• 基础研究 • 下一篇
刘 扬,赵银龙,刘晓冬*,马淑梅,龚守良,刘树铮
LIU Yang, ZHAO Yin-long, LIU Xiao-dong*, MA Shu-mei,GONG Shou-liang, LIU Shu-zheng
摘要: 目的:定点诱变合成p53基因突变子进而构建表达载体。 方法:以野生型p53基因为模板,采用PCR体外定点突变技术,设计2对引物,将突变位点设 计在引物上,通过重叠延伸法2次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩 增片段克隆入pcDNA3.1载体中。 结果:在预期位点已经发生突变,p53基因第175位密码子由精氨酸(cgc)突变为组氨酸(cac),第248位密码子由精氨酸(cgg)突变为色氨酸(tgg),第273位密码子由精氨酸(cgt)突变为组氨酸(cat)。p53基因突变子表达载体成功构建。 结论:PCR技术诱导定点突变准确、高效。基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位 点奠定了基础。
中图分类号: