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期刊信息

吉林大学学报(医学版)
双月刊
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:李欣欣
编 辑:姜瑾秋 韩宏志 官 鑫
陈思含 李昕蔚
电 话:0431-85619279
E-mail:xuebao@jlu.edu.cn
地 址:吉林省长春市新民大街828号
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2009年, 第35卷, 第6期 刊出日期:2009-11-28
基础研究
c-myc基因与辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤的关联性分析
于雷, 刘永哲, 孙世龙, 方芳, 巩宏伟, 陈强, 鞠桂芝
J4. 2009 (6):  971-974. 
摘要 ( 1424 )   [HTML]( ) PDF(1144KB) ( 537 )  

目的:研究辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤c-myc基因表达的变化,为阐明辐射致癌机制提供理论依据。方法:采用X射线(剂量率0.287 Gy?min-1,总剂量7 Gy)照射BALB/c小鼠,建立小鼠胸腺淋巴瘤模型,6个月后处死小鼠,取辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤和正常胸腺,分别提取总RNA、合成cDNA和提取总蛋白,采用实时定量PCR方法和Western blotting方法分别检测辐射诱发胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织c-myc基因mRNA和蛋白表达。结果:经实时定量PCR检测,胸腺淋巴瘤和正常胸腺组织c-myc基因mRNA相对表达量分别为9.16±4.66和1.16±0.54,两组比较差异有显著性(P<0.01);Western blotting检测结果显示,胸腺淋巴瘤c-myc基因蛋白表达较正常胸腺组织明显增高。结论:c-myc基因与辐射诱发
小鼠胸腺淋巴瘤有关联,可能是辐射致癌的易感基因。

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高迁移率蛋白A2基因真核表达载体构建与表达鉴定
曲珊珊, 王洋, 张海英, 史艳芬, 董雪, 吕慧, 李玉林, 李荣贵
J4. 2009 (6):  975-978.  DOI: 国家自然科学基金资助课题(30872193)
摘要 ( 1268 )   [HTML]( ) PDF(1354KB) ( 523 )  

目的:构建高迁移率蛋白A2(HMGA2)基因的真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达,为进一步研究HMGA2 基因功能奠定理论基础。方法:采用RT-PCR 方法从人乳腺上皮HBL-100 细胞中扩增HMGA2 基因全长cDNA,扩增产物经双酶切及凝胶回收后,直接克隆至黄绿色荧光真核表达载体YFP-C1中,构建YFP- C1-HMGA2重组质粒。将YFP-C1-HMGA2真核表达载体转染到人前列腺癌PC3细胞中,通过RT-PCR方法验证所构建的真核表达质粒YFP-C1-HMGA2的正确性。结果:RT-PCR获得长度为351 bp的HMGA2全长cDNA,经YFP-C1真核表达载体克隆、酶切鉴定及测序分析,测序结果示基因序列与GenBank序列一致,证实真核表达质粒YFP-C1-HMGA2构建成功,并且能够在真核细胞中表达。结论:成功克隆了HMGA2基因,构建了YFP-C1-HMGA2重组质粒。

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重组人碱性成纤维细胞生长因子促进急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生
王晓杰, 李晶, 田海山, 马吉胜, 周鑫, 刘孝菊, 王艳芳, 姚娜, 李校堃
J4. 2009 (6):  979-979-982. 
摘要 ( 1502 )   [HTML]( ) PDF(2100KB) ( 529 )  

目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的作用,探讨通过心肌缺血区小血管再生治疗冠心病的新途径。 方法:制备急性心肌梗死大鼠模型,60只大鼠随机分为心肌梗死模型组、rhbFGF高剂量组(50 mg•L-1)、rhbFGF低剂量组(25 mg•L-1)和假手术组;造模前心肌内多点注射rhbFGF。24 h、2周和4周后利用形态学和组织学方法测定各组心肌梗死面积,并进行缺血心肌微血管密度和病理组织学检查。结果:大鼠急性心肌梗死24 h、2 和4周后,rhbFGF高、低剂量组心肌梗死面积缩小,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);2和4周后,rhbFGF高、低剂量组血管生成增加,与模型组及假手术组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05);24 h、2和4周后,病理切片HE 染色,模型组显示梗死区心肌细胞水肿,心肌纤维断裂,部分心肌细胞溶解,炎细胞浸润;rhbFGF高、低剂量组梗死区亦出现心肌细胞水肿,少见心肌纤维断裂、心肌细胞溶解。结论: rhbFGF有促进缺血心肌血管再生,缩小急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积的作用。

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AIRE通过调控Notch1表达影响CD4+CD25+Treg的作用及其机制
吴静, 杨巍, 孙际童, 苏静波, 魏晓曦, 李一
J4. 2009 (6):  983-986. 
摘要 ( 1103 )   [HTML]( ) PDF(1521KB) ( 490 )  

目的:研究AIRE基因是否可通过调控Notch1的表达而影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导及功能,探讨AIRE在外周免疫耐受中的作用机制。 方法:将RAW264.7细胞分为转染组和未转染组,采用脂质体法将pEGFPC3-AIRE质粒转入RAW264.7细胞, 采用RT-PCR法检测各组AIRE mRNA的表达及Notch1 mRNA表达的变化。 将RAW264.7细胞分为转染组、转染并经Notch1抗体阻断组、 阴性对照组及未转染并经Notch1抗体阻断组,分别采用FACS法及RT-PCR法检测各组RAW264.7细胞对CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3 mRNA 表达的影响。 结果: 质粒成功转入RAW264.7细胞内。 AIRE转染组较未转染组Notch1 mRNA表达增加。 AIRE转染组较未转染组CD4+CD25+Treg细胞的数量及功能相关基因Foxp3 mRNA的表达水平均增加,经Notch1抗体阻断后, AIRE转染组与未转染组CD4+CD25+Treg细胞的数量及功能均较对照组降低。 结论:AIRE可能通过上调RAW264.7细胞上Notch1的表达进而影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而在维持外周免疫耐受方面发挥一定的作用。

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人脂肪干细胞向脂肪细胞的定向分化
杨旭芳, 何旭, 何牮, 张丽红, 李玉林
J4. 2009 (6):  987-991. 
摘要 ( 1372 )   [HTML]( ) PDF(2136KB) ( 553 )  

目的:分离和培养人脂肪干细胞(hADSCs),并在体外定向诱导hADSCs分化为脂肪细胞。方法:利用胶原酶消化法和贴壁筛选法从人脂肪组织中分离、培养及扩增hADSCs;应用地塞米松、吲哚美辛、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤及胰岛素定向诱导hADSCs分化为脂肪细胞。结果:体外分离、培养出高度同源性的hADSCs,hADSCs具有相对特异的细胞表面标志,即CD29、CD73、CD105及CD166呈阳性表达,而CD31及HLA-DR呈阴性表达;hADSCs具有典型的干细胞增殖特点,大部分处于静息期,只有少数细胞处于增殖活跃期;hADSCs能被诱导分化为脂肪细胞。结论:成功地分离、培养出高度同源性的、未分化的hADSCs;体外定向诱导hADSCs可分化为脂肪细胞。

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内质网应激在氟中毒大鼠肾损害中的作用
孙景春, 王春艳, 徐辉, 李广生
J4. 2009 (6):  992-995. 
摘要 ( 1120 )   [HTML]( ) PDF(2381KB) ( 712 )  

目的: 初步观察内质网应激在氟中毒大鼠肾组织中的变化,探索内质网应激在氟中毒肾损伤机制中的作用。方法: 48只Wistar 大鼠按体重平均分成4组:常食对照组、常食加氟组、低钙对照组和低钙加氟组;分别给予常食和低钙饮食,加氟组大鼠饮水中投氟化钠(NaF)(221 mg•L-1)3个月。实验结束后,取一侧肾脏制作病理切片,在光镜下观察形态学变化。取各组大鼠50 mg肾组织抽提总RNA,利用RT-PCR技术分析内质网应激相关基因Grp78、Xbp1、CHOP和PDI的表达水平。结果:光镜下可见,常食加氟组大鼠肾组织以近端小管和远端小管上皮细胞水肿和空泡变性为主;低钙加氟组大鼠肾组织近端小管和远端小管上皮细胞呈现水肿和空泡变性,伴有散在的坏死、轻度再生修复和肾间质充血;常食对照组和低钙对照组大鼠肾组织无明显变化。RT-PCR产物经半定量分析显示,低钙加氟组和常食加氟组大鼠肾组织Xbp1的表达较相应对照组明显增强(P<0.05),低钙加氟组大鼠肾组织Grp78 mRNA表达较常食加氟组和低钙对照组明显增强(P<0.05或 P<0.01);而低钙加氟组大鼠肾组织PDI的表达较常食加氟组明显下降(P<0.05)。各组大鼠肾组织CHOP表达差异无显著性(P>0.05)。结论:过量氟可造成肾组织损伤,低钙营养进一步加剧了氟对肾的损伤作用,而内质网应激很可能参与该损伤机制。

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RNA干扰对HeLa细胞VEGF表达和细胞增殖的影响
王继, 李星蓉, 左丹, 王丽
J4. 2009 (6):  996-1001. 
摘要 ( 1071 )   [HTML]( ) PDF(3861KB) ( 522 )  

目的:探讨RNA干扰对HeLa细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达和细胞增殖的影响,为人宫颈癌的治疗提供理论依据。方法:构建针对VEGF165的RNA干涉质粒,稳定转染HeLa细胞,设HeLa组、对照组和干涉组,用RT-PCR方法检测稳定细胞株中VEGF mRNA的表达,Western blotting和ELISA方法检测VEGF165蛋白的表达,MTT及流式细胞术检测VEGF siRNA作用下的细胞增殖,Hoechst33342染色检测VEGF siRNA作用下细胞凋亡的变化。结果:成功建立了VEGF siRNA的稳定细胞株,与对照组比较,干涉组VEGF的mRNA 和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。 与对照组比较,稳定转染VEGF siRNA的细胞株在24 、48 和72 h的 细胞生长抑制率分别为12.8%±5.4%、17.4%±3.7%和27.2%±5.7%,细胞增殖明显受到抑制(P<0.01)。与对照组比较,Hoechst33342染色显示VEGF siRNA对HeLa细胞的细胞凋亡率没有影响。结论:VEGF siRNA可以有效抑制HeLa细胞中VEGF mRNA和蛋白的表达,抑制细胞的增殖,提示VEGF在宫颈癌的发生、发展中具有重要作用,抑制VEGF的表达有望成为一种治疗宫颈癌的途径。

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肿瘤细胞对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响
李欣, 杨巍, 付海英, 张佳伦, 李一
J4. 2009 (6):  1002-1006. 
摘要 ( 1045 )   [HTML]( ) PDF(2204KB) ( 571 )  

目的:探讨肿瘤细胞与免疫细胞相互作用对CD4+CD25+Treg细胞数量和功能的影响。方法:建立Lewis肺癌细胞与小鼠脾淋巴细胞共培养体系。Lewis肺癌细胞与不同浓度小鼠脾淋巴细胞共培养,分为4组:实验组Ⅰ(5×105个Lewis肺癌细胞与1×106个淋巴细胞共培养)、对照组Ⅰ(1×106个淋巴细胞单独培养)、实验组Ⅱ(5×105个Lewis肺癌细胞
与2×106个淋巴细胞共培养)、对照组Ⅱ(2×106个淋巴细胞单独培养);Lewis肺癌细胞与
淋巴细胞共培养不同时间,采用3个时间点:24、48和72 h;Lewis肺癌细胞培养上清与淋巴细
胞共培养,选择培养上清浓度为20%和50%。采用流式细胞术检测了Lewis肺癌细胞与脾淋巴
细胞共培养系统中CD4+CD25+Treg细胞数量变化,通过RT-PCR方法检测了共培养对Foxp
3 mRNA表达的影响。结果:与对照组比较,实验组Ⅰ 中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRN
A表达明显增强(P<0.05),实验组Ⅱ中CD4+CD25+Treg细胞数量和Foxp3 mRNA表达无明
显变化(P>0.05);Lewis肺癌细胞与淋巴细胞培养24及48 h可见CD4+CD25+Treg细胞数量及Foxp3
mRNA表达明显升高(P<0.05),而72 h后变化不明显;20%和50% Lewis肺癌细胞培养上清
均可明显提高CD4+CD25+Treg数量及Foxp3 mRNA表达(P<0.05)。结论:肿瘤细胞及其培养
上清可诱导CD4+CD25+Treg细胞数量增加、功能增强,由肿瘤细胞所引起的CD4+CD25+Treg细
胞产生及功能增强可能是肿瘤逃避免疫监视机制之一。

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事艾滋病流行病学和电离辐射生物效应领域的研究。
齐亚莉, 张震宇, 王洪艳, 李金华, 龚守良
J4. 2009 (6):  1007-1010. 
摘要 ( 1274 )   [HTML]( ) PDF(1802KB) ( 617 )  

目的:探讨电离辐射联合自噬和凋亡抑制剂及诱导剂对人乳腺癌细胞株增殖的抑制作用。方法: 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和流式细胞术(FCM)检测经不同剂量(0、2、4、8和10 Gy)照射和4 Gy 、4 Gy+自噬抑制剂三甲基腺嘌呤(-MA)、4 Gy +自噬诱导剂(rapamycin)、4 Gy + 凋亡抑制剂泛半胱氨酸蛋白酶抑制剂(z-VAD-fmk)不同方法处
理的人乳腺癌细胞存活和增殖情况,并分析其量效、时效关系。结果:随着照射剂量的增加
(4、8和10 Gy)及时间的延长(48和72 h),乳腺癌细胞的增殖抑制率升高,组间比较差
异有显著性(P<0.05 或 P<0.01)。与4Gy+rapamycin处理组比较,4 Gy + 3-MA和4 Gy + z
-VAD-fmk处理组癌细胞增殖抑制率比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01),不同方法处理后24、48和72
h其抑制率组间比较差异有显著性(P<0.05或 P<0.01)。结论:电离辐射联合自噬诱导剂能够促进癌细胞凋亡,而电离辐射联合自噬抑制剂或凋亡抑制剂能够抑制其凋亡。电离辐射可诱导人乳腺癌细胞自噬并促进其凋亡。

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金刚烷胺修饰物对禽流感病毒感染小鼠免疫功能的影响
徐坤, 李静, 李金华, 侯雷, 杨松涛, 王宏芳, 浦昀, 吴新宇, 李娟, 夏咸柱
J4. 2009 (6):  1011-1014. 
摘要 ( 1105 )   [HTML]( ) PDF(2188KB) ( 465 )  

目的:观察金刚烷胺修饰物(NAM)对禽流感病毒感染小鼠免疫功能的影响,为抗禽流感病毒新药NAM的开发提供实验依据。方法:采用禽流感病毒(H5N1)感染小鼠模型,实验分正常对照组(NC)、模型组(PC)、金刚烷胺阳性药物组(AMA)及NAM 25、50、100和200 mg?kg-1剂量组。测定小鼠胸腺指数、脾指数、刺激指数(SI)、NK细胞杀伤活性和干扰素(IFN)活性。结果: NAM 100 mg?kg-1剂量组平均脾指数高于PC组(P<0.05);NAM各剂量组平均胸腺指数高于PC组(P<0.05)。NAM 25、100和200  mg?kg-1剂量组的刺激指数高于PC组(P<0.05);NAM 100和200  mg?kg-1剂量组刺激指数高于AMA组(P<0.05)。NAM 100和200  mg?kg-1剂量组NK细胞杀伤活性高于PC组(P<0.05);NAM 25、100和200  mg?kg-1剂量组NK细胞杀伤活性高于AMA组(P<0.05)。NAM 50、100和200  mg?kg-1剂量组IFN活性高
于PC组(P<0.01); NAM 50、100和200 mg?kg-1剂量组IFN活性高于AMA组(P<0.05)。结论:NAM可刺激禽流感病毒感染小鼠脾细胞和胸腺细胞增殖,对T淋巴细胞转化功能、NK细胞杀伤活性及IFN免疫活性均有不同程度的促进作用。

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杀菌/通透性增强蛋白对分泌性中耳炎模型大鼠损伤黏膜的修复作用
房宁, 汪欣, 祝威
J4. 2009 (6):  1015-1019. 
摘要 ( 1053 )   [HTML]( ) PDF(2188KB) ( 484 )  

目的:探讨杀菌/通透性增强蛋白(BPI)对分泌性中耳炎(OME)损伤黏膜的修复作用,阐明OME的发病机理。方法: Wistar大鼠(40耳)随机分为正常对照组(4耳)、BPI对照组(4耳)、咽鼓管阻塞(ETO)组(8耳)、内毒素(LPS)注射组(8耳)、ETO+LPS组(8耳)及ETO+LPS+BPI组(8耳),通过咽鼓管阻塞和中耳腔注射LPS制备OME动物模型,在
动物模型制备后第1、2和4周分别处死动物,光镜和扫描电镜观察中耳黏膜的变化。结果:
正常对照组、BPI对照组大鼠的中耳黏膜保持正常形态,在咽鼓管的鼓室口处可见较多的假复层立方或柱状上皮细胞,这些上皮细胞含有较多的纤毛细胞和少量杯状细胞,构成大鼠中耳粘液纤毛输送系统;上鼓室处的黏膜由单层、扁平鳞状上皮细胞和少量微绒毛构成,细胞界限清楚,呈多边形,纤毛细胞数量较咽鼓管鼓室口处明显减少。LPS注射组、ETO组、ETO+LPS组大鼠中耳黏膜明显增厚,在咽鼓管鼓室口可见纤毛细胞减少、杯状细胞增多,同时在上鼓室上皮层观察到数量较多的假复层立方上皮细胞。而ETO+LPS+BPI组大鼠为近似正常的中耳黏膜,上鼓室处的黏膜为单层鳞状上皮细胞和少量微绒毛。结论:LPS和ETO通过中耳黏膜的炎症反应削弱黏液纤毛输送系统的功能,导致OME的发生和迁延。BPI与LPS有特异的亲和作用,抑制LPS导致的炎症反应,恢复有效的黏液纤毛输送系统,而对正常黏膜没有损伤,是一种潜在的治疗和预防慢性中耳炎的有效药物。

