NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制

doi:10.13481/j.1671-587x.20160401

吉林大学学报(医学版) ›› 2016, Vol. 42 ›› Issue (04): 637-641.doi: 10.13481/j.1671-587x.20160401

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NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制

田晶¹, 齐玲², 纪朋艳³, 沈楠³, 崔万丽¹, 王春艳¹

1. 吉林医药学院生理学教研室, 吉林吉林 132013;
2. 吉林医药学院病理学教研室, 吉林吉林 132013;
3. 吉林医药学院实验中心, 吉林吉林 132013

收稿日期:2015-07-07 出版日期:2016-07-28 发布日期:2016-07-20
通讯作者: 齐玲,副教授,硕士研究生导师(Tel:0432-64560027,E-mail:qiling1718@163.com) E-mail:qiling1718@163.com
作者简介:田晶(1973-),女,吉林省吉林市人,副教授,医学硕士,主要从事脑肿瘤治疗方面的研究。
基金资助:
国家自然科学基金资助课题（81201671）；吉林省教育厅"十二五"科研项目资助课题（2012330，2014369）

Induction effect of NPPB on apoptosis of human glioma SHG-44 cells and its mechanism

TIAN Jing¹, QI Ling², JI Pengyan³, SHEN Nan³, CUI Wanli¹, WANG Chunyan¹

1. Department of Physiology, Jilin Medical College, Jilin 132013, China;
2. Department of Pathology, Jilin Medical College, Jilin 132013, China;
3. Experimental Center, Jilin Medical College, Jilin 132013, China

Received:2015-07-07 Online:2016-07-28 Published:2016-07-20

摘要/Abstract

摘要：

目的：探讨氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸（NPPB）对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用，并阐明其可能的机制。方法：体外培养脑胶质瘤SHG-44细胞，分为对照组及50、100和200 μmol·L^-1 NPPB组。采用MTT法检测细胞活力，采用流式细胞术检测细胞凋亡率，采用免疫组织化学法和蛋白免疫印记法分别检测SHG-44细胞中凋亡蛋白的表达水平。结果：MTT检测，与对照组比较，作用24和48 h，100和200 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞活力明显降低（P < 0.01）。流式细胞术检测，100和200 μmol·L^-1 NPPB组细胞凋亡率分别为24.64%和41.85%，高于对照组（4.17%）（P < 0.01）。免疫组织化学和蛋白免疫印记法检测，100 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞中caspase-3和Bax蛋白表达水平升高（P < 0.05或P < 0.01），Bcl-2蛋白表达水平降低（P < 0.05）。结论：NPPB可以通过下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达，使caspase-3活化，进而引起SHG-44细胞凋亡。

关键词: 氯通道, 神经胶质瘤, 细胞增殖, 细胞凋亡

Abstract:

Objective:To investigate the induction effect of NPPB,a chloride channel blocker,on the apoptosis of human glioma SHG-44 cells,and to explore its mechanism. Methods: The SHG-44 cells were cultured in vitro and divided into control group and NPPB groups (50,100,200 μmol·L^-1). The cell viability was detected by MTT assay. The apoptotic rates were detected by flow cytometry. The expression levels of Bax,Bcl-2 and caspase-3 were detected by immunohistochemical analysis and Western blottingmethod. Results: Compared with control group,the cell viabilities of SHG-44 cells in 100 and 200 μmol·L^-1 NPPB groups after treated for 24 and 48 h were decreased significantly(P < 0.01). The results of flow cytometry showed that the apoptotic rates of SHG-44 cells in 100 and 200 μmol·L^-1 NPPB groups were 24.64% and 41.85%,and they were higher than that in control group(4.17%)(P < 0. 01).The immunohistochemical analysis and Western blotting results showed that the expression levels of caspase-3 and Bax proteins in SHG-44 cells in 100 μmol·L^-1 NPPB group were increased(P < 0.05 or P < 0. 01),and the expression level of Bcl-2 protein was decreased(P < 0.05). Conclusion:NPPB could induce the apoptosis of human glioma SHG-44 cellsby the down-regulation of the expression of Bcl-2 and the up-regulation of the expression of Bax,and the activation of caspase-3.

Key words: chloride channel, glioma, cell proliferation, apoptosis

中图分类号:

R739.41

田晶, 齐玲, 纪朋艳, 沈楠, 崔万丽, 王春艳. NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(04): 637-641.

TIAN Jing, QI Ling, JI Pengyan, SHEN Nan, CUI Wanli, WANG Chunyan. Induction effect of NPPB on apoptosis of human glioma SHG-44 cells and its mechanism[J]. Journal of Jilin University Medicine Edition, 2016, 42(04): 637-641.

参考文献

[1] Jentsch TJ,Stein V,Weinreich F,et al. Molecular structure and physiological function of chloride channels [J]. Physiol Rev,2002,82(2):503-568.

[2] 焦军东,岳朋,杜智敏,等. 氯通道阻滞剂抑制人肾小球系膜细胞增殖[J]. 中国药理学通报,2007,23(1):86-90.

[3] 范爱辉,陈丽新,毛建文,等. 阻断氯通道对鼻咽癌细胞凋亡和细胞增殖的影响 [J]. 广东医学,2006,27(12):1804-1806.

[4] He D,Luo X,Wei W,et al. DCPIB,a specific inhibitor of volume-regulated anion channels (VRACs),inhibits astrocyte proliferation and cell cycle progression via G₁/S arrest [J]. J Mol Neurosci,2012,46(2):249-257.

[5] Kang MK,Kang SK. Pharmacologic blockade of chloride channel synergistically enhances apoptosis of chemotherapeutic drug resistant cancer stem cells[J]. Biochem Biophys Res Commun,2008,373(4):539-544.

[6] Park M,Song C,Yoon H,et al. Double blockade of glioma cell proliferation and migration by temozolomide conjugated with NPPB,a chloride channel blocker[J]. ACS Chem Neurosci,2016,181(2):1328-1336.

[7] Turner KL,Sontheimer H. Cl^- and K⁺ channels and their role in primary brain tumour biology [J]. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci,2014,369(1638):20130095.

[8] Min XJ,Li H,Hou SC,et al. Dysfunction of volume-sensitive chloride channels contributes to cisplatin resistance in human lung adenocarcinoma cells [J]. Exp Biol Med(Maywood),2011,236(4):483-491.

[9] Cuddapah VA,Sontheimer H. Ion channels and transporters in cancer. 2. Ion channels and the control of cancer cell migration [J]. Am J Physiol Cell Physiol,2011,301(3):C541-549.

[10] Che XF,Zheng CL,Akiyama S,et al.2-Amimophenoxazine-3-one and 2-amino-4,4α-dihydro-4α,7-dimethyl-3H-phenoxazine-3-one cause cellular apoptosis by reducing higher intracellular pH in cancer cells[J]. Proc Jpn Acad Ser B Phys Biol Sci,2011,87(4):199-213.

[11] 刘善文,李媛,李华荣,等. 小檗碱激活人结肠癌细胞容积敏感的氯通道[J].生理学报,2011,63(6):517-524.

[12] 厉冰雪,藤双凤,刘镇锋,等. 熊果酸激活低分化鼻咽癌细胞氯通道和减小细胞容积[J]. 生理学报,2012,64(6):673-680.

[13] Lam M,Dubyak G,Chen L,et al. Evidence that bcl-2 represses apoptosis by regulating endoplasmic reticulum-associated Ca²⁺ fluxes[J]. Proc Natl Acad Sci USA,1994,91(14):6569-6573.

[14] Susin SA,Zamzami N,Castedo M,et al. Bcl-2 inhibits the mitochondrial release of an apoptogenic protease[J]. J Exp Med,1996,184(4):1331-1341.

[15] 赵佳,郝利铭,姜文华,等.新霉素对脑胶质瘤细胞增殖及PDGF、VEGF和血管生成素表达的影响[J]. 中国实验诊断学,2014,18(10):1579-1582.

[16] 袁兆新,高寒,池明,等.CLIC4在饥饿诱导神经胶质瘤细胞自噬中的作用[J]. 中国实验诊断学,2015,19(5):707-710.

NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制

Induction effect of NPPB on apoptosis of human glioma SHG-44 cells and its mechanism

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[3]	邢树刚, 张丽红, 金明华, 李百慧, 武则馨, 房波, 李伟. 杨梅黄酮对小鼠脑胶质瘤GL261细胞增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 955-961.
[4]	薛亚娟, 符兆英. 人乳头瘤病毒致癌特性及其E6和E7蛋白致癌机制的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1096-1099.
[5]	袁虎勤, 李强. 水飞蓟素对人胃癌SGC 7901细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 988-993.
[6]	刘定坤, 杨楠, 金巨楼, 孙梦洁, 王倩, 吴佳, 刘志辉. 牙髓干细胞增殖、分化和迁移的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1100-1104.
[7]	于洋, 徐路, 刘师兵, 李松岩, 徐冶. 杨梅素通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 903-907.
[8]	杨万霞, 苏强, 邢爱华, 张晓延. 饥饿对Beclin-1依赖的Ana-1细胞自噬和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 704-708.
[9]	李鑫, 马云飞, 唐庚, 韦麒, 纪红池, 田嘉安, 申延男, 王志成. 线粒体靶向KillerRed诱导的ROS增强辐射对HeLa细胞的增殖抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 718-723.
[10]	朱效慧, 孟琴, 冯世燕. TP53在不明原因复发性流产患者绒毛组织中的表达及其对人滋养层细胞生长的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 796-800.
[11]	王淼, 母润红, 李明成, 李洪杰. RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 753-758.
[12]	安乐, 杨建征, 胡春梅, 于琼, 肖晗, 郝书弘, 唐艳. 多囊蛋白1基因对人宫颈癌HeLa细胞的抗凋亡作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 776-779.
[13]	任艳芳, 姜永杰, 张秀玲, 姜姗, 王玉红. SHH信号通路对子痫前期患者滋养细胞凋亡和侵袭的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 510-515.
[14]	周刘祥, 林琳, 胡鑫敏, 王晓春. 内分泌腺性血管内皮生长因子对结肠癌LoVo细胞增殖和迁移的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 516-520.
[15]	吕鹏, 宁明杰, 邵玉, 张璐妮, 唐英, 王南博, 陈飞儿, 齐玲. 野黄芩苷对人脑胶质瘤U87细胞的增殖抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 466-470.