吉林大学学报(医学版) ›› 2021, Vol. 47 ›› Issue (2): 460-468.doi: 10.13481/j.1671-587X.20210227
吴洁1,杨学华2,马玲1,范文强1,付冬冬1,高晓1,左淑飞1,梁舒1,秦艺璐1,王培山3(),郭金燕4
Jie WU1,Xuehua YANG2,Ling MA1,Wenqiang FAN1,Dongdong FU1,Xiao GAO1,Shufei ZUO1,Shu LIANG1,Yilu QIN1,Peishan WANG3(),Jinyan GUO4
摘要: 探讨miR-26a-5p对人类风湿关节炎(RA)-成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡及炎性因子分泌的影响,阐明其作用机制。 分离RA患者的膝关节滑膜组织RA-FLSs,将miR-26a-5p模拟物(mimic)、抑制物(inhibitor)及阴性对照转染 RA-FLSs,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测转染效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,CCK-8 法检测各组细胞增殖活性,AnnexinⅤ-FITC/PI与Hoechst 33342染色检测各组细胞凋亡情况,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)与酪氨酸激酶2(JAK2)/信号传导及转录活化因子3(STAT3)信号通路相关蛋白表达水平。 与空白对照组和NC-mimic组比较, miR-26a-5p mimic组RA-FLSs中 miR-26a-5p mRNA表达水平升高(P<0.05),RA-FLSs增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05);与空白对照组和NC-inhibitor组比较,miR-26a-5p inhibitor组RA-FLSs中 miR-26a-5p mRNA表达水平降低(P<0.05),RA-FLSs细胞增殖活性升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2、JAK2、p-JAK2、STAT3和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。 过表达miR-26a-5p能够抑制RA-FLSs细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制 JAK2/STAT3信号通路的激活有关。
中图分类号: