探讨程序性死亡受体1（PD-1）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织浸润CD4+和CD8+T淋巴细胞中的表达情况，阐明前列腺素E2（PGE2）对PD-1的影响及其相关机制。

选取确诊的75例NSCLC患者作为研究对象，根据国际抗癌联盟（UICC）颁布的NSCLC TNM分期标准，将患者分为I~Ⅳ期。应用密度梯度离心法分离获得NSCLC组织匀浆中浸润的单个核细胞。采用流式细胞术分析浸润淋巴细胞中CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞所占百分率。采用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和Western blotting法检测浸润T淋巴细胞中PD-1 mRNA和蛋白表达水平。利用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中PGE2水平。

Ⅲ期和Ⅳ期NSCLC患者局部浸润CD8+T淋巴细胞百分率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期NSCLC患者（P<0.05），而CD4+T淋巴细胞百分率在不同TNM分期患者组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。在Ⅳ期NSCLC患者CD8+T淋巴细胞中PD-1 mRNA表达水平高于其他分期患者（P<0.05），在不同TNM分期患者CD4+T淋巴细胞中PD-1 mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。在Ⅲ期和Ⅳ期NSCLC患者血清中PGE2水平明显高于Ⅰ期和Ⅱ期NSCLC患者（P<0.05）。PGE2刺激CD8+T淋巴细胞后EP2和EP4 mRNA表达水平明显升高（P<0.05），而加入EP2和EP4拮抗剂后CD8+T淋巴细胞中PD-1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05），PD-1蛋白表达量降低。

PGE2能够通过PGE2/EP2和PGE2/EP4信号通路促进NSCLC组织浸润CD8+T淋巴细胞中PD-1的表达，从而抑制CD8+T淋巴细胞的免疫功能。

探讨骨化三醇对胆总管结扎（BDL）诱导的小鼠肝纤维化的保护作用，并阐述其可能的作用机制。

选用45只8~10周雄性C57BL/6小鼠，随机分为假手术组、肝纤维化模型组（模型组）和骨化三醇治疗组（治疗组），每组15只。假手术组小鼠绕胆总管穿过手术线，不结扎。模型组小鼠双重结扎胆总管并离断。治疗组小鼠术后2.5 μg·kg^－1腹腔注射骨化三醇，每周3次。假手术组和模型组小鼠注射等体积生理盐水。术后继续给药4周，第28天眼眶取血，取小鼠肝脏。术后第2天检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性及总胆汁酸（TBA）、总胆红素（TBIL）和羟脯氨酸（Hyp）水平。苏木精-伊红（HE）染色和天狼猩红染色观察各组小鼠肝组织病理形态学和肝组织纤维化程度。Western blotting法检测各组小鼠肝组织中维生素D受体（VDR）细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（p-ERK）、α-平滑肌蛋白（α-SMA）、转化生长因子β1（TGF-β1）、Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）和结蛋白（Desmin）表达水平。免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中α-SMA和TGF-β1蛋白表达情况。

与假手术组比较，模型组小鼠血清中ALT和AST活性及TBA、TBIL和Hyp水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，治疗组小鼠血清中ALT和AST活性及TBA、TBIL和Hyp水平明显降低（P<0.05）。HE染色，假手术组小鼠肝小叶正常，组织结构较为完整，未见炎性细胞浸润；模型组小鼠肝组织出现炎性细胞浸润，坏死灶和胶原沉积较为明显；与模型组比较，治疗组小鼠肝组织坏死灶区域明显减少，炎性浸润有所改善。天狼猩红染色，假手术组小鼠肝组织仅有少量胶原沉积出现在中央静脉周围；模型组小鼠肝组织中央静脉及汇管区出现明显胶原沉积；与模型组比较，治疗组胶原沉积明显减少。Western blotting法检测，与假手术组比较，模型组小鼠肝组织中ERK、p-ERK、α-SMA、TGF-β1、Col Ⅰ和Desmin蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，治疗组小鼠肝组织中ERK、pERK、α-SMA、TGF-β1、Col Ⅰ和Desmin蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。免疫组织化学，模型组小鼠肝组织中α-SMA和TGF-β1蛋白表达量高于假手术组；治疗组小鼠肝组织中α-SMA和TGF-β1蛋白表达量明显低于模型组。

骨化三醇通过激活维VDR，下调ERK蛋白表达，降低TGF-β1表达，减少肝星状细胞（HSCs）激活，抑制胶原在组织间沉积，从而缓解BDL诱导的小鼠肝纤维化。

探讨毛樱桃总黄酮（PTTTF）对小鼠皮肤增生性瘢痕（HS）形成的作用，并阐明其可能的作用机制。

将96只ICR雄性小鼠随机分为空白对照组，模型对照组（给予相同剂量的涂膜剂空白基质），低、中和高剂量毛樱桃涂膜剂（PTTP）组（分别给予0.4、0.8 和1.6 mg·L^－1 PTTP），阳性对照复方醋酸地塞米松乳膏（DXM）组，每组16只。除空白对照组外，其余各组小鼠均采用皮肤打孔器，以脊柱为中线在背部两侧制造2个直径为10 mm的全层皮肤缺损模型，每天给药1次，每次给药0.1 mL涂抹。每天观察各组小鼠创面愈合情况，计算伤口愈合率。分别于造模第10、20、30和40天处死每组小鼠4只，取创面全层皮肤组织。采用HE染色观察HS皮肤组织病理形态表现，Western blotting法检测各组小鼠皮肤瘢痕组织中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3（Cleaved caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达水平。

与模型对照组比较，造模第40天时，低、中和高剂量PTTP组小鼠创面愈合率分别为98.94%、99.14%和99.04%，差异有统计学意义（P<0.05）。HE染色，与模型对照组比较，各剂量PTTP组小鼠伤口愈合较快，逐渐恢复到正常皮肤结构，有皮脂腺、毛囊和汗腺等皮肤附属器生成。Western blotting法检测，与模型对照组比较，各剂量PTTP组小鼠皮肤瘢痕组织中Cleaved caspase-3和Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。

PTTTF可促进伤口愈合，对小鼠HS的形成具有一定的抑制作用，其作用机制可能与诱导细胞凋亡有关。

观察胰高血糖素样肽1（GLP-1）受体激动剂利拉鲁肽对高糖诱导足细胞损伤后相关蛋白mRNA及蛋白表达的影响，并探讨其作用机制。

将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、甘露醇对照组、利拉鲁肽组和高糖+利拉鲁肽组。提取各组细胞RNA，应用Real-time PCR（RT-PCR）法检测各组足细胞中Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中Nephrin、Podocin、ZO-1、Bcl-2和caspase-3蛋白表达水平，免疫荧光法观察足细胞中骨架蛋白Synaptopodin表达情况，流式细胞术检测细胞凋亡率。将分化成熟的足细胞随机分为对照组、高糖组、高糖+利拉鲁肽组、高糖+利拉鲁肽+LY294002组。采用Western blotting法检测磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路转导蛋白、Bcl-2和caspase-3表达水平。

与对照组比较，高糖组足细胞中标志蛋白Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA及蛋白表达水平降低（P <0.05），Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05），caspase-3蛋白表达水平升高（P<0.05），足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显降低（P<0.05），足细胞凋亡率明显升高（P<0.05）。与高糖组比较，高糖+利拉鲁肽组足细胞中Nephrin、Podocin和ZO-1 mRNA及蛋白表达水平升高（P <0.05），Bcl-2蛋白表达水平升高（P <0.05），caspase-3蛋白表达水平降低（P<0.05），足细胞特异性骨架蛋白Synaptopodin荧光强度明显升高（P<0.05），足细胞凋亡率明显降低（P<0.05）。与对照组比较，高糖组足细胞中PI3K和pAkt蛋白表达水平明显降低（P <0.05），Bcl-2蛋白表达水平降低（ P<0.05），caspase-3蛋白表达水平升高（P <0.05）；与高糖组比较，高糖+利拉鲁肽组足细胞内PI3K和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达水平明显升高（P <0.05），凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平升高（P <0.05），caspase-3蛋白表达水平降低（P<0.05），与高糖+利拉鲁肽组比较，高糖+利拉鲁肽+LY294002组足细胞中PI3K和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达水平降低（P<0.05），Bcl-2蛋白表达水平降低（P <0.05），caspase-3蛋白表达水平升高（P<0.05）。

利拉鲁肽通过激活PI3K/Akt信号通路抑制足细胞凋亡，减轻高糖诱导的足细胞损伤。

探讨线粒体分裂融合蛋白表达失衡在IgA肾病（IgAN）小鼠肾脏病理学变化中的作用，为IgAN的治疗提供一定的实验依据。

20只健康SPF级雄性BALB/C小鼠， 6~8周龄，随机分为对照组和模型组，每组10只。采用牛血清白蛋白（BSA）、脂多糖（LPS）和四氯化碳（CCl₄）联合给药的方式建立小鼠IgAN模型。采用免疫荧光技术检测肾小球中IgA沉积，苏木精-伊红（HE）染色观察小鼠肾组织病理形态表现，以评价模型是否构建成功。称量小鼠体质量和肾脏质量，计算各组小鼠肾脏指数；酶活性法检测小鼠血清中肌酐和尿素氮水平。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测小鼠肾组织中调控线粒体分裂融合的关键基因动力相关蛋白1（Drp1）、线粒体融合蛋白1（Mfn1）和线粒体融合蛋白2（Mfn2）mRNA表达水平，Western blotting法检测小鼠肾组织中Drp1、Mfn1和Mfn2蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组小鼠肾小球出现明显的IgA沉积，伴随肾小球萎缩，肾小球系膜细胞和基质增生导致系膜区增宽，肾小管部分细胞肿胀坏死，表明IgAN模型构建成功。与对照组比较，模型组小鼠肾脏指数、血清肌酐和尿素氮水平均明显升高（P<0.05），小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高（P<0.05或P<0.01），小鼠肾组织中Drp1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），而小鼠肾组织中Mfn1和Mfn2 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

线粒体分裂融合蛋白表达失衡可能是IgAN发生发展的机制之一，以分裂融合稳态为靶点的研究可能为IgAN的治疗提供新思路。

探讨在具有T790M突变的非小细胞肺癌（NSCLC）细胞中应用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除程序性细胞死亡配体1（PD-L1）后对吉非替尼耐药敏感性的影响，阐明PD-L1对PC-9/T790M细胞耐药敏感性的作用机制。

常规体外培养PC-9细胞和 PC-9/T790M细胞，经CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除PC-9/T790M细胞中PD-L1后，分为PC-9、PC-9/T790M和Cas9 PC-9/sgRNA 3组细胞。采用Western blotting 法检测各组细胞中PD-L1蛋白表达水平，CCK-8法检测5、10和20 mmol·L^－1吉非替尼干预24、48和72 h后各组细胞存活率。体内实验中检测吉非替尼干预后各组移植瘤体积，HE染色观察移植瘤组织病理形态表现。

Western blotting 法检测，经CRISPR/Cas9编辑后敲除PD-L1的sgRNAl#组与PC-9、PC-9/T790M、sgRNA2#和sgRNA3#组比较，PD-L1蛋白表达水平最低。CCK-8法检测，在应用药物干预前Cas9 PC-9/sgRNA组细胞增殖活性与PC-9组、PC-9/T790M组比较，差异无统计学意义（P>0.05），10 mmol·L^－1吉非替尼干预72 h后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组细胞存活率与PC-9/T790M组比较明显降低（P<0.01）。体内实验，与PC-9/T790M组比较，吉非替尼干预后PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组裸鼠移植瘤体积明显减少（P<0.05）；PC-9组和Cas9 PC-9/sgRNA1#组移植瘤细胞呈现中、重度坏死，而PC-9/T790M组移植瘤组织病理形态无明显变化。

在耐药PC-9/T790M细胞中应用CRISPR/Cas9编辑技术敲除PD-L1能够明显提高吉非替尼的药物敏感性。

探讨疏肝化癥方对乳腺癌小鼠的抑瘤作用及其对肿瘤血管生成的影响，并阐明其可能的作用机制。

将40只雌性BALB/c小鼠随机分为模型组和0.01、0.10、1.00及10.00 g·kg^－1疏肝化癥方组，每组8只。采用小鼠腋下胸骨前缘乳腺脂肪垫内接种4T1细胞法构建三阴性乳腺癌（TNBC）小鼠模型。模型构建成功后，疏肝化癥方组小鼠灌胃给予相应剂量的疏肝化癥方液，模型组小鼠给予等量蒸馏水，持续21 d。每天检测各组小鼠食量和体质量；并在模型构建成功后第3、7、14和21天时，采用游标卡尺测量瘤体长径和短径，计算各组小鼠肿瘤体积和抑瘤率。21 d后处死小鼠，取瘤体组织，采用免疫组织化学法和Western blotting 法检测各组小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素样蛋白2（Ang-2）蛋白表达水平。

与模型组比较，不同剂量疏肝化癥方组小鼠每日食量随天数增加均降低，但差异无统计学意义（P>0.05）。在第14和21天时，模型组小鼠体质量增长缓慢；但10.00 g·kg^－1疏肝化癥方组小鼠体质量明显增加，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较，第21天时0.10、1.00和10.00 g·kg^－1疏肝化癥方组小鼠抑瘤率明显升高（P<0.05或P<0.01）。免疫组织化学检测，模型组小鼠肿瘤组织细胞质棕黄色较深；各剂量疏肝化癥方组随剂量的升高，肿瘤组织细胞着色逐渐减轻，各剂量疏肝化癥方组小鼠肿瘤组织细胞质棕黄色逐渐减少，而细胞核淡蓝色逐渐加大。阳性信号吸光度（A）值检测，与模型组比较，各剂量疏肝化癥方组VEGF和Ang-2蛋白表达水平明显降低，差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01），且以10.00 g·kg^－1疏肝化癥方组降低最明显。Western blotting法检测，与模型组比较，各剂量疏肝化癥方组小鼠肿瘤组织中VEGF和Ang-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01），且呈剂量依赖性。

疏肝化癥方对乳腺癌荷瘤小鼠的瘤体生长有抑制作用，其作用机制可能与抑制肿瘤组织中VEGF和Ang-2蛋白表达有关。

研究硒代蛋氨酸（Se-Met）对铅暴露大鼠脑组织损伤的保护作用，并探讨其作用机制。

50只健康雄性Wistar大鼠随机分正常对照组、铅损伤模型组（Pb组），Pb+低、中和高剂量Se-Met（Pb+L Se-Met、Pb+M Se-Met和Pb+H Se-Met）组（n=10）。除正常对照组外，其余4组大鼠自由饮用浓度为1 g·L^－1（546.2 mg·L^－1 Pb）的醋酸铅溶液，共4周，建立铅损伤模型。Pb+L Se-Met、Pb+M Se-Met和Pb+H Se-Met组大鼠每天给予0.1、0.2和0.4 g·kg^－1 Se-Met，以5 mL蒸馏水混悬液灌胃给药，正常对照组和Pb组大鼠每天给予等体积蒸馏水灌胃，连续6周。采用石墨炉原子吸收光谱法测定各组大鼠骨铅含量；Morris水迷宫实验检测大鼠行为学指标；生化法检测大鼠脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、胆碱酯酶（CHE）活性和丙二醛（MDA）及一氧化氮（NO）水平；HE染色观察各组大鼠脑海马CA1区病理形态表现；免疫组织化学法观察各组大鼠脑海马CA1区细胞凋亡蛋白［B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）］和硒蛋白S（SelS）的表达。

与正常对照组比较，Pb组、Pb+L Se-Met组、Pb+M Se-Met组和Pb+H Se-Met组大鼠骨铅含量明显增加（P<0.01）；Morris水迷宫实验中大鼠逃避潜伏期明显延长（P<0.01），总运动距离明显增加（P<0.01），目标象限滞留时间明显缩短（P<0.05），穿越次数明显降低（P<0.05）；大鼠脑组织中GSH-Px 、SOD和CHE活性明显降低（P<0.01），MDA和NO水平明显升高（P<0.01）。与正常对照组比较，Pb组大鼠海马CA1区神经细胞排列不整齐，细胞形态不规则呈多角形，细胞核浓缩深染。与Pb组比较，Pb+L Se-Met组、Pb+M Se-Met组和Pb+H Se-Met组大鼠骨铅含量明显降低（P<0.01）；Morris水迷宫试验中大鼠逃避潜伏期明显缩短（P<0.01），总运动距离明显缩短（P<0.01），目标象限滞留时间明显延长（P<0.05），穿越次数明显增加（P<0.05）；大鼠脑组织中GSH-Px 、SOD和CHE活性升高（P<0.01），MDA和NO水平明显降低（P<0.01）；大鼠海马CA1区病理改变减轻； SelS和Bcl-2蛋白表达量增加， Bax蛋白表达量降低。

Se-Met对铅暴露大鼠脑组织损伤具有一定保护作用，其作用机制与降低铅暴露大鼠体内铅负荷、减少氧化损伤和脑海马CA1区细胞凋亡、增加大鼠脑海马CA1区SelS表达有关。

探讨木犀草素通过Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）信号通路对大鼠烟曲霉菌性角膜炎（AFK）的调控作用，阐明其抑制AFK炎症反应的机制。

100只SD大鼠随机选取15只作为假手术组［未注入烟曲霉菌（AF）孢子混悬液］，其余85只大鼠采用AF孢子混悬液注入法建立AFK模型。建模成功的72只大鼠随机分为模型组14只、低剂量木犀草素组14只、中剂量木犀草素组14只、高剂量木犀草素组15只和脂多糖（LPS）+木犀草素组15只。低、中和高剂量木犀草素组大鼠给予浓度为5、10和20 g·L^－1木犀草素溶液局部滴眼50 μL，假手术组和模型组大鼠给予等量1% DMSO溶液局部滴眼，LPS+木犀草素组大鼠给予20 g·L^－1木犀草素溶液50 μL和LPS溶液1.0 μg局部滴眼，连续7 d。观察各组大鼠角膜大体变化并评估各组大鼠角膜炎症指数；制备各组大鼠角膜组织标本，采用HE染色法观察角膜组织病理形态表现；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠角膜组织中白细胞介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素12（IL-12）水平，采用Western blotting法检测各组大鼠角膜组织中 TLR4、MyD88和核转录因子-κB（NF-κB）蛋白表达水平。

假手术组大鼠角膜组织上皮完整，无炎性细胞浸润；模型组和LPS+木犀草素组大鼠角膜呈现白色致密溃疡灶，水肿且表面无光泽，虹膜不可见，LPS+木犀草素组溃疡灶面积更大；低、中和高剂量木犀草素组大鼠角膜溃疡灶面积逐渐变小，病变减轻。HE染色，模型组和LPS+木犀草素组大鼠角膜均可见胶原纤维肿胀、排列紊乱，大量炎性细胞浸润；低、中和高剂量木犀草素组上述变化均减轻，其中高剂量木犀草素组减轻最为明显。与模型组比较，低、中和高剂量木犀草素组大鼠角膜炎症指数和角膜组织中IL-1β、TNF-α、IL-12水平及TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；LPS+木犀草素组上述指标均高于模型组和低、中及高剂量木犀草素组（P<0.05）。

木犀草素对AFK大鼠具有治疗作用，可有效抑制角膜炎症反应，其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88信号通路相关蛋白表达及其下游炎症因子有关。

探讨围生期邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）暴露对小鼠神经行为的影响，阐明DEHP影响神经行为的可能机制。

选用受孕的ICR小鼠32只，随机分为3个不同剂量DEHP和玉米油对照组，于怀孕第3天起至孕17 d止，每天分别给予低剂量（10 mg?kg^－1）、中剂量（50 mg?kg^－1）、高剂量（250 mg?kg^－1）DEHP和玉米油灌胃，在仔鼠出生后观察其神经发育学指标，并在7周龄后进行神经行为学检测；利用Western blotting法检测仔鼠大脑前额叶皮层组织中丝切蛋白（cofilin）和P21蛋白激活激酶1（Pak1）蛋白表达水平。将体外培养的Neuro-2A细胞分为不同剂量DEHP组和二甲基亚砜（DMSO）对照组，分别用1 nmol?L^－1、10 nmol?L^－1、1 μmol?L^－1 DEHP和DMSO孵育，在0、6、12、24和48 h利用细胞划痕实验观察细胞迁移能力，在相差显微镜下拍照观察细胞突起生长的情况。

与玉米油对照组比较，不同剂量DEHP组新生仔鼠神经发育学指标差异无统计学意义（P>0.05）；与玉米油对照组比较，中剂量DEHP组雌性仔鼠自由探索新环境的能力降低（P<0.01）；与玉米油对照组比较，中剂量DEHP组仔鼠前额叶皮层组织中cofilin蛋白表达水平降低（P<0.05），但Pak1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。细胞划痕实验，与DMSO对照组比较，不同剂量DEHP组细胞孵育12 h后，细胞迁移速率均降低（P<0.05）；1 μmol?L^－1 DEHP组孵育6 h后细胞平均突起长度均缩短（P<0.05），孵育48 h后有突起细胞百分比降低（P<0.05）。

ICR小鼠在孕期暴露于50 mg?kg^－1及以上剂量的DEHP可导致仔鼠神经行为异常，1 μmol?L^－1 DEHP孵育Neuro-2A细胞12 h后明显抑制细胞迁移和突起生长能力，其机制可能与DEHP抑制细胞骨架调控蛋白cofilin的表达有关。

探讨肌肽对脂多糖（LPS）诱导的星形胶质细胞（AS）炎症因子释放的影响，初步阐明其作用机制。

体外培养新生大鼠大脑皮质AS并纯化，随机分为对照组、LPS组和LPS+肌肽组（10、30和90 mmol·L^－1肌肽）。对照组只加入完全培养基，LPS组培养基中加入终浓度为1 mg·L^－1 LPS，体外刺激细胞 24 h构建炎症损伤模型，LPS+肌肽组培养基中预先分别加入10、30和90 mmol·L^－1肌肽，培养1 h后再加入终浓度为1 mg·L^－1 的LPS。MTT法检测各组AS存活率，ELISA法检测各组AS培养液中白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，DCFH-DA探针法检测各组AS中活性氧（ROS）水平，Hoechst 33258荧光染色法检测各组AS凋亡率，免疫荧光染色法测定各组AS中磷酸化核转录因子κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达情况和p-NF-κB p65阳性细胞数，采用Western blotting 法检测各组AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平。

与对照组比较，LPS组AS存活率明显降低（P<0.05），AS培养液中IL-1β和TNF-α水平升高（P<0.05），AS中ROS水平、AS凋亡率和p-NF-κB p65阳性细胞数均明显升高（P<0.05），AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平升高（P<0.05）。与LPS组比较，LPS+肌肽组AS存活率明显升高（P<0.05），AS培养液中IL-1β和TNF-α水平降低（P<0.05），AS中ROS水平、AS凋亡率和p-NF-κB p65阳性细胞数均明显降低（P<0.05），AS中p-NF-κB p65蛋白表达水平降低（P<0.05）。

肌肽可抑制LPS引起的AS中炎症因子IL-1β和TNF-α释放，其机制可能与肌肽抑制LPS诱导AS中ROS生成、进而抑制NF-κB p65激活有关。

观察铁超载条件下跨膜蛋白Nedd4家族反应蛋白1（Ndfip1）过表达对神经细胞凋亡的抑制作用，探讨Ndfip1对神经细胞的保护作用机制。

分别以Ndfip1质粒和空质粒转染的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为实验组和对照组。在铁离子超载条件下，采用MTT比色法测定2组细胞生存率，采用活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）检测试剂盒检测2组细胞中ROS水平和MDA水平，Western blotting法测定2组细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）的蛋白表达水平。

与对照组比较，实验组细胞生存率明显升高（P<0.05）。实验组细胞内荧光强度明显弱于对照组，即实验组细胞中ROS水平明显低于对照组。与对照组比较，实验组细胞中MDA水平明显降低（P<0.05），细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05），Bax和caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。

Ndfip1可以减轻铁离子超载诱导的神经细胞凋亡，提高细胞生存率，对神经细胞具有保护作用；其作用机制可能与减轻细胞内氧化应激反应和抑制凋亡途径有关。

探讨新型血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体、全反式维甲酸（ATRA）、新型VEGF单克隆抗体与ATRA联合用药对乳腺癌MCF-7细胞的影响，为乳腺癌的临床治疗提供新方案。

将MCF-7乳腺癌细胞分为对照组（不做任何处理）、VEGF抗体组（20 mg·L^－1 VEGF抗体）、ATRA组（10 μmol·L^－1 ATRA）和VEGF抗体+ATRA组（20 mg·L^－1 VEGF抗体+10 μmol·L^－1 ATRA）4组，每组5个重复。加入不同药物处理MCF-7细胞48 h后，采用ELISA法检测新型VEGF抗体浓度，MTT法检测MCF-7细胞增殖率，流式细胞术检测MCF-7细胞凋亡率，免疫印迹法检测MCF-7细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和核转录因子κB（NF-κB）蛋白表达水平。

ELISA法检测，新型人类重组VEGF单克隆抗体浓度为200 μg·L^－1，与阳性抗体对照比较其质量良好。MTT法检测，与对照组比较，VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞增殖率明显降低（P<0.01）。流式细胞术检测，与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较，VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高（P<0.01）；与对照组比较，VEGF抗体组和ATRA组MCF-7细胞凋亡率明显升高（P<0.01）；与VEGF抗体组比较，ATRA组MCF-7细胞凋亡率升高（P<0.01）。免疫印迹法检测，与对照组、VEGF抗体组和ATRA组比较，VEGF抗体+ATRA组MCF-7细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05）；与对照组和VEGF抗体组比较，ATRA组MCF细胞中NF-κB蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）， Bax蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。

新型VEGF单克隆抗体和ATRA可以抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡，而二者联合用药的效果要显著优于单独用药。

探讨膜相关环状蛋白1（MARCH1）对胃癌细胞迁移和侵袭的影响，并阐明其可能的分子机制。

收集胃癌手术切除的20例胃癌组织和癌旁组织，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法和Western blotting法检测不同组织中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平。选择人胃黏膜正常上皮细胞GES-1和人胃癌细胞BGC-823、BGC-803、AGS及SGC-7901，RT-qPCR法检测不同细胞中MARCH1 mRNA表达水平。取对数生长期的SGC-7901细胞系分为siNC（转染siNC）、siMARCH1-1组（转染siMARCH1-1）和siMARCH1-2组（转染siMARCH1-2），RT-qPCR法和Western blotting法检测各组细胞中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平，CCK-8法检测各组细胞增殖活性，细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率，Transwell小室实验检测各组细胞侵袭能力，Western blotting法检测各组细胞中磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶（p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和蛋白激酶B（AKT）蛋白表达水平。

与癌旁组织比较，胃癌组织中MARCH1 mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），与胃黏膜正常上皮细胞GES-1比较，人胃癌细胞BGC-823、BGC-803、AGS和SGC-7901中MARCH1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。与siNC比较，siMARCH1-1组和siMARCH1-2组细胞中MARCH1 mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）；与siNC比较，siMARCH1-1组和siMARCH1-2组细胞增殖活性差异无统计学意义（P>0.05），细胞划痕愈合率和侵袭数均明显降低（P<0.01），细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.01），AKT蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。

MARCH1能够促进胃癌细胞的迁移和侵袭，其机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。

探讨miRNA-138-5p过表达对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂（DDP）耐药的影响，并阐明其可能机制。

采用浓度梯度递增法诱导MCF-7细胞，建立DDP耐药细胞株MCF-7/DDP，再将miR-138-5p mimics或HIF-1α过表达质粒分别或同时转染至MCF-7/DDP细胞中。将细胞分为阴性对照组（NC组，转染miR-138-5p mimics阴性对照）、miR-138-5p mimics组（转染miR-138-5p mimics）、miR-138-5p mimics+Vector组（共转染miR-138-5p mimics和空载质粒）和miR-138-5p mimics+HIF-1α组（共转染miR-138-5p mimics和HIF-1α过表达质粒），另选未经任何转染的MCF-7/DDP细胞作为空白对照组。采用不同浓度（0、10、20、40、80和100 μmol·L^－1）DDP处理细胞24 h，MTT法检测细胞增殖活性，并计算半数抑制浓度（IC₅₀）和耐药指数（RI）；实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测细胞中miR-138-5p和HIF-1α mRNA表达水平；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blotting法检测细胞中HIF-1α、P-gp和MRP1蛋白表达水平；采用TargetScan软件预测miR-138-5p与HIF-1α靶向结合位点，并采用双荧光素酶报告系统验证两者靶向关系。

与亲本MCF-7细胞比较，耐药细胞株MCF-7/DDP对DDP的IC₅₀值明显升高（P<0.01），且RI值为5.72。与亲本MCF-7细胞比较，耐药细胞株MCF-7/DDP中miR-138-5p表达水平明显降低（P<0.01），而HIF-1α mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。与空白对照组或NC组比较，miR-138-5p mimics组细胞中miR-138-5p表达水平和细胞凋亡率明显升高（P<0.01），HIF-1α蛋白表达水平和细胞增殖活性明显降低（P<0.01）。双荧光素酶报告系统实验，与NC组比较，miR-138-5p mimics组野生型HIF-1α细胞中荧光素酶活性明显降低（P<0.01）。与miR-138-5p mimics+ Vector组比较，miR-138-5p mimics+HIF-1α组细胞增殖活性明显升高（P<0.05），细胞凋亡率明显降低（P<0.01），细胞中HIF-1α、P-gp和MRP1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

miRNA-138-5p通过靶向抑制HIF-1α表达和下调耐药相关蛋白P-gp和MRP1表达水平，增强MCF-7/DDP细胞对DDP的敏感性。

探索脉管Ⅱ号胶囊对大鼠肢体缺血症的影响，为外周动脉疾病的治疗奠定理论基础。

60只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、假手术组、阳性对照组（0.202 5 g·kg^－1复方丹参）、低剂量脉管Ⅱ号胶囊组（30 mg·kg^－1）和高剂量脉管Ⅱ号胶囊组（90 mg·kg^－1），每组10只。采用结扎股动静脉近端、远端及其主要分支的方法建立大鼠后肢缺血模型。观察各组大鼠的一般状态，采用HE染色法观察各组大鼠后肢肌肉组织病理形态表现，采用免疫组织化学法检测各组大鼠肌肉组织中血管生成素1（Ang-1）、酪氨酸激酶受体2（Tie2）和CD31阳性表达细胞数；采用Western blotting法检测各组大鼠肌肉组织中Ang-1和Tie2蛋白表达水平。

大鼠手术侧后肢皮肤温度偏低，皮肤颜色呈现暗红色，后肢体出现紫绀和趾甲脱落等现象。与正常对照组和假手术组比较，模型组大鼠后肢肌肉细胞肿胀明显，出现横纹消失以及肌束膜内肌原纤维萎缩的现象；与模型组比较，阳性对照组、低和高剂量脉管Ⅱ号胶囊组上述情况有所缓解。与假手术组比较，模型组大鼠肌肉组织中Ang-1和Tie2阳性表达细胞数明显减少（P<0.05）；与模型组比较，阳性对照组和高剂量脉管Ⅱ号组大鼠肌肉组织中Ang-1和Tie2阳性表达细胞数明显升高（P<0.05）。与模型组比较，阳性对照组和高剂量脉管Ⅱ号胶囊组大鼠后肢皮肤温度差明显减小（P<0.05），大鼠肌肉组织中Ang-1和Tie2蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。

脉管Ⅱ号胶囊可促进大鼠肢体缺血后血管的再生，其作用机制可能与激活Ang-1/Tie2通路有关。

探讨雷公藤多苷（GTW）对慢性肾脏病（CKD）大鼠血管内皮损伤的保护作用，并阐明其作用机制。

将60只大鼠随机分为对照组、模型组和低、中及高剂量GTW组，每组12只。采用腺嘌呤诱导CKD大鼠模型。低、中和高剂量GTW组大鼠分别灌胃给予3.0、6.0和9.0 mg·kg^－1 GTW，对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。给药4周后检测各组大鼠血清尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）水平。采用HE和Masson染色观察各组大鼠血清肾脏组织病理及纤维化改变。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清内皮素1（ET-1）、一氧化氮（NO）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平。

与对照组比较，模型组大鼠血清中BUN、Scr、ET-1、AngⅡ、TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明显升高（P<0.05），NO水平明显降低（P<0.05），肾组织纤维化程度明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低、中和高剂量GTW组大鼠血清中BUN、Scr、ET-1、AngⅡ、TNF-α、IL-6和TGF-β1水平明显降低（P<0.05），NO水平明显升高（P<0.05），肾组织纤维化程度明显降低（P<0.05）。HE染色，对照组大鼠肾组织中肾小球和肾小管结构完整，细胞排列整齐；模型组大鼠肾组织肾小球和肾小管出现水肿，球囊粘连，有炎症细胞浸润；低、中和高剂量GTW组大鼠肾组织均有不同程度水肿和炎症细胞浸润，损伤程度较模型组轻。

GTW通过下调ET-1和AngⅡ水平、上调NO水平，降低血清炎性因子水平，对CKD大鼠血管内皮损伤起到改善作用。

探讨冬凌草甲素对子宫内膜癌HEC-1B细胞增殖、迁移和侵袭的影响，阐明其可能机制。

取对数生长期的子宫内膜癌HEC-1B细胞分为对照组（DMSO培养液）、 阳性对照组（2.5 mg·L^－1顺铂）、低剂量（10 μmol·L^－1）冬凌草甲素组、中剂量（20 μmol·L^－1）冬凌草甲素组和高剂量（40 μmol·L^－1）冬凌草甲素组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡率，细胞划痕实验检测细胞迁移能力，Transwell小室实验检测HEC-1B细胞侵袭能力，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）法检测各组HEC-1B细胞中长链非编码RNA（lncRNA）结肠癌相关转录因子1（CCAT1）表达水平。

与对照组比较，阳性对照组和低、中及高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05）；HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。与低剂量冬凌草甲素组比较，中和高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高 （P<0.05），细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05），HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。与中剂量冬凌草甲素组比较，高剂量冬凌草甲素组HEC-1B细胞凋亡率明显升高 （P<0.05），细胞划痕愈合率和穿膜细胞数均明显降低（P<0.05），HEC-1B细胞中lncRNA CCAT1表达水平明显降低（P<0.05）。

冬凌草甲素可以抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭，促进子宫内膜癌HEC-1B细胞凋亡，其作用机制可能与下调lncRNA CCAT1表达水平有关。

探讨白芍总苷（TGP）通过调控Toll样受体4（TLR4）/核因子κB（NF-κB）信号通路对类风湿关节炎（RA）大鼠关节情况、炎症因子及凋亡因子的影响，并阐明其作用机制。

利用牛Ⅱ型胶原蛋白溶液和完全弗氏佐剂构建胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠模型，将CIA模型大鼠随机分为CIA组、低剂量（25 mg·kg^－1）TGP组（TGP-LD组）、中剂量（50 mg·kg^－1）TGP组（TGP-MD）和高剂量（100 mg·kg^－1） TGP 组（TGP-HD组），每组10只；另选取10只健康SD大鼠作为对照组。记录各组大鼠体质量、关节炎指数及关节肿胀度；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）， 白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）水平；采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测各组大鼠关节滑膜组织中TLR4、NF-κB、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved caspase-3）、B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA和蛋白表达水平。

与对照组比较，CIA组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3和Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05），关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达水平，血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显升高（P<0.05）。与CIA组比较，不同剂量TGP组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3及Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平，血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平明显降低（P<0.05）。与TGP-LD组比较， TGP-MD组和TGP-HD组大鼠体质量和关节滑膜组织中Cleaved caspase-3及Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05），关节炎指数、关节肿胀度、关节滑膜组织中Bcl-2、TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达水平，血清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平明显降低（P<0.05）。

TGP可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路，改善CIA症状，降低炎症反应，并促进关节滑膜组织细胞的凋亡。

探讨敲低烷基化修复同源体3（ALKBH3）对膀胱癌细胞生长、迁移与肿瘤血管生成的影响，并阐明其相关机制。

分别采用免疫组织化学和蛋白质印迹法检测膀胱上皮细胞癌和癌旁组织以及正常膀胱上皮细胞（SV-HRUC-1）和膀胱癌细胞（BIU87和T24）中ALKBH3蛋白表达水平。将BIU87和T24细胞分为sh-Con组（转染sh-Con）和sh-ALKBH3组（转染sh-ALKBH3）。采用CCK-8法、集落形成实验和Transwell小室实验分别检测2组细胞活性、集落数、迁移数和侵袭数。采用Transwell小室实验和小管形成实验分别检测2组细胞培养基诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）迁移数和小管形成率。构建异体移植瘤模型，采用游标卡尺定时检测2组瘤体体积，采用免疫组织化学检测瘤体组织中CD31蛋白表达水平。采用蛋白质印迹法检测体内和体外实验中2组细胞中血管内皮生长因子A（VEGF-A）蛋白表达水平。

与癌旁组织或SV-HRUC-1细胞比较，膀胱上皮细胞癌组织或膀胱癌细胞（BIU87和T24）中ALKBH3蛋白表达水平均明显升高（P<0.01）。体外实验，与sh-Con组比较，sh-ALKBH3组BIU87和T24细胞活性、迁移数和侵袭数以及其诱导的HUVEC迁移数和小管形成率均明显降低（P<0.01）。体内实验，与sh-Con组比较，sh-ALKBH3组瘤体体积减小（P<0.01），且瘤体组织中CD31蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。与sh-Con组比较，在体内外实验中sh-ALKBH3组VEGF-A蛋白表达水平均明显降低（P<0.01）。

敲低ALKBH3能抑制膀胱癌细胞的生长、迁移、侵袭和肿瘤血管生成，其机制可能与下调VEGF-A表达有关。

探讨腹腔神经丛阻滞对大鼠肝部分切除术后应激反应及免疫炎性的影响，并阐明其作用机制。

取40只大鼠，随机选取10只作为正常组，10只作为阻滞剂对照剂组，20只制备大鼠肝部分切除术模型。取造模成功的16只大鼠，随机分为模型组和模型+阻滞剂组，每组8只。模型+阻滞剂组大鼠于术毕关腹前给予腹腔神经丛双侧注射0.5%利多卡因，阻滞剂对照组大鼠不制备模型，给予腹腔神经丛双侧注射0.5%利多卡因，正常组与模型组大鼠给予腹腔神经丛双侧注射等量生理盐水。给药12 h后，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组大鼠血清中皮质酮（CORT）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、去甲肾上腺素（NE）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平，实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）和Western blotting法检测各组大鼠外周血单个核细胞中糖皮质激素受体（GR）、Toll样受体4（TLR4）mRNA和蛋白表达水平。

与正常组和阻滞剂对照组比较，模型组和模型+阻滞剂组大鼠血清中CORT、ACTH和NE水平升高（P<0.05）；与模型组比较，模型+阻滞剂组大鼠血清中CORT、ACTH和NE水平降低（P<0.05）。与正常组和阻滞剂对照组比较，模型组和模型+阻滞剂组大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高（P<0.05）；与模型组比较，模型+阻滞剂组大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平降低（P<0.05）。与正常组和阻滞剂对照组比较，模型组和模型+阻滞剂组大鼠外周血单个核细胞中GR mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05），TLR4 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05）；与模型组比较，模型+阻滞剂组大鼠外周血单个核细胞中GR mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05），TLR4 mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.05）。正常组和阻滞剂对照组大鼠血清中CORT、ACTH、NE、TNF-α、IL-1β、IL-6水平及外周血单个核细胞中GR、TLR4 mRNA和蛋白表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

腹腔神经丛阻滞能减轻肝部分切除术后大鼠的应激反应及免疫炎性反应，其机制可能与上调GR蛋白表达和下调TLR4蛋白表达有关。

通过生物信息学方法对癌症基因组图谱（TCGA）和高通量基因表达（GEO）数据库进行数据挖掘，探讨宫颈鳞状细胞癌（宫颈鳞癌）预后相关分子。

从TCGA和GEO数据库下载宫颈鳞癌相关数据，利用Perl软件和R语言软件进行数据整理和分析，筛选出2个数据库中在正常组织和肿瘤组织共有的差异表达基因（DEGs），并对DEGs进行基因本体论（GO）的功能富集和京都基因与基因组百科全书 （KEGG） 通路富集分析，预测其作用机制。使用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白-蛋白互作（PPI）网络，筛选枢纽基因，并结合临床数据进行生存分析。

2个数据库共有的DEGs为226个，其中上调的为170个，下调的为56个。GO富集分析，上述DEGs主要与细胞核分裂、细胞器分裂、有丝分裂和DNA酶活性催化等有关联。KEGG通路分析，这些DEGs主要富集在细胞周期、DNA复制和p53信号通路等。生存分析，微小染色体蛋白（MCMs）家族基因中MCM2、MCM5和MCM6与染色体结构维持蛋白4 （SMC4）基因均在肿瘤组织中高表达，且与宫颈鳞癌患者预后有关联（P < 0.05），其中表达上调的MCM2、MCM5和MCM6基因可延长宫颈鳞癌患者的生存时间，属于抑癌基因；而SMC4则缩短患者的生存时间，为促癌基因。

MCM2、MCM5和MCM6作为抑癌基因抑制宫颈癌的进展，而SMC4作为促癌基因促进宫颈鳞癌的进展。

通过生物信息学工具探讨20个m⁶A调节基因在子宫内膜癌（UCEC）组织中的表达水平并筛选与预后有关的核心基因，阐明核心基因与免疫浸润程度的关系。

利用肿瘤基因组图谱（TCGA）数据库下载符合本研究要求的547例UCEC和35例癌旁组织中m⁶A调节基因的转录组数据、临床病理指标和生存期数据；利用基因表达汇编（GEO）数据库下载GSE17025芯片数据，包含81例UCEC样本和12例正常子宫内膜样本。利用基因表达分析工具（GEO2R）和R软件筛选差异表达的m⁶A调节基因，进一步对差异表达基因（DEGs）进行生存分析和独立预后分析，选取与UCEC患者总体生存期（OS）关联最强的DEGs作为核心基因；应用STRING数据库构建蛋白互作（PPI）网络，采用R软件对DEGs进行相关性分析；利用UALCAN数据库分析核心基因表达水平与UCSC不同临床病理学指标的关联性；应用肿瘤免疫评估资源（TIMER）数据库和基因表达谱数据动态分析（GEPIA）数据库研究核心基因与肿瘤免疫浸润程度及免疫浸润标记物的相关性；利用Kaplan-Meier Plotter数据库基于免疫细胞亚组中核心基因的表达水平进行生存分析。

大多数m⁶A调节基因在UCEC组织和癌旁组织样本中的表达水平比较差异有统计学意义（P<0.05），其中IGF2BP3 mRNA在UCEC组织中呈高水平表达（P<0.05），IGF2BP3 mRNA高水平表达患者OS较IGF2BP3 mRNA低水平表达患者缩短（P<0.05），且单因素［风险比（HR）=1.106，95%可信区间（CI）：1.019~1.202，P=0.016］和多因素Cox回归分析结果（HR=1.097，95% CI：1.003~1.199，P=0.043）均显示IGF2BP3可作为评估患者OS的独立危险因子；IGF2BP3 mRNA在晚期、绝经前UCEC患者肿瘤组织和子宫内膜浆液性腺癌组织中呈高水平表达（P<0.05）；IGF2BP3 mRNA表达水平与UCEC中CD8+T细胞（r=0.126，P<0.05）、中性粒细胞（r=0.324，P<0.01）和树突状细胞（DC）（r=0.120，P<0.05）免疫浸润程度呈正相关关系；IGF2BP3 mRNA表达水平与UCEC中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）、巨噬细胞（M1和M2）、辅助性T细胞（Th1、Th2和Th17）和调节性T细胞（Treg）标记物呈正相关关系（0.1≤r ≤1.0，P<0.05）；在B细胞、CD8+T细胞、Treg细胞和Th2 细胞低浸润亚组中IGF2BP3 mRNA高水平表达患者OS比IGF2BP3 mRNA低水平表达患者短（P<0.05）。

