吉林大学学报(医学版) ›› 2017, Vol. 43 ›› Issue (01): 186-189.doi: 10.13481/j.1671-587x.20170137
小鼠肾脏足细胞的原代培养和鉴定
高霞1, 雷晓燕1, 刘姝娆2, 索艳红3, 曹晓锋1, 高明东1
- 1. 甘肃省人民医院儿科, 甘肃 兰州 730000;
2. 甘肃省中医药大学研究生处, 甘肃 兰州 730000;
3. 宁夏医科大学研究生学院, 宁夏 银川 750000
Primary culture and identification of mouse kidney cells
GAO Xia1, LEI Xiaoyan1, LIU Shurao2, SUO Yanhong3, CAO Xiaofeng1, GAO Mingdong1
- 1. Department of Pediatrics, People's Hospital of Gansu Province, Lanzhou 730000, China;
2. Department of Postgraduate, Gansu University of Traditional Chinese Medicine, Lanzhou 730000, China;
3. School of Postgraduate, Ningxia Medical University, Yinchuan 750001, China
摘要：
目的：建立可操作性好、简单易行且效率较高的小鼠肾脏足细胞分离及原代培养模式，为其进一步研究奠定基础。方法：取C57/BL6J小鼠肾脏，通过差异过筛法获取300目筛的肾小球，用制备好的KI-3T3培养基重悬肾小球后静置于铺被鼠尾胶原的培养皿中，4 d后开始换液，7 d后开始胰蛋白酶消化肾小球，并开始足细胞传代培养。5~7d传代1次，传代2~3次后收集细胞鉴定。采用倒置扭转显微镜观察小鼠肾脏足细胞形态表现，采用PCR法检测小鼠肾脏足细胞中nephrin，podocin和P-cadherin的表达。结果：肾小球种植3 d后可见足细胞从组织中爬出，足细胞传代培养7 d后在倒置相差显微镜下可观察到细胞胞体有突起生长。PCR法检测，分离培养的足细胞表达nephrin、podocin和P-cadherin。结论：差异过筛结合消化酶技术能够成功分离培养C57/BL6J小鼠肾脏足细胞。
中图分类号:
- Q813.11