目的 探讨洛伐他汀对高脂血症诱导的大鼠肝损伤的保护作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 将15只SD大鼠随机分为对照组、高脂血症模型组和洛伐他汀组，每组5只。对照组大鼠常规饲养，高脂血症模型组和洛伐他汀组大鼠采用高脂饲料饲养12周；第8周开始灌胃给药，洛伐他汀组大鼠给予2 mg?kg^-1洛伐他汀，对照组和高脂血症模型组大鼠给予等体积生理盐水，每天1次，持续给药4周。检测各组大鼠实验开始后第1、8、9、10、11和12周时体质量，采用HE染色检测各组大鼠肝组织病理形态表现，采用试剂盒检测各组大鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和丙二醛（MDA）水平及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）和谷氨酸氨基转移酶（ALT）活性以及白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素12（IL-12）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，采用16S rRNA测序方法检测各组大鼠肠道菌群组成。 结果 与对照组比较，高脂血症模型组大鼠体质量从高脂饲料饲养第8周开始明显升高（P<0.05或P<0.01或P<0.001）；与高脂血症模型组比较，第11和12周洛伐他汀组大鼠体质量明显降低（P<0.05）。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠肝脏表面较为粗糙并呈苍白色，边缘厚钝，形态肿大，有颗粒感和油腻感；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠肝脏呈淡褐红色，质软，边缘稍钝，体积减小，颗粒感和油腻感较轻。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠肝脏细胞肿胀且排列紊乱，细胞核固缩，分布大量炎性细胞，且胞内有大量空泡样变性；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠肝脏细胞肿胀程度和变性程度明显减轻，肝细胞排列较整齐、结构较完整，炎症细胞浸润减少，空泡样变性减少。与对照组比较，高脂血症模型组血清中TC、TG和LDL-C水平明显升高（P<0.05），HDL-C水平明显降低（P<0.05）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠血清中TC、TG和LDL-C水平明显降低（P<0.05），HDL-C水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠血清中MDA水平和ALT及AST活性明显升高（P<0.05），SOD和GSH-Px活性明显降低（P<0.05）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠血清中MDA水平和ALT及AST活性明显降低（P<0.05），SOD和GSH-Px活性明显升高（P<0.05）。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α水平明显升高（P<0.05）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α水平明显降低（P<0.05）。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠ACE指数和Chao1指数明显降低（P<0.05）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠ACE指数和Chao1指数明显升高（P<0.05或P<0.01）。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠肠道内厚壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）相对丰度明显升高（P<0.001），拟杆菌门（Bacteroidetes）和放线菌门（Actinobacteria）相对丰度明显降低（P<0.001）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠肠道内Firmicutes和Proteobacteria相对丰度明显降低（P<0.05或P<0.01），Bacteroidetes和Actinobacteria相对丰度未见明显变化。与对照组比较，高脂血症模型组大鼠肠道内乳杆菌属（Lactobacillus）相对丰度明显降低（P<0.001），拟杆菌属（Bacteroides）、脱硫弧菌属（Desulfovibrio）和梭菌属（Clostridium）相对丰度明显升高（P<0.01或P<0.001）；与高脂血症模型组比较，洛伐他汀组大鼠肠道内Lactobacillus相对丰度未见明显变化，Bacteroides、Desulfovibrio和Clostridium相对丰度明显降低（P<0.05或P<0.01或P<0.001）。 结论 洛伐他汀对高脂血症诱导的大鼠肝损伤具有改善作用，其机制可能与洛伐他汀改善肠道菌群组成和抑制氧化应激及炎症损伤有关。

目的 探讨铁皮石斛西洋参颗粒（DPQG）对过度训练小鼠的抗疲劳作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 48只小鼠随机分为对照组（等体积蒸馏水）、 低剂量DPQG组（400 mg·kg^-1 DPQG）、中剂量DPQG组（800 mg·kg^-1 DPQG）和高剂量DPQG组（1 600 mg·kg^-1 DPQG），DPQG灌胃干预35 d，末次给药30 min后各组小鼠进行转棒实验和游泳耐力实验。采集各组小鼠血清、肝组织与肌肉组织，采用ELISA法检测各组小鼠血清中乳酸（LAC）水平和乳酸脱氢酶（LDH）活性及肌肉组织中丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及肌糖原和肝糖原水平，采用HE染色观察小鼠肌肉组织病理形态表现。利用转录组学与代谢组学技术鉴定对照组和高剂量DPQG组小鼠肌肉组织中关键基因与代谢产物并分析差异表达基因（DEGs）与差异代谢物的相关性。 结果 与对照组比较，各剂量DPQG组小鼠转棒时间明显增加（P<0.05），高剂量DPQG组小鼠游泳力竭时间明显增加（P<0.05）。与对照组比较，中和高剂量DPQG组小鼠LDH、SOD和GSH-Px活性升高（P<0.01）。与对照组比较，中和高剂量DPQG组小鼠MDA和肝糖原水平明显降低（P<0.01）。转录组学测序，DPQG主要作用于Trib3和Olfr495等DEGs；基因本体（GO）功能富集分析与京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析，DEGs主要富集于嗅觉相关过程与信号通路；代谢组学KEGG分析，差异代谢物主要富集于炎症介质对色氨酸（TRP）的调节通路上；转录组学与代谢组学联合分析，piezo1基因与差异代谢物β1-卡茄碱（r=-1，P<0.05）和椴树碱（r=1，P<0.05）相关度较高。 结论 DPQG通过调节LAC代谢和糖原平衡以及维持体内氧化/抗氧化平衡对过度训练小鼠发挥一定的抗疲劳作用，其作用机制与Olfr495和piezo1基因以及炎症介质对TRP的调节通路有关。

目的 探讨胎盘表达转录因子1（Plet1）在来曲唑构建的多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠卵巢组织中的表达及其对大鼠卵巢颗粒细胞增殖调控作用，并阐明Plet1参与PCOS发病的可能机制。 方法 取课题组前期研究采集的大鼠卵巢样本，分为对照组和PCOS组，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测2组大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA和蛋白表达水平。另取24只大鼠，采用阴道涂片鉴定将大鼠分为发情前期、发情期、发情后期及发情间期4组，RT-qPCR法检测不同发情周期大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA表达水平，免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织中Plet1表达定位。转染大鼠卵巢颗粒细胞，分为对照组、si-Plet1-rat-266组、si-Plet1-rat-383组和si-Plet1-rat-554组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性，采用RT-qPCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞中细胞分裂蛋白激酶6（CDK6）和P53 mRNA表达水平。 结果 RT-qPCR法检测，Plet1 mRNA在正常大鼠卵巢中表达，Plet1 mRNA表达水平在各发情周期组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。免疫组织化学检测，Plet1蛋白在大鼠卵巢组织中表达定位主要在卵巢颗粒细胞和黄体细胞。与对照组比较，PCOS组大鼠卵巢中Plet1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低 （P<0.05）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞中Plet1 mRNA表达水平明显降低（P<0.01），且下降幅度最大。CCK-8法检测，与对照组比较，si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性明显降低（P<0.05）。与对照组比较，si-Plet1-rat-383组CDK6和P53 mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。 结论 Plet1蛋白在正常大鼠卵巢组织中表达分布主要集中于卵巢颗粒细胞和黄体细胞。PCOS模型大鼠卵巢组织内Plet1基因表达下调，干扰Plet1基因表达可抑制大鼠卵巢颗粒细胞增殖。

目的 探讨微小RNA-325-3p（miR-325-3p）过表达对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响，阐明其作用机制。 方法 收集25例明确诊断为结肠癌患者的肿瘤组织及对应的癌旁正常组织。采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测癌旁正常组织和结肠癌组织中miR-325-3p和进化和淋巴兴趣相关结构域蛋白1（PRELID1）mRNA表达水平。采用RT-qPCR法和Western blotting法检测人正常结肠细胞NCM460及结肠癌细胞SW480、HCT116和HT-29中miR-325-3p及PRELID1 mRNA表达水平和PRELID1蛋白表达水平。将SW480细胞分为对照组、NC-mimics组、miR-325-3p mimics组、miR-325-3p mimics+oe-NC组和miR-325-3p mimics+oe-PRELID1组。采用Transwell小室实验和细胞划痕实验分别检测各组细胞侵袭及迁移能力，Western blotting法检测各组细胞中上皮-间质转化（EMT）中E-钙黏蛋白（E-Cadherin）、N-钙黏蛋白（N-Cadherin）和波形蛋白（Vimentin）表达水平。使用Targetscan生物信息学网站预测miR-325-3p下游靶基因，采用双荧光素酶实验验证miR-325-3p与PRELID1的靶向调控关系。 结果 与癌旁正常组织比较，结肠癌组织中miR-325-3p表达水平明显降低（P<0.05），PRELID1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05），且结肠癌组织中miR-325-3p和PRELID1 mRNA表达水平呈负相关关系（r<0，R²=0.392， P<0.001）。 与NCM460细胞比较， SW480、 HCT116和HT-29细胞中miR-325-3p表达水平均明显降低（P<0.05），PRELID1 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。与对照组和NC-mimics组比较，miR-325-3p mimics组SW480细胞侵袭细胞数明显减少（P<0.05），划痕愈合率降低（P<0.05），E-Cadherin蛋白表达水平升高（P<0.05），N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低（P<0.05）。双荧光素酶实验证实PRELID1是miR-325-3p的直接靶标。与miR-325-3p mimics+oe-NC组比较，miR-325-3p mimics+oe-PRELID1组SW480细胞侵袭细胞数明显增加（P<0.05），划痕愈合率升高（P<0.05），E-Cadherin蛋白表达水平降低（P<0.05），N-Cadherin和Vimentin蛋白表达水平均升高（P<0.05）。 结论 过表达miR-325-3p可靶向下调PRELID1表达，抑制EMT进程，进而抑制SW480细胞侵袭和迁移。

目的 探讨激肽释放酶5（KLK5）过表达对宫颈癌细胞的增殖、侵袭及顺铂（DDP）敏感性的影响，并阐明其作用机制。 方法 采用Western blotting法验证KLK5稳定转染过表达的宫颈癌细胞（ME180-OE-KLK5）。取对数生长期的宫颈癌ME180-NC-KLK5和OE-KLK5细胞，分别将其接种于裸鼠皮下建立皮下移植瘤模型，造模成功后裸鼠随机分为生理盐水对照组（NC-KLK5+0.9%NaCl组）、DDP治疗组（NC-KLK5+DDP组）、KLK5过表达组（OE-KLK5+0.9%NaCl组）和KLK5过表达联合DDP组（OE-KLK5+DDP组），每组5只。NC-KLK5+DDP组和OE-KLK5+DDP组裸鼠按照5 mg·kg^-1的比例腹腔注射DDP；NC-KLK5+0.9%NaCl组和OE-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠按照0.01 mL·g^-1的比例腹腔注射生理盐水。每2 d称裸鼠质量，并记录瘤体的长径和短径，计算肿瘤体积，绘制瘤体生长曲线，于第14天给药结束后24 h，处死裸鼠，剥离瘤体并称质量。采用HE染色法观察各组裸鼠肿瘤组织病理形态表现，免疫组织化学染色法观察各组裸鼠肿瘤组织中KLK5、Ki67和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平。 结果 与ME180-NC-KLK5细胞比较，ME180-OE-KLK5细胞中KLK5蛋白表达水平升高（P<0.05）。皮下移植瘤种植后第1周，各组裸鼠进食和活动状态良好，体质量逐渐增长。第2周开始进入给药阶段，NC-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠进食和活动状态及体质量较第1周无明显变化；与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，NC-KLK5+DDP组裸鼠开始出现食欲减退，体质量不增长，活动状态减弱；第3周药物治疗期间，NC-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠进食及活动状态较第2周无明显变化，开始出现体质量不增长；与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，NC-KLK5+DDP组裸鼠进食和活动状态明显减弱，体质量降低。与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，NC-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤体积减小（P<0.01）；与NC-KLK5+DDP组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤体积明显增大（P<0.001）；与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠移植瘤体积增大（P<0.001）；与OE-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤体积差异无统计学意义（P>0.05）。与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，NC-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤质量降低（P<0.05）；与NC-KLK5+DDP组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠瘤质量明显升高（P<0.001）；与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠瘤质量升高（P<0.001）；与OE-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠瘤体质量差异无统计学意义（P>0.05）。与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠移植瘤细胞核异质性更强；OE-KLK5+DDP组和NC-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤细胞出现形态学改变，表现为细胞核固缩、碎裂，肿瘤细胞体积缩小以及出现坏死和凋亡等。与NC-KLK5+DDP组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤坏死程度更明显。与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，NC-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤组织中KLK5、Ki67和MMP-9蛋白表达水平降低（P<0.05）；与NC-KLK5+DDP组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤组织中KLK5、Ki67和MMP-9蛋白表达水平升高（P<0.001）；与NC-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+0.9%NaCl组裸鼠移植瘤组织中KLK5、Ki67和MMP-9蛋白表达水平升高（P<0.001）；与OE-KLK5+0.9%NaCl组比较，OE-KLK5+DDP组裸鼠移植瘤组织中KLK5、Ki67和MMP-9蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 KLK5过表达可促进DDP处理的宫颈癌ME180细胞裸鼠皮下移植瘤的生长，上调移植瘤组织中Ki-67和MMP-9蛋白表达，降低移植瘤对DDP的敏感性。

目的 探讨β-榄香烯对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞线粒体结构及功能的影响，并阐明其治疗NSCLC的作用机制。 方法 将对数生长期的A549细胞分为空白对照组（0 mg·L^-1 β-榄香烯），低、中和高剂量β-榄香烯组（10、25和50 mg·L^-1 β-榄香烯）及溶剂对照组（等体积0.5%乙醇）。处理24 h后，采用MTT法检测各组的细胞活性，透射电镜观察各组细胞的线粒体形态表现，比色法检测各组细胞中三磷酸腺苷（ATP）水平，JC-1流式法检测各组细胞的线粒体膜电位，线粒体膜通透性转换孔实验检测各组细胞的线粒体膜通透性。 结果 MTT法，与空白对照组比较，低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞活性逐渐降低（P<0.05）；溶剂对照组A549细胞活性无明显变化，差异无统计学意义（P<0.05）。透射电镜法，与空白对照组比较，低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞的线粒体出现肿胀、空泡化、峪排列紊乱和溶解等现象；溶剂对照组A549细胞的线粒体形态无明显变化。比色法，与空白对照组比较，低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞中ATP水平逐渐降低（P<0.05）；溶剂对照组A549细胞中ATP水平无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。JC-1流式法，与空白对照组比较，低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞的线粒体膜电位降低，Q2-4区域细胞百分率升高（P<0.05）；溶剂对照组的A549细胞线粒体膜电位与Q2-4区域细胞百分率无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。线粒体膜通透性转换孔实验法，与空白对照组比较，低、中、高剂量β-榄香烯组A549细胞线粒体膜通透性增加，各组M4区域细胞百分率升高（P<0.05）；溶剂对照组A549细胞的线粒体膜通透性和M4区域细胞百分率均无明显变化，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 β-榄香烯能够抑制A549细胞的增殖，其作用机制可能是通过降低A549细胞中ATP水平和线粒体膜电位、改变细胞线粒体形态以及增加线粒体膜通透性而破坏A549细胞线粒体结构，引起线粒体功能损伤。

目的 探讨血必净注射液对抗N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）脑炎小鼠血脑屏障（BBB）损伤的作用，并阐明其对辅助性T细胞17（Th17）/调节性T细胞（Treg）失衡的调控作用。 方法 采用谷氨酸受体N1亚基（GluN1）356-385抗原肽诱导建立主动免疫抗NMDAR脑炎小鼠模型，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测小鼠血清中抗NMDAR免疫球蛋白G（IgG）抗体水平。选取健康未建模小鼠为对照组，建模成功小鼠随机分为模型组、低剂量血必净注射液（XBJ-L）组和高剂量血必净注射液（XBJ-H）组，每组10只，XBJ-L组和XBJ-H组小鼠于建模后分别腹腔注射5和10 mL·kg^-1血必净注射液。采用Longa评分法评估各组小鼠神经功能损伤情况，伊文思蓝（EB）染色检测各组小鼠BBB通透性，免疫荧光染色法检测各组小鼠大脑皮质中闭锁小带蛋白1（ZO-1）和闭合蛋白（Occludin）表达情况，Western blotting法检测各组小鼠大脑皮质中ZO-1、Occludin、紧密连接蛋白5（Claudin-5）和神经特异核蛋白（NeuN）蛋白表达水平，ELISA法检测各组小鼠血清中Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素（IL）-17、IL-22和IL-10水平，流式细胞术检测各组小鼠外周血中Th17和Treg细胞百分率并计算Th17/Treg比值。 结果 经GluN1 356-385抗原肽诱导的小鼠血清中NMDAR IgG抗体呈阳性，说明造模成功。与对照组比较，模型组小鼠神经功能损伤评分明显升高（P<0.05）；脑组织中EB水平明显升高（P<0.05），大脑皮质中ZO-1和Occludin荧光染色强度降低，大脑皮质中ZO-1、Occludin、Claudin-5和NeuN蛋白表达水平明显降低（P<0.05），血清中IL-17和IL-22水平明显升高（P<0.05），IL-10水平明显降低（P<0.05），外周血中Th17细胞百分率明显升高（P<0.05），Treg细胞百分率明显降低（P<0.05），Th17/Treg比值明显增加（P<0.05）。与模型组比较，XBJ-L组和XBJ-H组小鼠神经功能损伤评分明显降低（P<0.05）；脑组织中EB水平明显降低（P<0.05）；大脑皮质中ZO-1和Occludin荧光染色强度升高，ZO-1、Occludin、Claudin-5和NeuN蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；血清中IL-17和IL-22水平明显降低（P<0.05），IL-10水平明显升高（P<0.05）；外周血中Th17细胞百分率明显降低（P<0.05），Treg细胞百分率明显升高（P<0.05），Th17/Treg比值明显减小（P<0.05）。与XBJ-L组比较，XBJ-H组小鼠神经功能损伤评分明显降低（P<0.05）；脑组织中EB水平明显降低（P<0.05）；大脑皮质中ZO-1和Occludin荧光染色强度升高（P<0.05），ZO-1、Occludin、Claudin-5和NeuN蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；血清中IL-17和IL-22水平明显降低（P<0.05），IL-10水平明显升高（P<0.05）；外周血Th17细胞百分率明显降低（P<0.05），Treg细胞百分率明显升高（P<0.05），Th17/Treg比值明显减小（P<0.05）。 结论 血必净注射液能够改善抗NMDAR脑炎小鼠BBB损伤，调节Th17/Treg趋于平衡，从而减轻抗NMDAR脑炎神经功能损伤。

目的 探究生肌玉红膏提取物（SYOE）对斑马鱼皮肤创面愈合的促进作用，并阐明其作用机制。 方法 取320条野生型AB系斑马鱼，于侧腹部切口建立创面模型后，随机分为对照组、低剂量SYOE组（置于含0.625 mg·L^-1 SYOE的水中饲养）、高剂量SYOE组（置于含1.250 mg·L^-1 SYOE的水中饲养）和尿囊素组（置于含1.000 mg·L^-1尿囊素的水中饲养），每组80条。分别于损伤后第7、14和21天拍照记录斑马鱼皮肤创面面积，计算创面愈合率。于不同时间点收集各组斑马鱼创面皮肤组织制作组织切片，采用HE染色观察第0、7、14和21天各组斑马鱼皮肤创面边缘宽度，天狼星红染色检测损伤后第2、4、6和8天各组斑马鱼皮肤创面组织中的胶原蛋白水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测损伤后第4天各组斑马鱼皮肤创面组织中Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法分析损伤后第4天各组斑马鱼皮肤创面组织中Col Ⅰ编码基因col1a1a、col1a1b、col1a2和α-SMA以及转化生长因子β（TGF-β）/Smad信号通路关键因子tgfb1a、smad2和smad3a mRNA表达水平。 结果 创面愈合评估，与对照组比较，损伤后第7、14和21天低剂量SYOE组、高剂量SYOE组及尿囊素组斑马鱼皮肤创面愈合率明显升高（P<0.05或P<0.01），其中高剂量SYOE组在第21天时斑马鱼皮肤创面愈合率达84%。HE染色，与对照组比较，损伤后第14和21天，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组及尿囊素组斑马鱼皮肤创面边缘宽度明显减小（P<0.05或P<0.01）。天狼星红染色，损伤后第6和8天，与对照组比较，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中胶原蛋白水平明显升高（P<0.01）。ELISA法检测，损伤后第4天，与对照组比较，低剂量SYOE组、高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中Col Ⅰ及α-SMA水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR法检测，损伤后第4天，与对照组比较，低剂量SYOE组斑马鱼皮肤创面组织中col1a1b、col1a2、α-SMA、tgfb1a和smad2 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），高剂量SYOE组和尿囊素组斑马鱼皮肤创面组织中col1a1a、col1a1b、col1a2、α-SMA、tgfb1a、smad2及smad3a mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 SYOE能够增加斑马鱼皮肤创面的胶原蛋白沉积，促进皮肤创面愈合，并提高TGF-β/Smad信号通路相关基因的表达水平。

目的 探讨外泌体（Exos）负载的微小RNA-520a-5p（miR-520a-5p）对胎鼠宫内生长受限（FGR）妊娠结局的影响，并阐明其作用机制。 方法 体外培养小鼠胎盘间充质干细胞（MSCs），并利用miR-520a-5p腺病毒载体（Ad-miR-520a-5p）转染获得高负载miR-520a-5p的Exos（miR-520a-5p-MSCs-Exos）并进行鉴定。C57BL/6小鼠按照雌雄2∶1的比例合笼交配成功妊娠，将40只怀孕小鼠分为对照组、FGR组、NC-MSCs-Exos组和miR-520a-5p-MSCs-Exos组，每组10只。除对照组外，其余组小鼠采用孕期过度暴露地塞米松（DEX）诱发妊娠期母体小鼠的FGR模型。检测胎鼠出生体质量和生后1、2、3及4周体质量，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNA甲基转移酶3b（DNMT3b）和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达水平，Western blotting法检测各组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平，甲基化特异性PCR（MSP）分析各组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率，双荧光素酶报告基因实验验证miR-520a-5p与DNMT3b之间的靶向关系。 结果 透射电子显微镜（TEM）和纳米粒子追踪分析（NTA）分析，Exos呈球形，粒径集中在100 nm附近；Western blotting法，Exos表面生物标志物CD63和CD81均呈阳性表达；RT-qPCR法，与NC-MSCs-Exos和Ad-NC-MSCs-Exos比较，Ad-miR-520a-5p-MSCs-Exos中miR-520a-5p表达水平升高（P<0.001）。4组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量比较差异均有统计学意义（F=36.084，F=19.851，F=77.755，F=103.223；P<0.001）。与对照组比较，FGR组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均降低（P<0.05）；与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较，miR-520a-5p-MSCs-Exos组子代小鼠出生体质量和生后1、2及3周体质量均升高（P<0.05）。单因素方差分析，4组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p、DNMT3b和VEGF mRNA表达水平比较差异有统计学意义（F=103.224，F=856.460，F=214.563；P<0.001）；组间两两比较，与对照组比较，FGR组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平降低（P<0.05），DNMT3b mRNA表达水平升高（P<0.05）；与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较，miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中miR-520a-5p和VEGF mRNA表达水平升高（P<0.05），DNMT3b mRNA表达水平降低（P<0.05）。单因素方差分析，4组小鼠胎盘组织中DNMT3b和VEGF蛋白表达水平比较差异有统计学意义（F=245.601，F=149.360；P<0.001）；组间两两比较，与对照组比较，FGR组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白水平升高（P<0.05），VEGF蛋白表达水平降低（P<0.05）；与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较，miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中DNMT3b蛋白表达水平降低（P<0.05），VEGF蛋白表达水平升高（P<0.05）。单因素方差分析，4组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率比较差异有统计学意义（F=687.096，P<0.001）；组间两两比较，与对照组比较，FGR组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率升高（P<0.05）；与FGR组和NC-MSCs-Exos组比较，miR-520a-5p-MSCs-Exos组小鼠胎盘组织中VEGF启动子甲基化率降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验，与miR-NC组比较，miR-520a-5p组DNMT3b-WT报告载体细胞的荧光素酶活性明显降低（P<0.05）；与miR-NC组比较，miR-520a-5p组DNMT3b-MUT报告载体细胞的荧光素酶活性无明显改变，差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 高负载miR-520a-5p的MSCs来源的Exos可能通过靶向下调DNMT3b表达，抑制VEGF甲基化，促进VEGF表达，改善FGR胎鼠妊娠结局。

目的 通过人真皮毛乳头细胞（HDPCs）体外实验、C57BL/6小鼠体内实验和人体功效测试，探讨防脱育发液（CHAaHGS）对毛发生长的影响，阐明其潜在作用机制。 方法 将HDPCs分为对照组、CHAaHGS组和米诺地尔组。采用MTT法检测各组HDPCs增殖活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组HDPCs上清液中血管内皮生长因子（VEGF）、肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）和转化生长因子β1（TGF-β1）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组HDPCs中VEGF、HGF、IGF-1、TGF-β1和碱性磷酸酶（ALP）mRNA表达水平，Western blotting法检测各组HDPCs中β-连环蛋白（β-catenin）、蓬乱蛋白1（DVL1）、糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）、磷酸化GSK-3β（p-GSK-3β）和无翅型MMTV整合位点家族蛋白（Wnt）家族成员3a（Wnt3a）蛋白表达水平。取18只小鼠随机分为对照组、CHAaHGS组和米诺地尔组，每组6只。采用脱毛膏建立小鼠脱毛模型，脱毛后立即给予相应药物处理。检测第21天各组小鼠新生毛发长度和毛发质量，采用HE染色观察各组小鼠第7天背部脱毛区皮肤毛囊形态表现，ELISA法检测各组小鼠背部脱毛区皮肤组织中VEGF、HGF、IGF-1和TGF-β1水平。将60名受试者随机分成对照组和CHAaHGS组，每组30名。检测第0、4、8和12周各组受试者脱发数量和毛发密度。 结果 MTT法，与对照组比较，50 mg·L^-1 CHAaHGS组细胞增殖活性明显升高（P<0.01）。ELISA法，与对照组比较，CHAaHGS组细胞上清液中VEGF、HGF和IGF-1水平明显升高（P<0.05或P<0.01），TGF-β1水平明显降低（P<0.01）。RT-qPCR法，与对照组比较，CHAaHGS组细胞中VEGF、HGF、IGF-1和ALP mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），TGF-β1 mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；Western blotting法，与对照组比较，CHAaHGS组细胞中β-catenin、DVL1、p-GSK-3β和Wnt3a蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），GSK-3β蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。动物实验，第21天时，与对照组比较，CHAaHGS组小鼠新生毛发长度明显增长（P<0.05），毛发质量明显增加（P<0.01）。第7天时，HE染色，与对照组比较，CHAaHGS组小鼠毛囊间距明显减少（P<0.05），毛囊数量明显增加（P<0.01）；ELISA法，与对照组比较，CHAaHGS组小鼠脱毛区皮肤组织中VEGF、HGF和IGF-1水平明显升高（P<0.05或P<0.01），TGF-β1水平明显降低（P<0.05）。人体功效试验测试，与对照组比较，第12周时CHAaHGS组受试者脱发数量明显减少（P<0.01），局部毛发密度增加（P<0.05）。 结论 CHAaHGS对毛发生长具有促进作用，其机制可能与其增加HDPCs增殖活性，诱导VEGF、HGF和IGF-1分泌及激活Wnt/β-Catenin信号通路有关。

目的 探讨赤藓糖醇对机体糖脂代谢的影响，并基于代谢组学研究赤藓糖醇影响肝脏代谢的作用机制。 方法 雄性ICR小鼠随机分为正常组、蔗糖组（2%蔗糖）、低剂量赤藓糖醇（1%赤藓糖醇）组、中剂量赤藓糖醇（2%赤藓糖醇）组和高剂量赤藓糖醇（4%赤藓糖醇）组，每组10只。配制相应浓度蔗糖和赤藓糖醇溶液并置于水瓶中，小鼠可自由饮用和进食，连续观察12周，测定各组小鼠体质量、进食量和饮水量。采用试剂盒检测各组小鼠血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和血糖水平，计算小鼠肝脏指数。采用超高效液相色谱-轨道阱高分辨质谱（UPLC-OE-MS）非靶标代谢组学检测正常组和高剂量赤藓糖醇组小鼠肝脏代谢物，采用生物信息学以变量重要性投影（VIP） >1且校正后P<0.05为条件筛选2组小鼠肝脏差异代谢物，利用京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析探讨肝脏差异代谢物的功能作用。 结果 与正常组比较，其他各组小鼠体质量、进食量、肝脏指数和血脂水平差异均无统计学意义（P>0.05），高剂量赤藓糖醇组小鼠血糖水平明显升高（P<0.01）。 2组小鼠肝脏代谢组学分析共鉴定1 144个代谢物， 主要包括脂质和脂类小分子（17.39%）、有机酸及衍生物（10.87%）、有机杂环化合物（5.80%）和有机氧化合物（5.07%）等。与正常组比较，高剂量赤藓糖醇组小鼠共有138个肝脏差异代谢物，其中112个代谢物上调，26个代谢物下调。KEGG信号通路富集分析，差异代谢物主要富集于代谢、类固醇激素生物合成、皮质醇合成与代谢和库欣综合征等通路；进一步对代谢通路进行拓扑分析，差异代谢物主要涉及鞘脂代谢、三羧酸循环、核黄素代谢、类固醇激素生物合成和嘌呤代谢等信号通路。 结论 长期摄入高剂量赤藓糖醇可引起小鼠血糖水平升高，其机制可能是通过干扰核黄素代谢影响三羧酸循环和干扰鞘脂代谢，导致血糖控制系统受损。

目的 利用嵌段共聚物二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG₂₀₀₀）制备包裹紫杉醇二聚体（PTX₂）的纳米药物PTX₂纳米粒子（NPs），即PTX₂ NPs，探讨PTX₂ NPs对人肺癌A549细胞的杀伤效果及其对细胞凋亡的影响。 方法 利用纳米沉淀法制备PTX₂ NPs，采用动态光散射法（DLS）检测其粒径分布，透射电子显微镜（TEM）观察PTX₂ NPs的超微结构。在0和10 mmol·L^-1 二硫苏糖醇（DTT）处理后，采用透析法检测PTX₂ NPs体外释放情况。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测不同浓度PTX₂和PTX₂ NPs（0.000 1、0.001 0、0.010 0、0.100 0和1.000 0 μmol·L^-1）处理后各组A549细胞存活率。将A549细胞分为对照组、PTX₂和PTX₂ NPs组，采用细胞活/死染色法检测各组A549细胞生存情况，流式细胞术检测各组人肺癌A549细胞凋亡率。 结果 DLS检测，PTX₂ NPs粒径为144.7 nm，TEM下呈均一圆球结构；PTX₂ NPs能够在还原环境中持续释放紫杉醇（PTX），72 h累积释放率约为84%。CCK-8法，PTX₂和PTX₂ NPs均抑制A549细胞增殖且呈剂量依赖性。在PTX浓度<0.01 μmol·L^-1时，与PTX₂组比较，PTX₂ NPs组A549细胞存活率明显降低（P<0.01或P<0.001）。活/死细胞染色法，与PTX₂组比较，PTX₂ NPs组红色荧光标记的死细胞数量增加。流式细胞术，与对照组和PTX₂组比较，PTX₂ NPs组A549细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 成功制备包裹PTX₂的纳米药物PTX₂ NPs，能够响应性释放PTX，对人肺癌A549细胞具有较PTX₂更明显的杀伤作用。

目的 探讨干扰素γ（IFN-γ）对神经母细胞瘤细胞增殖的影响和IFN-γ潜在的基因签名，以及该基因签名在神经母细胞瘤细胞中的表达及其与不良预后的关系，阐明IFN-γ及其基因签名在神经母细胞瘤中的作用。 方法 选取神经母细胞瘤细胞SK-N-BE（2）（原癌基因N-MYC扩增型）和SH-SY5Y（原癌基因N-MYC 非扩增型）细胞，分别使用不同浓度（0、500、750、1 000和1 500 μg·L^-1）IFN-γ处理24 h后，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测细胞增殖活性，并收集细胞样本进行转录组测序，确定IFN-γ基因签名。收集23例神经母细胞瘤组织和6例正常肾上腺组织，采用免疫组织化学法（IHC）检测IFN-γ基因签名的表达。根据IFN-γ基因签名表达水平将神经母细胞瘤组织分为SULT2B1低表达和高表达组，分析IFN-γ基因签名表达水平与患者不良预后的关系。 结果 CCK-8法，随着IFN-γ浓度增加，SK-N-BE（2）细胞增殖活性明显降低（P<0.01），4组SK-N-BE（2）细胞抑制率分别为6.73%、6.77%、7.67%和9.19%；随着IFN-γ浓度升高，SH-SY5Y细胞增殖活性明显升高（P<0.01），4组SH-SY5Y细胞增殖率分别为46.80%、79.19%、70.30%和72.33%。转录组测序分析确定了IFN-γ的基因签名可能为羟基类固醇磺基转移酶2B1（SULT2B1）。IHC检测，神经母细胞瘤组织中SULT2B1蛋白表达量明显升高。临床资料分析，SULT2B1低表达组与高表达组患者年龄（Z=-2.618，P=0.018）、淋巴结转移（χ²=4.439，P=0.035）和远处转移（χ²=5.856，P=0.016）情况比较差异有统计学意义。 结论 IFN-γ可以抑制SK-N-BE（2）细胞增殖，促进SH-SY5Y细胞增殖；IFN-γ的基因签名可能为SULT2B1；SULT2B1在神经母细胞瘤组织中表达上调，且SULT2B1高表达与神经母细胞瘤患者不良预后有关联。

目的 探讨高度近视（HM）患者与非HM者在视网膜结构和微循环上的变化，并阐明相关指标与眼轴长度（AL）的关系。 方法 选取40例单纯HM患者（非病理性近视）的80只眼作为病例组，选取年龄和性别相匹配的40例非HM者的80只眼作为对照组。所有研究对象均行最佳矫正视力（BCVA）、AL、等效球镜（SE）和光学相干断层扫描血管成像（OCTA）检查。采用OCTA检测2组研究对象浅层视网膜毛细血管丛（SCP）、深层视网膜毛细血管丛（DCP）和视盘周围放射状毛细血管（RPC）血管密度、黄斑中心凹厚度（CMT）以及黄斑中心凹无血管区（FAZ）的面积及体积，分析2组研究对象各项指标的差异。采用生物测量仪测量2组研究对象的AL，并分析AL与上述各项指标的关系。 结果 2组研究对象年龄和性别构成比比较差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较，病例组患者眼视网膜黄斑区域除中心凹处外整体、旁中心凹和中心凹周围的SCP血管密度及DCP血管密度均明显降低（P<0.05）。与对照组比较，病例组患者视盘区域RPC血管密度在整体、周围、周围上半部和周围下半部均明显降低（P<0.001），内盘RPC血管密度明显升高（P<0.01）。与对照组比较，病例组患者总体FAZ体积明显升高（P<0.01），旁中心凹和中心凹周围区域CMT明显降低（P<0.001）。病例组患者AL与SCP血管密度（r=-0.642，P<0.001）、DCP血管密度（r=-0.388，P<0.001）、RPC血管密度（r=-0.639，P<0.001）和CMT（r=-0.495，P<0.001）均呈负相关关系；与FAZ体积呈正相关关系（r=0.580，P<0.001）；与FAZ面积无相关性（r=-0.062，P=0.587）。 结论 HM患者在早期即可能出现SCP、DCP和RPC血管密度降低及中心视网膜变薄和FAZ体积增加，且随着AL增加，SCP、DCP和RPC血管密度及CMT降低，FAZ体积增加，AL与上述指标有关联。

目的 评估FBJ鼠科骨肉瘤病毒癌基因同源物B（FOSB）基因在免疫球蛋白A肾病（IgAN）和常见慢性肾脏病（CKD）中的表达特征，探讨其作为潜在关键候选基因或生物标志物的价值。 方法 从基因表达综合数据库（GEO）中下载IgAN、糖尿病肾病（DKD）、膜性肾病（MN）和微小病变肾病（MCD）肾小球样本的RNA测序数据集。采用最小绝对收缩和选择算子（LASSO）回归、随机森林（RF）和支持向量机（SVM）机器学习方法筛选相应CKD的特征基因。对IgAN的特征基因进行基因本体论（GO）功能富集和京都基因与基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析。采用pROC包绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估特征基因对IgAN的诊断效能，并筛选诊断效能最高的基因进行基因集富集分析（GSEA），分析其与IgAN核心免疫细胞浸润的相关性。基于Nephroseq v5平台分析肾组织中FOSB表达水平与肾功能的关系。收集IgAN、DKD、MN和MCD患者肾脏组织标本各5例及5例癌旁正常肾组织标本（对照组），采用免疫组织化学染色法检测各组肾组织中FOSB蛋白表达水平。 结果 共筛选出110个IgAN肾小球差异表达基因（DEGs），其中FOSB、NR4A2和DUSP1为特征基因。IgAN组FOSB mRNA表达水平明显低于健康对照组（P<0.05）。GO功能富集分析，IgAN特征基因主要富集于多巴胺生物合成、中脑多巴胺能神经元分化、肽基丝氨酸/苏氨酸去磷酸化及对皮质酮的反应等生物过程。KEGG信号通路富集分析，IgAN特征基因主要富集于可卡因成瘾、安非他命成瘾、白细胞介素17（IL-17）信号通路、醛固酮合成与分泌和5-羟色胺能突触等信号通路。ROC曲线分析，FOSB对IgAN具有良好的诊断效能。GSEA分析，FOSB高表达组中，DEGs在精氨酸和脯氨酸代谢、丁酸代谢、成红细胞白血病病毒癌基因同源物（ERBB）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路和果糖及甘露糖代谢等通路显著富集；FOSB低表达组中，DEGs在同种异体移植排斥反应、细胞外基质受体相互作用和1型糖尿病等通路显著富集。免疫细胞浸润分析，自然杀伤细胞、中性粒细胞和M1型巨噬细胞是IgAN的核心免疫细胞，且FOSB表达与中性粒细胞浸润呈正相关关系（r=0.42，P<0.05）。免疫组织化学检测，与对照组比较，IgAN、DKD、MN和MCD组患者肾小球组织中FOSB蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。 结论 FOSB基因在IgAN、DKD、MN和MCD患者肾小球组织中呈低表达，其可能是IgAN潜在的生物标志物。

目的 探讨老年肌少症肥胖伴糖尿病患者血清中3种促炎因子与肌肉质量（MM）的关系，为制订老年肌少症肥胖伴糖尿病患者的临床治疗方案提供理论依据。 方法 选择2021年1月—2023年5月于本院就诊的老年糖尿病患者，包括41例肥胖伴糖尿病患者（OD组）和46例肌少症肥胖伴糖尿病患者（SOD组），并纳入同期于本院体检的80名健康受试者（对照组）和62名单纯性肥胖症受试者（SO组）。比较4组受试者临床资料，并分析促炎因子与MM和脂肪量（FM）的关联性。将所有受试者按肌少症患病情况分组为肌少症组和正常组，采用Logistic回归模型分析肌少症的独立影响因素，并绘制受试者工作特征（ROC）曲线，判断上述因素对肌少症的预测价值。 结果 与对照组比较，SOD、OD和SO组受试者体质量指数（BMI）、FM及体脂率（BFP）均明显升高（P<0.05）；与对照组、OD组和SO组比较，SOD组受试者四肢骨骼肌质量（ASM）、四肢骨骼肌质量指数（ASMI）及握力（GS）明显降低（P<0.05），血清中白细胞介素6（IL-6）、C-反应蛋白（CRP）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平明显升高（P<0.05）。所有受试者血清中IL-6、CRP和TNF-α与ASMI呈负相关关系（r=-0.589，r=-0.621，r=-0.620；P<0.05），与BFP呈正相关关系（r=0.252，r=0.221，r=0.147；P<0.05）。与正常组比较，肌少症组受试者ASM、ASMI和GS明显降低（P<0.05），血清中IL-6、CRP和TNF-α水平明显升高（P<0.05）。单因素Logistic回归分析，IL-6、CRP和TNF-α均是肌少症的影响因素（P<0.05）。多因素Logistic回归分析，IL-6和TNF-α水平升高是肌少症的独立危险因素（OR>1，P<0.05）。ROC曲线分析，IL-6、CRP和TNF-α的曲线下面积（AUC）值均>0.700，说明上述指标对于肌少症具有较好的预测价值。 结论 促炎因子IL-6、CRP和TNF-α水平升高与老年肌少症肥胖伴糖尿病患者MM下降有关联，且IL-6和TNF-α是肌少症的独立危险因素。

目的 比较接受单或双节段腰椎后路手术的老年患者分别应用舒芬太尼静脉自控镇痛（PCIA）与布比卡因脂质体切口局部浸润麻醉（LIA）的镇痛效果，为老年腰椎手术患者术后镇痛方法的选择提供依据。 方法 选取本院全麻下择期行单或双节段腰椎后路手术的老年患者124例，按照1∶1的比例将患者分为舒芬太尼PCIA组（PCIA组）和布比卡因脂质体切口LIA组（LIA组），每组各62例，除中途退出试验者外，最终PCIA组纳入58例患者，LIA组纳入60例患者。在手术结束前30 min，给予PCIA组患者舒芬太尼1.5 μg·kg^-1联合右美托咪定1.5 μg·kg^-1的镇痛泵方案治疗。术毕，LIA组患者由脊柱外科医生沿手术切口双侧多位点注射布比卡因脂质体266 mg（生理盐水40 mL稀释）。记录2组患者术后30 min、6 h、24 h、48 h和72 h的静息视觉模拟量表（VAS）疼痛评分（非劣效界值δ=10 mm）、术后不良反应（恶心呕吐、呼吸抑制、瘙痒、便秘和头晕嗜睡等）发生情况、术后补救镇痛次数、术后48和72 h麻醉满意度评分、术后住院时长及出院时切口愈合情况等。 结果 术后30 min~48 h，LIA组患者静息VAS疼痛评分均高于PCIA组（P<0.001），而LIA组患者术后72 h静息VAS疼痛评分低于PCIA组（P<0.001）；术后30 min、24 h和48 h，非劣效性成立，布比卡因脂质体切口LIA的镇痛效果不劣于舒芬太尼PCIA；术后6 h，非劣效性不成立；术后72 h，布比卡因脂质体切口LIA的镇痛效果优于舒芬太尼PCIA（P<0.001）；与PCIA组比较，LIA组患者术后恶心呕吐发生率降低（P<0.05），2组患者术后头晕嗜睡、便秘、呼吸抑制和瘙痒发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）；与PCIA组比较，LIA组患者术后住院时长缩短（P<0.001），2组患者术后补救镇痛次数和切口愈合等级比较差异无统计学意义（P>0.05）；LIA组患者术后48和72 h麻醉满意度评分均高于PCIA组（P<0.05）。 结论 接受单或双节段腰椎手术的老年患者术后使用布比卡因脂质体切口LIA的镇痛效果并不劣于舒芬太尼PCIA，且术后不良反应发生率更低，术后镇痛满意度评分更高。

