吉林大学学报(医学版) ›› 2008, Vol. 34 ›› Issue (2): 354-356.doi: 吉林省发展和改革委员会基金资助课题 [(2

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分泌型核心蛋白聚糖真核表达载体的构建及鉴定

张玉成1,杜珍武1,王雅丽1,卜丽莎1,吕俊峰2,张桂珍1   

  1. 1.吉林大学中日联谊医院中心实验室,吉林 长春 130033;2.吉林大学第二医院放射线科,吉林 长春 130041
  • 收稿日期:2007-10-16 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-03-28 发布日期:2008-03-28
  • 通讯作者: 张桂珍

Construction and identification of recombinant eukaryotic expressing vector pcDNA3.1-DCN

  • Received:2007-10-16 Revised:1900-01-01 Online:2008-03-28 Published:2008-03-28

摘要: 目的:构建分泌型核心蛋白聚糖(DCN)真核表达载体,为研究DCN的生物学功能奠定基础。方法:利用特异性引物,应用PCR技术扩增DCN全长基因cDNA片段,与 pcDNA3.1载体进行连接,并转化到大肠杆菌JM109中扩增以获得重组载体,应用双酶切、PCR以及测序鉴定此重组载体。结果:获得了约1080 bp大小的特异性DNA片段;PCR产物与真核表达载体进行连接,经过双酶切、PCR以及测序鉴定证实分泌型DCN cDNA片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1中。结论:成功克隆了分泌型DCN cDNA,并且构建了真核表达载体pcDNA3.1-DCN。

关键词: 核心蛋白聚糖;聚合酶链反应;克隆, 基因表达

中图分类号: 

  • Q782