吉林大学学报(医学版) ›› 2021, Vol. 47 ›› Issue (5): 1124-1130.doi: 10.13481/j.1671-587X.20210507
Yang ZHENG1,Jiahui WANG1,Yue PENG2,Xianling YUAN2,Lei WANG1,Tiejian ZHAO2()
摘要: 探讨莪术醇对小鼠肝窦内皮细胞(LSEC)结构的影响,阐明其对LSEC介导的肝内血管新生的作用。 30只SPF级KM小鼠使用灌注及消化法分离原代LSEC,将其分为空白对照组、模型组、莪术醇组和丹参酚酸B组,空白对照组仅用普通培养基处理;模型组用100 μg·L-1廋素进行活化,培养细胞48 h;莪术醇组先用45 mg·L-1莪术醇处理30 min再用廋素培养细胞48 h;丹参酚酸B组先用1×10-6 mmol·L-1丹参酚酸B处理30 min再用廋素培养细胞48 h。采用MTT法检测各组细胞增殖率,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测各组细胞中分化抗原簇31(CD31)和血管性血友病因子(vWF) mRNA表达水平,免疫印迹法检测CD31和vWF蛋白表达水平,扫描电镜观察LSEC窗孔的结构,血管形成实验观察肝内血管新生情况。 MTT法检测,模型组细胞增殖率较空白对照组明显降低(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞增殖率较模型组明显下降(P<0.05),丹参酚酸B组与莪术醇组细胞增殖率比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-qPCR法检测,模型组细胞中CD31和vWF mRNA表达水平较空白对照组明显升高(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞中CD31和vWF mRNA表达水平较模型组明显降低(P<0.05),丹参酚酸B组与莪术醇组细胞中CD31和vWF mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫印迹法检测,模型组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平较空白对照组明显升高(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平较模型组明显降低(P<0.05),莪术醇组与丹参酚酸B组细胞中CD31和vWF蛋白表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜观察,空白对照组LSEC窗孔数量较多,与空白对照组比较,模型组窗孔数量减少;与模型组比较,莪术醇组和丹参酚酸B组LSEC窗孔数量有所增加。血管形成实验检测,模型组血管形成数量较空白对照组明显增加(P<0.05),莪术醇组和丹参酚酸B组血管形成数量较模型组明显减少(P<0.05),莪术醇组与丹参酚酸B组血管形成数量比较差异无统计学意义(P>0.05)。 莪术醇通过调控小鼠LSEC的窗孔结构,从而抑制肝内血管新生。
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