IGF2BP3 mRNA表达水平在UCEC组织中明显升高，IGF2BP3 mRNA高水平表达可促进UCEC组织中免疫浸润，提示UCEC患者预后不良；IGF2BP3可能成为判定UCEC患者预后的分子标志物和新的治疗靶点。

探讨miR-1915-3p和Bcl-2 mRNA在结肠癌组织中的表达及其与结肠癌患者临床病理参数和预后的相关性，阐明miR-1915-3p和Bcl-2在结肠癌发生发展中的作用。

收集结肠癌组织及癌旁正常黏膜组织标本各40例，应用实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）技术检测结肠癌组织和癌旁正常黏膜组织中miR-1915-3p和Bcl-2 mRNA表达水平，采用Pearson相关分析法分析miR-1915-3p表达水平与和Bcl-2 mRNA表达水平的相关性，采用χ²检验分析miR-1915-3p和Bcl-2与结肠癌患者临床病理参数和预后的关系，采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，生存差异行Log-rank检验。

RT-qPCR检测，与癌旁正常黏膜组织比较，结肠癌组织中miR-1915-3p表达水平明显降低（P<0.05），Bcl-2 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）；且结肠癌组织中miR-1915-3p与Bcl-2 mRNA表达水平呈负相关关系（r=－0.542，P<0.05）。结肠癌组织中，miR-1915-3p表达水平与肿瘤分化程度和淋巴结转移有明显关联（P<0.05），miR-1915-3p表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小和TNM分期无关联（P>0.05）。结肠癌组织中Bcl-2 mRNA表达水平与TNM分期有关（P<0.05），而与其他临床病理参数无关联（P>0.05）。Kaplan-Meier生存曲线，miR-1915-3p高表达组结肠癌患者总生存期（OS）长于miR-1915-3p低表达组（χ²=3.641，P<0.05），而Bcl-2 mRNA表达水平与结肠癌患者预后无关联（χ²=0.571，P>0.05）。

结肠癌患者肿瘤组织中miR-1915-3p表达水平明显降低，而Bcl-2 mRNA表达水平明显升高，二者的联合检测有助于结肠癌的诊断和预后评估。

探讨miR-26a-5p对人类风湿关节炎（RA）-成纤维样滑膜细胞（FLSs）凋亡及炎性因子分泌的影响，阐明其作用机制。

分离RA患者的膝关节滑膜组织RA-FLSs，将miR-26a-5p模拟物（mimic）、抑制物（inhibitor）及阴性对照转染 RA-FLSs，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）法检测转染效果，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养液中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，CCK-8 法检测各组细胞增殖活性，AnnexinⅤ-FITC/PI与Hoechst 33342染色检测各组细胞凋亡情况，Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）与酪氨酸激酶2（JAK2）/信号传导及转录活化因子3（STAT3）信号通路相关蛋白表达水平。

与空白对照组和NC-mimic组比较， miR-26a-5p mimic组RA-FLSs中 miR-26a-5p mRNA表达水平升高（P<0.05），RA-FLSs增殖活性降低（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞中Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平降低（P<0.05），Bax蛋白表达水平升高（P<0.05）；与空白对照组和NC-inhibitor组比较，miR-26a-5p inhibitor组RA-FLSs中 miR-26a-5p mRNA表达水平降低（P<0.05），RA-FLSs细胞增殖活性升高（P<0.05），细胞凋亡率降低（P<0.05），Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平升高（P<0.05），Bax蛋白表达水平降低（P<0.05）。

过表达miR-26a-5p能够抑制RA-FLSs细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用机制可能与抑制 JAK2/STAT3信号通路的激活有关。

在可控型心脏死亡器官捐献（DCD）术中应用不同剂量的乌司他丁预处理，观察其对肾移植受体术后肾功能的影响。

可控型DCD供体90例，肾移植受体174例。将供体随机分为3组，U1组术中使用乌司他丁5 000 U·kg^－1；U2组术中使用乌司他丁10 000 U·kg^－1；对照组术中不使用乌司他丁，给予等量的生理盐水。检测受体术前及术后1~7 d的血肌酐和血尿素氮水平，计算估算肾小球滤过率（eGFR），记录每小时尿量，计算术后移植物功能延迟恢复 （DGF）发生率。

3组受体术后7 d的每小时尿量呈现下降的趋势。术后第1天，U1组和U2组受体每小时尿量高于对照组（P<0.05）。术后第3天，U2组受体每小时尿量高于U1组（P<0.05）。术后第5天，U2组每小时尿量高于U1组（P<0.05）。术后第6天，U2组受体每小时尿量高于U1组和对照组（P<0.05）。其余各天3组受体每小时尿量比较差异无统计学意义（P>0.05）。术后7 d内U1组和U2组受体eGFR均高于对照组，术后第2天U1组受体eGFR高于对照组（P<0.05），其余时间3组受体eGFR比较差异无统计学意义（P>0.05）。3组受体术后7 d内血肌酐水平均明显降低，U1组和U2组受体血肌酐水平较对照组下降幅度更低，但3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。3组受体血尿素氮水平均降低后又升高，U1组和U2组受体血尿素氮水平较对照组下降幅度更大，但3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。对照组、U1组和U2组受体术后DGF发生率分别为10.5%、8.5%和6.9%，U1组和U2组受体术后DGF发生率低于对照组，但3组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。

乌司他丁预处理可控型DCD，可促进肾移植受体术后尿量早期恢复，对肾功能有一定的保护作用。

评价和比较中国患者在接受冠状动脉搭桥术（CABG）后应用中等剂量瑞舒伐他汀和辛伐他汀的有效性和安全性，以提供合理的CABG术后二级预防策略。

纳入本院符合研究标准的行CABG的患者。根据术后应用他汀类药物的种类分为瑞舒伐他汀组和辛伐他汀组，各150例。收集患者基线资料。记录2组患者入院时和术后1年时血脂状况。收集术后心血管死亡、再发心绞痛等主要不良心血管事件（MACE）和肝功能异常、肌病等安全性相关不良事件的发生情况，以及术后1年时复查冠状动脉CT血管造影（CTA）结果，并计算狭窄指数。

共完成随访286例，随访率95.3%，其中瑞舒伐他汀组完成随访140例，辛伐他汀组完成随访146例。血脂方面，与术前比较，瑞舒伐他汀组和辛伐他汀组患者术后1年时总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平均明显降低（P<0.05），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显升高（P<0.05）。MACE和安全性方面，2组组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。桥血管狭窄情况，瑞舒伐他汀组和辛伐他汀组患者狭窄指数分别为4.55（0~11.86）和 5.78（0~13.00），差异无统计学意义（P>0.05）。

中等剂量瑞舒伐他汀和辛伐他汀均能使血清LDL-C水平达到降脂标准；2种药物的有效性和安全性无差异，均可用于中国冠心病患者CABG术后的二级预防策略。

观察甘氨酸喷砂对种植体周围炎的作用，探讨金银花连翘提取液用于甘氨酸龈下喷砂治疗种植体周围炎的辅助作用，分析复合中药治疗种植体周围炎的可行性。

将56例种植体周围炎患者按照自愿原则分为对照组（n=30）和中药组（n=26），2组患者年龄、性别以及治疗前受试种植牙位探诊深度（PD）、改良菌斑指数（mPLI）、改良龈沟出血指数（mSBI）和种植牙周袋龈沟液（PISF）中白细胞介素6（IL-6）水平比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。2组患牙均进行牙周基础治疗后，中药组将EMS喷砂机中的蒸馏水替换为金银花连翘提取液进行甘氨酸龈下喷砂；对照组进行甘氨酸颗粒和蒸馏水龈下喷砂。治疗后第1、2和4周记录2组患者种植牙位PD、mPLI和mSBI。酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测2组患者PISF中IL-6水平。

治疗后，中药组和对照组患者PD、PISF中IL-6水平、mPLI和mSBI评分均较治疗前降低，且中药组较对照组降低更明显（P<0.05）。

在牙周基础治疗上进行甘氨酸喷砂对种植体周围炎有良好的治疗效果，金银花连翘提取液对该治疗效果有较好的促进作用。

探讨后路360°病灶清除联合双钛笼植骨融合治疗伴侧方移位的胸腰段结核的可行性。

收集1例伴有侧方移位的胸腰段结核患者的临床资料，分析患者手术治疗方法和临床疗效，并进行相关文献复习。

患者，女性，41岁，因腰背部疼痛半年、加重伴双下肢麻木无力半个月入院。查体见腰背部隆起，叩痛明显，双侧腹股沟水平下浅感觉减退。双下肢各肌群肌力Ⅱ级，双下肢肌张力正常。生理反射及病理反射均未引出。实验室检查，结核感染T细胞检测 （T-SPOT）阳性；红细胞沉降率（ESR）76 mmHg；C反应蛋白（CRP）55.19 mg·L^－1。影像学检查，L1椎体病理性骨折，T12/L1椎体及椎间隙破坏，胸腰段后凸畸形伴侧方移位，双侧腰大肌、椎管及椎旁脓肿。诊断为胸腰段脊柱结核（T12、L1）、胸腰段侧后凸畸形、双下肢不全瘫、腰大肌及椎旁脓肿。术中充分清除椎间、椎旁病灶和重建脊柱的稳定性。患者手术顺利完成，症状明显缓解，胸腰段生理曲度恢复及植骨骨性融合良好。术后1年，Frankel分级由术前B级恢复至E级，视觉模拟疼痛评分（VAS）由术前7分降至1分，腰椎功能障碍指数（ODI）评分由术前78%降至术后16%，无复发，预后佳。

后路360°病灶清除联合双钛笼支撑合并结构植骨和颗粒植骨可为伴侧方移位的胸腰段结核提供良好的椎体间支撑及融合效果，同时也能充分地清除椎间及椎旁病灶，可作为治疗此类疾病的一种手术方式。

探讨直肠腔内三维超声（3D-ERUS）对中下段直肠癌术前有无淋巴结转移和N分期的诊断价值，并分析直肠癌病灶和肠周淋巴结的超声影像与临床病理特征和淋巴结转移的关联性。

选取94例术后病理均诊断为直肠癌的患者，术前均行3D-ERUS和盆腔核磁共振成像（MRI）检查。3D-ERUS和MRI诊断淋巴结转移的结果采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）评价，3D-ERUS和MRI诊断N分期的结果采用精确率、召回率和F1评分评价，二者对有无淋巴结转移和N分期的诊断结果与病理结果之间的一致性均采用Kappa系数评价。采用χ²检验比较超声影象与临床病理特征和淋巴结转移的差异，差异有统计学意义的因素作为自变量纳入多因素Logistic回归分析。

3D-ERUS诊断有无淋巴结转移的准确性为80.85%（Kappa=0.615，P<0.01），ROC曲线下面积（AUC）为0.831；MRI诊断有无淋巴结转移的准确性为70.21%（Kappa=0.415，P<0.01），AUC为0.728；二者AUC比较差异有统计学意义（Z=2.039，P=0.041），二者诊断准确性比较差异无统计学意义（χ²=2.33，P=0.126）。3D-ERUS对N分期的总体准确性为74.47%（Kappa=0.562，P<0.01），高于MRI（63.44%）（Kappa=0.394，P<0.01），二者准确性比较差异亦无统计学意义（χ²=2.17，P=0.141）。单因素分析，有4个因素有统计学意义，即病理T分期、癌胚抗 原（CEA）、分化程度和3D-ERUS术前T分期（uT-stage）；多因素回归分析，病理T分期是有无淋巴结转移的主要危险因素（P<0.01），与T_is-T₂期直肠癌比较，T₄期［比值比（OR）=12.000，95%可信区间（CI）：3.141~45.839］发生淋巴结转移的风险更高。

3D-ERUS在术前诊断中下段直肠癌的N分期中具有较高临床应用价值，病理T₄期的直肠癌发生肠周淋巴结转移的风险最高。

分析吉林省长春市大气污染物暴露对脑卒中入院风险的影响。

收集2018年10月1日—2019年10月30日在吉林大学第一医院入院的脑卒中病例和同期长春市大气污染物监测数据。采用病例交叉研究进行单污染物和多污染物模型条件Logistic回归分析。通过单污染模型分析各大气污染物对脑卒中入院风险的滞后效应，根据最大比值比（OR）确定各大气污染物最佳滞后期，通过多污染物模型分析大气污染物对脑卒中入院风险的影响。

共纳入病例3 633例。单污染物模型确定的大气污染物对脑卒中入院的最佳滞后期为发病前4 d。多污染物模型分析，发病前4 d的大气细颗粒物（PM_2.5）、二氧化硫（SO₂）、一氧化碳（CO）和臭氧（O₃）浓度可影响脑卒中入院风险。PM_2.5浓度每升高10 μg?m^－3，脑卒中入院风险增加3.0%［95%可信区间（CI）（1.007，1.054）］；SO₂浓度每升高10 μg?m^－3，脑卒中入院风险增加22.6%［95%CI（1.165，1.291）］；CO浓度每升高10 mg?m^－3，脑卒中入院风险增加14%［95%CI（1.101，1.180）］；O₃浓度每升高10 μg?m^—3，脑卒中入院风险增加3.7%［95%CI（1.029，1.046）］。

大气污染物对脑卒中入院的影响有滞后效应。长春市大气中PM_2.5、SO₂、CO和O₃浓度升高可增加当地脑卒中入院风险。

采用高通量筛选方法筛选出抑制视神经脊髓炎（NMO）-IgG与水通道蛋白4（AQP4）结合的小分子。

将FRT-AQP4细胞分为阴性对照组（不加小分子化合物）和筛选组，采用化学发光法检测辣根过氧化物酶（HRP）活性。将V79-AQP4细胞分为抑制剂组（neosutchuenenine）和二甲基亚砜（DMSO）组，采用免疫荧光法检测各组细胞荧光强度，荧光猝灭法检测各组细胞的水通透性，CellTiter-Glo^? 发光法检测补体依赖的细胞毒性，水溶性四氮唑1（WST-1）法检测细胞活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞凋亡情况。

与阴性对照组比较，筛选组HRP活性明显升高（P<0.01）。与DMSO组比较，抑制剂组红色荧光强度明显降低，而绿色荧光无明显变化；与DMSO组比较，抑制剂组水通透性无明显变化（P>0.05），补体依赖的细胞毒性明显降低（P<0.01），细胞活性和细胞凋亡无明显变化（P>0.05）。

成功建立高通量筛选AQP4小分子抑制剂的方法，并筛选出具有阻断作用的小分子抑制剂neosutchuenenine。