J4 ›› 2009, Vol. 35 ›› Issue (4): 612-615.
鲁刚1,2|袁长吉3|韩伟1|麻海春1|赵恒兰1
LU Gang1,2,YUAN Chang-ji3>,HAN Wei1,MA Hai-chun1,ZHAO Heng-lan1
摘要:
目的:观察高渗液(HS)对缺氧/复氧的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,阐明高渗液治疗休克时对血管内皮细胞的保护机制。方法:体外分离和培养的HUVECs分为对照组和实验组,采用荧光探针技术,应用激光共聚焦显微镜,测定细胞内[Ca2+]i的变化,两组细胞先置于缺氧(95%氮气,5%CO2)环境中8 h,然后将实验组细胞置于配制好的HS中15 min,再在常氧状态下(95%空气,5%CO2)培养16 h。对照组细胞加对照液(M199培养液)15 min后同实验组。两组细胞分别于缺氧前(T0)、缺氧后(T1)、处理后(T2)、复氧后1/2、2、8、16 h(T3~6)测定细胞内Fluo-3荧光强度。结果:两组细胞荧光强度T1与T0比较显著升高(P<0.05);实验组细胞荧光强度T2低于实验组T1及对照组T2(P<0.05),但仍高于T0(P<0.05),且复氧过程中逐渐降低,至T5恢复到T0水平;两组细胞T3时点荧光强度均高于各T2时点(P<0.05);实验组复氧过程中不同时点(T3~6)荧光强度低于各自同一时间点的对照组(P<0.05)。结论:缺氧/复氧可以引发HUVECs内[Ca2+]i升高,而HS能减轻HUVECs内的钙超载,保护缺氧/复氧损伤的内皮细胞。
中图分类号: