吉林大学学报(医学版) ›› 2022, Vol. 48 ›› Issue (3): 702-710.doi: 10.13481/j.1671-587X.20220319
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Cuilan LIU,Fengai HU,Jing LIU,Dan WANG,Changyun QIU,Dunjiang LIU,Di ZHAO()
摘要: 探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制。 取对数生长期的神经胶质瘤U251和U87 MG细胞分为对照组(0 μmol·L-1 AdipoRon)和20、40、60、80及100 μmol·L-1 AdipoRon组,CCK-8法检测24、48和72 h时各组细胞增殖率。U251和U87 MG细胞分为对照组(0 μmol·L-1 )和40、60及80 μmol·L-1 AdipoRon组,细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,划痕愈合实验检测各组细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率及不同细胞周期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中AMP依赖蛋白激酶(AMPK)和磷酸化AMPK(p-AMPK)蛋白表达水平。将U251细胞分为shNC对照组(未处理)、shNC组(经40 μmol·L-1 AdipoRon处理,未敲低)、AdipoR1敲低组(经40 μmol·L-1 AdipoRon处理,敲低AdipoR1)、AdipoR2敲低组(经40 μmol·L-1 AdipoRon处理,敲低AdipoR2)和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组(经40 μmol·L-1 AdipoRon处理,敲低AdipoR1和AdipoR2)。CCK-8法检测各组U251细胞增殖率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组U251细胞中AdiopR1和 AdiopR2 mRNA表达水平。 与对照组比较,24、48和72 h时,不同浓度AdipoRon组U251和U87 MG细胞增殖率明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,40、60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞克隆形成率明显降低(P<0.01);与对照组比较,作用48 h时,40、60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞划痕愈合率降低(P<0.01);与对照组比较,60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U251细胞及80 μmol·L-1 AdipoRon组U87 MG细胞凋亡率升高(P<0.01),40、60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞中G0/G1期细胞百分率升高(P<0.01);与对照组比较,60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U251细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.01),40、60和80 μmol·L-1 AdipoRon组U87 MG细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01)。与shNC对照组比较,AdipoR1敲低组细胞中AdipoR1 mRNA表达水平降低(P<0.01),AdipoR2敲低组细胞中AdipoR2 mRNA表达水平降低(P<0.01)。与shNC对照组比较,经40 μmol·L-1 AdipoRon作用后,敲低AdipoR1组、敲低AdipoR2组和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组U251细胞增殖率均升高(P<0.05或P<0.01)。 AdipoRon可抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡,并将细胞周期阻滞在G0/G1期,其作用机制可能是AdipoRon与脂联素受体AdipoR1和AdipoR2相互作用后促进AMPK磷酸化,从而影响胶质瘤细胞的生物学行为。
中图分类号: