吉林大学学报(医学版) ›› 2016, Vol. 42 ›› Issue (01): 80-84.doi: 10.13481/j.1671-587x.20160116
杨擎, 隋欣, 王宝森, 于智莘, 朱凯, 律广富, 王建玮, 闫文昊, 张慧媛, 林嘉楠, 刘英娜, 李娜, 曲晓波
YANG Qing, SUI Xin, WANG Baosen, YU Zhixin, ZHU Kai, LYU Guangfu, WANG Jianwei, YAN Wenhao, ZHANG Huiyuan, LIN Jianan, LIU Yingna, LI Na, QU Xiaobo
摘要:
目的: 探讨五味子乙素(Sch B)对谷氨酸(Glu)致人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,阐明其对ATR信号通路的影响。 方法: 将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞分为对照组、DMSO组、模型组、Sch B1组、Sch B2组和Sch B3组。对照组SH-SY5Y细胞不做任何处理;DMSO组SH-SY5Y细胞用17 mmol·L-1 DMSO作用24h;模型组SH-SY5Y细胞用20 mmol·L-1 Glu孵育24h造成细胞损伤模型;Sch B1、Sch B2和Sch B3组采用0.05、 0.10和1.00 μmol·L-1浓度Sch B预处理SH-SY5Y细胞24 h后再用Glu(20 mmol·L-1 )继续孵育24 h。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting法检测ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达情况。 结果: MTT法检测,与模型组比较,Sch B1、Sch B2和Sch B3组细胞存活率明显升高(P<0.05或P<0.01),且Sch B2组细胞存活率最高,故选取Sch B2组作为Sch B组进行后续实验。细胞周期检测,与对照组比较,模型组G0/G1期细胞所占百分比降低(P<0.05),S期和G2/M 期细胞所占百分比升高(P<0.05);与模型组比较,Sch B组G0/G1期细胞所占百分比升高(P<0.05),S期和G2/M 期细胞所占百分比降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,Sch B组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平均降低(P<0.05)。 结论: Sch B对Glu致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与下调ATR信号通路、减少细胞周期阻滞有关。
中图分类号: