探讨微小RNA-34a（miR-34a）对人牙周膜干细胞（PDLSCs）成骨分化的影响，并阐明其作用机制。

原代分离PDLSCs，诱导PDLSCs成骨分化，收集成骨分化后第0、7和14 天的PDLSCs。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测PDLSCs成骨分化细胞中碱性磷酸酶（ALP）、Runt相关转录因子2（Runx2）和骨钙素（OCN）mRNA表达水平，Western blotting法检测PDLSCs中解整合素金属蛋白酶10（ADAM10）蛋白表达水平。将PDLSCs分为空白对照组、空载组和miR-34a过表达组。RT-qPCR法检测各组PDLSCs中miR-34a表达水平，双荧光素酶报告系统验证miR-34a与ADAM10基因的靶向关系，Western blotting法检测各组PDLSCs中ADAM10蛋白表达水平。成骨诱导分化后，采用茜素红染色观察各组PDLSCs中矿化结节形成情况， RT-qPCR法检测各组PDLSCs中ALP、Runx2和OCN mRNA表达水平，比色法检测各组PDLSCs中ALP活性，Western blotting法检测各组PDLSCs中Notch1、Notch胞内结构域（NICD）和Hes1蛋白的表达水平。

与成骨分化第0天比较，成骨分化第7和14天PDLSCs中miR-34a、ALP、Runx2和OCN mRNA表达水平逐渐升高（P<0.05），而ADAM10蛋白表达水平逐渐降低（P<0.05）。与对照组和空载组比较，miR-34a过表达组细胞中miR-34a表达水平明显升高（P<0.05），ADAM10蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验，PDLSCs中ADAM10是miR-34a的靶基因。与对照组和空载组比较， miR-34a过表达组PDLSCs中矿化结节形成数、ALP活性以及ALP、Runx2和OCN mRNA表达水平明显升高（P<0.05），Notch1、NICD和Hes1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

过表达miR-34a能通过靶向下调ADAM10进而抑制Notch信号通路活性，从而促进PDLSCs成骨分化。