小鼠白细胞介素18真核表达质粒的构建及基因多态性分析

doi:卫生部临床学科重点科研项目；吉林省科技厅

小鼠白细胞介素18真核表达质粒的构建及基因多态性分析

时阳，谭岩^*，刘力华，太京华，方艳秋，段秀梅，姜艳芳，许淑芬

吉林大学第一医院中心实验室，吉林长春130021

收稿日期:2003-11-11 修回日期:1900-01-01 出版日期:2004-03-28 发布日期:2004-03-28
通讯作者: 谭岩

AConstruction of recombinant eukaryotic expressing plasmidof mouse IL-18 and analysis of its gene polymorphism

SHI Yang, TAN Yan^*, LIU Li-hua, TAI Jing-hua, FANG Yan-qiu, DUAN Xiu-mei, JIANG Yan-fang, XU Shu-fen

Central Laboratory, First Hospital, Jilin University, Changchun 130021, China

Received:2003-11-11 Revised:1900-01-01 Online:2004-03-28 Published:2004-03-28
Contact: TAN Yan

摘要/Abstract

摘要： 目的：构建小鼠白细胞介素18(mIL-18)的重组真核表达质粒，制备有效的免疫佐剂。方法：通过RT-PCR分别从BALB/c小鼠和Swiss小鼠肝组织总RNA中扩增mIL-18，并将其连接于载体pcDNA3中，再用双酶切及测序方法鉴定重组质粒。结果：构建出两组重组质粒，其中从BALB/c小鼠中获得的mIL-18序列与Genbank中序列完全一致，而从Swiss小鼠中获得的mIL-18序列有两个点突变。结论：重组质粒pcIL-18构建成功，且发现mIL-18具有未见报道的点突变，已登录于Genbank。这为研制抗肿瘤DNA疫苗，增强疫苗疗效奠定基础。

关键词: 真核表达质粒, 佐剂, 免疫, 多态现象(遗传学)

Abstract: Objective To construct recombinant Murine IL-18 (mIL-18) plasmid which could be expressed in eukaryotic systems and be used as immunoadjuvant. Methods mIL-18 was amplified from BALB/c and Swiss mouse liver mRNA by RT-PCR, and ligated orientatively into the eukaryotic expressing plasmid pcDNA3. The recombinant plasmids, pcIL-18,were evaluated with endorebonuclease digestion and sequencing. Results Two recombinant plasmids were constructed. The sequence of mIL-18 from BALB/c mouse was consistent with that of Genbank, while the one from Swiss mouse had two point mutations. Conclusion Two recombinant plasmids pcIL-18 are constructed successfully. They will play a key role in reinforcing DNA vaccine. And gene polymophism in mIL-18 has been found and received by Genbank (AY362457).

Key words: eukaryotic expressing plasmid, adjuvarits, immunologic, polymorphism (genetics)

中图分类号:

Q346.5

时阳，谭岩，刘力华，太京华，方艳秋，段秀梅，姜艳芳，许淑芬. 小鼠白细胞介素18真核表达质粒的构建及基因多态性分析[J]. J4, 2004, 30(2): 206-208.

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