人腺体激肽释放酶基因重组表达载体pPICZαChK2的构建

doi:国家自然科学基金资助课题

人腺体激肽释放酶基因重组表达载体pPICZαChK2的构建

路英丽¹, 张家颖², 邹冬辉¹, 张媛媛¹,李丹地¹,王忠山^1*

1. 吉林大学基础医学院细胞生物学教研室，吉林长春130021;2.吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心，吉林长春130021

收稿日期:2003-12-23 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-11-28 发布日期:2004-11-28
通讯作者: 王忠山

Construction of recombinant human glandular kallikre in expression vector pPICZαChK2

LU Ying-li¹, ZHANG Jia-ying², ZOU Dong-hui¹, ZHANG Yuan-yuan¹,LI Dan-di¹,WANG Zhong-shan^1*

1.Department of Cell Biology,School of Basic Medical Sciences,Jilin University,Changchun 130021,China;2. Experimental Center of Biochemistry and Molecular Biology, School of Basic Medical Sciences,Jilin University,Changchun 130021,China

Received:2003-12-23 Revised:1900-01-01 Online:2004-11-28 Published:2004-11-28
Contact: WANG Zhong-shan

摘要/Abstract

摘要： 目的：构建人腺体激肽释放酶（hK2）基因的酵母表达载体。方法：利用RT-PCR法从人正常前列腺组织中扩增出hK2基因，先将其克隆到pGEM-T载体，进行序列测定和分析，然后将hK2基因亚克隆至酵母pPICZαC表达载体上，进行鉴定。结果：获得一个核苷酸长度为738 bp的基因，同源比较结果表明,与GenBank（NCBI:AF188746）公布的hK2的基因序列有99%的同源性，序列分析表明有一个氨基酸出现变异。酶切表明hK2基因正确插入酵母表达载体pPICZαC。结论：成功构建出hK2基因的酵母表达载体pPICZαChK2。

关键词: 基因表达

Abstract: Objective To construct yeast expression vector which can express human glandular kallikrein highly. Methods The hK2 gene was amplified by RT-PCR from human normal prostate tissue. The amplified DNA fragment was cloned into pGEM-T vector for sequence analysis. The hK2 gene was then subcloned into yeast expression vector pPICZαC. Results A gene of 738bp was obtained and showed a 99% homology with hK2 gene sequence published in GenBank(NCBI: AF188746).Sequence analysis showed that only one amino acid was different.hK2 gene was inserted into yeast expression vector pPICZαC correctly. Conclusion The hK2 yeast expression vector pPICZαChK2 is constructed successfully in the study.

Key words: gene expression

中图分类号:

路英丽, 张家颖, 邹冬辉, 张媛媛,李丹地,王忠山. 人腺体激肽释放酶基因重组表达载体pPICZαChK2的构建[J]. J4, 2004, 30(6): 839-842.

LU Ying-li, ZHANG Jia-ying, ZOU Dong-hui, ZHANG Yuan-yuan,LI Dan-di,WANG Zhong-shan. Construction of recombinant human glandular kallikre in expression vector pPICZαChK2[J]. J4, 2004, 30(6): 839-842.

[1]	陈炳鹏, 任明, 李容杭, 韩青, 王金成. 基因芯片技术检测NOB1对骨肉瘤细胞相关基因的调控作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2018, 44(05): 929-934.
[2]	田丹, 孙新, 安晓婷, 张立岩, 刘杨, 佟海滨, 李坦, 申野, 满枋霖, 颜伟群. HSA-TP5融合基因表达载体的构建及其真核表达[J]. 吉林大学学报(医学版), 2017, 43(05): 948-952.
[3]	辛桂杰, 朱海超, 李昊, 温剑平. 最低限度免疫定义基因表达的HCV多表位DNA疫苗对小鼠细胞免疫的诱导作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(06): 1071-1075.
[4]	齐玲, 王玮瑶, 郑中华, 张以忠, 赵丽微, 钟秀宏, 赵东海, 杨淑艳, 杨宁江, 任旷, 于洪泉. SUMO及SUMO化修饰蛋白在恶性胶质瘤发生中的作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(01): 7-10.
[5]	刘姝，王霁雪,吴雅臻，王淑梅. 色素上皮源性因子基因转染对巨噬细胞诱导大鼠增生性玻璃体视网膜病变的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2013, 39(6): 1181-1185.
[6]	孙晓宇，何钟勤，刘晓红，高心，钟丞，薛莹. 殊异韦荣菌sahH基因的克隆、表达和纯化[J]. 吉林大学学报(医学版), 2013, 39(4): 704-709.
[7]	张雪，陈萍，毕云枫，曲宁宁，刘琼，孙鑫泽. 木糖氧化产碱菌中亚硝酸盐还原酶基因的克隆与表达[J]. 吉林大学学报(医学版), 2013, 39(4): 690-693.
[8]	贾晓辉，罗建民，刘亚平，尹婉宜，张丽红. SHIP和Caspase-3 mRNA在骨髓增生异常综合征患者骨髓组织中的表达及其临床意义[J]. 吉林大学学报(医学版), 2013, 39(3): 554-558.
[9]	贺梦子，赵银龙，刘晓冬，马淑梅，刘欣. 甲状腺乳头状癌组织中差异表达miRNA及其靶基因的筛选和预测[J]. 吉林大学学报(医学版), 2013, 39(1): 99-103.
[10]	伍贤军\|缪璇\|程秀\|王妍青\|辻一郎\|李晓萌. GFP-SUMO-3融合蛋白的重组及其在LNCaP细胞中的表达和定位[J]. J4, 2011, 37(6): 1024-1027.
[11]	孙玲,刘慧颖,李淑红\|宫鹏涛\|张西臣. 弓形虫GRA1基因的克隆与原核表达[J]. J4, 2011, 37(4): 631-635.
[12]	刘洁, 贾天军, 刘雪晴, 贾晓辉, 翟雪琼. 人甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白激酶-2 C端基因的克隆与鉴定[J]. J4, 2011, 37(1): 51-55.
[13]	赵丽晶, 许多, 程宏, 梁作文, 鲁育铭, 韩向北, 郭亚雄, 赵丽娟, 董妍. 20(s)-原人参二醇对体外培养Siha细胞caspase-3表达激活的影响[J]. J4, 2011, 37(1): 26-29.
[14]	李智, 郎晓讴, 张绍军, 姜文华. Stat3和Stat5在分化型甲状腺癌组织中的表达及意义[J]. J4, 2010, 36(4): 708-712.
[15]	李静, 朴云峰, 蒋政, 安鼎伟, 金丽君. STAT3基因在人肝癌细胞株HepG2、Bel7402、SMMC7721和肝癌组织中的表达及意义[J]. J4, 2010, 36(3): 531-535.