Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应

doi:吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题（20

Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应

朱继红^1,2，崔满华³，李霄²，孙丽丽⁴，张钰²，陈漉²，刘立明²，张振民²，金宁一²

1．吉林大学第一医院妇产科，吉林长春 130021；2．军事医学科学院解放军基因工程实验室，吉林长春 130062；〖JP〗3．吉林大学第二医院妇产科，吉林长春 130041；4．吉林省肿瘤医院头颈外科，吉林长春 130012

收稿日期:2007-11-13 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-28 发布日期:2008-03-28
通讯作者: 金宁一

Anti-tumor effects of Apoptin gene on uterine cervix cancer cells

ZHU Ji-hong^1,2，CUI Man-hua³，LI Xiao²，SUN Li-li⁴，ZHANG Yu²，CHEN Lu²，LIU Li-ming²，ZHANG Zhen-min²，JIN Ning-yi²

1．Department of Gynecology and Obstetrics , First Hospital , Jilin University, Changchun 130021, China；2．Genetic Engineering Laboratory of PLA, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130062，China；3．Department of Gynecology and Obstetrics, Second Hospital , Jilin University, Changchun 130041, China；4．Department of Head and Neck Surgery, Tumor Hospital of Jilin Province, Changchun 130012, China

Received:2007-11-13 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-28 Published:2008-03-28
Contact: JIN Ning-yi

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨Apoptin基因对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用和作用方式。方法：应用脂质体转染法将重组质粒pVAX1-Apoptin和载体质粒pVAX1分别体外转染Hela细胞，作为重组质粒pVAX1-Apoptin组和载体质粒pVAX1组，同时设空白细胞对照组。应用Western blotting检测Apoptin基因在Hela细胞中的表达；运用噻唑兰(MTT)分析法检测重组质粒对Hela肿瘤细胞的抑制作用；罗丹明123 和DCFA 染色测定线粒体跨膜电位(ΔΨm) 和活性氧水平变化；底物染色反应检测caspase-3活性。结果：pVAX1-Apoptin组转染48 h后，Hela细胞的抑制率为69.28%，明显高于对照组（0.74%）和pVAX1组（10.11%）（P<0.01）。与对照组比较，pVAX1-Apoptin组线粒体ΔΨm下降(P<0.01)，细胞内活性氧水平升高(P<0.05)， caspase-3活性增强(P<0.01)。结论：Apoptin可通过诱导Hela细胞凋亡，进而特异性杀伤Hela肿瘤细胞。

关键词: Apoptin基因, 细胞凋亡, 抑瘤作用

Abstract: Objective To investigate the anti-tumor effects and mode action of Apoptin on human uterine cervix cancer cells. Methods Recombinant plasmid pVAX1-Apoptin and pVAX1 were transfected into Hela cells by application of liposome in vitro and used as pVAX1-Apoptin group and pVAX1 group, meanwhile control group(without cells) was set up. The expression of Apoptin in Hela cells was detected by Western blotting. Anti-tumor effect on Hela cells was measured through methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay. The alteration of mitochondrial transmembrane potential and ROS level of the cells were detected by flow cytometry ( FCM) with rhodamine 123 and DCFA staining. The activation of caspase-3 was assayed by its substrate color reaction. Results The　 inhibitory rate in pVAX1-Apoptin group 48 h after transfection (69.28%) was higher than those in control group (0.74%) and pVAX1 group(10.11%) .Compared with control group ,the mitochondrial transmembrane potential was decreased (P<0.01), ROS level of the cells was increased (P<0.05), and caspase-3 activity was increased(P<0.01) in pVAX1-Apoptin group.Conclusion Anti-tumor effects of Apoptin on Hela cells may be resulted from the apoptosis-inducing function of Apoptin.

Key words: Apoptin gene, apoptosis, anti-tumor

中图分类号:

Q255

朱继红，崔满华，李霄，孙丽丽，张钰，陈漉，刘立明，张振民，金宁一. Apoptin对宫颈癌Hela细胞的抑制效应[J]. J4, 2008, 34(2): 237-240.

ZHU Ji-hong，CUI Man-hua，LI Xiao，SUN Li-li，ZHANG Yu，CHEN Lu，LIU Li-ming，ZHANG Zhen-min，JIN Ning-yi. Anti-tumor effects of Apoptin gene on uterine cervix cancer cells[J]. J4, 2008, 34(2): 237-240.

[1]	朱德强, 陈学军. 白花丹素对肝癌索拉菲尼耐药细胞HepG2R增殖和凋亡的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1223-1229.
[2]	阎慧, 马淑飞, 段明华, 闫玉礼, 潘新, 李海清, 周长龙, 赵天倚. 京尼平对胃癌SGC 7901细胞体外增殖、侵袭能力和凋亡的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 924-928.
[3]	邢树刚, 张丽红, 金明华, 李百慧, 武则馨, 房波, 李伟. 杨梅黄酮对小鼠脑胶质瘤GL261细胞增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 955-961.
[4]	薛亚娟, 符兆英. 人乳头瘤病毒致癌特性及其E6和E7蛋白致癌机制的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1096-1099.
[5]	于洋, 徐路, 刘师兵, 李松岩, 徐冶. 杨梅素通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 903-907.
[6]	王淼, 母润红, 李明成, 李洪杰. RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 753-758.
[7]	杨万霞, 苏强, 邢爱华, 张晓延. 饥饿对Beclin-1依赖的Ana-1细胞自噬和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 704-708.
[8]	朱效慧, 孟琴, 冯世燕. TP53在不明原因复发性流产患者绒毛组织中的表达及其对人滋养层细胞生长的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 796-800.
[9]	安乐, 杨建征, 胡春梅, 于琼, 肖晗, 郝书弘, 唐艳. 多囊蛋白1基因对人宫颈癌HeLa细胞的抗凋亡作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 776-779.
[10]	吕鹏, 宁明杰, 邵玉, 张璐妮, 唐英, 王南博, 陈飞儿, 齐玲. 野黄芩苷对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 466-470.
[11]	杨文延, 刘强, 孙志娟, 杜利清, 徐畅, 王彦, 柳杨, 王芹. 褪黑素对人非小细胞肺癌H1299细胞辐射敏感性的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 532-536.
[12]	任艳芳, 姜永杰, 张秀玲, 姜姗, 王玉红. SHH信号通路对子痫前期患者滋养细胞凋亡和侵袭的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 510-515.
[13]	杨易, 包康达, 周彦兵, 袁超, 李勇, 刘晓明, 徐金瑞. Wnt5a对人肺腺癌A549细胞凋亡的调控作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(02): 229-234.
[14]	钟莉莉, 赵银龙, 李炳锦, 邹晓晗, 程子倩, 崔然吉. MicroRNA-210对卵巢癌细胞生长及放射敏感性的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(02): 265-269.
[15]	朱博, 满枋霖, 刘鹏, 佟海滨, 田丹, 孙新. 室内装修挥发性污染物对雄性小鼠生殖功能和精子凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(02): 281-285.