人核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定

doi:吉林省科技厅科技发展计划资助课题(2003126

人核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定

操海萍^1△，舒振波²，张桂珍^1*

1. 吉林大学中日联谊医院中心实验室，吉林长春 130033；2. 吉林大学中日联谊医院普通外科，吉林长春 130033

收稿日期:2005-09-02 修回日期:1900-01-01 出版日期:2006-07-28 发布日期:2006-07-28
通讯作者: 张桂珍

Construction and identification of human decorin gene recombinant eukaryotic expressing vector

CAO Hai-ping^1△，SU Zhen-bo²，ZHANG Gui-zhen^1*

1. Central Laboratory，China-Japan Union Hospital，Jilin University，Changchun 130033, China；2. Department of General Surgery，China-Japan Union Hospital，Jilin University， Changchun 130033，China

Received:2005-09-02 Revised:1900-01-01 Online:2006-07-28 Published:2006-07-28
Contact: ZHANG Gui-zhen

摘要/Abstract

摘要： 目的：构建人核心蛋白聚糖（DCN）真核表达载体，为进一步研究其生物学活性奠定基础。方法：采用聚合酶链反应（PCR）扩增目的片段，PCR产物及真核表达载体pcDNA3分别双酶切后进行连接，并转化入大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体。结果：PCR获得与预期大小一致的、约1 000 bp的特异性DNA片段，PCR产物与表达载体经双酶切后连接，构建重组载体pcDNA-dec，经双酶切鉴定及测序证实，人DCN基因cDNA片段正确插入真核表达载体中。结论：成功构建人DCN真核表达载体pcDNA-dec。

关键词: 基因表达, 聚合酶链反应, 方法

Abstract: Objective To construct a recombinant eukaryotic expressing vector pcDNA-dec and provide a basis for further study on the bioactivity of decorin (DCN). Methods DCN cDNA was amplified by using polymerase chain reaction(PCR). Product of PCR and expressing vector were digested by restriction endonucleases, then ligated and transformed into JM109 bacteria. Results The specific DNA fragment was obtained by PCR as supposed. Product of PCR and expressing vector were digested by restriction endonucleases, then ligated to establish the recombinant eukaryotic expression vector pcDNA-dec. It was confirmed that DCN cDNA was inserted into the eukaryotic expression vector correctly by using digestion identification and sequencing. Conclusion The recombinant eukaryotic expression vector pcDNA-dec of human DCN is successfully constructed.

Key words: gene expression, polymerase chain reaction, methods

中图分类号:

Q786

操海萍，舒振波，张桂珍. 人核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定[J]. J4, 2006, 32(4): 590-592.

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