吉林大学学报(医学版) ›› 2013, Vol. 39 ›› Issue (2): 199-203.doi: 10.7694/jldxyxb20130202
pEgr1-hsTRAIL质粒对肺腺癌A549细胞放射敏感性及DR4和DR5表达水平的影响
杨艳明1,方芳2，刘念1，曲志杰1，王志成2，张艳秋3
- （1. 吉林大学第二医院肿瘤生物治疗中心，吉林 长春 130041；2. 吉林大学公共卫生学院卫生部放射生物学重点实验室，吉林 长春 130021；3.吉林大学第二医院手术室，吉林 长春 130041）
Influence of pEgr1-hsTRAL plasmid on radiosensitivity and DR4 and DR5 expression levels in lung adenocarcinoma A549 cells
YANG Yan-ming1,FANG Fang2,LIU Nian1,QU Zhi-jie1，WANG Zhi-cheng2,ZHANG Yan-qiu3
- (1.Biotherapy Center of Tumor, Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041,China;2. Key Laboratory of Radiobiology,Ministry of Health,School of Public Health,Jilin University,Changchun 130021；3.Department of Operating Room,Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041,China)
摘要： 目的:检测转染pEgr1-hsTRAIL质粒的人肺腺癌A549细胞放射敏感性变化及其对死亡受体（DR）4和DR 5 mRNA和蛋白表达的影响，探讨pEgr1-hsTRAIL质粒的辐射增敏效应和诱导细胞凋亡的可能机制。方法:实验分为正常对照（Normal control）组、pEgr1-hsTRAIL组、6 Gy X线照射组和pEgr1-hsTRAIL + 6 Gy X线照射组。A549细胞经过阳离子脂质体转染、X线深部治疗机照射后，利用平板克隆形成试验检测细胞放射敏感性，反转录RCR（RT-PCR）法检测DR4和DR5 mRNA表达变化，Western blotting法检测DR4和DR5蛋白表达的变化。结果：正常对照组和pEgr1-hsTRAIL组A549细胞的平均致死剂量（D0值）分别为3.26和1.91 Gy，说明pEgr1-hsTRAIL质粒能够增强A549细胞的放射敏感性。RT-PCR显示，转染pEgr1-hsTRAIL质粒对DR4和DR5 mRNA和蛋白表达水平无明显影响，而6 Gy X线照射后DR4和DR5 mRNA表达均显著高于正常对照组（P<0.05），转染pEgr1-hsTRAIL质粒后再进行6 Gy X线照射，DR4和DR5 mRNA表达水平均显著高于正常对照组（P<0.05），但只有DR5 mRNA表达水平显著高于6 Gy X线照射组（P<0.05）。Western blotting结果显示，与正常对照组比较，DR4和DR5蛋白在pEgr1-hsTRAIL组无明显变化，而在6 Gy X线照射和pEgr1-hsTRAIL + 6 Gy X线照射组表达增加，其中DR5蛋白在pEgr1-hsTRAIL + 6 Gy X线照射组增加更明显。结论:重组表达质粒pEgr1-shTRAIL能够增强A549细胞放射敏感性，且能增强DR5辐射诱导表达，而对DR4的辐射诱导表达无明显增强作用。
中图分类号:
- R734.2