重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体

doi:国家自然科学基金资助课题(39800151)

重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体

姜涛，李叔强，刘建国

吉林大学第一医院骨关节二科，吉林长春 130021

收稿日期:2006-07-31 修回日期:1900-01-01 出版日期:2007-03-28 发布日期:2007-03-28
通讯作者: 刘建国

Construction of Ad5-hBMP2 adenovirus vector by recombination of PCA13-hBMP2 plasmid

Received:2006-07-31 Revised:1900-01-01 Online:2007-03-28 Published:2007-03-28
Contact: LIU Jiang-guo

摘要/Abstract

摘要： 目的：通过重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体，并将其扩增纯化。方法：通过PCR技术获得hBMP2基因，酶切PCA13-MCMV质粒，连接PCA13-MCMV/EcoR Ⅰ+HindⅢ与hBMP2，获得PCA13-hBMP2质粒。将质粒PCA13-hBMP2与含有5型腺病毒右臂的质粒pBHGE3通过脂质体共转染至293细胞，提取腺病毒DNA,应用PCR、双酶切进行鉴定，扩增Ad5-hBMP2腺病毒载体，测定病毒滴度。Adv-hBMP2转染大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs),测定不同时间hBMP2蛋白表达量。结果：成功构建PCA13-hBMP2质粒，通过同源重组成功获得Ad5-hBMP2腺病毒载体，扩增后测得病毒滴度为1.669×10¹⁰pfu•mL^-1。Adv-hBMP2转染大鼠BMSCs后hBMP2蛋白表达量随时间延长明显增加（P<0.01）。结论：获得可表达hBMP-2的Ad5-hBMP2腺病毒载体,为基因辅助的骨组织工程技术提供安全有效的转基因载体。

关键词: 骨形态发生蛋白2, 腺病毒, 人, 克隆, 分子, 重组, 遗传

中图分类号:

姜涛，李叔强，刘建国. 重组PCA13-hBMP2质粒构建Ad5-hBMP2腺病毒载体[J]. J4, 2007, 33(2): 362-365.

[1]	于秀艳, 张晓伟, 丛占杰, 李铤, 吴雪峰. 乳腺癌患者血清中hMAM和CD147水平检测及其临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(06): 1269-1274.
[2]	薛亚娟, 符兆英. 人乳头瘤病毒致癌特性及其E6和E7蛋白致癌机制的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1096-1099.
[3]	袁虎勤, 李强. 水飞蓟素对人胃癌SGC 7901细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 988-993.
[4]	郑芳, 欧阳征仁, 欧阳靖霖, 周诗力, 罗文. 乳腺癌患者超声图像特征与人类上皮生长因子受体2和Ki-67阳性表达的关联性分析[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1073-1077.
[5]	马亚兰, 张欣, 李丹丹, 周鹤, 房书珈, 徐影, 郑连文. 卵巢功能储备正常者拮抗剂方案COH使用过程中添加高纯度人绝经促性腺激素对IVF-ET妊娠结局的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 1036-1040.
[6]	史金先, 张赐童, 刘璐, 黄天意, 闫通通, 孙世群, 王晓容. 纳米载银室温固化型PMMA材料对小鼠肝组织和肝细胞DNA损伤的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 962-967.
[7]	尹芳蕊, 庞春艳, 耿立霞, 王永福. 过表达miR-124a对J774.1细胞中TNF-α和IL-6表达水平及细胞周期的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 983-987.
[8]	王海彬, 董志军, 郭立涛, 石晶, 董微丽. 菩人丹超微粉对STZ诱导糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其对NF-κB信号通路的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 759-763.
[9]	王淼, 母润红, 李明成, 李洪杰. RNAi沉默survivin和HIF-1α基因对胃癌BGC-823细胞体外增殖和凋亡的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 753-758.
[10]	范伟, 杨永广, 胡正. 具有人红细胞重建的人源化小鼠模型构建和应用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 859-863.
[11]	张啸环, 段明华, 闫玉礼, 潘新, 李海清, 周长龙, 赵天倚. 人羊膜成纤维细胞的分离和鉴定[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 845-848.
[12]	屠培培, 黄彬, 路景涛, 薛绍礼, 夏觅珍, 吴琳梅, 张耀方, 李明刚. DNA和组蛋白表观遗传修饰在2型糖尿病发病中作用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 853-858.
[13]	治丁铭, 隋殿军, 岂蕊, 苗永迪, 韩冬, 娄石磊, 邱悦, 孙聪. 基于网络药理学探讨葛根治疗高脂蛋白血症的潜在作用靶点[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(04): 724-730.
[14]	刘少伟, 姜欢, 王晓龙, 李梦红, 陈玉, 唐中元, 胡敏. 兔抗破骨细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶多克隆抗体的制备和应用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 661-666.
[15]	陈冰, 刘昊川, 李龙云, 赵国庆, 王震, 杨永广, 李凯, 胡正. 人源化小鼠模型构建和应用的研究进展[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(03): 667-674.