吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (2): 377-384.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230214
Hongyu SUN,Zihan CHEN,Baiji CUI,Xianmin FENG(),Di LIU()
摘要:
目的 探讨乌拉草提取物黄酮类成分对大鼠皮肤烫伤后金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染的抑菌作用,为新型抗感染中药的研发提供新思路。 方法 采用水醇提取法提取乌拉草有效成分并利用紫外分光光度法测定其黄酮含量,采用牛津杯法抑菌试验检测乌拉草有效成分对细菌的抑菌活性,试管稀释法测定其最低抑菌浓度 (MIC)。24只SD大鼠采用自制烫伤仪构建Ⅱ度烫伤模型,随机分为生理盐水对照组、青霉素钠 (NaBP) 对照组和乌拉草提取物CM-70治疗组,每组8只。3组大鼠创面皮内多点注射接种20 μL (1.0×108 CFU·mL-1) S.aureus,次日3组大鼠分别涂抹无菌生理盐水(0.5 g无菌脱脂棉吸附生理盐水0.5 mL·cm-2)、NaBP(0.5 g无菌脱脂棉吸附NaBP,5 000 U·kg-1 体质量)和10 g·L-1 乌拉草CM-70提取物稀释液(0.5 g无菌脱脂棉吸附0.5 mL·cm-2乌拉草CM-70提取液)。观察各组大鼠创面感染情况,采用创面痂下细菌定量实验检测各组大鼠烫伤后第1、2、3、4、5、6和7天创面细菌数(CFU·g-1),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠烫伤前和烫伤后第1、3、7及14天血清白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素10 (IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。 结果 体外抑菌活性检测,不同稀释浓度乌拉草CM-70提取物稀释液针对金黄色葡萄球菌形成不同大小抑菌圈,针对大肠埃希菌和白色念珠菌未形成抑菌圈。MIC检测,乌拉草有效成分对 S.aureus的MIC值为2.5 g·L-1。各组大鼠烫伤创面感染和愈合情况观察,与生理盐水对照组比较,感染后第3天,乌拉草CM-70提取物治疗组大鼠伤口浆液渗出较少;感染后第7天,伤口浆液渗出减少;红肿减轻,伤口面积缩小;感染后第14天,伤口创面已完全干燥,无浆液渗出,表面形成痂皮,伤口愈合良好,与NaBP对照组相近。烫伤创面痂下细菌定量,与生理盐水对照组比较,同一时间点乌拉草CM-70提取物治疗组大鼠创面痂下细菌数明显减少(P<0.01)。ELISA法检测,与生理盐水对照组比较,乌拉草CM-70提取物治疗组大鼠血清中IL-10水平在烫伤后第1和3天明显升高(P<0.05),在第7和14天明显降低(P<0.05);乌拉草CM-70提取物治疗组大鼠血清中IL-1β和TNF-α水平在烫伤后第1、3、7和14天明显降低(P<0.05)。 结论 乌拉草有效成分可明显抑制大鼠皮肤烫伤后S.aureus感染,通过调控血清IL-1β、IL-10和TNF-α水平发挥抗炎和抑菌作用。
中图分类号: