miR-124-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制

doi:10.13481/j.1671-587X.20220321

摘要/Abstract

摘要： 目的

观察微小RNA-124-3p（miR-124-3p）对口腔鳞癌（OSCC）HSC2和KON细胞增殖及侵袭的影响，并探讨其可能作用机制。

方法

实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测OSCC组织和OSCC细胞中miR-124-3p和脑源性神经生长因子（BDNF）mRNA表达水平，分析miR-124-3p表达与OSCC患者生存率的关系，裸鼠成瘤实验分析各组裸鼠体内成瘤的体积和质量，Western blotting法检测HSC2和KON细胞中BDNF蛋白表达水平。将miR-124-3p 、miR-NC、inhibitor-NC、miR-124-3p inhibitor、siBDNF、BDNF和miR-124-3p+BDNF分别转染至HSC2及KON细胞作为miR-124-3p组、miR-NC组、inhibitor-NC组、miR-124-3p inhibitor组、siBDNF组、BDNF组及miR-124-3p+BDNF组。CCK-8法检测HSC2和KON细胞的细胞存活率，Transwell实验检测各组HSC2和KON细胞的细胞侵袭率。双荧光素酶报告基因实验检测miR-124-3p与BDNF的靶向关系，RNA免疫沉淀实验检测miR-124-3p与BDNF的靶向关系。

结果

OSCC组织、HSC2和KON细胞中miR-124-3p呈低表达，BDNF mRNA呈高表达，且miR-124-3p表达与OSCC患者生存率有关（P<0.05）。与miR-NC组比较，miR-124-3p组细胞存活率和细胞侵袭率降低（P<0.05），裸鼠肿瘤体积和质量降低（P<0.05）。与inhibitor-NC组比较，siBDNF组细胞存活率和细胞侵袭率降低（P<0.05）。与inhibitor-NC组比较，BDNF组细胞存活率和细胞侵袭率升高（P<0.05）。BDNF是miR-124-3p的潜在靶标。与miR-124-3p组比较，miR-124-3p+BDNF组细胞存活率和细胞率侵袭升高（P<0.05）。

结论

miR-124-3p可抑制OSCC细胞的增殖和侵袭，其作用机制可能与靶向结合BDNF有关。

关键词: 口腔鳞状细胞癌, 微小RNA-124-3p, 脑源性神经营养因子, 细胞增殖, 细胞侵袭

Abstract: Objective

To observe the effect of microRNA-124-3p （miR-124-3p） on the proliferation and invasion of oral squamous cell carcinoma （OSCC） HSC2 and KON cells， and to explore its possible mechanism.

Methods

The expression levels of miR-124-3p and brain-derived nerve growth factor （BDNF） mRNA in the OSCC tissue and OSCC cells were detected by real-time fluorescence quantitative PCR （RT-qPCR） method， and the relationship between the expression of miR-124-3p and the survival rate of the OSCC patients was analyzed；the volumes and masses of tumor of the nude mice in various groups were analyzed；the expression levels of BDNF protein in HSC2 and KON cells were detected by Western blotting method；the HSC2 and KON cells were divided into miR-124-3p group（transfected miR-124-3p），miR-NC group（transfected with miR-NC），inhibitor-NC（transfected with inhibitor-NC），miR-124-3p inhibitor group（transfected with miR-124-3p inhibitor），siBDNF group（transfected with siBDNF），BDNF group（transfected with BDNF），and miR-124-3p+BDNF group（transfected with miR-124-3+BDNF）.The survival rates of the HSC2 and KON cells were detected by CCK-8 method，and the invasion rates of HSC2 and KON cells in various groups were detected by Transwell experiment； the targeting relationship between miR-124-3p and BDNF was also detected by double luciferase reporter gene experiment， and the targeting relationship between miR-124-3p and BDNF was detected by RNA immunoprecipitation experiment.

Results

The expressions of miR-124-3p in OSCC tissue and HSC2 and KON cells were low， and the expression of BDNF mRNA was high；the expression of miR-124-3p was correlated with the survival rate of the OSCC patients（P<0.05）. Compared with miR-NC group， the survival rates and the invasion rates of the HSC2 and KON cells in miR-124-3p group were decreased （P<0.05）， and the tumor volumes and mass of the nude mice were decreased （P<0.05）. Compared with inhibitor-NC group， the survival rates and the invasion rates of the HSC2 and KON cells in siBDNF group were decreased （P<0.05）. Compared with inhibitor-NC group， the survival rates and the invasion rates of the HSC2 and KON cells in BDNF group were increased （P<0.05）.BDNF was a potential target of miR-124-3p. Compared with miR-124-3p group， the survival rates and the invasion rates of the HSC2 and KON cells in miR-124-3p+BDNF group were increased （P<0.05）.

Conclusion

miR-124-3p can inhibit the proliferation and invasion of the OSCC cells， and its mechanism may be related to the targeted binding of BDNF.

Key words: Oral squamous cell carcinoma, MicroRNA-124-3p, Brain-derived neurotrophic factor, Cell proliferation, Cell invasion

中图分类号:

R739.85

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