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鞘内注射NOS抑制剂对神经痛大鼠脊髓背角内磷酸化CREB表达的影响
杨桐伟, 宋雪松, 王苹, 王春喜
J4. 2009 (6):  1020-1023. 
摘要 ( 994 )   [HTML]( )

目的:观察鞘内注射一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对神经病理性疼痛大鼠痛行为及脊髓背角内磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响,阐明脊髓背角内不同信号传导通路在神经病理性疼痛中的交互作用。方法:成年雄性Wistar大鼠制备背根神经节压迫性损伤(CCD)模型,按照注射药物不同随机分为L-NAME组、AG组、8-Br-cGMP组、7-NI组、Cremophor组和PBS组,采用热痛刺激仪测定CCD大鼠鞘内注射前后热痛缩爪潜伏期的变化,应用免疫组织化学方法检测大鼠脊髓背角内pCREB的表达。结果:CCD第5天大鼠术侧脊髓背角内pCREB免疫反应阳性神经元明显增多,阳性神经元位于脊髓背角全层。与PBS组比较,L-NAME组、AG组和7-NI组于鞘内注射后2 h术侧脊髓背角内pCREB免疫反应阳性神经元数量明显减少(P<0.01),8-Br-cGMP组术侧脊髓背角内pCREB免疫反应阳性神经元数量增加(P<0.05),鞘内应用NOS抑制剂L-NAME、AG或7-NI组能够明显减少CCD大鼠脊髓背角中pCREB表达,
同时伴有大鼠痛行为的改善。结论:CREB参与介导NO-cGMP-PKG信号传导通路在CCD引起的神经病理性痛的形成与维持。

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嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中 5-HT及5-HIAA 含量的影响及其机制
李鸿梅, 何海涛, 李昆, 刘剑凯, 洪敏
J4. 2009 (6):  1024-1028. 
摘要 ( 1154 )   [HTML]( )

目的:研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中 5-羟色胺(5-HT)及 5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响及其作用机制。方法:剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110 只正常雄性 Wistar 大鼠随机分为对照组(C)、海洛因组(H)、海洛因补偿 AMP + GMP 组(HAG)、海洛因补偿 AMP 组(HA)、海洛因补偿 GMP 组(HG),每组 22只。应用荧光分光光度法测定大鼠脑组织中5-HT和 5-HIAA 的含量,ELISA 法测定大鼠脑组织中色氨酸羟化酶(TPH)的含量,免疫组化法检测脑组织中 TPH 蛋白的表达,每组中有 8 只鼠于第 10 天第 1 次给药后 4 h 观察戒断症状,每组中有4只鼠用于免疫组化。结果:与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠的咀嚼、齿颤及睑下垂次数均明显减少 (P<0.05)。与 C 组比较, H 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较, HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 5-HT 和 5-HIAA 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 TPH 含量显著下降 (P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 和 HG 组大鼠脑组织中 TPH 含量均有所升高 (P<0.05)。与 C 组比较,H 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数明显减少(P<0.05);与 H 组比较,HAG、HA 及 HG 组大鼠脑组织中 THP 表达的阳性细胞计数有所升高(P<0.05)。结论:嘌呤核苷酸补偿能够减轻海洛因依赖大鼠的戒断症状,并能增加大鼠脑组织中 5-HT 和 TPH 的含量。

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聚肌胞对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响
田原僮, 钟毅, 曾靖, 赵雪俭, 赵丽娟
J4. 2009 (6):  1029-1031. 
摘要 ( 1229 )   [HTML]( )

目的: 探讨聚肌胞对小鼠前列腺癌组织内血管生成的影响,阐明其可能机制。 方法: 将16只C57BL6/J纯系荷瘤小鼠按瘤重随机分为对照组和聚肌胞组,分别于瘤内注射生理盐水和聚肌胞(1次?3 d-1),用药7次后切除瘤灶,计算瘤重抑制率和瘤指数。肿瘤组织HE染色,镜下观察前列腺癌组织形态学变化及血管分布情况。肿瘤组织血管内皮生长因子(VE
GF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白免疫组织化学染色,观察其蛋白表达情况。结果:聚肌胞组小鼠前列腺癌的瘤重抑制率为67.85%,瘤指数为(5.42±0.17)%;对照组瘤指数为(14.45±1.06)%,两组比较差异有显著性( P<0.01)。聚肌胞组和对照组前列腺癌组织中VEGF阳性染色肿瘤细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(9.64±2.90)% 和(37.91±7.62)%,eNOS阳性染色肿瘤细胞计数占同类肿瘤细胞的比例分别为(22.00±8.07)%和(54
.43±10.39)%,两组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论: 聚肌胞通过降低小鼠前列腺癌组织中VEGF和eNOS蛋白的表达,抑制小鼠前列腺癌组织内血管的生成,减少肿瘤组织供
氧和养分,对小鼠前列腺癌产生间接抑制作用。

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长白忍冬花蕾化学成分的分离与结构鉴定
崔晶, 王广树
J4. 2009 (6):  1032-1035. 
摘要 ( 1116 )   [HTML]( )

目的:分析长白忍冬(Lonicera ruprechtiana Regel.)花蕾中的化学成分,为进一步开发利用其药用价值提供实验数据。方法:以长白忍冬的干燥花蕾为原材料,用70%的乙醇冷浸提取,经大孔树脂柱色谱纯化,用硅胶、ODS柱色谱分离其化学成分,利用紫外光谱测定仪、红外光谱仪、核磁共振仪测定其化学成分的光谱学数据。结果:根据在薄层色谱中呈现单一斑点结果,从长白忍冬花蕾中分离得到5个化合物,经理化常数测定及光谱学数据分析鉴定其化学结构。其结构分别为:胡萝卜苷(Ⅰ),7S-O-甲基莫罗忍冬苷(Ⅱ),新橙皮糖苷(Ⅲ),苯甲基-O-β-D-吡喃木糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅳ),6′-O-β-D- 呋喃芹糖基獐牙菜苷(Ⅴ)。结论:该5个化合物均系首次从长白忍冬花蕾中分离得到。  

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人参皂甙Rh2对人脑恶性胶质瘤SHG-44细胞抗肿瘤作用的蛋白质组学分析
洪新雨, 崔佳乐, 李文臣, 陈勃, 罗毅男
J4. 2009 (6):  1036-1039.  DOI:
摘要 ( 1225 )   [HTML]( )

目的:利用蛋白质组学研究技术分离、鉴定人脑恶性胶质瘤SHG-44细胞经人参皂甙Rh2(G-Rh2)作用后差异表达蛋白,探讨G-Rh2抗胶质瘤作用机制。方法:提取32 μmol?L-1 G-Rh2处理72 h后的SHG-44细胞及空白对照组细胞总蛋白;通过双向凝胶电泳分离蛋白质
,选取2D图谱中差异表达≥1.5倍且P<0.05的蛋白质斑点,使用基质辅助激光解析离子飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行肽指纹图谱(PMF)鉴定。结果:与空白对照组比较,SHG
-44细胞经G-Rh2作用后,双向电泳发现了20个差异蛋白质点,其中16个蛋白质点表达下调,4蛋白质点上调。质谱分析了前5个差异显著的下调蛋白质点,分别为丝切蛋白1(cofilin 1)、磷酸甘油酸激酶(phosphoglycerate kinase,PGK)、过氧化物氧化还原酶1(peroxiredoxin 1,Prx 1)、热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)。结论:差异表达的蛋白质可能参与了G-Rh2对人脑恶性胶质瘤的抗肿瘤作用。

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hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响
许娜, 袁红艳, 王凤丽, 廖翔宇, 刘超, 常雅萍
J4. 2009 (6):  1040-1043. 
摘要 ( 1278 )   [HTML]( )

目的:观察人源抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对Lewis肺癌细胞增殖的抑制作用,探讨其抗肿瘤的可能机制。方法:将含hCAP-18/LL-37的真核表达质粒瞬时转染Lewis肺癌细胞,同时设正常对照组、转染空载体组和转染重组基因组,MTT比色检测Lewis肺癌细胞转染后48和72 h的增殖活性,流式细胞术和荧光染色检测细胞凋亡。免疫细胞化学染色检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:转染重组基因组Lewis细胞增殖受到明显抑制,与转染空载体组比较,转染后48和72 h的抑制率分别为3.51%和17.65%;流式细胞术检测转染重组基因组凋亡率为7.4%,正常对照组凋亡率为4.4%,转染空载体组凋亡率为5.2%;免疫细胞化学染色,转染重
组基因组Lewis细胞Bax蛋白表达增加,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);Bcl-2蛋白表达减少,但与对照组比较差异无显著性(P<0.05)。结论:hCAP-18/LL-37基因瞬时转染Le
wis肺癌细胞,可抑制肿瘤细胞生长、调控凋亡相关基因Bax、 Bcl-2表达,诱导肿瘤细胞凋亡。

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Bcl-2及Bax在异丙肾上腺素致心肌坏死模型大鼠心肌中的表达及意义
李相军, 杨莉, 任立群, 石艳, 孙波, 苗春生
J4. 2009 (6):  1044-1047. 
摘要 ( 1419 )   [HTML]( )

目的:探讨Bcl-2及Bax在异丙肾上腺素(Isp)致心肌坏死模型大鼠心肌中的表达及意义。方法:40只大鼠随机分为4组:正常对照组及注射Isp后12 h、1周和3周组。除正常对照组外,其他各组大鼠皮下注射Isp(15 mg?kg-1体重),并于给药后12 h、1周和3周时取对应组大鼠心脏,用免疫组化法及RT-PCR法检测各组大鼠心肌组织中Bcl-2及Bax的表达。结果:免疫组化结果显示,注射Isp后 12 h及1周组大鼠心肌组织中Bax表达明显高于正常对照组(P<0.05);注射Isp后12 h、1周及3周组大鼠心肌组织Bcl-2表达量均明显低于正常对照组(P<0.05);注射Isp后12 h、1周、3周后,各组大鼠心肌组织Bcl-2/Bax比值均低于正常对照组(P<0.05)。RT-PCR结果显示,注射Isp后各组大鼠心肌组织Bax mRNA表达量均明显高于正常对照组(P<0.05),且在注射Isp后1周时,Bax mRNA表达量达到高峰;注射Isp后,各组大鼠心肌组织Bcl-2 mRNA表达量均明显低于正常对照组大鼠(P<0.05);与正常对照组大鼠比较,在注射Isp后 12h及1周,各组大鼠心肌组织Bcl-2/Bax比值明显增高(P<0.05)。结论:心肌细胞的凋亡是心肌纤维化的病理基础,而Bcl-2家族基因及蛋白表达变化在此过程中起主要调控作用。

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来曲唑诱导多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中FSH受体的表达及其意义
郭洪胜, 安长新, 陈东
J4. 2009 (6):  1048-1051. 
摘要 ( 1457 )   [HTML]( )

目的:研究来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠卵巢组织中促卵泡刺激素受体(FSHR)基因的表达,为该模型的应用提供一定的理论依据。方法:40只雌性SD大鼠随机分为模型组和对照组,每组20只,模型组应用来曲唑诱导大鼠PCOS模型,对照组不作任何处理。应用放射免疫法测定大鼠血清性激素水平;HE染色观察卵巢组织学变化,Real-time-PCR、免疫组织化学和Western blotting法检测FSHR基因在卵巢组织中的表达。结果:与对照组比较,模型组血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度显著增高(P<0.05),雌二醇(E2)、孕酮(P)浓度降低(P<0.05)。卵巢质量两组间比较差异无显著性(P>0.05)。与对照组比较,模型组可见囊状扩张卵泡明显增多,卵巢白膜增厚,黄体数量明显减少。模型组卵巢组织中FSHR mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。结论:来曲唑诱导的PCOS大鼠卵巢组织中FSHR基因表达水平与人类PCOS患者相似,该模型是研究PCOS病理机制的一种理想的动物模型。

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奥曲肽对大鼠肝星状细胞增殖的抑制作用
戴永美, 蔡立勉, 林棱
J4. 2009 (6):  1052-1056. 
摘要 ( 1132 )   [HTML]( )

目的:观察奥曲肽(OCT)对肝星状细胞(HSC)Ⅰ型、Ⅲ型胶原和基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因及蛋白表达的影响,阐明其抗肝纤维化的机制。方法:体外培养rHSC-99细胞,以不同浓度OCT作用24 h后,MTT法观察细胞增殖,ELISA法测定上清液中Ⅰ型、Ⅲ型胶原,半定量RT-PCR法检测MMP-2、Ⅰ型及Ⅲ型胶原mRNA表达。结果:与对照组比较,OCT能显著抑制体外培养的rHSC-99增殖(P<0.05),在一定剂量范围(1~8 μg?L-1)内,随着OCT浓度升高,细胞增殖抑制率增加。与对照组比较,OCT各组细胞上清液中Ⅰ型、Ⅲ型胶原浓度明显降低(P<0.05),且Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。与对照组比较,OCT组MMP-2 mRNA呈高表达(P<0.05)。结论:OCT能抑制HSC增殖,下调Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA及其蛋白表达,上调MMP-2 mRNA表达水平,这可能是其抗肝纤维化作用机制之一。

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亚细胞定位PTEN基因真核表达载体的构建与鉴定
李洪凌, 朱向辉, 姜新, 曲雅勤, 李亮
J4. 2009 (6):  1057-1060. 
摘要 ( 1690 )   [HTML]( )

目的:构建人野生型亚细胞定位PTEN基因真核表达载体,为进一步研究其抗肿瘤作用奠定基础。 方法:以胎盘组织RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的基因片段。PCR产物与T载体连接,转化大肠杆菌,获得T-PTEN质粒,进行酶切鉴定和测序。以T-PTEN质粒为模板,利用PCR技术将核定位信号(NSL)加入PTEN序列。PCR产物与T载体连接,转化大肠杆菌,获得T-NSL-PTEN质粒。真核表达载体pcDNA3.1及T-NSL-PTEN质粒经EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后连接,转化大肠杆菌,获得重组载体pcDNA3.1-NSL-PTEN,进行酶切和测序鉴定。结果:重组质粒PUM-PTEN酶切在1 200 bp处见目的片段,与预期结果符合。测序结果显示基因序列与目的基因完全一致;重组质粒PUM-NSL-PTEN酶切在1 200 bp处见目的片段,测序结果显示基因序列与设计一致,核定位信号成功加入;重组质粒pcDNA3.1-PTEN酶切在1 200 bp处见目的片段,测序结果显示基因序列与目的基因相同;重组载体pcDNA3.1-NSL-PTEN经双酶切和测序证实了其正确性EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切在1 200 bp处见目的片段,与预期结果一致。测序结果显示,核定位信号成功加入,其后是阅读框架正确的PTEN基因序列。结论:成功构建可表达亚细胞定位PTEN的真核表达载体pcDNA3.1-NSL-PTEN。

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驱铅益智口服液对铅染毒大鼠的治疗作用
韩长城, 于庆海, 康维钧, 宋波, 唐龙妹
J4. 2009 (6):  1061-1064. 
摘要 ( 1473 )   [HTML]( )

目的:探讨驱铅益智口服液对铅中毒大鼠的治疗效果,为预防和治疗铅中毒提供实验室依据。方法:72只SD大鼠随机分为6组:1组为阴性对照组(蒸馏水灌胃),其余5组用2%醋酸铅制备铅染毒模型后分为阳性对照组(蒸馏水灌胃)、EDTA组(0.5% EDTA-2Na腹腔注射)和低、中、高剂量驱铅益智口服液治疗组。干预3周后,断头取血并留取肝脏、肾脏、股骨,采用氢化物发生-原子吸收光谱法测定铅含量,光镜下观察各种组织病理形态学变化。结果: 与阳性对照组比较,3种剂量口服液组血液、肝脏、肾脏、股骨组织的铅水平显著降低(P<0.05或P<0.01);3种剂量口服液组血液和肾组织铅水平下降百分率比较差异均无显著性(P>0.05);低剂量口服液组肝组织铅水平下降百分率高于高剂量组和EDTA组(P<0.05或P<0.01);高剂量口服液组股骨组织铅水平显著降低,与低、中剂量口服液组和EDTA组比较差异有显著性(P<0.01)。光镜下观察各脏器组织结构和细胞形态无异常变化。结论: 驱铅益智口服液对铅染毒大鼠具有安全、有效的治疗作用。

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微量元素作为甲醛损伤生物标志物的水平分析
于敬红, 李环, 孙维琦, 徐晓磊, 高久春
J4. 2009 (6):  1065-1067. 
摘要 ( 1111 )   [HTML]( )

目的:通过观测甲醛对小鼠肝脏、全血微量元素含量的影响,探讨甲醛损伤的生物标志物。方法:80只健康昆明小鼠随机分为对照组及甲醛染毒低剂量组(1/40LD50)、中剂量组(1/20LD50)和高剂量组(1/10LD50),每组20只,采用吸入染毒方式,每天2 h,连续染毒3及6周后断头处死,分别测定小鼠肝脏和全血Cu、Fe、Zn、Mn的含量。结果:染毒3周高剂量组Fe、Zn、Mn含量及染毒6周中、高剂量组小鼠肝脏Fe、Zn含量明显低于对照组(P<0.05),染毒3周高剂量组小鼠全血Mn、Zn含量明显低于对照组(P<0.05),染毒6周后中、高剂量组小鼠全血Fe、Zn明显低于对照组(P<0.05);染毒不同时间的各剂量组小鼠肝脏及全血Cu含量均无显著变化(P>0.05)。结论:甲醛可引起小鼠肝脏及全血Fe、Zn及Mn含量降低,Mn、Zn及Fe可作为甲醛损伤的标志物。

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转录介导融合基因RBM6-RBM5在肿瘤细胞及组织中的表达
王珂, 张捷, 李然伟
J4. 2009 (6):  1068-1073. 
摘要 ( 1304 )   [HTML]( )

目的: 鉴定RBM6-RBM5融合基因的存在,研究其与肿瘤发生的关系。方法:采用GLC20、MDA、MB、231、 Jurkat、TF-1、MCF-7、Hela、BT-474、A431、K562及Raji 10种肿瘤细胞株,肺、卵巢、骨骼肌、皮肤、脾脏、子宫、心脏、骨、脑、淋巴结、胰腺、前列腺及睾丸等肿瘤组织及其相应正常对照组织的cDNA,5例乳腺癌组织,以巢式PCR方法检测融合基因的存在,并通过QPCR方法研究融合基因的产生与RBM6、RBM5基因表达水平之间的关系。结果:RBM6-RBM5融合基因首次在MDA、MB、231细胞株中获得鉴定,序列分析发现该基因为RBM
6和RBM5的融合体,该融合体不包括RBM6的外显子20、21以及RBM5的外显子1。该融合基因在10种肿瘤细胞株及部分肿瘤组织中表达,但在正常组织中却未见表达。融合基因的表达与RBM6和RBM5 mRNA 的表达有关;RBM6和RBM5 mRNA的表达水平在融合基因阳性的肿瘤组织中明显高于融合基因阴性的肿瘤组织。结论:融合基因的表达与肿瘤发生有关,高水平的RBM6和RBM5 mRNA水平可能是融合基因产生的原因之一。 
[关键词] RNA结合基序蛋白; 转录介导融合基因;肿瘤细胞,培养的

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金银花对大鼠体内和体外RBL细胞的抗氧化保护作用及其机制
宫璀璀, 郑乃刚, 吴景兰, 赖泽仁, 何培霞
J4. 2009 (6):  1074-1078. 
摘要 ( 1358 )   [HTML]( )

目的:从细胞和分子水平探讨金银花(HS)对机体内外的抗氧化作用及其机制,为金银花的临床应用提供理论依据。方法:体外培养的人肝RBL细胞与0.25 g?L-1的金银花共培养前或后加H2O2(氧化剂),应用MTT和TUNEL实验检测细胞生存率和凋亡率,免疫组织化学/免疫印迹检测NF-κB、HSP-70、Bcl-2、Bax及 Caspase-3 表达水平,检测细胞内抗氧化酶体系的水平。建立金银花大、小剂量灌胃的大鼠动物模型,检测血浆抗氧化酶体系的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱苷肽(GSH)、丙二醛(MDA)的水平。结果:金银花对RBL细胞的抗氧化和抗凋亡作用中,前保护(先加金银花,后加H2O2)高于后保护(先加H2O2,后加金银花)的效应;下调NF-κB和HSP-70的表达和Bcl-2/Bax比值,且前保护组凋亡率低于后保护组;同时也上调细胞内抗氧化酶体系的水平。金银花灌胃1~2 h后,大鼠血浆中T-AOC、GSH-Px、GSH、SOD含量较灌胃前显著增高(P<0.05),而MDA含量明显减低(P<0.05)。结论:金银花可通过上调体
内抗氧化酶体系并下调NF-kB信号传导途径呈现抗氧化、抗凋亡的保护作用。
 

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自体肺体外循环对肺功能的保护作用
林柏松, 张秀和, 张柏民, 姜亦忠, 李哲, 孙耀
J4. 2009 (6):  1079-1083. 
摘要 ( 1115 )   [HTML]( )

目的:探讨以自体肺取代人工肺的体外循环(CPB)方法对犬肺功能的保护效果。方法: 12 只杂种犬随机分为对照组及实验组(每组6只)。对照组在CPB期间使用膜式氧合器,实验组在CPB期间使用自体肺进行氧合,两组均阻断主动脉90 min、辅助循环30min, CPB前及停止后15及60 min监测气道峰压、肺血管阻力和肺静脉血氧分压,留取血标本进行生化分析,对肺组织进行光、电镜观察。结果:CPB后15和60 min,对照组气道阻力明显高于CPB前(P<0.05),实验组与CPB前比较差异无显著性(P>0.05),实验组CPB后15和60 min均低于对照组(P<0.05);CPB后15和60 min各组肺血管阻力均明显高于CPB前(P<0.01),实验组明显低于对照组相应时间点(P<0.01);CPB后15和60 min各组氧指数均明显高于CPB前(P<0.01),实验组明显低于对照组相应时间点(P<0.01);实验组CPB后60 min 肺泡-动脉氧压力差(P[A-a]O2)明显低于对照组(P<0.001)。实验组肺组织MDA含量及支气管肺泡灌洗液(PAL)中性粒细胞计数明显低于对照组(P<0.001,P<0.05)。实验组组织学改变明显轻于对照组(P<0.001)。结论: CPB后肺脏形态和功能有明显变化,自体肺体外循环对犬肺形态和功能有良好的保护作用。

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甲肝-麻疹-水痘联合疫苗对细胞免疫功能的影响
李英华, 关锋, 王琦, 代玉银, 林承赫, 刘景晔, 王鹏富
J4. 2009 (6):  1084-1087. 
摘要 ( 1053 )   [HTML]( )

目的: 研究甲肝-麻疹-水痘联合疫苗对细胞免疫功能的影响,阐明联合疫苗的作用强度。
方法: 用甲肝-麻疹-水痘联合疫苗、甲肝疫苗、麻疹疫苗、水痘疫苗分别对小鼠进行注射,第2周开始采血,采用流式细胞技术检测T淋巴细胞表面标记物CD3+﹑CD4+﹑CD8+ 的百分含量。用ConA刺激淋巴细胞,计算刺激指数(SI)反映淋巴细胞转化程度。姬姆萨染色,镜检,计算吞噬百分率检测巨噬细胞的吞噬功能。RT-PCR检测细胞因子IFN-γ、IL-2的mRNA表达水平。结果:流式细胞技术检测结果显示,联合疫苗组的CD3+/CD8+比值明显高于单价疫苗组(P<0.05)。淋巴细胞转化实验中,联合疫苗组SI明显高于单价疫苗组(P<0.05)。联合疫苗组巨噬细胞的吞噬百分率明显高于单价疫苗组(P<0.05)。联合疫苗组IFN-γ、IL-2的mRNA表达水平明显高于单价疫苗组 (P<0.05)。结论: 甲肝-麻疹-水痘联合疫苗增强机体细胞免疫功能的作用强于单价疫苗。

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痛必定冻干粉针对脊髓中枢的镇痛作用及其机制
曹军,王中男,孙淑娟
J4. 2009 (6):  1088-1091. 
摘要 ( 1097 )   [HTML]( )

目的:研究痛必定冻干粉针对慢性结扎损伤(CCI)模型活体大鼠脊髓在体WDR神经元的作用,阐明痛必定的脊髓中枢镇痛机理,从细胞水平研究痛必定是否具有药物依赖性。方法:采用电生理细胞外记录技术,在CCI活体大鼠的脊髓腰膨大节段,寻找并记录给予痛必定20 mg?kg-1前以及给药后不同时间段同一活体WDR神经元的电活动:观察给药前以及给药后2、4、8和10 min同一活体WDR神经元的C反应放电数;观察给药前及给药后1、2、4和6 min同一活体细胞的自发放电数;观察 wind-up现象。结果: C反应放电数共记录到8个细胞, 给药后2、4、8和10 min与给药前平均C反应放电数比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。观察细胞的自发放电数共记录到12个细胞,其中6个在给药后立即停止自发放电, 6个在给药后6 min以内放电停止,给药后2和4 min与给药前平均自发放电数比较差异有显著性(P<0.01)。实验共观察到5次wind-up现象,给药后此现象均被抑制。结论:痛必定冻干粉针的脊髓中枢镇痛是通过对WDR神经元的作用来完成的,本研究从细胞水平证实痛必定无药物依赖性。

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云南白药对大鼠骨骼肌急性损伤后炎症反应和卫星细胞再生的影响
孙茹|赵立君|杨熹洁| 邴国强
J4. 2009 (6):  1092-1096. 
摘要 ( 1144 )   [HTML]( )

目的:研究云南白药对大鼠急性骨骼肌损伤后炎性细胞和肌再生细胞(卫星细胞)的作用及其机理。方法:制备跑台诱导大鼠骨骼肌急性损伤模型,造模24 h后,模型大鼠左侧后肢喷洒云南白药为治疗侧,右侧喷洒等量生理盐水作为非治疗侧,在损伤后2、4、7、10和14d分别取4只大鼠后肢的治疗侧和非治疗侧腓肠肌(快肌)和比目鱼肌(慢肌)做HE切片,在光学显微镜下观察炎性细胞和卫星细胞的数量及形态学变化。结果:药物治疗侧快肌在损伤后的第2、4、7天炎性细胞较非治疗侧明显减少(P<0.01),肌细胞的坏死程度较轻;云南白药治疗侧慢肌在损伤后的第2天炎性细胞较非治疗侧明显减少(P<0.01)。药物治疗侧的快肌和慢肌在损伤后的第7、10天损伤的肌纤维部分得到修复,卫星细胞的数量较非治疗侧明显增多(P<0.01)。结论:云南白药能够抑制炎性细胞对损伤后肌肉组织的破坏作用,缩短炎症反应进程,促进损伤后肌纤维的修复,对骨骼肌卫星细胞的增殖有一定的促进作用。

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PTGER3基因多态性与精神分裂症的关系
张迪,俞琼,杨军,陈燕芬,史杰萍,陶然,桑红,于雅琴
J4. 2009 (6):  1097-1102. 
摘要 ( 1283 )   [HTML]( )

目的:探讨在中国北方汉族人群中PTGER3基因rs12026099、rs2250312和rs1022528基因多态性与精神分裂症的关系。 方法:采用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测中国北方汉族240个由精神分裂症患者及其健康父母组成的核心家系的基因型,应用遗传统计学方法进行单倍型相对风险分析(HRR)、传递不平衡检验(TDT)、单倍型分析和临床症状关联分析。 结果:患者组和父母组PTGER3基因的rs12026099、rs2250312和rs1022528基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);HRR分析结果显示,父母传递和未传递给患病子女的3个位点的等位基因频数分布差异均无显著性(χ2= 1.396,P>0.05;χ2= 0.042,P>0.05;χ2= 0.119,P>0.05);TDT分析结果显示,杂合子父母双亲的3个位点的不同等位基因传递概率均未偏离50% (χ2= 1.380,P>0.05;χ2= 0.043,P>0.05;χ2= 0.126,P>0.05);单倍型分析结果显示,rs2250312和rs1022528位点等位基因位于同一单倍型域结构内,但两位点所形成的单倍型与精神分裂症无关联(χ2=6.500,P>0.05);单核苷酸多态性(SNPs)位点与精神分裂症临床症状的关联性χ2检验结果显示,rs12026099位点与精神分裂症的情感淡漠和偏执型精神分裂症的思维逻辑障碍有
关联(χ2=4.578,P=0.032;χ2=6.100,P=0.047),rs2250312位点与偏执型精神分裂症的思维逻辑障碍和意志贫乏有关联(χ2=4.471,P=0.034;χ2=4.206,P=0.040),rs1022528位点与偏执型精神分裂症的思维逻辑障碍有关联(χ2=4.108,P=0.043)。结论:在中国北方汉族人群中PTGER3基因上的rs12026099、rs2250312和rs1022528位点可能与精神分裂症的发病无关联,而与精神分裂症的临床症状有关联。

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宁夏回族原发性高血压人群HLA-DQB1基因多态性分析
徐金瑞, 杨易, 张东涛, 高力扬, 王玉炯
J4. 2009 (6):  1103-1106. 
摘要 ( 1143 )   [HTML]( )

目的:分析HLA-DQB1基因多态性在宁夏回族人群原发性高血压(EH)患者中的分布,阐明宁夏回族人群原发性高血压的易感性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)的方法对宁夏回族66例健康个体(对照组)及84例EH患者(病例组)的HLA-DQB1位点进行基因分型,应用遗传学统计方法分析宁夏回族原发性高血压人群DQB1基因多态性。结果:病例组等位基因DQB1*0301、*0401、*0601、*0604/5/6/7、*0302频率显著高于对照组(P<0.01或P<0.05);病例组等位基因DQB1*0501、*0602、*0603/8、*0606、*0402、*0604/5/6/8频率显著低于对照组(P<0.01或P<0.05)。结论:DQB1*0301、*0401、*0601、*0604/5/6/7、*0302与宁夏回族人群原发性高血压的易感性有关,而DQB1*0501、*0602、*0603/8、*0606、*0402、*0604/5/6/8有可能是宁夏回族人群原发性高血压的保护因子。

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慢性乙型肝炎患者胸腺肽治疗前后血清Th1/Th2细胞因子水平变化及临床意义
刘元元, 马振华, 朴荣利, 牛俊奇
J4. 2009 (6):  1107-1110. 
摘要 ( 1513 )   [HTML]( )

目的:探讨慢性乙型肝炎患者应用胸腺肽治疗前后血清中Thl/Th2型细胞因子水平的变化,阐明其与病情、疗效及病毒学的关系。方法:慢性活动性乙肝患者(治疗组)19例,正常对照组10例,治疗组每周2和5注射胸腺肽α1 mL,于治疗前、治疗13周、21周应用流式细胞仪技术检测细胞因子水平、HBV DNA、肝功生化指标,正常对照者随机检测1次,观察治疗前后患者血清IL-2、IFN、TNF、IL-4、IL-6及IL-10的变化,并分析细胞因子含量与生化应答及病毒学应答的关系。结果:应用胸腺肽治疗后,患者Th细胞分泌的细胞因子(IL-2、IFN、TNF、IL-4、IL-6、IL-10)较治疗前增多(P<0.05),应答组Th1细胞因子(IL-2、IFN、TNF)的水平高于无应答组,无应答组Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的水平高于应答组(P<0.05)
。按生化学应答分析,细胞因子水平能反应患者治疗效果,病毒载量应答组细胞因子水平低于部分应答组,部分应答组低于无应答组,应答组细胞因子〖JP3〗水平低于无应答组,细胞因子增长趋势与病毒学应答治疗效果呈反向趋势(P<0.05)。结论:慢性乙型肝炎患者应用胸腺肽治疗后血清中Thl/Th2型细胞因子的变化有助于机体对HBVDNA的清除。

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卡维地洛对老年舒张性心力衰竭患者心功能及糖、脂代谢的影响
郑雁, 孟霖, 董均树, 吴金义
J4. 2009 (6):  1111-1114. 
摘要 ( 1084 )   [HTML]( )

目的:探讨卡维地洛对老年舒张性心力衰竭(DHF)患者心功能及糖、脂代谢的影响,阐明其改善心功能的作用。方法:将76例老年舒张性心力衰竭的患者随机分为治疗组34例及对照组42例,全部给予常规抗舒张性心力衰竭治疗,治疗组加用卡维地洛(从小剂量开始),疗程3~6个月。应用超声心动图(UCG)及无创心功能检测仪(Bioz.com)测定两组治疗前后心脏舒张功能指标。检测两组空腹血糖及甘油三酯、胆固醇水平。结果:治疗组患者在治疗后总有效率明显高于对照组(P<0.05),反映左室舒张功能的指标优于治疗前(P<0.05),与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。治疗组用药前后血糖、血脂变化差异无显著性(P>0.05),与对照组比较血糖、血脂均降低(P<0.05)。治疗过程中,两组均未发生明显不良反应,无一例停药。结论:应用卡维地洛可改善老年舒张性心力衰竭患者的左室功能,且对糖、脂代谢无明显影响。

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老年冠心病患者血浆同型半胱氨酸和C-反应蛋白水平的变化及临床意义
杨文, 张艳华, 沙春蕊
J4. 2009 (6):  1115-1118. 
摘要 ( 993 )   [HTML]( )

目的:探讨老年冠心病患者血浆同型半胱氨酸(Hcy)和C-反应蛋白(CRP)水平变化,阐明老年冠心病患者发病的危险因素。方法:将90例老年冠心病患者分为稳定型心绞痛(SAP)组30例、不稳定型心绞痛(UAP)组30例及急性心肌梗死(AMI)组30例。同时选择60岁以上体检健康的老年人30例为对照组。所有研究对象空腹采血后分离血浆,检测血浆Hcy和CRP。结果:老年冠心病各组TC和TG均高于对照组(P<0.05),TG升高呈AMI组>UAP组>SAP组趋势。老年冠心病各组血浆Hcy和CRP水平均高于对照组(P<0.05),老年冠心病各组之间血浆Hcy和CRP水平比较差异仍有显著性(P<0.05),呈AMI组>UAP组>SAP组趋势。结论:老年冠心病与Hcy和CRP水平升高有关,高同型半胱氨基(HHcy)血症和CRP水平升高可能是老年冠心病发病的一个危险因素。同时,血脂异常与HHcy血症和CRP水平升高有关联。随着老年冠心病严重程度的增加,血浆Hcy和CRP水平也增高,可以通过监测血浆Hcy和CRP水平增高程度来预测老年冠心病病变的严重程度。

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survivin和caspase-9在原发性肝细胞癌组织中的表达及意义
王举, 窦忠霞, 王会春, 张文梁, 王有德
J4. 2009 (6):  1119-1122. 
摘要 ( 1234 )   [HTML]( )

目的:研究survivin和caspase-9在原发性肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与细胞凋亡的关系。方法:应用免疫组化SP法检测42例HCC、42例癌旁组织和12例正常肝脏组织石蜡
切片中survivin和caspase-9表达,应用TUNEL法检测细胞凋亡。结果:survivin在正常肝脏组织中无表达,在癌旁组织和HCC中的表达率分别为4.76%和73.81%,二者比较差异有显著性(P<0.01);caspase-9在正常肝脏组织、癌旁组织和HCC中的表达率分别为83.33%、80.95%和47.62%,HCC与前二者比较差异有显著性(P< 0.05),而癌旁组织和正常组织比较差异无显著性(P>0.05);survivin和caspase-9在HCC中的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小无明显关系,但与肿瘤组织学分级和转移有密切关联。结论:survivin在HCC中稳定高效表达,可能通过抑制caspase-9而抑制细胞凋亡;survivin高表达和caspase-9低表达可作为HCC独立的不良预后因子。

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不同剂量低能量激光照射对体外人成骨样细胞增殖和分化的影响
李秋实, 张天夫, 周延民
J4. 2009 (6):  1123-1126. 
摘要 ( 1144 )   [HTML]( )

目的:探讨不同剂量低能量激光(LLL)照射对人成骨样细胞增殖和分化的影响,为LLL的临床应用提供实验依据。方法:对数生长期人成骨细胞MG63随机分为3组,采用Ga-Al-As半导体激光器(808 nm,66 mW)进行照射,照射组1的剂量为1 J?cm-2,照射组2的剂量为 3 J?cm-2,对照组不进行激光照射。采用MTT法检测细胞增殖活力,免疫组化法检测细胞分化的标志骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原蛋白(Coll Ⅰ)的表达情况。结果:与对照组比较,照射组1的细胞增殖活力和OPN、Coll Ⅰ表达量差异无显著性(P>0.05);24和48 h照射组2的细胞增殖活力明显高于对照组(P<0.05),且24 h时OPN、Coll Ⅰ表达量明显高于对照组(P< 0.05)。结论:3 J?cm-2剂量的低能量激光能促进人成骨样细胞的增殖和分化,可能促进骨修复。

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宫颈癌HeLa细胞中Bcrp1+、CK17+及CD44v5+表型细胞的检测与分离
张松灵, 张晓霞, 于晓伟, 李玉林
J4. 2009 (6):  1127-1130. 
摘要 ( 1238 )   [HTML]( )

目的:检测Bcrp1、CK17及CD44v5在宫颈癌HeLa细胞中的表达情况及相互关系,推测该3种抗体成为宫颈癌干细胞标记物的可能。方法:采用免疫荧光标记物流式细胞仪分选并检测HeLa细胞中的CK17+、CD44v5+、Bcrp1+表型细胞;利用免疫细胞化学染色法,检测Bcrp1+ 及Bcrp1-1两组HeLa细胞中CK17及CD44v5的表达情况。结果: HeLa细胞中存在CD44v5+细胞,所占比例为0.1%,CK17+细胞为0.7%,Bcrp1+细胞为11%;Bcrp1+组HeLa细胞中存在CK17+及CD44v5+细胞,而Bcrp1-组中则无,组间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:表达CK17及CD44v5的HeLa细胞同时表达Bcrp1转运蛋白,CK17及CD44v5均有可能成为宫颈癌干细胞的标记物。

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D24和SLeX在肺癌组织中的表达及意义
姜爱英, 陈志营, 谭平
J4. 2009 (6):  1131-1134. 
摘要 ( 1480 )   [HTML]( )

目的:探讨CD24和SLeX在肺癌组织中的表达及意义,阐明其与肺癌发生和发展的关系。方法:采用免疫组织化学方法分析CD24和SLeX在70例肺癌组织中的表达。结果:CD24和SLeX在非小细胞肺癌组织中阳性表达率分别为41.3%和63.5%,在小细胞肺癌组织中分别呈无表达和弱表达。CD24和SLeX在腺癌组织中阳性表达率分别为55.9%和76.5%,均明显高于鳞癌(24.1%
和48.3%)(P<0.05)。在肺腺癌、鳞癌组,CD24阳性表达与患者年龄、性别、吸烟指数、肿
瘤分期分级无关联(P>0.05)。而SLeX肺腺癌、鳞癌中,Ⅲ期的阳性表达率(83.3%)高于Ⅰ~Ⅱ期的阳性表达率(55.6%),低分化肺癌(80.8%)高于高、中分化肺癌(51.4%),女性患者(76.7%)高于男性(51.5%),组间比较差异有显著性(P<0.05)。CD24和SLeX呈阳性表达者平均生存时间明显低于阴性表达者(P<0.05)。结论:CD24和SLeX与肺癌的发生、发展关系密切,可以做为判断肺癌患者预后的指标。

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孕激素受体A、B在乳腺癌和癌旁乳腺组织中的表达及其意义
韩冰, 李嗣杰, 付彤, 范志民, 宋东
J4. 2009 (6):  1135-1138. 
摘要 ( 1023 )   [HTML]( )

目的:探讨孕激素受体A、B(PRA、PRB)在乳腺癌和癌旁非恶性乳腺组织(癌旁组织)中的表达及其与患者临床特征之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测PRA和PRB在50例(全部为女性)乳腺癌及癌旁乳腺组织中的表达,分析PRA、PRB表达与患者年龄、雌激素受体α(ERα)和CDC-47之间的关系。结果: PRA和PRB在癌细胞和癌旁上皮细胞及导管上皮细胞的细胞核及细胞浆中均有表达,阳性率分别为42%、42%和52%、36%,PRA与PRB在癌组织和癌旁组织中表达阳性率比较差异无显著性(P>0.05)。癌旁组织中PRA表达与年龄呈明显负相关(r=-0.316 8,P<0.05);癌组织中PRA和PRB的表达与ERα(r=0.403 2,P<0.05;r=0.378 6,P<0.05)及CDC-47(r=-0.422 8,P<0.05;r=-0.529 5,P<0.05)表达明显相关;在癌组织和癌旁组织中,PRA与PRB均呈显著正相关(r=0.840 1,P<0.05;r=0.424 6,P<0.05)。结论:孕激素受体两种亚型相互协调行使功能,但PRA在乳腺癌发生及发展中起更加重要的作用。

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MIF、CD68和CD57在卵巢癌组织中的表达及其意义
张丽红, 王医术, 翟颖仙, 周洪澜
J4. 2009 (6):  1139-1141. 
摘要 ( 1276 )   [HTML]( )

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子、巨噬细胞及自然杀伤细胞标记物MIF 、CD68及CD57在卵巢癌组织中的表达及意义。 方法:采用免疫组织化学法检测56例卵巢癌和5例正常卵巢组织中MIF、CD68及CD57蛋白的表达情况。 结果:正常卵巢组织中,MIF有少量表达,CD68、CD57均无表达;卵巢癌组织中MIF、CD68、CD57均有阳性表达,随着肿瘤恶性度的升高CD57、CD68、MIF阳性表达量有增多趋势,与正常卵巢组织比较差异有显著性(P<0.05)。各级别卵巢癌组织中CD57表达量明显低于CD68表达量(P<0.05)。结论:卵巢癌组织中MIF蛋白表达上调导致巨噬细胞和自然杀伤细胞增多,可能是肿瘤进一步恶化的原因之一。

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减体重对女子柔道运动员机能状态的影响
卢明月,李之俊,王志峰
J4. 2009 (6):  1142-1146. 
摘要 ( 845 )   [HTML]( )

目的:探讨减体重对女子柔道运动员机能状态的影响。方法:上海市女子柔道队12名运动员随机分为减重组(6人)和对照组(6人),从赛前1个月(包括减重第一、二、三阶段和减重末期)开始进行生理、生化指标的跟踪测试,并进行统计学处理。结果:减重组在前3个阶段体脂%下降与减重前比较差异有显著性(P<0.05),在减重末期去脂体重、背力和握力与减重前和对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。在减重末期,减重组血红蛋白(Hb)、红细胞(RBC)和红细胞压积(Hct)与减重前及对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。减重组血尿素氮(BUN)在第三阶段和减重末期与减重前比较差异有显著性(P<0.05),在减重末期与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。在减重末期,减重组睾酮(T)和皮质醇(C)与减重前及对照组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:女子柔道运动员赛前减体重可引起机体内生理和生化指标的变化,导致机能状态和运动能力的下降。

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芪苈强心胶囊治疗慢性充血性心力衰竭效果评价
丁梅, 杨萍, 何敏, 冯朝晖
J4. 2009 (6):  1147-1150. 
摘要 ( 1158 )   [HTML]( )

目的:观察芪苈强心胶囊治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)的临床疗效。方法:将64例CHF患者采用随机数字表随机分为治疗组33例和对照组31例,两组基线水平无差异,两组均应用洋地黄、利尿剂、ACEI等常规治疗,治疗组加服芪苈强心胶囊。比较两组患者治疗前后出汗改善情况、心功能好转率、6分钟步行距离、血清离子变化及用药期间的不良反应。结果:治疗1、2周后治疗组患者出汗缓解率高于对照组(P<0.05)。治疗1周后两组患者心功能和6分钟步行距离均较治疗前提高,但组间比较差异无显著性(P>0.05),2周后治疗组优于对照组(P<0.05)。治疗1周后两组患者血清Na+水平均较治疗前降低,但组间比较差异无显著性(P>0.05);2周后治疗组血清Na+水平高于对照组(P<0.05)。治疗1、2周后两组血清K+水平比较差异无显著性(P>0.05)。治疗组和对照组患者未出现任何不良反应,无停用芪苈强心胶囊者。结论:芪苈强心胶囊对患者止汗作用明显,短期内即可见效;有一定的强心作用,但起效相对慢;有一定的保钠作用,对血钾影响不大;耐受性好。

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奥沙利铂联合氟尿嘧啶或卡培他滨治疗老年晚期结肠癌的效果评价
姜振宇, 荆蕾, 许颖, 姚程
J4. 2009 (6):  1151-1153. 
摘要 ( 1038 )   [HTML]( )

目的: 研究奥沙利铂联合卡培他滨或醛氢叶酸/氟尿嘧啶治疗老年晚期结肠癌的疗效、毒副反应及临床应用顺应性。方法:回顾性分析本院收治的66例接受奥沙利铂联合卡培他滨方案(XELOX组,31例)或奥沙利铂联合氟尿嘧啶方案(OLF组,35例)治疗老年晚期结肠癌的临床资料,对比分析两方案的疗效及安全性。结果:XELOX组总有效率为51.6%, OLF组总有效率为48.5%,两组近期疗效比较差异无显著性(P>0.05)。XELOX组的毒副反应Ⅰ和Ⅱ度白细胞减少、恶心呕吐、外周静脉炎、肝功能损伤、脱发的发生率均明显低于OLF组,两组比较差异有显著性(P<0.05)。XELOX组的主要毒副反应是腹泻和手足综合征,发生率分别为41.9%和25.8%,明显高于OLF组(P<0.05)。结论:奥沙利铂联合卡培他滨治疗老年结肠癌疗效好,可提高患者
生存质量,毒副反应较轻,易于接受,应视为治疗老年晚期结肠癌的首选方案。卡培他滨具有口服、方便、相对安全特性,在临床应用上更有优势。

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影像学
质子磁共振波谱在脑内环状强化病变鉴别诊断中的应用
来颖, 王巍, 程凯亮, 张孟超, 刘云霞
J4. 2009 (6):  1154-1158. 
摘要 ( 1078 )   [HTML]( )

目的:研究质子磁共振波谱(1HMRS)在脑内环状强化病变鉴别诊断中的临床应用价值。方法:28例经病理证实或临床明确诊断的脑内环状强化病灶患者,其中高级别胶质瘤6例,转移瘤10例,脑脓肿12例,均行多体素1HMRS检查,测量比较病灶中心、强化环、灶周水肿区及正常对照组(病灶对侧正常脑组织)的代谢物浓度比值。结果:高级别胶质瘤与转移瘤病灶中心NAA/Cho、Cho/Cr、NAA/Cr比值比较差异无显著性(P>0.05),NAA峰出现几率差异有显著性(P<0.05)。高级别胶质瘤瘤周区域与转移瘤的瘤周区域和正常对照组NAA/Cho、Cho/Cr比值及Cho相对含量比较差异有显著性(P<0.05),脑转移瘤瘤周区域和正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。脑脓肿有特征性细胞液AA峰。脑脓肿Cho/Cr0(Cr0表示病灶对侧正常脑组织内Cr含量)比值较高级别胶质瘤和转移瘤明显降低(P<0.05),上述结果与病理检查结果相符。结论:1HMRS分析能够提高脑内环状强化病变诊断的准确率。

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三维增强磁共振血管成像在下肢动脉闭塞性疾病诊断中的临床应用
程凯亮, 来颖, 柳林, 刘云霞
J4. 2009 (6):  1159-1162. 
摘要 ( 976 )   [HTML]( )

目的:评价三维增强磁共振血管成像(3D CE MRA)在下肢动脉闭塞性疾病(PAOD)诊断中的临床价值。 方法:接受手术治疗的PAOD患者103例(579段血管),术前全部行双下肢动脉3D CE MRA检查,将重建后图像与手术结果进行对比,评估该方法对下肢动脉狭窄或闭塞的显示情况。 结果:103例患者579段血管,图像显示清晰,其中盆段206段,大腿段196段,小腿段177段,3D CE MRA诊断重度动脉狭窄及闭塞(狭窄度≥70%)的灵敏度和特异度分别为97.6%和95.4%,与手术结果符合率83.7%;按节段划分3D CE MRA对小腿段重度狭窄诊断的灵敏度最高(100%),对大腿段重度狭窄病变诊断的特异度最高(97%)。结论:3D CE MRA对不同程度血管狭窄和不同节段血管狭窄度分级的判定与手术结果具有良好的一致性,可用于指导PAOD的治疗。

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基础研究
18F-FDG PET/CT和MRI对鼻咽癌诊断价值的比较
林秋玉, 赵红光, 赵继红, 林承赫
J4. 2009 (6):  1163-1166. 
摘要 ( 1397 )   [HTML]( )

目的: 比较18F-FDG PET/CT和MRI在鼻咽癌TNM分期中的诊断价值,阐明18F-FDG PET/CT 标准化摄取值(SUV)与鼻咽癌T分期和病理类型的关系。方法:41例鼻咽癌患者行18F-FDG PET/CT全身扫描,且于3周内行头颈部MRI检查。按照国际通用的美国癌症联合委员会(AJCC)鼻咽癌TNM分期标准对病变分别行MRI、PET/CT分期,并将组织病理结果作为参照标准。结果:①原发肿瘤:PET/CT诊断鼻咽癌T分期的准确率为85.37%,MRI的准确率为60.98%,两者比较差异有显著性(U=2.49,P< 0.05);结合病理结果提示,PET/CT降低分期3例,提高分期7例;鼻咽癌患者原发灶SUV值与鼻咽癌T分期呈明显正相关关系(rs=0.706,P<0.05)。未分化癌患者SUV值明显高于低分化鳞癌,两组间比较差异有显著性(t=7.89,P<0.05)。②淋巴结转移:41例患者共切取淋巴结139枚,其中PET/CT正确判断阳性72枚,阴性56枚,灵敏度和特异度分别为93.51%和90.32%;MRI正确判断阳性60枚,阴性51枚,灵敏度和特异度分别为80.00%和79.69%;PET/CT诊断淋巴结转移的准确率为92.09%,MRI诊断淋巴结转移的准确率为79.86%,两者比较差异有显著性(U=2.93,P< 0. 05)。③远处转移:41例患者18F-FDG PET/CT全身扫描结果中,2例患者出现肝脏和骨骼远处转移灶,而MRI因扫描部位的限制未能显示。结论:18F-FDG PET/CT对鼻咽癌的TNM分期较MRI更全面、可靠。

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影像学
MSCT肺容积测定在COPD患者肺功能评价中的应用
李爽, 陈亮, 杜继民, 华树成
J4. 2009 (6):  1167-1171. 
摘要 ( 1319 )   [HTML]( )

目的:研究多层螺旋CT(MSCT)肺容积指标与肺功能(PFT)指标的相关性及其在评估慢性阻塞性肺疾病(COPD)方面的应用价值。方法:选择24例COPD患者(COPD组)和22例肺部CT检查正常者(正常组),均在1 周内完成肺功能检查及MSCT 检查。采用MSCT于最大吸气末和最大呼气末分别扫描全肺,用Pulmo 肺定量软件测定全肺容积。应用 SPSS13.0 软件对 CT Pulmo 软件分析所得结果及 PFT 检查所得结果进行统计学分析。结果:与正常组比较,COPD组最大吸气末容积(Vin) (P<0.05)、最大呼气末容积(Vex) (P<0.05)、容积比(Vex /Vin) (P<0.01)均明显升高,而容积差(Vin-Vex) (P<0.05)则明显下降。MSCT 肺容积指标中, Vin 与PFT的肺总量(TLC )(r= 0.923 ,P<0.01) 、Vex 与残气量(RV) (r=0.912,P<0.05) 呈正相关关系, Vin-Vex与肺活量(VC) (r = 0.763,P<0.01) 、Vex/Vin 与残气量和肺总量比(RV/TLC )(r= 0.754 ,P<0.01) 也呈正相关关系。Vex与第1秒用力呼气容积实测值与预测值百分比(FEV1%)和第1 s用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV1/FVC)有较好的相关性,(r =-0.616,P<0.01;r=-0.543,P<0.05)。与对照组比较,COPD患者Vin、Vex、Vex/Vi
n 均有显著升高(P<0.05,P<0.01),与PFT的表现相一致。结论:MSCT 测定的肺容积指标与PFT 有很好的相关性,可用于评估COPD患者的肺功能。

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技术交流
追踪随访布鲁菌病患者PCR实验室诊断方法的建立
马琳, 常琳, 杨军, 孙英杰, 高丽娜, 郭菲, 甄清, 于雅琴
J4. 2009 (6):  1172-1176. 
摘要 ( 1085 )   [HTML]( )

目的: 建立布鲁菌单一PCR实验室检测方法,并在模拟样本和染毒动物实验中优化反应条件,为将PCR方法应用于布鲁菌病患者治疗后的追踪随访提供实验室依据。 方法: 针对编码BP26的基因序列设计布鲁菌属引物,针对插入性序列IS711设计区分布鲁菌羊种、牛种和猪种引物;以M5或M5荧光菌株为实验组、以PBS为对照组制备系列浓度的模拟样本和染毒动物;用热解法从血液样本中提取布鲁菌基因组;用BP26与羊种、牛种和猪种引物对菌液进行PCR扩增,用BP26和羊种引物对模拟样本和染毒动物不同时间点的血液样本进行检测。结果: 菌属水平引物BP26和不同种引物在对布鲁氏菌标准菌株、疫苗株基因组的扩增中均得到特异性条带,具有一定的特异性;热解法可提取到模拟样本和染毒小鼠血液样本中的布鲁菌基因组,经PCR扩增后得到特异性条带;染毒小鼠血样PCR检测阳性结果数随时间先上升后下降,同一时间点增加样本量可提高阳性率,热解法在各时间点检测阳性率均高于同期化学试剂法提取结果,PCR检测方法灵敏度高于分离培养方法。 结论:采用热解法提取血液样本中的布鲁菌基因组,易于操作;PCR检测方法安全稳定,敏感性高于传统分离培养方法;以核酸为靶标进行检测的特异性较高,可进一步应用于患者治疗后追踪随访研究。

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