人Ad-BMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞对其Ⅱ型胶原和碱性磷酸酶表达的影响

doi:吉林省科技厅资助课题

人Ad-BMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞对其Ⅱ型胶原和碱性磷酸酶表达的影响

韩冬^1△，李建军²，张巨¹，孙鸿斌¹，顾家祥¹，王健3，刘建国²，王国君^1*

1.吉林大学中日联谊医院手外科，吉林长春130031；2.吉林大学第一医院骨科，吉林长春130021；3.温州医学院附属一院骨科，浙江温州325000

收稿日期:2004-01-13 修回日期:1900-01-01 出版日期:2005-01-28 发布日期:2005-01-28
通讯作者: 王国君

Effects of BMP-2 gene transduced rabbit bone marrow stromalcells on expressions of collagen type Ⅱ and AKP

HAN Dong^1△, LI Jian-jun², ZHANG Ju¹, SUN Hong-bin¹,GU Jia-xiang¹, WANG Jian3, LIU Jian-guo²,WANG Guo-jun^1*

1. Department of Hand Surgery, China-Japan Union Hospital, Jilin University, Changchun 130031, China;2. Department of Orthopedics, First Hospital, Jilin University, Changchun 130021, China;3. Department of Orthopedics, First Hospital ,Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000, China

Received:2004-01-13 Revised:1900-01-01 Online:2005-01-28 Published:2005-01-28
Contact: WANG Guo-jun

摘要/Abstract

摘要： 目的：用人骨形态发生蛋白2腺病毒表达载体（Ad-BMP-2）转染兔骨髓基质干细胞（BMSC），观察Ad-BMP-2转染对细胞分化的影响。方法：将Ad-BMP-2转染体外培养的兔BMSC，7 d后利用原位杂交和免疫组化方法检测细胞内BMP-2及Ⅱ型胶原的表达，同时行碱性磷酸酶染色。结果：BMP-2和Ⅱ型胶原原位杂交法显示实验组细胞胞浆中有棕黄色阳性杂交信号，对照组阴性。BMP-2和Ⅱ型胶原免疫组化法显示实验组细胞胞浆棕黄色阳性着色，胞核阴性表达，对照组阴性；碱性磷酸酶染色见实验组细胞胞浆呈棕黑色阳性着色，可见细小的棕黑色颗粒，对照组染色阴性。结论：Ad-BMP-2可高效转染BMSC，且促进其向成骨细胞和软骨细胞方向转化。

关键词: 人, 骨形态发生蛋白质类, 转染, 干细胞, 胶原Ⅱ型, 碱性磷酸酶

Abstract: Objective Using a recombinant adenoviral vector carrying the human BMP-2 gene (Ad-BMP-2) to transfect rabbit bone marrow stromal cells (BMSC) to study the effects of Ad-BMP-2 transfection on cell differentiation. Methods The rabbit BMSC cultured in vitro were transfected by Ad-BMP-2. Seven days later, the expressions of BMP-2 and collagen type Ⅱ in these cells were determined by in situ hybridization and immunohistochemical analysis, and the alkaline phosphatase (AKP) activity of the BMSC was observed. Results There were positive results in cytoplasm in experimental group: the brown-yellow hybridization signals were observed and that indicated the expressions of BMP-2 and collagen type Ⅱ of Ad-BMP-2 infected BMSC by in situ hybridization, the yellow pigmenting were observed by immunohistochemical analysis but not in nuclei, the brown-black particles were seen by AKP staining. But in control group, these were negative. Conclusion Ad-BMP-2 could infect BMSC with high efficiency and promote the conversion to osteoblast and chondrocyte.

Key words: human, bone morphogenetic proteins, transfection, stem cells, collagen type Ⅱ, alkaline phosphatase

中图分类号:

韩冬，李建军，张巨，孙鸿斌，顾家祥，王健3，刘建国，王国君. 人Ad-BMP-2基因转染兔骨髓基质干细胞对其Ⅱ型胶原和碱性磷酸酶表达的影响[J]. J4, 2005, 31(1): 45-47.

HAN Dong, LI Jian-jun, ZHANG Ju, SUN Hong-bin,GU Jia-xiang, WANG Jian3, LIU Jian-guo,WANG Guo-jun. Effects of BMP-2 gene transduced rabbit bone marrow stromalcells on expressions of collagen type Ⅱ and AKP[J]. J4, 2005, 31(1): 45-47.

[1]	赵丽艳, 宋扬, 吕晓艳, 贾茗博, 朱洪权. 上皮-间质转化胶质瘤细胞的干细胞样特性及白藜芦醇对其干细胞样特性的抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1185-1189.
[2]	李里, 宫亮, 吴玉斌. 沉默WNT4基因对稳定转染PAX2基因大鼠肾小管上皮细胞迁移和侵袭能力的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1212-1217.
[3]	刘林娜, 陈婕妤, 吕方怡, 花扣珍, 蔡大敏, 银国利, 王俊娟. 芬戈莫德对神经干细胞和星形胶质细胞增殖及迁移的影响及其对小鼠脊髓损伤的保护机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1218-1222.
[4]	龚庆, 宋秋莹, 邱莉晶, 黄晓巍, 赵文海. 聚丙交酯-乙交酯微球搭载鹿茸多肽联合骨髓间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1174-1178.
[5]	于秀艳, 张晓伟, 丛占杰, 李铤, 吴雪峰. 乳腺癌患者血清中hMAM和CD147水平检测及其临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1269-1274.
[6]	周丹, 赵辉, 赵洋, 刘晋宇. 人毛囊间充质干细胞临床应用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1086-1089.
[7]	马亚兰, 张欣, 李丹丹, 周鹤, 房书珈, 徐影, 郑连文. 卵巢功能储备正常者拮抗剂方案COH使用过程中添加高纯度人绝经促性腺激素对IVF-ET妊娠结局的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1036-1040.
[8]	石旭, 余欣, 曲兴龙, 曹扬, 张广娟, 李长远. 低氧及其下游因子miRNA-145在脐带间充质干细胞向Ⅱ型肺泡上皮细胞分化中的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 935-942.
[9]	郑芳, 欧阳征仁, 欧阳靖霖, 周诗力, 罗文. 乳腺癌患者超声图像特征与人类上皮生长因子受体2和Ki-67阳性表达的关联性分析[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1073-1077.
[10]	刘定坤, 杨楠, 金巨楼, 孙梦洁, 王倩, 吴佳, 刘志辉. 牙髓干细胞增殖、分化和迁移的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1100-1104.
[11]	孟琳, 王璐, 布文奂, 丁鑫鑫, 高华丽, 王梓霖, 刘玉兰, 李琛, 孙宏晨. 小鼠骨髓间充质干细胞对人舌鳞状细胞癌Cal27细胞的归巢作用及其对Cal27细胞增殖和迁移的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 891-896.
[12]	薛亚娟, 符兆英. 人乳头瘤病毒致癌特性及其E6和E7蛋白致癌机制的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1096-1099.
[13]	袁虎勤, 李强. 水飞蓟素对人胃癌SGC 7901细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 988-993.
[14]	王海彬, 董志军, 郭立涛, 石晶, 董微丽. 菩人丹超微粉对STZ诱导糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其对NF-κB信号通路的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 759-763.
[15]	王淼, 母润红, 李明成, 李洪杰. RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 753-758.