吉林大学学报(医学版) ›› 2022, Vol. 48 ›› Issue (2): 364-373.doi: 10.13481/j.1671-587X.20220213
Zhihui ZHAO(),Xianghua BAI,Jinling HE,Weiqin DUAN,Min LIU,Shengmao ZHANG
摘要: 探讨舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞凋亡及长链非编码RNA(LncRNA)-肺癌转移相关转录本1(MALAT1)靶向细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,阐明舒芬太尼对MIRI大鼠的可能作用机制。 30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和舒芬太尼组,每组10只。采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)的方法制备MIRI模型,假手术组只开胸不结扎,舒芬太尼组大鼠于再灌注前10 min时尾静脉注射舒芬太尼1 μg?kg-1,假手术组和模型组大鼠分别尾静脉注射等量生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法及荧光探针原位杂交(FISH)法检测各组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平,原位末端标记(TUNEL)染色法检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。构建心肌细胞缺氧复氧模型模拟体内MIRI,分为对照组、模型组、舒芬太尼组、pcDNA-MALAT1组(MALAT1组)和舒芬太尼+pcDNA-MALAT1组(舒芬太尼+MALAT1组)。H9C2细胞缺氧培养10 h后复氧构建缺氧复氧损伤模型;采用Western blotting法检测各组H9C2细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平。 动物实验,与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,舒芬太尼组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。细胞实验,与对照组比较,模型组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,舒芬太尼组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与MALAT1组比较,舒芬太尼+MALAT1组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。 舒芬太尼能减轻MIRI大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制LncRNA-MALAT1表达从而激活ERK1/2信号通路有关。
中图分类号: