研究妊娠对雌性大鼠冷防御反应的影响，并探讨其作用机制。

42只成年雌性大鼠随机分为非妊娠期组（n=14）、妊娠中期组（n=14）和妊娠晚期组（n=14）。非妊娠期组雌性大鼠不与雄性大鼠合笼，妊娠中期和妊娠晚期组雌性大鼠与雄性大鼠合笼交配，采用氨基甲酸乙酯和α-氯醛糖混合液麻醉各组大鼠。采用冰水降低各组大鼠腹部皮肤温度，给予皮肤冷刺激建立冷防御反应模型。采用多通道温度信号测量系统同步监测各组大鼠皮肤冷刺激前后腹部皮肤、直肠和肩胛间区棕色脂肪组织（iBAT）温度，采用多通道温度信号测量系统和生物信号采集系统同步监测各组大鼠皮肤冷刺激前后腹部皮肤和直肠温度及支配iBAT的交感神经放电活动（SNA）情况。

与冷刺激前比较，接受冷刺激后各组大鼠皮肤温度均明显降低（P<0.05），各组大鼠直肠温度差异无统计学意义（P>0.05）。接受冷刺激后，各组大鼠皮肤温度下降幅度比较差异无统计学意义（P>0.05）；各组大鼠直肠温度变化幅度比较差异无统计学意义（P>0.05）。与冷刺激前比较，接受冷刺激后，非妊娠期和妊娠中期组雌性大鼠iBAT温度均明显升高（P<0.05），妊娠晚期组大鼠iBAT温度差异无统计学意义（P>0.05）。接受冷刺激后，与非妊娠期组比较，妊娠中期组大鼠iBAT温度上升幅度差异无统计学意义（P>0.05）。接受冷刺激后，与非妊娠期或妊娠中期组比较，妊娠晚期组大鼠iBAT温度上升幅度明显降低（P<0.05）。与冷刺激前比较，接受冷刺激后非妊娠期和妊娠中期组大鼠iBAT SNA均明显升高（P<0.05），妊娠晚期组大鼠iBAT SNA差异无统计学意义（P>0.05）。接受冷刺激后，与非妊娠期组比较，妊娠中期组大鼠iBAT SNA上升幅度差异无统计学意义（P>0.05）；与非妊娠期或妊娠中期组比较，妊娠晚期组大鼠iBAT SNA上升幅度明显降低（P<0.05）。

非妊娠期和妊娠中期大鼠具有正常的冷防御反应；妊娠晚期大鼠冷防御反应减弱。这种现象与非妊娠期和妊娠中期大鼠具有正常的冷防御性iBAT SNA、而妊娠晚期大鼠的冷防御性iBAT SNA受到抑制有关。

探讨丹酚酸B（Sal B）对小鼠动脉粥样硬化病变和氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导的小鼠巨噬细胞胞葬作用的影响，阐明Sal B抗动脉粥样硬化的作用机制。

将32只雄性低密度脂蛋白受体基因敲除（LDLR^－/－）小鼠随机分为对照组、模型组、Sal B组和阿托伐他汀组，每组8只。对照组小鼠给予普通饲料喂养，其他各组小鼠给予高脂饲料喂养12周。对照组和模型组小鼠每日给予生理盐水腹腔注射，Sal B组小鼠给予Sal B溶液腹腔注射，阿托伐他汀组小鼠给予阿托伐他汀溶液灌胃。检测各组小鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平，油红O染色法观察小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率。RAW264.7细胞分为对照组、ox-LDL组（采用40 mg·L^－1 ox-LDL诱导24 h），低、中和高剂量Sal B组（给予含1.25、2.50和5.00 mg·L^－1 Sal B的培养基）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测各组小鼠主动脉组织及RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3和乳脂球表皮生长因子8 （MFGE8） mRNA及蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组小鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高（P<0.05），小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率升高（P<0.05），小鼠主动脉组织中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）；与模型组比较，Sal B和阿托伐他汀组小鼠血清TC、TG和LDL-c水平降低（P<0.01），小鼠主动脉粥样硬化斑块面积百分率降低（P<0.01），小鼠主动脉组织中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较，ox-LDL诱导组RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3和MFGE8 mRNA及蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与ox-LDL诱导组比较，Sal B组RAW264.7细胞中AXL、MERTK、TYRO3、MFGE8 mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。

Sal B通过上调胞葬相关分子表达，促进LDLR^－/－小鼠及RAW264.7细胞的胞葬作用，从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

观察重组人生长激素对局灶性脑缺血再灌注小鼠运动功能的影响，探讨其可能的作用机制。

选取C57BL/6J小鼠24只，采用改良Zea-Longa线栓法建立脑缺血再灌注损伤模型，随机分为生长激素治疗组（脑缺血再灌注+生长激素，SG组）和对照组（脑缺血再灌注+生理盐水，SS组），每组12只。SG组小鼠于造模后48 h开始颈部皮下注射重组人生长激素，剂量为1.4 mg·kg^－1·d^－1，持续14 d；SS组小鼠注射生理盐水，注射时间、剂量、部位及次数与SG组小鼠一致。分别于损伤前、损伤后1 d和损伤后16 d，采用平衡木实验评价小鼠运动协调能力，网屏实验评价小鼠肢体肌力，圆筒实验评价小鼠患肢使用率；损伤后16 d，采用免疫印迹法检测2组小鼠梗死灶周围区域中突触蛋白1（SYN1）表达水平。

平衡木实验，损伤后1 d，2组小鼠运动协调能力评分均明显低于损伤前（P<0.01）；损伤后16 d，2组小鼠运动协调能力评分均高于损伤后1 d（P<0.01），SG组小鼠运动协调能力评分较SS组升高（P<0.05）。网屏实验，损伤后1 d，2组小鼠倒置抓握网屏时的停留时间明显短于损伤前（P<0.01）；损伤后16 d，2组小鼠停留时间均优于损伤后1 d（P<0.01）；与SS组比较，SG组小鼠倒置抓握网屏时的停留时间明显延长（P<0.05）。圆筒实验，损伤后1 d，2组小鼠患侧肢体使用率明显低于损伤前（P<0.01）；损伤后16 d，2组小鼠患侧肢体使用率均高于损伤后1 d（P<0.01），其中SG组小鼠较SS组患侧肢体使用率更高（P<0.05）。免疫印迹法检测，与SS组比较，SG组小鼠梗死灶周围区域中SYN1表达水平明显升高（P<0.05）。

重组人生长激素能够改善局灶性脑缺血再灌注小鼠的运动功能，其机制可能与促进梗死灶周围区域中SYN1的表达有关。

探讨人参糖蛋白（PGG）对少弱精症小鼠生精障碍的改善作用，并初步阐明其作用机制。

选取健康雄性小鼠60只，随机分成正常组、模型组、阳性对照组（生精胶囊，700 mg·kg^－1）、低剂量PGG组（100 mg·kg^－1 PGG）、中剂量PGG组（200 mg·kg^－1 PGG）和高剂量PGG组（400 mg·kg^－1 PGG），每组10只。除正常组外，其余组小鼠腹腔注射30 mg·kg^－1环磷酰胺，制备少弱精症模型。取各组小鼠附睾采集精子，显微镜下观察精子总数、精子活率、精子畸形率和精子活力，观察各组小鼠精子形态，采集各组小鼠睾丸（双）、前列腺+贮精囊（双）、包皮腺（双）和提肛肌，称质量并计算脏器系数，苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠睾丸组织病理形态表现，ELISA法测定各组小鼠血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）和催乳素（PRL）水平。

与正常组比较，模型组小鼠精子总数降低（P<0.01）、精子活率降低（P<0.01）、精子畸形率升高（P<0.01）、精子活力降低（P<0.01），睾丸和前列腺+贮精囊脏器系数降低（P<0.05或P<0.01），包皮腺和提肛肌脏器系数差异无统计学意义（P>0.05），生精小管中生精细胞层厚度和生精细胞层横截面面积减小（P<0.01），血清T、FSH和PRL水平降低（P<0.05或P<0.01）。与模型组比较，中和高剂量PGG组小鼠精子总数升高（P<0.05）、精子活率升高（P<0.01）、精子畸形率降低（P<0.05或P<0.01）、精子活力升高（P<0.05或P<0.01），各脏器系数差异无统计学意义（P>0.05），生精小管中生精细胞层厚度和生精细胞层横截面面积增大（P<0.05或P<0.01），生精胶囊组、中和高剂量PGG组小鼠血清T水平升高（P<0.05或P<0.01）、生精胶囊组和各剂量PGG组小鼠血清FSH水平升高（P<0.05或P<0.01），各剂量PGG组小鼠血清PRL水平升高（P<0.01）。

PGG具有剂量依赖性，给药剂量增加药效增强，PGG能明显改善少弱精症小鼠生精障碍，其机制可能与PGG提高小鼠血清性激素水平有关。

观察溴区PHD结构域转录因子（BPTF）相关蛋白18（BAP18）在睾丸细胞中的表达及其在雄激素受体（AR）信号通路过程中发挥的作用，阐明BAP18调控AR信号通路的具体靶基因，探讨BAP18在睾丸细胞中发挥的生物学功能。

收集大鼠睾丸支持细胞R2C和TM3及睾丸间质细胞TM4和15P-1，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各细胞中BAP18和AR mRNA表达水平，Western blotting法检测细胞中BAP18和AR蛋白表达水平，蛋白免疫共沉淀实验（co-IP）检测在睾丸R2C细胞中BAP18与AR之间的相互作用关系。在R2C细胞中采用带有FLAG标签的BAP18过表达质粒使BAP18过表达（BAP18过表达组）。荧光素酶双基因报告实验检测R2C细胞中荧光素酶活性。对照组采用PcDNA3空载质粒转染R2C细胞，RT-qPCR法检测BAP18过表达前后睾酮（T）和双氢睾酮（DHT）作用后R2C细胞中BAP18、AR、STAR、HSD3B1、CYP17A1和DDX25 mRNA水平，Western blotting法检测BAP18过表达前后T和DHT作用后R2C细胞中CYP17A1蛋白表达水平。

在睾丸间质细胞和支持细胞中均有BAP18表达，但AR主要在睾丸间质细胞中表达；在睾丸R2C细胞中BAP18与AR存在相互作用，且上调AR介导的基因转录。与对照组比较，在T和DHT作用下BAP18过表达组R2C细胞中CYP17A1 mRNA和蛋白表达水平升高（P<0.01）。在R2C细胞中同时外源转染定量BAP18表达质粒后，在DHT的作用下细胞中荧光素酶活性升高近3倍，而在T的作用下，细胞中荧光素酶活性升高1.5倍。过表达BAP18后，BAP18过表达组R2C细胞中AR、STAR、HSD3B1和DDX25 mRNA表达水平与过表达前比较差异无统计学意义（P>0.05），而CYP17A1 mRNA表达水平高于过表达前（P<0.05）；T和DHT作用后，R2C细胞中CYP17A1 mRNA表达水平均高于T和DHT作用前（P<0.05）。在细胞中过表达BAP18后，T和DHT作用后细胞中CYP17A1蛋白表达水平明显高于T和DHT作用前（P<0.05），但T和DHT刺激前后细胞中DDX25蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。

BAP18可以在睾丸间质细胞中与AR相互作用并调控AR信号通路重要靶基因CYP17A1，可能参与睾丸间质细胞的生理过程。

探讨微小RNA-152（miR-152）在子宫内膜癌（EC）组织中的表达和作用，为研究EC的发病机制和靶向治疗方案提供依据。

选取21例EC患者癌组织（肿瘤组）和39例非EC患者内膜组织（对照组）及人EC RL95-2细胞和293T细胞为研究对象。收集肿瘤组和对照组患者的年龄、身高、体质量（BM）、体质量指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、腰围（WC）和腹围（AC）等临床资料，检测2组患者甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、Ki-67和低密度脂蛋白受体（LDLR）水平，生物信息学方法预测miR-152下游与增殖和侵袭相关的靶基因LDLR表达，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平，Western blotting法和免疫组织化学检测法检测肿瘤组和对照组患者子宫内膜组织中LDLR 蛋白表达水平，Person相关分析法分析LDLR mRNA表达与患者一般资料、生化指标及miR-152表达的相关性。将RL95-2细胞分为空质粒组（转染miR-NC 空质粒）、miR-152组（转染miR-152-mimics）、miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组（同时转染miR-152-mimics和pcDNA3.1-vector） 和miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR 组（同时转染miR-152-mimics和 pcDNA3.1-LDLR）。CCK-8法检测各组细胞增殖率，Transwell法检测各组细胞的侵袭细胞数，双荧光素酶报告基因实验检测各组293T细胞中荧光素酶活性。

肿瘤组患者子宫内膜组织中miR-152表达水平明显低于对照组（P<0.05），LDLR mRNA和蛋白表达水平均高于对照组（P<0.05 或P<0.01）。双荧光素酶报告基因检测，LDLR为 miR-152的靶基因。Person相关分析，肿瘤组患者子宫内膜组织中LDLR mRNA表达与Ki-67、BMI、TC、TG、BM和WC呈正相关关系（r=0.4490， r=0.4377， r=0.4472， r=0.4706， r=0.5882， r=0.5130， P<0.05），与miR-152的表达呈负相关关系（r=－0.4378，P<0.05）。与空质粒组比较，miR-152组RL95-2细胞增殖率降低（P<0.05），侵袭细胞数减少（P<0.05）；与miR-NC组比较，miR-152组RL95-2细胞增殖率降低（P<0.05），侵袭细胞数减少（P<0.05）；与miR-152-mimics+pcDNA3.1-vector组比较，miR-152-mimics+pcDNA3.1-LDLR组细胞增殖率升高（P<0.01），侵袭细胞数增多（P<0.01）。

miR-152通过降低LDLR的表达抑制EC细胞增殖和侵袭。

观察黄芩素对大鼠坐骨神经慢性压迫引起痛行为的抑制作用及初级感觉神经元中胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）表达的调控作用，阐明黄芩素对神经病理痛的镇痛机制。

48只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和黄芩素组，每组16只。各组大鼠麻醉后，假手术组大鼠仅暴露坐骨神经，模型组和黄芩素组大鼠行坐骨神经慢性缩窄手术建立大鼠慢性缩窄性神经损伤（CCI）模型。造模成功后黄芩素组大鼠腹腔连续注射黄芩素7 d。手术前后不同时间点分别检测各组大鼠患侧机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）以评价神经损伤引起的痛行为。第11天，每组选取6只大鼠，免疫荧光染色检测各组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数；第28天检测各组其余大鼠背根神经节（DRG）中GDNF荧光强度。

手术前各组大鼠MWT和TWL比较差异无统计学意义（P>0.05）；与假手术组比较，术后1 d模型组和黄芩素组大鼠MWT 和TWL 明显降低（P<0.05），给药后3 d黄芩素组大鼠MWT和TWL升高（P>0.05）；与假手术组比较，模型组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数升高（P<0.05）；与模型组比较，黄芩素组大鼠脊髓背角组织中c-Fos阳性细胞数降低（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠DRG中GDNF荧光强度降低（P<0.05）；与模型组比较，黄芩素组大鼠DRG中GDNF荧光强度升高（P<0.05）。

黄芩素对大鼠神经病理痛具有镇痛作用。初级感觉神经元中GDNF参与坐骨神经损伤引起的神经病理痛，黄芩素对神经病理痛的镇痛作用可能与其调控GDNF的表达有关。

探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）来源外泌体（Exo）诱导自噬对１-甲基-４-苯基吡啶离子（MPP⁺）抑制人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞存活的影响，阐明其作用机制。

将人神经细胞肿瘤SH-SY5Y细胞分别给予不同浓度（0、0.25、0.50、1.00和2.00 mmol·L^－1）MMP⁺作用24和48 h后检测各组细胞存活率。实验分为对照组［给予磷酸盐缓冲液（PBS）］、MPP⁺组（给予0.50 mmol·L^－1 MPP⁺）、MPP⁺+BMSCs的上清液（BMSCs-Sup）组（给予0.50 mmol·L^－1 MPP⁺和BMSCs Sup）、MPP⁺+BMSCs-Exo组（给予0.50 mmol·L^－1 MPP⁺和100 mg·L^－1 BMSCs Exo）、MPP⁺+雷帕霉素（Rap）组（给予0.50 mmol·L^－1 MPP⁺和2 mmol·L^－1 Rap）和MPP⁺+BMSCs-Exo+3-甲基腺嘌呤（3-MA）组（给予0.50 mmol·L^－1 MPP⁺、100 mg·L^－1 BMSCs-Exo和1 mmol·L^－1 3-MA）。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率，共聚焦显微镜下观察吖啶橙染色后各组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度，Western blotting法检测各组细胞中CD63、TGS101和Calnexin蛋白表达情况。

MTT检测，SH-SY5Y细胞存活率随着MPP⁺浓度的升高或处理时间的延长逐渐降低（P<0.05），且呈浓度和时间依赖性。与MPP⁺组比较，MPP⁺+BMSCs-Sup组、MPP⁺+BMSCs-Exo组和MPP⁺+Rap组SH-SY5Y细胞存活率升高（P<0.05）；与MPP⁺+BMSCs-Exo组比较，MPP⁺+BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞存活率降低（P<0.05）。细胞吖啶橙染色，与MPP⁺组比较，MPP⁺+BMSCs-Sup组、MPP⁺+BMSCs-Exo组和MPP⁺+Rap组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度增加（P<0.05）；与MPP⁺+BMSCs-Exo组比较，MPP⁺+BMSCs-Exo+3-MA组SH-SY5Y细胞中自噬酸性囊泡荧光强度降低（P<0.05）。Western blotting法检测，各组细胞中外泌体标志蛋白CD63和TGS101蛋白高表达，内质网标志蛋白Calnexin低表达。

BMSCs-Exo通过激活细胞自噬抵抗MPP⁺诱导的SH-SY5Y细胞存活率下降。

探讨新型纳米羟基磷灰石（nHA）/聚丙交酯-乙交酯（PLGA）纳米复合微球对大鼠颅骨缺损的修复作用，为该材料的临床应用提供依据。

采用口腔低速手机于9只SD大鼠的颅骨制备2个对称的5 mm直径临界骨缺损模型，并随机分为实验组（植入nHA/PLGA纳米复合微球）、对照组（植入Bio-oss颗粒）和空白组（仅制备缺损而未填充材料），每组6个颅骨缺损模型。于术后当天、术后4周和术后8周进行颅骨CT三维重建，检查颅骨缺损修复效果；于第8周处死大鼠，采用微计算机断层扫描技术（micro-CT）扫描三维重建，观察各组大鼠颅骨缺损区域骨小梁数量（Tb.N）、缺损区域骨小梁间距（Tb.Sp）、缺损区域骨小梁厚度（Tb.Th）和缺损区域新生骨量与缺损总体积的比值（BV/TV）。

肉眼观察，实验组大鼠颅骨缺损区域边界清晰，颗粒间隙内可见新生骨质；对照组大鼠颅骨缺损区域见颗粒状骨粉堆积，无明显吸收；空白组大鼠颅骨缺损中心区域有明显凹陷，无明显骨沉积。CT三维重建检查，在第8周，与空白组比较，实验组大鼠有明显的的新骨形成；与对照组比较，实验组大鼠均出现明显的新骨沉积。micro-CT检查，在第8周，与对照组比较，实验组大鼠颅骨缺损区Tb.N、Tb.Sp和Tb.Th差异无明显统计学意义（P>0.05），BV/TV降低（P<0.05）；与空白组比较，实验组和对照组大鼠颅骨缺损区Tb.Sp、Tb.Th和BV/TV比较差异均有统计学意义（P<0.05）。

nHA/PLGA纳米复合微球对骨缺损具有良好的修复效果。

观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi） 丙戊酸（VPA）单独或联合X射线照射对人三阴性乳腺癌（TNBC）MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用，并分析联合照射对MDA-MB-231细胞凋亡和自噬的影响。

将处于对数生长期的MDA-MB-231细胞分为对照组、不同浓度（2.5、5.0、10.0、20.0和40.0 mmol·L^－1）VPA组、4 Gy X射线照射组和不同浓度（2.5、5.0、10.0、20.0和40.0 mmol·L^－1）VPA联合4 Gy X射线照射组。于作用24、48和72 h后，采用CCK-8法检测各组MDA-MB-231细胞增殖率。MDA-MB-231细胞分为对照组、4 Gy X射线照射组、5 mmol·L^－1 VPA组、5 mmol·L^－1 VPA 联合4 Gy X射线照射组。于作用24和48 h后，流式细胞术检测各组MDA-MB-231细胞凋亡率和自噬率。

与对照组比较，VPA组和VPA联合4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞增殖率均明显降低（P<0.01），且呈浓度和时间依赖性；与4 Gy X射线照射组比较，VPA联合4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞增殖率均明显降低（P<0.01）。作用24 h后，2.5 mmol·L^－1 VPA 联合 4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞增殖率低于2.5 mmol·L^－1 VPA组（P<0.05）；作用72 h后，2.5 和10.0 mmol·L^－1 VPA 联合 4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞增殖率低于2.5 和10.0 mmol·L^－1VPA组（P<0.05）。5.0 mmol·L^－1VPA单独或联合4 Gy X射线作用MDA-MB-231细胞24和48 h后，与对照组比较，4 Gy X射线照射组、5.0 mmol·L^－1VPA组和5.0 mmol·L^－1VPA联合4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞凋亡率和自噬率均明显升高（P<0.05或P<0.01）。与4 Gy X射线照射组比较，5.0 mmol·L^－1VPA联合4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞凋亡率和自噬率均明显升高（P<0.01）。作用48 h后，与5.0 mmol·L^－1VPA组比较，5.0 mmol·L^－1 VPA联合4 Gy X射线照射组MDA-MB-231细胞自噬率升高（P<0.05）。

VPA对MDA-MB-231细胞具有增殖抑制作用，并呈现浓度和时间依赖性，且VPA和X射线的联合抑制效果更优，其机制可能是二者联合引起细胞凋亡和自噬增加。

检测幽门螺杆菌（Hp）对3种常见抗生素的耐药率，探讨其相关耐药基因突变形式，为阐明其耐药分子机制提供依据。

选择35例确诊为慢性胃炎或消化性溃疡患者的胃黏膜标本，分离培养鉴定Hp。采用琼脂稀释法检测Hp对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的最小抑菌浓度（MIC），根据药敏试验结果分为敏感组和耐药组。通过PCR扩增克拉霉素耐药基因23S rRNA、甲硝唑耐药基因rdxA和左氧氟沙星耐药基因gyrA，PCR纯化产物测序后分析核苷酸和氨基酸突变位点。

Hp菌株培养3~5 d后，平板上可见光滑、半透明和针尖样小菌落。35株Hp均对甲硝唑和左氧氟沙星耐药，克拉霉素耐药率为80%（28/35）。与敏感菌株比较，克拉霉素耐药菌株均发生基因突变，23S rRNA基因最常见的突变位点为A2143G，其次为突变位点A2223G和A2142G+A2164G；甲硝唑耐药菌株rdxA基因主要发生错义突变，其次为移码突变和无义突变；左氧氟沙星耐药菌株gyrA基因主要发生N87K突变，其次为D91N突变、N87I、D91G及N87K+D143E突变，17.1%的耐药菌株未发生任何位点突变。

Hp菌株对克拉霉素、甲硝唑和左氧氟沙星的耐药率较高，相关耐药基因突变是导致抗生素耐药的主要原因，筛选这些突变可能有助于防止抗生素耐药性及选择合适的抗菌药物根除Hp。

探讨利多卡因在1-甲基-4苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病（PD）模型PC12细胞的保护作用，并阐明其可能的分子机制。

CCK-8法确定不同浓度（0.2、0.4、0.8、1.6和3.2 mmol·L^－1）MPTP的最佳作用浓度和作用时间，CCK-8法确定不同浓度（0.001、0.010、0.100、0.200、0.400、0.600、0.800和1.000 g·L^－1）利多卡因最佳作用浓度和作用时间，Western blotting法进一步确定利多卡因最佳作用浓度。将PC12细胞分为对照组（不进行何处理）、MPTP组（给予0.8 mmol·L^－1 MPTP作用24 h）、MPTP+利多卡因组（给予0.8 mmol·L^－1 MPTP作用24 h后再给予0.6 g·L^－1 利多卡因作用6 h）、MPTP+利多卡因+DKK1组（给予0.8 mmol·L^－1 MPTP作用24 h后再给予0.6 g·L^－1利多卡因和100 μg·L^－1 DKK1作用6 h）和MPTP+DKK1组（给予0.8 mmol·L^－1 MPTP作用24 h后再给予100 μg·L^－1 DKK1作用6 h）。流式细胞术检测各组PC12细胞中活性氧（ROS）水平，ELISA法检测各组PC12细胞上清中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中Wnt配体蛋白1（Wnt1）、β连环蛋白（β-catenin）和糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β） mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中Wnt1、β-catenin、GSK-3β、磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）蛋白表达水平。

与对照组比较，MPTP组PC12细胞中ROS、IL-1β、IL-6和TNF-α水平及GSK-3β mRNA表达水平以及GSK-3β、p-GSK-3β和caspase 3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05），而Wnt1、β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与MPTP组比较，MPTP+ 利多卡因组PC12细胞中ROS、IL-1β、IL-6和TNF-α水平及GSK-3β mRNA表达水平以及GSK-3β、p-GSK-3β和caspase 3蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），而Wnt1、β-catenin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

利多卡因可显著降低PC12细胞中ROS的生成及抑制促炎性细胞因子的释放，同时还可显著下调凋亡蛋白caspase 3的表达，从而发挥对MPTP诱导的PD模型PC12细胞的保护作用，其作用机制可能与Wnt/β-catenin信号通路有关。

探讨脂肪间充质干细胞（ADMSCs）的生物学特性，阐明ADMSCs对卵巢早衰（POF）模型大鼠的治疗作用及其机制。

分离培养SD大鼠的ADMSCs，光学显微镜观察细胞形态表现，成骨和成脂细胞诱导试剂诱导ADMSCs成骨及成脂分化，流式细胞术检测ADMSCs表面抗原标记物CD44、CD90和CD45的表达。CCK-8法检测ADMSCs的生长状态并绘制生长曲线。通过腹腔注射顺铂建立大鼠POF模型。30只SD大鼠分为正常对照组（10只）和造模组（20只），造模组大鼠再随机分为模型组和ADMSCs治疗组，每组10只。ADMSCs治疗组大鼠每3 d经尾静脉注射异体ADMSCs；正常对照组和模型组大鼠每3 d经尾静脉注射生理盐水。记录各组大鼠体质量，ELISA法检测各组大鼠血清雌二醇（E₂）、卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）水平，HE染色观察各组大鼠卵巢组织病理形态表现。

ADMSCs为贴壁生长细胞，生长旺盛，可向成骨和成脂分化，ADMSCs高表达CD44和CD90，表达率分别为75.85%及59.71%；低表达CD45，表达率为39.12%。与正常对照组比较，造模组大鼠体质量明显降低（P<0.05），血清E₂水平明显降低（P<0.05），FSH和LH水平明显升高（P<0.05），缺乏各级卵泡，闭锁卵泡数目增多。与模型组比较，ADMSCs治疗组大鼠血清E₂水平升高（P<0.05），FSH和LH水平降低（P<0.05），各级卵泡数目增多，闭锁卵泡数目减少。

ADMSCs能够在体外生长繁殖，并具有较强生长增殖能力和多向分化能力；ADMSCs能够改善POF模型大鼠血清E₂水平及卵巢功能，对POF模型大鼠具有一定的治疗作用。

探讨沉默结直肠癌（CRC）细胞中布卢姆综合征解旋酶（BLM）基因表达对伊立替康（即CPT-11）化疗敏感性的影响，并阐明其相关作用机制。

体外培养HT-29、Lovo、HCT-116、RKO和DLD1细胞，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法筛选高表达BLM mRNA和蛋白的RKO和DLD1细胞。将携带shRNA的慢病毒载体感染细胞以沉默RKO与DLD1细胞中的BLM表达，CCK-8法检测感染后各组CRC细胞存活率和CPT-11半数抑制浓度（IC₅₀）值。将RKO或DLD1细胞分为LV-shNC组（感染LV-shNC的细胞）、CPT-11+LV-shNC组（CPT-11处理感染LV-shNC的细胞）和CPT-11+LV-shBLM组（CPT-11处理感染LV-shBLM的细胞）。流式细胞术检测不同细胞周期各组CRC细胞百分率，Western blotting法检测各组CRC细胞中兔抗B细胞淋巴瘤/白血病2关联死亡启动子（Bad）、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）、周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）、周期蛋白依赖性激酶6（CDK6）和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A（p21）蛋白表达水平，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。构建异体移植瘤模型，检测各组小鼠肿瘤体积和肿瘤组织中BLM、K-i67及TUNEL的阳性表达率。

与HT-29、Lovo或HCT-116细胞比较，RKO和DLD1细胞中BLM mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.05）；与感染LV-shNC的RKO或DLD1细胞比较，感染LV-shBLM慢病毒后，RKO或DLD1细胞中BLM mRNA表达水平降低（P<0.05）。与LV-shNC组比较，CPT-11+LV-shNC组和CPT-11+LV-shBLM组细胞存活率和IC₅₀值降低（P<0.05）。与LV-shNC组比较，CPT-11+LV-shNC组和CPT-11+LV-shBLM组G₀/G₁期和S期细胞百分率及细胞凋亡率均升高（P<0.05），而G₂/M期细胞百分率降低（P<0.05），细胞中Cyclin D1，CDK4、CDK6和Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05），而p21、Bax、Bad和cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高（P<0.05）；与CPT-11+LV-shNC组比较，CPT-11+LV-shBLM组G₀/G₁期和S期细胞百分率及细胞凋亡率均升高（P<0.05），而G₂/M期细胞百分率降低（P<0.05），细胞中Cyclin D1、CDK4、CDK6和Bcl-2蛋白表达水平均明显降低（P<0.05），而p21、Bax、Bad和cleaved caspase-3蛋白表达水平均升高（P<0.05）。裸鼠移植瘤实验，与LV-shNC组比较，CPT-11+LV-shNC组和CPT-11+LV-shBLM组裸鼠肿瘤体积缩小（P<0.05），肿瘤组织中BLM及Ki-67的阳性表达率均降低（P<0.05），TUNEL阳性表达率升高（P<0.05）；与CPT-11+LV-shNC组比较，CPT-11+LV-shBLM组裸鼠肿瘤体积缩小（P<0.05），肿瘤组织中BLM和Ki-67的阳性表达率均降低（P<0.05），TUNEL阳性表达率明显升高（P<0.05）。

沉默CRC细胞中BLM表达可能通过抑制肿瘤细胞的周期进展，从而促进化疗药物CPT-11诱导的细胞凋亡，最终在体内外改善CRC细胞的化疗抵抗。

观察重楼皂苷Ⅶ（PP Ⅶ）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠急性肺损伤的保护作用，并探讨其可能作用机制。

将75只大鼠随机分成假手术组、模型组、地塞米松组（阳性对照，给予2 mg·kg^－1地塞米松）、低剂量PP Ⅶ组（给予50 mg·kg^－1 PP Ⅶ）和高剂量PP Ⅶ组（给予150 mg·kg^－1 PP Ⅶ），每组15只。除假手术组外，其他各组大鼠采用逆行胆胰管注射5%牛磺胆酸钠溶液法建立SAP大鼠模型，术后立即给予相应药物处理。检测各组大鼠动脉血氧合指数（OI）和肺组织湿/干质量（W/D）比值，ELISA法检测各组大鼠血清脂肪酶和淀粉酶水平及支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，HE染色观察各组大鼠胰腺组织和肺组织病理形态表现，Western blotting法检测各组大鼠肺组织中核因子-κB（NF-κB）信号通路相关蛋白表达水平。

与假手术组比较，模型组大鼠胰腺和肺组织损伤严重，动脉血OI值明显降低（P<0.01），肺组织W/D比值、血清脂肪酶和淀粉酶水平、BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及肺组织中核因子-κB抑制因子α（IκBα）和磷酸化NF-κB（p-NF-κB） p65 （Ser536）蛋白表达水平明显升高（P<0.01）；与模型组比较，地塞米松组和高剂量PP Ⅶ组大鼠胰腺组织和肺组织损伤程度得到明显改善，动脉血OI比值明显升高（P<0.01），肺组织W/D比值、血清脂肪酶和淀粉酶水平、BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平及肺组织中IκBα和p-NF-κB p65 （Ser536）蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。

PP Ⅶ可能通过抑制NF-κB信号通路对SAP大鼠急性肺损伤发挥保护作用。

探讨木犀草素调控活性氧（ROS）/硫氧还蛋白结合蛋白（TXNIP）/NOD样受体相关蛋白3（NLRP3）信号通路激活对小鼠急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的改善作用。

60只SD小鼠随机分为对照组、模型组、木犀草素（20 mg·kg^－1）组、邻苯三酚（PG）（75 mg·kg^－1）组和木犀草素（20 mg·kg^－1）+PG（75 mg·kg^－1）组，每组12只。除对照组外，其他组小鼠采用气管滴注脂多糖（LPS）溶液的方法建立ARDS模型，对照组小鼠气管滴注等量生理盐水。称量各组小鼠右肺湿质量和干质量，并计算湿质量/干质量（W/D）比值，检测各组小鼠动脉血氧分压（PaO₂），HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现，检测各组小鼠吸气阻力（Ri）、每分钟通气量（MV）和呼气峰流速（PEF），检测各组小鼠肺组织中ROS、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）水平及血清白细胞介素18（IL-18）、白细胞介素1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，Western blotting法检测各组小鼠肺组织中TXNIP、caspase-1、caspase-4和NLRP3蛋白表达水平。

与对照组比较，模型组小鼠肺泡壁变厚，肺泡塌陷变形，肺间质水肿伴有大量炎性细胞浸润，肺组织有严重病理损伤，W/D比值，Ri，血清IL-18、IL-1β及TNF-α水平，肺组织中ROS水平及TXNIP、caspase-1、caspase-4和NLRP3蛋白表达水平升高（P<0.05）；MV、PEF、PaO₂和肺组织中GSH-Px及CAT水平降低（P<0.05）。与模型组比较，木犀草素组小鼠肺组织病理损伤均有所改善，W/D比值，Ri，血清IL-18、IL-1β及TNF-α水平，肺组织中ROS水平和TXNIP、caspase-1、caspase-4及NLRP3蛋白表达水平均降低（P<0.05），MV、PEF和PaO₂及肺组织中GSH-Px和CAT水平均升高（P<0.05）；PG组小鼠肺组织病理损伤均加重，W/D比值，Ri，血清IL-18、IL-1β及TNF-α水平，肺组织中ROS水平及TXNIP、caspase-1、caspase-4和NLRP3蛋白表达水平均升高（P<0.05），MV、PEF和PaO₂及肺组织中GSH-Px和CAT水平均降低（P<0.05）。

木犀草素可通过抑制ROS/TXNIP/NLRP3信号通路激活，减轻肺部炎症与氧化应激，改善ARDS小鼠肺损伤，修复其肺功能。

探讨施万细胞样细胞（SCLCs）对大鼠背根神经节（DRG）细胞突起生长和神经生长因子（NGF）表达的影响，阐明SCLCs促进DRG细胞生长的作用及其机制。

分离培养脂肪源性干细胞（ADSCs），茜素红染色检测细胞中钙化结节从而观察其分化能力，将其诱导分化为SCLCs，免疫荧光法检测SCLCs 中S100蛋白的表达。分离培养DRG细胞，免疫组织化学染色检测DRG细胞中神经元核抗原（NeuN）蛋白的表达。建立SCLCs与DRG细胞共培养体系，将细胞分为单培养组和共培养组。HE染色观察2组DRG细胞的形态结构，计数2组DRG细胞数和DRG细胞突起数，免疫组织化学染色检测2组DRG细胞中NGF蛋白的表达，Western blotting法检测2组DRG细胞中NGF蛋白表达水平。

原代ADSCs培养7 d，倒置显微镜下可见数量较多、体积较大、呈长梭形的细胞类似旋涡状或铺路石样排列。茜素红染色，镜下可见钙化结节，即所培养细胞具有分化能力。免疫荧光染色，大多数细胞均呈S100染色阳性，即ADSCs可成功诱导分化为SCLCs。培养72 h后，DRG细胞突起细而长、呈花环样排列，7~8 d后，细胞数量进一步增加，胞体较大，呈圆形，突起细长，相互连接似栅栏样。免疫组织化学染色，几乎所有细胞核均被标记为棕褐色，呈NeuN染色阳性。与单培养组比较，共培养组DRG细胞数及细胞突起数均明显增加（P<0.05），共培养组DRG细胞中NGF蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。

共培养条件下SCLCs可增加DRG细胞数和细胞突起数，提高DRG细胞中NGF蛋白的表达，发挥促进DRG细胞生长的作用。

探讨香烟烟雾暴露对大鼠睾丸支持细胞的损伤作用，阐明微小RNA-138-5p （miR-138-5p）在此过程中发挥的保护作用。

200只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中及高剂量香烟暴露组（每天给予每只大鼠10、20和30支香烟），分别于2、4、6、8和12周麻醉处死动物，检测各组大鼠血浆中抑制素B水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组大鼠睾丸组织中miR-138-5p表达水平，免疫组织化学法检测各组大鼠睾丸支持细胞中波形蛋白表达水平。体外培养睾丸TM4细胞（对照组），将制备好的香烟烟雾提取物（CSE）原液稀释至5%和10%，并处理TM4细胞，作为5%CSE组和10%CSE组。采用MTT法检测各组细胞存活率和各组细胞中乳酸脱氢酶（LDH）活性，流式细胞术和TUNEL法检测各组细胞凋亡率。睾丸TM4细胞转染过表达miR-138-5p质粒后，分为对照组、5%CSE组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p组、10%CSE组、10%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组和10%CSE+Pri-miRNA-138-5p组，采用上述方法检测各组细胞生存率、细胞中LDH活性和细胞凋亡率。

与对照组比较，各剂量香烟暴露组大鼠血浆中抑制素B水平降低；与对照组比较，第8周高剂量香烟暴露组和第12周各剂量香烟暴露组大鼠血浆中抑制素B水平降低（P<0.05）。光镜下观察，对照组大鼠睾丸细胞胞质出现阳性黄染，香烟暴露组大鼠睾丸TM4细胞中睾丸组织波形蛋白表达水平逐渐降低；与对照组比较，不同时间高剂量香烟暴露组大鼠睾丸TM4细胞中睾丸波形蛋白表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较，第8周时中和高剂量香烟暴露组及12周时各剂量香烟暴露组大鼠睾丸组织中miR-138-5p表达水平均降低（P<0.05）。与对照组比较，5% CSE组和10% CSE组睾丸TM4细胞存活率明显降低（P<0.01）。与对照组比较，5%CSE组和10%CSE组大鼠睾丸TM4细胞中LDH活性降低（P<0.05或P<0.01）。过表达miR-138-5p后，与对照组比较，5%CSE组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组、5%CSE+Pri-miRNA-138-5p组、10%CSE组、10%CSE+Pri-miRNA-138-5p Ctrl组和10%CSE+Pri-miRNA-138-5p组大鼠睾丸TM4细胞增殖率降低（P<0.05或P<0.01）；与5%CSE组比较，5%CSE+Pri-miRNA-138-5p组大鼠睾丸TM4细胞增殖率升高（P<0.05或P<0.01），细胞凋亡率降低（P<0.05或P<0.01）；与10%CSE CSE组比较，10%CSE+Pri-miRNA-138-5p组大鼠睾丸TM4细胞增殖率升高（P<0.05或P<0.01），细胞凋亡率降低（P<0.05）。

长期大量香烟烟雾暴露可引起睾丸支持细胞不可逆性损伤，miR-138-5p在其中发挥了重要的保护作用。

探讨脂联素受体激动剂AdipoRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响，阐明其可能的作用机制。

取对数生长期的神经胶质瘤U251和U87 MG细胞分为对照组（0 μmol·L^－1 AdipoRon^{）和20、40、60、80及100 μmol·L－1 AdipoRon组，CCK-8法检测24、48和72 h时各组细胞增殖率。U251和U87 MG细胞分为对照组（0 μmol·L－1 ）和40、60及80 μmol·L－1 AdipoRon组，细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率，划痕愈合实验检测各组细胞划痕愈合率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率及不同细胞周期细胞百分率，Western blotting法检测各组细胞中AMP依赖蛋白激酶（AMPK）和磷酸化AMPK（p-AMPK）蛋白表达水平。将U251细胞分为shNC对照组（未处理）、shNC组（经40 μmol·L－1 AdipoRon处理，未敲低）、AdipoR1敲低组（经40 μmol·L－1 AdipoRon处理，敲低AdipoR1）、AdipoR2敲低组（经40 μmol·L－1 AdipoRon处理，敲低AdipoR2）和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组（经40 μmol·L－1 AdipoRon处理，敲低AdipoR1和AdipoR2）。CCK-8法检测各组U251细胞增殖率，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组U251细胞中AdiopR1和 AdiopR2 mRNA表达水平。}

与对照组比较，24、48和72 h时，不同浓度AdipoRon组U251和U87 MG细胞增殖率明显降低（P<0.05或P<0.01）；与对照组比较，40、60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞克隆形成率明显降低（P<0.01）；与对照组比较，作用48 h时，40、60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞划痕愈合率降低（P<0.01）；与对照组比较，60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U251细胞及80 μmol·L^－1 AdipoRon组U87 MG细胞凋亡率升高（P<0.01），40、60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U251和U87 MG细胞中G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.01）；与对照组比较，60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U251细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高（P<0.01），40、60和80 μmol·L^－1 AdipoRon组U87 MG细胞中p-AMPK蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与shNC对照组比较，AdipoR1敲低组细胞中AdipoR1 mRNA表达水平降低（P<0.01），AdipoR2敲低组细胞中AdipoR2 mRNA表达水平降低（P<0.01）。与shNC对照组比较，经40 μmol·L^－1 AdipoRon作用后，敲低AdipoR1组、敲低AdipoR2组和AdipoR1+AdipoR2共同敲低组U251细胞增殖率均升高（P<0.05或P<0.01）。

AdipoRon可抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和凋亡，并将细胞周期阻滞在G₀/G₁期，其作用机制可能是AdipoRon与脂联素受体AdipoR1和AdipoR2相互作用后促进AMPK磷酸化，从而影响胶质瘤细胞的生物学行为。

探讨不同浓度贝母素乙（PMI）对人肺癌A549细胞凋亡的影响，阐明其可能的分子机制。

采用不同浓度PMI（0.025、0.050、0.100、0.200和0.400 mmol·L^－1）分别处理A549细胞24、48和72 h，MTT法检测A549细胞增殖活性，并计算半数抑制浓度（IC₅₀）。不同浓度PMI（0.050、0.100、0.200 mmol·L^－1）或0.200 mmol·L^－1 PMI联合p38 MAPK抑制剂SB203580处理A549细胞48 h后，细胞分为空白对照组、不同浓度（0.050、0.100和0.200 mmol·L^－1）PMI组和联合组（0.200 mmol·L^－1 PMI + 20 μmol·L^－1 SB203580）。Annexin Ⅴ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和cleaved-caspase-3及p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/p53信号通路相关蛋白磷酸化p38MAPK （p-p38MAPK）（Thr180/Thr182）、p-p53（ser15）、p53、PUMA和小鼠双微体2（MDM2）表达水平，免疫荧光实验观察各组细胞中p53蛋白定位情况。

与对照组比较，0.10和0.20 mmol·L^－1 PMI组A549细胞存活率降低（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞中Bax、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK（Thr180/Thr182）、p-p53（ser15）、p53和PUMA蛋白表达水平均升高（P<0.05），Bcl-2和MDM2蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与0.20 mmol·L^－1 PMI组比较，联合组A549细胞存活率升高（P<0.05），细胞凋亡率降低（P<0.05），细胞中Bax、cleaved-caspase-3p-p38MAPK（Thr180/Thr182）、p-p53（ser15）、p53和PUMA蛋白表达水平均降低（P<0.05），Bcl-2和MDM2蛋白表达水平均升高（P<0.05）。免疫荧光检测，p53蛋白存在由细胞质向细胞核转移的现象，且p53蛋白在细胞质和细胞核均有表达。

PMI可诱导A549细胞凋亡，其分子机制可能与p38 MAPK/p53信号通路介导的细胞凋亡有关。

观察微小RNA-124-3p（miR-124-3p）对口腔鳞癌（OSCC）HSC2和KON细胞增殖及侵袭的影响，并探讨其可能作用机制。

实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测OSCC组织和OSCC细胞中miR-124-3p和脑源性神经生长因子（BDNF）mRNA表达水平，分析miR-124-3p表达与OSCC患者生存率的关系，裸鼠成瘤实验分析各组裸鼠体内成瘤的体积和质量，Western blotting法检测HSC2和KON细胞中BDNF蛋白表达水平。将miR-124-3p 、miR-NC、inhibitor-NC、miR-124-3p inhibitor、siBDNF、BDNF和miR-124-3p+BDNF分别转染至HSC2及KON细胞作为miR-124-3p组、miR-NC组、inhibitor-NC组、miR-124-3p inhibitor组、siBDNF组、BDNF组及miR-124-3p+BDNF组。CCK-8法检测HSC2和KON细胞的细胞存活率，Transwell实验检测各组HSC2和KON细胞的细胞侵袭率。双荧光素酶报告基因实验检测miR-124-3p与BDNF的靶向关系，RNA免疫沉淀实验检测miR-124-3p与BDNF的靶向关系。

OSCC组织、HSC2和KON细胞中miR-124-3p呈低表达，BDNF mRNA呈高表达，且miR-124-3p表达与OSCC患者生存率有关（P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-124-3p组细胞存活率和细胞侵袭率降低（P<0.05），裸鼠肿瘤体积和质量降低（P<0.05）。与inhibitor-NC组比较，siBDNF组细胞存活率和细胞侵袭率降低（P<0.05）。与inhibitor-NC组比较，BDNF组细胞存活率和细胞侵袭率升高（P<0.05）。BDNF是miR-124-3p的潜在靶标。与miR-124-3p组比较，miR-124-3p+BDNF组细胞存活率和细胞率侵袭升高（P<0.05）。

miR-124-3p可抑制OSCC细胞的增殖和侵袭，其作用机制可能与靶向结合BDNF有关。

观察蛋白酶体抑制剂乳胞素对大鼠黑质多巴胺能神经元死亡和氧化损伤的作用，并探讨氧化损伤在蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元死亡中的作用。

将70只SD大鼠随机分为乳胞素组和生理盐水组，每组35只。将蛋白酶体抑制剂乳胞素立体定向注射入乳胞素组大鼠右侧黑质中，生理盐水组大鼠注射等体积的生理盐水。旷场实验检测2组大鼠的穿梭距离、下肢站立次数和总跑动时间，前肢使用不对称实验检测2组大鼠前肢使用不对称指数，阿扑吗啡诱导旋转实验检测2组大鼠旋转行为，微量酶标法检测2组大鼠中脑黑质中羟自由基、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、蛋白质羰基和8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）水平，免疫组织化学染色检测2组大鼠黑质中酪氨酸羟化酶（TH）免疫阳性神经元毁损程度。

与生理盐水组比较，乳胞素组大鼠的穿梭距离、下肢站立次数和总跑动时间明显减少（P<0.05）。与生理盐水组比较，乳胞素组大鼠前肢使用不对称指数明显升高（P<0.05）。乳胞素组大鼠注射阿扑吗啡后出现恒向健侧旋转。给药7和21 d后，与生理盐水组比较，乳胞素组大鼠注射侧黑质中羟自由基、MDA、蛋白质羰基和8-OHdG水平明显升高（P<0.05），GSH水平明显降低（P<0.05）。给药21 d后，乳胞素组大鼠注射侧黑质中TH免疫阳性神经元显著丧失。与生理盐水组比较，乳胞素组大鼠黑质中TH免疫阳性神经元残存率明显降低（P<0.05）。

大鼠黑质内注射蛋白酶体抑制剂乳胞素能够诱导大鼠黑质多巴胺能神经元氧化损伤，并最终导致神经元死亡。

探讨微小RNA-107（miR-107）通过丝裂原活化蛋白3激酶7（MAP3K7）调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇（TAX）耐药性的影响，并阐明其作用机制。

293T细胞分为miR-NC组（转染miR-NC）和miR-107 mimics组（转染miR-107 mimics）。采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞，获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX。SKOV3/TAX细胞随机分为空白对照组、TAX（给予4.0 μmol·L^－1 TAX）组、TAX+miR-107 mimics（给予4.0 μmol·L^－1 TAX且转染miR-107 mimics）组和TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7（给予4.0 μmol·L^－1 TAX且转染miR-107 mimics和pcDNA-MAP3K7）组；分别与人外周血淋巴细胞HPBL共培养，分为HPBL组、HPBL+SKOV3/TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组和HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测细胞中miR-107表达水平，双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和MAP3K7的靶向关系，Western blotting法检测各组细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平，CCK-8法检测各组细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。

与人卵巢上皮细胞HOSEpic比较，卵巢癌细胞中miR-107表达水平降低（P<0.05）。MAP3K7的3′-UTR与miR-107存在靶向结合位点。双荧光素酶报告基因实验，与miR-NC组比较，过表达miR-107组野生型MAP3K7的荧光素酶活性降低（P<0.01）。Western blotting法检测，过表达miR-107组细胞中MAP3K7蛋白表达水平低于miR-NC组（P<0.01）。RT-qPCR检测，与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞中miR-107 mRNA表达水平升高（P<0.01）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞中miR-107 mRNA表达水平升高（P<0.05）。与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低（P<0.01）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics 组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01）；与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平升高（P<0.05或P<0.01）。与HPBL+SKOV3/TAX组比较， HPBL+SKOV3/TAX+TAX组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低（P<0.05），细胞凋亡率降低（P<0.05）；与HPBL+SKOV3/TAX+TAX组比较，HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平和细胞凋亡率降低（P<0.05）；与HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics 组比较，HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+ pcDNA-MAP3K7组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低（P<0.01），且细胞凋亡率降低（P<0.01）。与空白对照组比较， TAX组SKOV3/TAX细胞存活率降低（P<0.05）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞存活率降低（P<0.05）。与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞存活率明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与TAX组比较，TAX+ miR-107组SKOV3/TAX细胞凋亡率升高（P<0.05）；与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组细胞凋亡率降低（P<0.05）。

miR-107在SKOV3/TAX细胞中呈低表达，且miR-107通过抑制MAP3K7的表达，抑制SKOV3/TAX细胞免疫逃逸，缓解卵巢癌细胞TAX耐药性。

探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）抑制剂SB303580（SB）对小鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）进展的影响，并阐明其可能的作用机制。

将48只C57BL/6小鼠分为对照组、SB组、COPD组和COPD+SB组，每组12只。COPD组和COPD+SB组小鼠给予香烟烟雾和脂多糖（LPS）建立COPD模型。吸入乙酰甲胆碱（Mch）后观察各组小鼠气道阻力以评价各组小鼠肺功能，HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现，细胞计数法和ELISA法检测各组小鼠肺泡灌洗液（BALF）中白细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素18（IL-18）水平，体外应用烟草提取物（CSE）刺激小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，将细胞分为对照组、SB组、CSE组和SB+CSE组。细胞免疫荧光染色观察各组巨噬细胞中NOD样受体蛋白3（NLRP3）及裂解型半胱氨酸蛋白酶3（cleaved caspase-3）的表达，流式细胞术检测各组细胞焦亡率和早期凋亡率，Western blotting法检测各组小鼠肺组织和巨噬细胞中磷酸化p38（p-38）、焦亡相关蛋白和核因子κB（NF-κB）信号通路相关蛋白表达水平。

成功构建COPD小鼠模型。与对照组比较，COPD组和COPD+SB组小鼠气道阻力，BALF中白细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数量及TNF-α、IL-6、IL-1β和IL-18水平以及肺组织中p-p-38、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶1（caspase-1）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、NF-κB p65及Toll样受体4（TLR4）蛋白表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）；肺组织结构明显受损，气道上皮细胞脱落，部分相邻肺泡融合至肺大泡等病理学改变。与对照组比较，SB组小鼠气道阻力，BALF中白细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平和肺组织中NLRP3、caspase-1、ASC、NF-κB p65及TLR4蛋白表达水平均无明显改变（P>0.05）；肺组织结构正常，但肺组织中p-p-38蛋白表达水平降低（P<0.05）。与COPD组比较，COPD+SB组小鼠气道阻力，BALF中白细胞总数、中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数量及TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平和肺组织中NLRP3、caspase-1、ASC、NF-κB p65及TLR4蛋白表达水平均降低（P<0.05），肺组织病理损伤明显减轻。体外实验，与对照组比较，CSE组和CSE+SB组巨噬细胞中NLRP3和cleaved caspase-3的表达增多、细胞焦亡率、早期凋亡率及细胞中p-p-38、ASC、NF-κB p65、TLR4和cleaved caspas-3蛋白表达水平均升高（P<0.05或P<0.01）；SB组巨噬细胞的细胞焦亡率、早期凋亡率和细胞中NLRP3、cleaved caspase-3、ASC、NF-κB p65、TLR4及cleaved caspas-3蛋白表达水平均无明显变化（P>0.05），但p-p-38蛋白表达水平降低（P<0.05）。与CSE组比较，CSE+SB组巨噬细胞的早期凋亡率和细胞中cleaved caspase-3表达水平明显升高（P<0.05），细胞焦亡率及细胞中p-p-38、NLRP3、ASC、NF-κB p65、TLR4及cleaved caspas-3蛋白表达水平降低（P<0.05）。

SB可能通过抑制NLRP3途径介导巨噬细胞焦亡，改善COPD肺损伤和炎症反应。

挖掘基因表达综合（GEO）数据库和癌症基因组图谱（TCGA） 数据库中结肠癌基因表达数据，探讨引发结肠癌的潜在核心基因及独立预后因子。

采用TCGA数据库检索结肠癌中基因表达水平和临床特征数据，采用GEO数据库检索结肠癌和癌旁组织中核心基因表达水平，行加权基因共表达网络分析（WGCNA）、维恩分析、蛋白-蛋白互作（PPI）网络构建和Hub 基因筛选、基因本体（GO）及京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析、泛癌基因的免疫细胞亚型分析、核心基因的泛癌热图和相关性分析、核心基因与肿瘤微环境的相关性分析和核心基因的风险回归模型分析，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）、Western blotting和免疫组织化学法检测结肠癌组织及癌旁组织中NKD1与AXIN2表达水平，进一步证实筛选结果。

TCGA数据分析得出1 208个基因高表达；GSE37182芯片中有252个基因高表达。对4组差异分析数据取交集，维恩分析获得13个共有基因，并进行PPI网络构建，发现7个基因（ARID3A、 SALL4、NKD1、KND2、AXIN2、CA9和TACSTD2）为结肠癌潜在的核心基因。GO富集分析，这7个基因主要参与Wnt信号通路进行正/负调控，基底外侧质膜或结合泛素蛋白连接酶；KEGG富集分析，这7个基因主要作用于Hippo信号通路和Wnt信号通路。泛癌基因分析，7个核心基因在结肠癌组织中均明显高表达，NKD1和AXIN2基因在结肠癌组织中的表达呈正相关关系（r=0.69）；TACSTD2基因在C1、C2、C3和C6免疫细胞亚型中呈高表达。核心基因的表达与样品中肿瘤微环境之间的相关性分析，结肠癌组织中NKD2、AXIN2、ARID3A和NKD1基因的表达与综合打分呈负相关关系（P<0.01）。结肠癌患者生存预后分析，只有AXIN2为显著独立预后因子（P<0.05），在结肠癌患者中为低风险独立预后因子。RT-qPCR、Western blotting和免疫组织化学法检测，NKD1在结肠癌肿瘤标本和结肠癌细胞中均呈高表达，并且NKD1与AXIN2基因表达水平呈显著正相关关系（P<0.01）。

基于生物信息学分析结肠癌数据库筛选出7个核心基因，其中AXIN2为结肠癌患者独立预后因子，结肠癌组织中NKD1的AXIN2基因表达水平呈正相关关系。

观察2型糖尿病（T2DM）患者行输尿管软镜碎石术（FURL）后出现感染相关并发症的影响因素，探讨T2DM患者术前血糖水平与发生术后感染相关并发症的关系，为T2DM患者在接受FULR术后发生感染相关并发症的早期预防及治疗提供参考。

选择接受FURL手术治疗的83例上尿路结石并发T2DM患者进行回顾性分析，根据术后是否发生感染将其分为感染组和非感染组，对比2组患者的临床资料，单因素和多因素Logistic回归分析筛选出发生术后感染的独立影响因素，受试者工作特征（ROC）曲线界定术前血糖控制良好的水平，据此将患者分为血糖控制良好组（血糖水平≤7.7 mmol·L^－1）和血糖控制不佳组（血糖水平>7.7 mmol·L^－1），比较2组T2DM患者术后感染相关并发症发生频数和平均术后住院天数。

单因素Logistic回归分析，术前血糖水平、结石直径≥2 cm、术前尿常规白细胞计数>10/HP、术前尿培养阳性和手术时间≥90 min为T2DM患者术后感染事件的可能影响因素；二元多因素Logistic回归分析，术前血糖水平、手术时间≥90 min、结石直径≥2 cm和术前尿培养阳性为T2DM患者术后出现感染相关并发症的独立影响因素。ROC曲线分析，以术前血糖7.7 mmol·L^－1作为截断值时，预测患者术后感染相关事件的灵敏度为70.37%，特异度为96.43%。血糖控制良好组患者术后感染相关并发症发生频数和术后平均住院天数均低于血糖控制不佳组（P<0.05）。

术前血糖水平、术前尿培养阳性、手术时间≥90 min和结石直径≥2 cm是T2DM患者行FURL术后发生感染并发症的独立影响因素。以术前血糖水平≤7.7 mmol·L^－1作为血糖控制良好的标准，能够有效降低患者的术后感染率，缩短术后住院时间。

探讨沉默DNA甲基化转移酶3a（DNMT3a）表达对银屑病样HaCaT细胞周期进展和细胞增殖的抑制作用，阐明其可能机制。

收集15例寻常性银屑病患者皮损组织（银屑病组）与15名健康者皮肤组织（对照组）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测2组研究对象皮肤组织中DNMT3a mRNA表达水平。siRNA转染技术将沉默DNMT3a表达的si-DNMT3a转染至HaCaT细胞中，RT-qPCR和Western blotting法检测si-DNMT3a的转染效率。采用M5方法诱导HaCaT细胞并建立银屑病样细胞模型，将细胞分为对照组、si-DNMT3a组、si-NC组和HaCaT组。CCK-8法检测各组细胞增殖率，流式细胞术检测不同细胞周期各组细胞百分率，Annexin Ⅴ-FITC实验检测各组细胞凋亡率。MSP实验检测银屑病组和对照组研究对象皮肤组织中LATS1基因启动子区甲基化水平。Western blotting法检测各组细胞中大肿瘤抑制基因1（LATS1）、Yes-相关蛋白1（YAP1）、Cyclin D1、CDK6和cleaved caspase-3蛋白表达水平。

与对照组比较，银屑病组患者皮肤组织中DNMT3a mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。与HaCaT组比较，si-NC组HaCaT细胞中DNMT3a mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。与HaCaT组比较，对照组、si-NC组和si-DNMT3a组HaCaT细胞增殖率和S期HaCaT细胞百分率均升高（P<0.05），G₁期细胞百分率和细胞凋亡率均降低（P<0.05）；与对照组和si-NC组比较，si-DNMT3a组HaCaT细胞增殖率和S期HaCaT细胞百分率均降低（P<0.05），细胞凋亡率和G₁期HaCaT细胞百分率升高（P<0.05）。MSP检测，银屑病组患者皮肤组织中LATS1启动子甲基化水平较对照组升高（P<0.01）。Western blotting检测，与HaCaT组比较，对照组、si-NC组和si-DNMT3a组HaCaT细胞中YAP1、Cyclin D1及CDK6蛋白表达水平明显升高（P<0.05），LATS1和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；与对照组和si-NC组比较，si-DNMT3a组HaCaT细胞中YAP1、Cyclin D1和CDK6蛋白表达水平降低（P<0.05），LATS1和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高（P<0.05）。

沉默DNMT3a表达可能通过降低LATS1的甲基化水平并下调YAP1的表达，从而抑制银屑病样HaCaT细胞周期进展和细胞增殖，并诱导细胞发生凋亡。

探讨在新药时代多发性骨髓瘤（MM）患者早期死亡的原因及其危险因素，为早期识别高危人群和指导治疗提供依据。

回顾性分析采用蛋白酶体抑制剂或免疫调节剂为基础化疗方案的新诊断多发性骨髓瘤（NDMM）患者的临床资料，根据总生存期（OS）是否超过24个月分为早期死亡组（OS<24个月）和对照组（OS≥24个月），统计分析2组患者的高危因素，包括年龄、国际分期系统（ISS）分期、修订国际分期系统（R-ISS）分期、贫血、肾功能不全、高钙血症、乳酸脱氢酶（LDH）水平升高、骨髓浆细胞比例>60%、髓外浆细胞瘤、荧光原位杂交（FISH）检测结果及疗效，生存分析采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，采用Logistic回归模型逐步法筛选危险因素，筛选出有意义的临床指标并采用多因素分析探讨早期死亡的高危因素。

共纳入237例NDMM患者，其中早期死亡组53例，对照组184例。早期死亡组患者中位OS为16个月，对照组至随访截止时中位OS仍未达到，2组患者中位OS比较差异有统计学意义（P<0.01）。早期死亡组患者死亡原因包括疾病进展死亡（77.4%）和非疾病进展死亡（22.6%），非疾病进展死亡中包括肺炎4例、急性心肌梗塞3例、急性脑梗塞1例和自动放弃治疗死因不祥4例。单因素分析，早期死亡组患者中高龄（>65岁）、ISS分期Ⅲ期、R-ISS分期Ⅲ期、贫血、LDH水平升高、骨髓浆细胞比例>60%、髓外浆细胞瘤、FISH检测17P缺失和最佳疗效未达部分缓解（PR）的百分率均高于对照组（P<0.05）。多因素回归分析，高龄（P=0.007）、R-ISS分期Ⅲ期（P=0.003）、髓外浆细胞瘤（P=0.008）和最佳疗效未达PR（P<0.01）是新药时代NDMM患者早期死亡的独立危险因素。

新药时代下早期死亡的原因为疾病进展，年龄>65岁、R-ISS分期Ⅲ期、髓外浆细胞瘤和最佳疗效未达PR仍是NDMM患者早期死亡的独立危险因素，对具有上述特征的NDMM患者进行强化治疗有可能改善患者预后。

探讨贝伐珠单抗联合化疗治疗已形成直肠阴道瘘直肠癌患者的疗效，为该病的治疗提供参考依据。

收集1例采用贝伐珠单抗联合FOLFIRI方案治疗的晚期直肠癌伴直肠阴道瘘患者的临床资料，分析其诊治特点和过程，并对相关文献进行总结。

患者，女性，64岁，于吉林省人民医院行经腹直肠癌手术（Dioxon手术），术后病理为中分化直肠腺癌，阴道后壁侵犯及区域淋巴结转移（pT4bN2M0，ⅢC期，Dukes C）；免疫组织化学检测，MSH2（+）、MLH1（+）、PMS2（+）、MSH6（+）、S-100（－）和BRAFV600E（－），提示错配修复蛋白功能正常（pMMR）；该患者发生N-和K-ras基因突变，术后4周辅助化疗前盆腔核磁成像（MRI）显示术后直肠阴道瘘，延期化疗，术后5个月疾病继续进展，被迫行姑息性一线、二线化疗，但疾病持续进展，三线采用贝伐珠单抗联合FOLFIRI方案治疗，未加重直肠阴道瘘，且促进了瘘道愈合，并显著提高了患者的生活质量。

针对肿瘤进展导致直肠阴道瘘且无法从西妥昔单抗治疗中受益的直肠癌患者，采用贝伐珠单抗联合化疗进行针对病因的治疗是一种可行的方案。

探讨血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤（AITL）的临床特点、诊断过程和治疗方法，提高临床医生对该病的认识。

收集1例AITL患者的临床资料、影像学表现、支气管镜和病理检查结果，分析上述资料，并进行相关文献复习。

患者，女性，66岁，因“发热伴咳嗽和咳痰15 d”入院。患者四肢散在红色皮疹，胸廓无畸形，气管居中，叩诊左下肺浊音，左下肺呼吸音减弱，无其他明显阳性体征。胸部CT检查结果显示双肺下叶见多发条片状高密度影，以左下肺为著，纵隔和双侧腋窝淋巴结肿大。初步考虑双肺炎症可能性大，待除外占位性病变。经支气管镜肺活检术（TBLB）、纵隔淋巴结支气管穿刺针吸活检术（TBNA）和胸水脱落细胞检测，结果均排除肺恶性病变。先后行抗感染治疗和实验性抗结核治疗，患者仍反复发热，多次复查胸部CT结果显示左下肺高密度影范围增大和实变。全面的实验室检查和影像学检查均未见异常，患者具体发热原因不明确。患者查体见躯干和四肢多发淡红色皮疹，双侧锁骨上淋巴结肿大，经右侧锁骨上淋巴结穿刺活组织检查，最终病理回报AITL。

有肺部影像学改变的不明原因发热，且伴有皮疹及淋巴结肿大的患者，如系统抗感染治疗效果不好，应考虑AITL。

基于多重聚合酶链式反应（PCR）技术，建立并评价一种可同时快速特异鉴别熊胆粉生物来源的方法，为鉴别人工模拟混合掺假样品提供依据。

利用猪、牛和熊线粒体细胞色素b基因，SDS-蛋白酶K裂解法（SDS-PK）提取胆类DNA，Primer Premier 5.0软件设计可扩增不同大小DNA片段且无交叉反应的物种特异性引物，特异性扩增后，将扩增条带克隆后测序，与GenBank数据库已登记序列比对。建立并优化多重PCR，评价其特异性和灵敏度，并采用该方法鉴别27份模拟混合掺假样品。

建立的猪、牛和熊胆粉DNA提取方法可于2 h之内完成操作，DNA纯度分别为2.04、1.69和1.70，浓度分别为158.63、189.34和148.55 mg·L^－1。设计可扩增出猪、牛和熊的物种特异性引物。测序结果与GenBank数据库已登记序列同源性达99%以上。PCR体系各物种引物特异性强，无非特异扩增。应用于三重PCR体系中的引物互不干扰，检测灵敏度高，3种靶标样品任意一种DNA浓度降至1 mg·L^－1时均可成功检测。27份人工模拟熊胆粉不同物种及不同比例掺假样品的检测结果与预设混合情况相符，盲法随机抽样重复检测5次，结果稳定。

成功建立可通过一次实验同时鉴别猪、牛和熊胆粉的方法，具有简便、灵敏及高效的特点，可应用于熊胆粉及其常见动物源性掺伪的鉴别。

探讨不同配比的海藻酸钠（SA）-角豆胶（LBG）互穿聚合物网络（IPN）水凝胶的载药和释药性能，评价包裹顺铂（DDP）的IPN水凝胶对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞的持续性杀伤作用及其机制。

将不同配比SA和LBG溶于去离子水，以戊二醛（GA）和氯化钙（CaCl₂）为交联剂，采用离子凝胶法制备不同配方的IPN水凝胶，扫描电镜（SEM）和傅里叶红外光谱（FTIR）表征水凝胶的物理化学结构，紫外分光光度分析法测定水凝胶的包封率（EE）并绘制药物释放曲线。三维柱状图展示不同配比LBG和GA条件下水凝胶珠的粒径及药物EE。结合EE和药物释放曲线选用优化配方包裹DDP制备DDP凝胶珠。CAL-27细胞分为对照组、DDP药液组和DDP凝胶珠组，MTS法和AO/PI 荧光染色法观察不同时间点各组CAL-27细胞的存活率和凋亡情况。

SEM观察，干燥的凝胶珠表面粗糙甚至凹凸不平，出现褶皱现象。三维柱状图观察，粒径随LBG水平的升高而增大，随GA水平的升高而减小。随着LBG和GA水平的升高，水凝胶的EE均升高。FTIR检测，IPN水凝胶成功包封药物DDP。当SA和LBG的配比为2.25∶0.75，GA水平为3%，CaCl₂浓度为3%时，水凝胶药物EE为76.8%，药物缓释时间达48 h。MTS法检测，6和12 h后，DDP凝胶珠组CAL-27细胞存活率高于DDP药液组（P<0.05）；在24和48 h时，DDP凝胶珠组细胞存活率低于DDP药液组（P<0.05）。6~48 h，对照组CAL-27细胞生长状态良好，增殖后的CAL-27细胞被染色为绿色；在6和12 h，DDP药液组和DDP凝胶珠组CAL-27细胞数量均少于对照组，DDP凝胶珠组存活细胞数略多于药物组；在24 h后，DDP凝胶珠组细胞生长速度变缓， CAL-27存活细胞数少于DDP药液组。

成功制备并优化了可缓释DDP的DDP-IPN水凝胶，其对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞具有持续杀伤作用，有望开发成一种新型药物缓释系统。