探讨在具有T790M突变的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞中应用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除程序性细胞死亡配体1（PD-L1）后对吉非替尼耐药敏感性的影响，阐明PD-L1对PC-9/T790M细胞耐药敏感性的作用机制。

常规体外培养PC-9细胞和 PC-9/T790M细胞，经CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除PC-9/T790M细胞中PD-L1后，分为PC-9、PC-9/T790M和Cas9 PC-9/sgRNA 3组细胞。采用Western blotting 法检测各组细胞中PD-L1蛋白表达水平，CCK-8法检测5、10和20 mmol·L^－1吉非替尼干预24、48和72 h后各组细胞存活率。体内实验中检测吉非替尼干预后各组移植瘤体积，HE染色观察移植瘤组织病理形态表现。

Western blotting 法检测，经CRISPR/Cas9编辑后敲除PD-L1的sgRNAl#组与PC-9、PC-9/T790M、sgRNA2#和sgRNA3#组比较，PD-L1蛋白表达水平最低。CCK-8法检测，在应用药物干预前Cas9 PC-9/sgRNA组细胞增殖活性与PC-9组、PC-9/T790M组比较，差异无统计学意义（P>0.05），10 mmol·L^－1吉非替尼干预72 h后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组细胞存活率与PC-9/T790M组比较明显降低（P<0.01）。体内实验，与PC-9/T790M组比较，吉非替尼干预后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组裸鼠移植瘤体积明显减少（P<0.05）；PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组移植瘤细胞呈现中、重度坏死，而PC-9/T790M组移植瘤组织病理形态无明显变化。

在耐药PC-9/T790M细胞中应用CRISPR/Cas9编辑技术敲除PD-L1能够明显提高吉非替尼的药物敏感性。