吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (3): 580-589.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230305
李畅1,2,马梓珊1,2,黄汕梅1,2,银帮巧2,陈枝凡1,2,聂莎1,2,张子谦3,李力3,刘鹰1(),唐耀平2,4()
Chang LI1,2,Zishan MA1,2,Shanmei HUANG1,2,Bangqiao YIN2,Zhifan CHEN1,2,Sha NIE1,2,Ziqian ZHANG3,Li LI3,Ying LIU1(),Yaoping TANG2,4()
摘要:
目的 探讨薏苡附子散对小鼠心肌缺血和血管内皮功能损伤的保护作用,阐明其可能的作用机制。 方法 60只雄性SPF级C57BL/6J小鼠,随机分为空白组、假手术组、急性心肌缺血(AMI)组、低剂量薏苡附子散组、中剂量薏苡附子散组和高剂量薏苡附子散组,每组10只;另取40只C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组、低剂量薏苡附子散组、中剂量薏苡附子散组和高剂量薏苡附子散组,每组10只。采用冠脉左前降支(LAD)结扎法建立AMI小鼠模型后进行相应的药物干预处理28 d。采用Western blotting法检测小鼠心肌组织中一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平,动脉张力检测法检测各组小鼠离体胸主动脉血管张力和舒张率,总一氧化氮(NO)检测试剂盒检测各组小鼠血清中NO水平,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察各组小鼠心肌组织缺血面积,HE染色观察各组小鼠心肌组织病理形态表现,观察各组小鼠术后存活率。人冠脉内皮细胞(HCAECs)随机分为空白组、缺氧组、缺氧+低剂量薏苡附子散组、缺氧+中剂量薏苡附子散组和缺氧+高剂量薏苡附子散组,除空白组外,其余各组细胞采用三气培养箱培养24 h建立缺氧模型。Griess实验检测各组HCAECs中NO水平,荧光染色法检测各组HCAECs中线粒体膜电位(MMP)和活性氧(ROS)水平。 结果 与建立AMI模型前比较,建立AMI模型后小鼠心电图ST段明显抬高。Western blotting法检测,与空白组比较,注射N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)后假手术组、AMI组和低、中及高剂量薏苡附子散组小鼠心肌组织中eNOS蛋白表达水平降低(P<0.05)。与生理盐水组比较,低、中和高剂量薏苡附子散组小鼠胸主动脉舒张率升高(P<0.05)。与空白组和假手术组比较,AMI组小鼠血清中NO水平降低(P<0.05),高剂量薏苡附子散组小鼠血清中NO水平升高(P<0.05);与AMI组比较,低、中和高剂量薏苡附子散组小鼠血清中NO水平升高(P<0.05)。TTC染色观察,与空白组和假手术组比较,AMI组和低、中及高剂量薏苡附子散组小鼠心肌组织均有不同程度心肌缺血;与AMI组比较,低、中和高剂量薏苡附子散组小鼠心肌组织缺血面积减少,心肌组织缺血面积百分率降低(P<0.05)。HE染色,空白组和假手术组小鼠心肌细胞排列整齐,胞核清晰完整,大小均匀,未见炎性细胞浸润;AMI组小鼠可见明显的心肌组织损伤,心肌细胞排列紊乱、破裂坏死,有炎性细胞浸润;低、中和高剂量薏苡附子散组小鼠可见心肌组织病理性损伤恢复。药物干预第28天,空白组和假手术组小鼠生存率为100%;与AMI组比较,低、中和高剂量薏苡附子散组小鼠生存率升高(χ2=15.03,P=0.010 2)。Griess实验检测,与空白组比较,缺氧组和缺氧+低剂量组薏苡附子散组HCAECs中NO水平降低(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧+中剂量薏苡附子散组和缺氧+高剂量薏苡附子散组HCAECs中NO水平升高(P<0.05)。荧光染色法检测,与空白组比较,缺氧组、缺氧+低剂量薏苡附子散组和缺氧+中剂量薏苡附子散组HCAECs中MMP水平降低(P<0.05),ROS水平升高(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧+中剂量薏苡附子散组和缺氧+高剂量薏苡附子散组HCAECs中MMP水平升高(P<0.05),缺氧+低剂量薏苡附子散组、缺氧+中剂量薏苡附子散组和缺氧+高剂量薏苡附子散组HCAECs中ROS水平降低(P<0.05)。 结论 薏苡附子散可通过增强NO生物活性,增加主动脉血管活性,改善心肌缺血病理状态,恢复MMP,减少ROS的生成,改善线粒体及血管内皮细胞功能障碍。
中图分类号: