J4 ›› 2009, Vol. 35 ›› Issue (6): 975-978.doi: 国家自然科学基金资助课题(30872193)
曲珊珊, 王洋, 张海英, 史艳芬, 董雪, 吕慧, 李玉林, 李荣贵
QU Shan-Shan, WANG yang, ZHANG Hai-Ying, SHI Yan-Fen, DONG Xue, LV Hui, LI Yu-Lin, LI Rong-Gui
摘要:
目的:构建高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,为进一步研究HMGA2 基因功能奠定理论基础。方法:采用RT-PCR 方法从人乳腺上皮HBL-100 细胞中扩增HMGA2 基因全长cDNA,扩增产物经双酶切及凝胶回收后,直接克隆至黄绿色荧光真核表达载体YFP-C1中,构建YFP- C1-HMGA2重组质粒。将YFP-C1-HMGA2真核表达载体转染到人前列腺癌PC3细胞中,通过RT-PCR方法验证所构建的真核表达质粒YFP-C1-HMGA2的正确性。结果:RT-PCR获得长度为351 bp的HMGA2全长cDNA,经YFP-C1真核表达载体克隆、酶切鉴定及测序分析,测序结果示基因序列与GenBank序列一致,证实真核表达质粒YFP-C1-HMGA2构建成功,并且能够在真核细胞中表达。结论:成功克隆了HMGA2基因,构建了YFP-C1-HMGA2重组质粒。
中图分类号: