吉林大学学报(医学版) 2021, 47(6) 1422-1428 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210611    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
载奥沙利铂细胞膜囊泡纳米药物的制备及其对小鼠结肠癌细胞的杀伤作用
黄莉莉,刘宇轩,方楷漪,穆业腾,胡楠楠,郭冲,杨馥旭,关新刚()
北华大学医学技术学院医药生物工程重点实验室,吉林 吉林 132013
摘要目的

制备内腔担载奥沙利铂(OXA)的细胞膜纳米囊泡(NVs),得到纳米药物NVs@OXA,探讨NVs@OXA对小鼠结肠癌细胞的内吞和杀伤效应。

方法

利用超速离心法分离HEK-293T细胞的细胞膜,通过脂质体挤出仪制备NVs,动态光散射检测NVs粒径,透射电子显微镜下观察NVs的超微结构。检测含有不同浓度(5、10、20、50 、75和 100 mg·L-1)NVs作用后小鼠树突状DC2.4细胞的存活率。激光共聚焦荧光显微镜成像分析囊泡的细胞内吞情况。采用电击法或孵育法将OXA装载于囊泡内腔,获得纳米药物 NVs@OXA。检测纳米药物NVs@OXA的装载效率和粒径变化。以游离OXA(游离OXA组)作为对照,MTT法检测含有不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0和15.0 μmol·L-1)NVs@OXA(NVs@OXA组)结肠癌CT26细胞的存活率,流式细胞术检测各组小鼠结肠癌CT26细胞凋亡率。

结果

采用细胞膜制备平均粒径为222.2 nm的NVs。细胞相容性检测,所有 NVs 处理的小鼠树突状DC2.4细胞存活率均>100%;电击法制备的OXA装载效率高于孵育法;纳米药物制备12 d内OXA粒径尺寸未见明显变化;激光共聚焦荧光显微镜下,NVs@OXA能成功进入结肠癌CT26细胞内;MTT法检测,在OXA 浓度为10 和15 μmol·L-1时, NVs@OXA组结肠癌细胞的存活率低于游离OXA组(P<0.05)。流式细胞术检测,NVs@OXA组结肠癌CT26细胞凋亡率高于游离NVs组(P<0.05)。

结论

利用NVs成功制备了内腔载有OXA的纳米药物NVs@OXA,电击法较孵育法制备的OXA装载效率更高,纳米药物可以被CT26结肠癌细胞高效内吞;纳米药物具有较游离OXA更强的肿瘤杀伤作用。

关键词: 细胞膜 纳米囊泡 奥沙利铂 细胞毒效应 内吞
收稿日期  2021-04-16   修回日期    网络版发布日期  2021-12-14  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20210611
基金项目: 吉林省科技厅科技发展计划项目(20180101213JC);吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20200033KJ);吉林省卫健委卫生与健康技术创新项目(2020J023)
通讯作者: 关新刚
作者简介: 黄莉莉(1996-),女,浙江省杭州市人,在读医学硕士,主要从事肿瘤免疫治疗机制方面的研究。

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