探讨瞬时受体电位通道 A1（TRPA1）在部分坐骨神经结扎（pSNL）小鼠神经病理性疼痛模型中的作用，阐明其作用机制。

30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组（n=6）、假手术组（n=6）和pSNL组（n=18）。pSNL组小鼠鞘内置管成功后随机分为pSNL组、pSNL+NC shRNA组（于术后第 7 天鞘内注射NC shRNA）和pSNL+TRPA1 shRNA组（于术后第7天鞘内注射TRPA1 shRNA）。检测注射前和注射后l、7、12和24 h各组小鼠后肢机械缩足反射阈值（MWT）和热阈值（TWL）。最后一次检测后2 h处死小鼠，采用Western blotting法检测各组小鼠术侧背根神经节（DRG）中TRPA1蛋白激酶Cε型（Prkce）和星形胶质细胞激活标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达， ELISA法检测各组小鼠细胞上清和血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和 单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）水平。分离培养pSNL模型小鼠的原代星形胶质细胞，过表达或敲低TRPA1，检测星形胶质细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和 MCP-1水平。采用STRING数据库和免疫共沉淀（Co-IP）法预测并验证TRPA1和Prkce相互作用。检测过表达或敲低TRPA1后空质粒组、Ad-TRPA1、sh-NC组和sh-TRPA1组星形胶质细胞中Prkce和GFAP蛋白表达水平以及细胞上清中TNF-α和 MCP-1水平。将TRPA1 shRNA单独转染或与Ad-Prkce共转染星形胶质细胞，分为sh-TRPA1+empty vector组（转染空载体）、sh-TRPA1+Ad-Prkce组（转染TRPA1过表达载体）和sh-TRPA1+Ad-Prkce组（转染Prkce过表达载体）。采用Western blotting法检测各组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平， ELISA法检测细胞上清中TNF-α和MCP-1水平。

与对照组比较，pSNL组小鼠MWT和TWL降低（P<0.01）；与pSNL+NC中shRNA组比较，pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠MWT和TWL升高（P<0.01）。与假手术组比较，术后第7天pSNL组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平升高（P<0.05），血清中TNF-α和MCP-1水平升高（P<0.05）。与pSNL+NC shRNA组比较， pSNL+TRPA1 shRNA组小鼠DRG中TRPA1和GFAP蛋白表达水平及血清中TNF-α和MCP-1水平降低（P<0.05）。与空质粒组比较，Ad-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显升高（P<0.01），细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高（P<0.05）；与sh-NC组比较，sh-TRPA1组细胞中GFAP蛋白表达水平明显降低（P<0.05），细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显降低（P < 0.05）。与sh-TRPA1+empty vector组比较，sh-TRPA1+Ad-Prkce组细胞中TRPA1、Prkce和GFAP蛋白表达水平升高（P<0.01），细胞上清中TNF-α和MCP-1水平明显升高（P<0.05）。

TRPA1通过与Prkce相互作用参与pSNL模型小鼠星形胶质细胞的激活以及神经病理性疼痛发生发展过程。