吉林大学学报(医学版) 2021, 47(5) 1139-1145 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210509    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
没食子酸对M1型巨噬细胞极化的影响
毛赫新1,王琳源1(),关宁2,高秀秋1
1.锦州医科大学附属第二医院牙周黏膜科,辽宁 锦州 121000
2.锦州医科大学附属第一医院 脑与脊髓损伤重点实验室,辽宁 锦州 121000
摘要目的

体外建立M1型巨噬细胞极化模型,探讨没食子酸(GA)对M1型巨噬细胞极化的影响。

方法

选用8周龄C57BL/6雌性小鼠,取腹腔巨噬细胞进行体外原代培养,通过对细胞培养基进行不同的处理,将实验分为对照组(不做处理)、M1极化模型组[加入脂多糖(LPS,100 μg·L-1)和干扰素γ(IFN-γ,20 μg·L-1)诱导腹腔巨噬细胞M1型极化]和GA组[在M1极化模型组的基础上,加入GA(37.5 mg·L-1)与LPS和IFN-γ共处理腹腔巨噬细胞]。采用倒置显微镜观察细胞形态表现,Annexin Ⅴ-PE/7-AAD双染法检测各组细胞凋亡率,流式细胞术检测 F4/80+iNOS+ M1 型巨噬细胞阳性表达率,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达水平。

结果

倒置显微镜观察,对照组细胞主要呈圆形或椭圆形,M1极化模型组细胞主要表现为梭形;与 M1极化模型组比较,GA组可见梭形细胞减少,圆形细胞增多。3组巨噬细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,M1极化模型组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率升高(P<0.01),GA组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与M1极化模型组比较,GA组中F4/80+iNOS+M1型巨噬细胞阳性表达率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,M1极化模型组细胞中iNOS和IL-1β mRNA表达水平升高(P<0.01);与M1极化模型组比较,GA组iNOS和IL-1β mRNA表达水平明显降低(P<0.01),与对照组比较,GA组iNOS和IL-1β mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。

结论

GA对巨噬细胞凋亡无明显影响,但可抑制巨噬细胞向M1型的极化。

关键词: 没食子酸 巨噬细胞极化 M1型巨噬细胞 腹腔巨噬细胞
收稿日期  2021-01-06   修回日期    网络版发布日期  2021-10-26  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210509
基金项目: 国家自然科学基金青年基金项目(81600870);辽宁省科技厅自然科学基金资助计划面上项目(2021-MS-324);辽宁省科技厅自然科学基金指导计划项目(2019-ZD-0824)
通讯作者: 王琳源
作者简介: 毛赫新(1994-),男,辽宁省凤城市人,在读硕士研究生,主要从事牙周炎免疫调节方面的研究。

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