辐射诱导人TRAIL基因表达的腺病毒穿梭质粒的构建及鉴定
李艳博1，梁 硕1，董丽华2，杨 巍1，郭
- 1.吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室，吉林 长春 130021;2.吉林大学第一医院肿瘤中心放疗科，吉林 长春 130021；3 .吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室，吉林 长春 130021
Construction and identification of recombinant adenoviral shuttle vector with radiation-inducible TRAIL gene
LI Yan-bo1， LIANG Shuo1， DONG Li-hua2， YA
- 1.MH Radiobiology Research Unit, School of Public Health, Jilin University, Changchun 130021, China;2.Department of Radiotherapy, Tumor Center, First Hospital, Jilin University, Changchun 130021,China； 3.Department of Toxicology, School of Public Health, Jilin University, Changchun 130021, China
摘要： 目的：构建辐射敏感Egr-1启动子诱导人肿瘤坏死因子（TNF）相关凋亡诱导配体（TRAIL）基因表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL。方法：利用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法从pACCMV-hTRAIL质粒中扩增得到TRAIL基因片段，并将其连接到pMD19T载体进行测序，利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL。结果：PCR扩增出约820 bp的片段，测序结果证实扩增片段的序列与GenBank公布（NM_003810）的一致。pshuttle-Egr1-hTRAIL用EcoRⅠ、KpnⅠ双酶切重组得到大小为3 540和4 299 bp的2个片段，用SmaⅠ酶切得到1 517、2 282和4 040 bp 的3个片段，用BamHⅠ酶切得到3 304和4 535 bp的2个片段，与预期结果完全一致。结论：成功克隆了hTRAIL基因，并构建了辐射诱导表达的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-hTRAIL。
中图分类号:
- R730.55
