吉林大学学报(医学版) 2023, 49(5) 1154-1160 DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230507    ISSN: 1671-587X CN: 22-1342/R

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基础研究
睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制
仝晓丽1,2,范明慧1,孟娇1,朱继红3,盛敏佳1()
1.吉林大学中日联谊医院生殖医学中心,吉林 长春 130033
2.山西省临汾市中心医院生殖健康 与不孕不育科,山西 临汾 041000
3.吉林大学第一医院生殖医学?产前诊断中心, 吉林 长春 130021
摘要

目的 探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。 方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG 细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮)、睾酮+氟他胺组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮+1.0×10-5 mol·L-1氟他胺)、睾酮+牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮+1.5 g·L-1 TUDCA)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组 SVOG 细胞中剪切型X盒结合蛋白1 (XBP1s)、激活转录因子4(ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和死亡受体5(DR5) mRNA表达水平,流式细胞术检测各组 SVOG 细胞凋亡率。 结果 与对照组比较,睾酮组SVOG细胞形态改变,异型细胞增多,胞质中出现较多颗粒,培养基中细胞碎片增多,SVOG细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞形态变化减少,细胞增殖抑制率降低(P<0.05);流式细胞术,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞凋亡率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-qPCR法,作用48 h后,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平降低(P<0.05)。 结论 睾酮可诱导人卵巢颗粒细胞凋亡并引起卵泡闭锁,其作用机制可能是雄激素与雄激素受体(AR)结合激活CHOP-DR5通路,诱导内质网应激(ERS)发生,促进颗粒细胞凋亡。

关键词: 睾酮 颗粒细胞 内质网应激 雄激素受体 转录因子C/EBP同源蛋白 死亡受体5
收稿日期  2022-11-30   修回日期    网络版发布日期  2023-10-26  
DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230507
基金项目: 吴阶平医学基金会专项项目(320.6750.2021-19-1);吉林省教育厅科学技术研究项目一般项目(JJKH20211200KJ);吉林省财政厅科研项目(JLSWSRCZX2020-062)
通讯作者: 盛敏佳
作者简介: 仝晓丽(1993-),女,山西省大同市人,医师,医学硕士,主要从事辅助生殖临床方面的研究。

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