目的 探讨长链非编码RNA （lncRNA）胃癌相关转录本2（GACAT2）基因对肺癌A549和H1299细胞增殖和干性的影响，阐明lncRNA GACAT2基因在肺癌发生发展中的作用。 方法 实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法扩增lncRNA GACAT2基因的全长序列，克隆至pc3.1（+）真核表达载体，采用菌液PCR法和基因测序法检测GACAT2过表达载体的构建情况。将pc3.1-GACAT2过表达质粒和对照质粒pc3.1分别转入人肺癌A549和H1299细胞，采用G418筛选并建立稳定过表达GACAT2的A549和H1299细胞，分为空载体组（转染pc3.1空载体）和pc3.1-GACAT2组（转染pc3.1-GACAT2重组质粒）。采用RT-qPCR法检测2组A549和H1299细胞中GACAT2 mRNA表达水平， CCK-8法检测2组细胞增殖活性，细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数，干细胞成球实验观察2组细胞成球数。 结果 成功构建GACAT2真核过表达载体。与空载体组比较，pc3.1-GACAT2组A549和H1299细胞中GACAT2 mRNA表达水平升高（P<0.05或P<0.01），细胞增殖活性降低（P<0.05或P<0.01），细胞克隆形成数明显降低（P<0.05或P<0.01），细胞成球数明显降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 过表达人lncRNA GACAT2基因能抑制肺癌A549和H1299细胞的增殖能力和细胞干性。