冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭及lncRNA CCAT1表达的影响

doi:10.13481/j.1671-587X.20210218

摘要/Abstract

摘要： 目的

探讨冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭的影响，阐明其可能机制。

方法

取对数生长期的子宫内膜癌HEC-1B细胞分为对照组（DMSO培养液）、阳性对照组（2.5 mg·L^－1顺铂）、低剂量（10 μmol·L^－1）冬凌草甲素组、中剂量（20 μmol·L^－1）冬凌草甲素组和高剂量（40 μmol·L^－1）冬凌草甲素组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室实验检测HEC-1B细胞侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测各组HEC-1B细胞中长链非编码RNA（lncRNA）结肠癌相关转录因子1（CCAT1）表达水平。

结果

与对照组比较，阳性对照组和低、中及高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05）；HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。与低剂量冬凌草甲素组比较，中和高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05），HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。与中剂量冬凌草甲素组比较，高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05），HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。

结论

冬凌草甲素可以抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进子宫内膜癌HEC-1B细胞凋亡，其作用机制可能与下调lncRNA CCAT1表达水平有关。

关键词: 冬凌草甲素, lncRNA CCAT1, 子宫内膜癌, 细胞迁移, 细胞侵袭

Abstract: Objective

To investigate the effects of oridonin on the proliferation， migration and invasion of endometrial cancer HEC-1B cells， and to elucidate its possible mechanism.

Methods

The endometrial cancer HEC-1B cells in logarithmic growth phase were divided into control group（DMSO）， positive control group（2.5 mg·L^－1cisplatin），low dose（10 μmol·L^－1）of oridonin group， medium dose （20 μmol·L^－1）of oridonin group and high dose （40 μmol·L^－1）of oridonin group. MTT assay was used to detect the inhibitory rates of proliferation of cells. Flow cytometry was used to determine the apoptotic rates of HEC-1B cells. Cell scratch test was used to detect the cell migration ability. Transwell chamber assay was used to detect the invasion ability of HEC-1B cells. Real-time fluorescence quantitative PCR（RT-qPCR） was used to detect the expression levels of lncRNA CCAT1 in the cells.

Results

Compared with control group， the apoptotic rates of HEC-1B cells in positive control group， low，medium and high doses of oridonin groups were significantly increased （P<0.05），the scratch healing rates and the number of transmembrane cells were significantly reduced （P<0.05），and the expression levels of lncRNA CCAT1 in the HEC-1B cells were significantly decreased （P<0.05）. Compared with low dose of oridonin group， the apoptotic rates of HEC-1B cells in medium and high doses of oridonin groups were significantly increased （P<0.05），the scratch healing rates and the number of transmembrane cells were significantly reduced （P<0.05），and the expression levels of lncRNA CCAT1 in the HEC-1B cells were significantly decreased （P<0.05）. Compared with medium dose of oridonin group， the apoptotic rate of HEC-1B cells in high dose of oridonin group was significantly increased （P<0.05），the scratch healing rate and the number of transmembrane cells were significantly reduced （P<0.05），and the expression level of lncRNA CCAT1 in the HEC-1B cells was significantly decreased （P<0.05）.

Conclusion

Oridonin can inhibit the proliferation， migration，and invasion and promote the apoptosis of endometrial cancer HEC-1B cells， and its mechanism may be related to down-regulating the expression level of lncRNA CCAT1.

Key words: oridonin, lncRNA CCAT1, endometrial cancer, cell migration, cell invasion

中图分类号:

R737.33

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图/表 5

表1

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表2

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表3

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Group	Inhibitory rate of proliferation	Apoptotic rate
Control	—	4.57±0.38
Positive control Oridonin(μmol·L^－1)	51.20±4.17	54.71±3.44^*
Low dose	18.41±2.17	35.46±1.05^*
Medium dose	32.01±3.56^△	40.55±3.10^*△
High dose	45.24±3.82^△#	44.82±2.31^*△#

Group	Scatch healing rate（η/%）	Number of transmembrane cells(n)
Control	84.3±7.7	196±25
Positive control Oridonin(μmol·L^－1)	34.8±5.3^*	58±16^*
Low dose	66.4±7.1^*	121±10^*
Medium dose	51.6±6.1^*△	99±15^*△
High dose	37.3±5.2^*△#	74±11^*△#

Group	lncRNA CCAT1
Control	1.13±0.24
Positive control Oridonin(μmol·L^－1)	0.96±0.15
Low dose	0.66±0.13^*
Medium dose	0.47±0.08^△*
High dose	0.32±0.10^*△#

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