吉林大学学报(医学版) 2019, 45(06) 1218-1223 DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190605    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合碳点通过高尔基体应激对MG63细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响
孟许亚1, 刘杰2,3, 王璐2,3, 布文奂2,3, 卢金金4, 孙宏晨5
1. 陕西省西安市第五医院口腔科, 陕西 西安 710000;
2. 吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室, 吉林 长春 130021;
3. 吉林大学口腔医院口腔病理科, 吉林 长春 130021;
4. 吉林大学口腔医院儿童口腔科, 吉林 长春 130021;
5. 中国医科大学附属口腔医院口腔病理科, 辽宁 沈阳 110000
摘要目的:探讨抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合碳点(CDs)对人骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡和氧化应激等的影响,阐明抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合CDs的细胞生物学特性。方法:以抗坏血酸和聚乙烯亚胺为原料,用微波法合成抗坏血酸-聚乙烯亚胺复合CDs。采用MTT法检测MG63细胞增殖率,流式细胞术检测不同细胞周期MG63细胞百分比。将MG63细胞分为空白对照组、转染阴性对照组、转染GOLPH3-siRNA组、CDs组、转染阴性对照+CDs组、转染GOLPH3-siRNA+CDs组。采用RT-PCR法检测各组MG63细胞中高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)的基因表达水平并计算基因沉默效率,流式细胞术检测各组MG63细胞凋亡率以及MG63细胞中活性氧(ROS)水平。结果:与空白对照组比较,随着CDs浓度的增加,MG63细胞的增殖率降低;在24和48 h时,CDs浓度大于40 mg·L-1时,MG63细胞增殖率明显降低(P<0.05);在72 h,CDs浓度大于20 mg·L-1时,细胞增殖率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,40 mg·L-1CDs组G0/G1期MG63细胞百分比明显升高(P<0.01),S期MG63细胞百分比明显降低(P<0.01)。倒置荧光显微镜下CDs具有一定的光致发光特性;与非碳点组(空白对照组、转染阴性对照组、转染GOLPH3-siRNA组)比较,碳点组(CDs组、转染阴性对照+CDs组、转染GOLPH3-siRNA+CDs组) MG63细胞凋亡率和细胞中ROS水平升高(P<0.05)。结论:CDs具有低毒性和光致发光特性,可以阻滞细胞周期,并促进细胞凋亡和ROS生成。GOLPH3具有抗凋亡和抑制ROS生成的作用,对细胞的存活起到一定的保护作用。
关键词: 碳点 抗坏血酸 聚乙烯亚胺 高尔基体应激 细胞增殖 细胞凋亡
收稿日期  2019-02-17   修回日期    网络版发布日期  2019-12-05  
DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190605
基金项目: 国家自然科学基金资助课题(81320108011);吉林省科技厅自然科学基金资助课题(20170101093JC);吉林省省级产业创新专项资金资助课题(2016C044-3)
通讯作者: 孙宏晨,教授,主任医师,博士研究生导师(Tel:0431-88796010,E-mail:hcsun@mail.jlu.edu.cn)
作者简介: 孟许亚(1991-),女,河南省汝州市人,医师,医学硕士,主要从事纳米材料促进成骨细胞分化方面的研究。

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