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单纯疱疹病毒胸苷激酶多克隆抗体的制备

张 煜2,于湘辉1,查 晓2,王安荣3,孔 维1   

  1. (1. 吉林大学疫苗中心,吉林 长春 130012;2.四川省肿瘤研究所,四川 成都 610041;3. 四川省肿瘤医院肿瘤流行病室, 四川 成都 610041)
  • 收稿日期:2008-03-01 修回日期:1900-01-01 出版日期:2008-11-28 发布日期:2008-11-28
  • 通讯作者: 孔 维

Preparation of polyclonal antibody of HSV-TK

  • Received:2008-03-01 Revised:1900-01-01 Online:2008-11-28 Published:2008-11-28

摘要: 目的:克隆单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因,并在大肠杆菌中表达,通过免疫家兔,获得HSV-TK多克隆抗体,为进一步研究HSV-TK 的功能奠定基础。方法:从纯化的单纯疱疹病毒(HSV)中提取病毒基因组,用PCR特异性扩增HSV-TK全长基因,克隆入表达载体pRSET B中进行表达,以纯化的表达产物免疫家兔制备多克隆抗血清,进行Western blotting 鉴定。结果:用IPTG诱导后,表达出相对分子质量(Mr)约43 000的融合蛋白,免疫家兔制备的兔血清,第2~5周每周采血1次,Western blotting检测均获得特异性蛋白带;最后一次样品3个稀释度(1∶1 000、1∶3 000、1∶5 000)的Western blotting分析仍可以检出蛋白质带。结论:成功获得了特异性强和滴度高的HSV-TK多克隆抗体。

关键词: 胸苷激酶, 基因表达, 多克隆抗体

中图分类号: 

  • R373.1