小鼠内皮抑素基因克隆、测序及pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒的构建

doi:国家自然科学基金资助课题

小鼠内皮抑素基因克隆、测序及pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒的构建

杨巍¹，刘林林¹，孙婷²，李秀娟³，田梅¹，朴春姬¹，潘艳¹，李修义^1*

1.吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室，吉林长春130021；2.吉林大学基础医学院病原生物学教研室，吉林长春130021；3.河南大学医学院细胞与分子免疫学实验室，河南开封475001

收稿日期:2003-08-26 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-01-28 发布日期:2004-01-28
通讯作者: 李修义

Cloning and sequencing of mouse endostatin and constructionof recombinant plasmid pEgr-IFNγ-mEndostatin

YANG Wei¹, LIU Lin-lin¹, SUN Ting², LI Xiu-juan³,TIAN Mei¹, PIAO Chun-Ji¹, PAN Yan¹, LI Xiu-yi^1*

1. MH Radiobiology Research Unit, School of Public Health, Jilin University, Changchun 130021, China;2. Department of Pathogenobiology, School of Basic Medical Sciences, Jilin University,Changchun 130021,China;3. Laboratory of Cellular and Molecular Immunology, College of Medical Sciences, Henan University,Kaifeng 475001,China

Received:2003-08-26 Revised:1900-01-01 Online:2004-01-28 Published:2004-01-28
Contact: LI Xiu-yi

摘要/Abstract

摘要： 目的：克隆小鼠内皮抑素（mEndostatin）编码区cDNA序列并构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达载体。方法：利用逆转录多聚酶链反应法（RT-PCR），以小鼠肝细胞mRNA为模板，扩增获得全长mEndostatin，与pMD18T载体连接作全自动测序，并利用基因重组技术构建含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒。结果：经测序证实获得的mEndostatin序列与文献报道完全一致，并构建了含Egr-1启动子的IFNγ和mEndostatin双基因表达质粒pEgr-IFNγ-mEndostatin。结论：利用RT-PCR法成功克隆了mEndostatin的cDNA序列，构建了pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒。

关键词: 质粒, 遗传学, 干扰素Ⅱ型, Egr-1, pEgr-IFNγ-mEndostatin

Abstract: Objective To clone the sequence of the cDNA of mouse endostatin (mEndostatin) coding area and construct an expression vector containing Egr-1 promoter, IFNγ and endostatin genes. Methods Full length mEndostatin was obtained with the technique of RT-PCR and using mouse hepatocyte mRNA as template, pMD18T- mEndostatin was sequenced automatically and an expression vector containing Egr-1 promoter, IFNγ, and endostatin genes was constructed with gene recombinant technique. Results It was proved that the cloned mEndostatin cDNA to be completely identical with that reported in the literature and the recombinant plasmid containing Egr-1 promoter, IFNγ, and endostatin genes was constructed successfully. Conclusion mEndostatin cDNA was cloned and the expression vector pEgr-IFNγ-mEndostatin was constructed successfully.

Key words: plasmids, genetics, interferon type Ⅱ, Egr-1, recombinant plasmid pEgr-IFNγ-mEndostatin

中图分类号:

Q782

杨巍，刘林林，孙婷，李秀娟，田梅，朴春姬，潘艳，李修义. 小鼠内皮抑素基因克隆、测序及pEgr-IFNγ-mEndostatin重组双基因表达质粒的构建[J]. J4, 2004, 30(1): 17-19.

YANG Wei, LIU Lin-lin, SUN Ting, LI Xiu-juan,TIAN Mei, PIAO Chun-Ji, PAN Yan, LI Xiu-yi. Cloning and sequencing of mouse endostatin and constructionof recombinant plasmid pEgr-IFNγ-mEndostatin[J]. J4, 2004, 30(1): 17-19.

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