吉林大学学报(医学版) ›› 2021, Vol. 47 ›› Issue (1): 35-43.doi: 10.13481/j.1671-587x.20210105
Qi LIU,Xianchen ZHANG,Xiangyu LI,Yumiao LIN,Yanqi YANG,Enzhi YAN()
摘要: 研究氯化锂对β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)引起的星形胶质细胞(AS)谷氨酸释放的抑制作用,并探讨其对海马神经元损伤的保护作用及机制。 原代培养AS及海马神经元,AS分为对照组和Aβ1-42+不同剂量氯化锂组(分别加入0.25、0.50和1.00 mmol?L-1氯化锂作用2 周,加入250 nmol?L-1 Aβ1-42刺激),采用荧光探针技术检测AS中Ca2+水平,采用高效液相色谱法检测AS谷氨酸的释放量,Western blotting法检测AS中瞬时受体电位通道蛋白1(TRPC1)、钠-钙交换蛋白1(NCX1)和电压门控钙离子通道(Cav1.2)蛋白表达水平。海马神经元成熟化后分为对照组、Aβ1-42组和Aβ1-42+不同剂量氯化锂组,加入Aβ1-42处理的含AS的条件培养基(ACM)培养并以不含AS的条件培养基为对照,倒置相差显微镜下观察海马神经元突起总长度(TDBL)、一级突起数 (PDN)和最大分支级数(MBO),Griess法测定培养液中一氧化氮(NO)释放量。 与对照组比较,Aβ1-42+不同剂量氯化锂组AS中Ca2+水平明显降低(P<0.05),Ca2+再充功能降低 (P<0.05),谷氨酸释放量明显减少(P<0.05),TRPC1蛋白表达水平明显降低 (P<0.05),NCX1和Cav1.2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,Aβ1-42组海马神经元NO释放量明显增加(P<0.05), TDBL、PDN 和MBO明显减少(P<0.01);与Aβ1-42组比较,Aβ1-42+不同剂量氯化锂组海马神经元NO释放量明显减少(P<0.01),TDBL、PDN和MBO明显增加(P<0.05或P<0.01)。加入Aβ1-42处理的不含AS的培养基培养,各组海马神经元NO释放量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。 氯化锂对Aβ1-42引起的AS中Ca2+依赖的谷氨酸释放具有抑制作用,该作用机制可能与其下调TRPC1受体表达有关,氯化锂可通过抑制神经元中NO的释放减轻海马神经元的损伤。
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