目的 探讨大疱性类天疱疮（BP）患者的感染情况及临床转归，分析BP住院患者发生感染的危险因素，构建并评价风险预测模型。 方法 选择首次确诊为BP的住院患者126例，根据BP患者是否发生感染分为感染组52例和未感染组74例，记录2组患者感染情况及转归情况，对2组患者的一般资料、实验室检查结果、衰弱筛查FRAIL量表评分、NRS2002评分和皮损严重程度进行统计学分析，采用多因素Logistic回归模型识别患者发生感染的危险因素，采用拟合优度检验评价模型，受试者工作特征（ROC）曲线评价模型对感染的预测价值。 结果 126例BP住院患者中，发生感染52例，感染率41.27%。感染组患者死亡率高于未感染组（P<0.05），未感染组患者缓解率高于感染组（P<0.05）。未感染组和感染组患者衰弱筛查FRAIL量表评分、NRS2002评分、血清白蛋白水平、前白蛋白水平、住院次数及皮损严重程度比较差异有统计学意义（P<0.05）；多因素Logistic回归分析回归方程：Logistic（P）=-7.63+0.922×皮损严重程度+2.565×衰弱筛查FRAIL量表评分+1.214×NRS2002评分，Logistic回归模型曲线下面积为0.916。 结论 衰弱筛查FRAIL量表评分、NRS2002评分和皮损严重程度是BP住院患者发生感染的危险因素，据此构建的感染风险预测模型具有良好预测价值，可为预防BP住院患者发生感染提供新的防控思路。

目的 利用生物信息学技术分析白细胞介素33（IL-33）在胶质瘤发生发展中的作用及其相关机制，并通过组织病理学实验进行验证，探讨IL-33作为脑胶质瘤诊治辅助标志物的可能性。 方法 从UCSC XENA数据库下载多形性胶质母细胞瘤/低级别胶质瘤（GBMLGG）病例数据，包括689例胶质瘤样本数据、5例癌旁样本数据和1 152例正常脑组织样本数据。使用Mann-Whitney U检验分析GBMLGG样本和正常脑组织中IL-33 mRNA的表达差异。根据GBMLGG组织中IL-33的表达水平，将肿瘤样本分为IL-33低表达组和IL-33高表达组，使用人类蛋白质图谱（HPA）验证IL-33在GBMLGG样本中的蛋白表达差异，使用R语言DESeq2功能包对GBMLGG肿瘤病例样本进行差异表达基因（DEGs）筛选。使用基因本体论（GO）功能富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）信号通路富集分析对DEGs进行通路分析，同时利用基因集富集分析（GSEA）探讨IL-33在GBMLGG组织中显著富集的通路，使用GSVA功能包分析GBMLGG样本中的免疫浸润情况，采用survival数据包及survminer数据包分析IL-33表达水平对GBMLGG不同临床亚组患者生存期的影响，利用单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析IL-33表达与GBMLGG患者临床病理特征的关系。收集GBMLGG和对照组织样本，采用免疫组织化学染色法检测GBMLGG和正常脑组织样本中IL-33及其受体致癌性抑制基因2（ST2）的表达水平。 结果 GBMLGG组织中IL-33 mRNA和蛋白表达水平较正常脑组织明显升高。IL-33低和高表达组共有634个DEGs，包括283个上调DEGs和351个下调DEGs。GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析，DEGs与激活补体经典途径、免疫球蛋白复合物形成和介导免疫球蛋白受体结合等生物学行为有关。GBMLGG病程发展中，IL-33高表达可以降解缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸，诱导柠檬烯和蒎烯降解，促进丙酸代谢，同时激活利什曼病菌感染通路、Not样受体信号通路和异体移植排斥通路。IL-33高表达组树突状细胞（DC）和肥大细胞浸润水平高于IL-33低表达组，嗜酸性粒细胞、辅助性T细胞和中央记忆型T细胞（Tcm）浸润水平低于IL-33低表达组。IL-33表达水平与γδT细胞（Tgd）、辅助性T细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、Tcm和效应记忆T细胞（Tem）浸润呈正相关关系（P<0.05）；与DC、自然杀伤细胞（NK）、CD8+T细胞和CD56高表达的NK细胞浸润水平呈负相关关系（P<0.05）。IL-33高表达组和IL-33低表达组的GBMLGG患者总生存期（OS）、疾病特异性生存期（DSS）及无疾病间隔（DFI）比较差异无统计学意义（P>0.05）。临床亚组分析，少突神经细胞瘤组织中IL-33表达水平低于星形胶质细胞瘤和少突-星形细胞瘤，胶质母细胞瘤组织中IL-33表达水平高于少突神经胶质瘤。世界卫生组织（WHO）分期和年龄是影响GBMLGG患者预后的危险因素，IDH突变和主要治疗效果是影响患者预后的独立保护因素。免疫组织化学染色，与正常脑组织比较，恶性脑胶质瘤组织中IL-33及其受体ST2蛋白表达水平明显升高（P<0.05），且两者表达水平在正常脑组织和恶性胶质瘤组织中均呈正相关关系（P<0.05）。 结论 胶质瘤组织中IL-33表达水平明显升高，IL-33高表达可能是胶质瘤患者预后不良的潜在因素。

目的 检测阿尔茨海默病（AD）患者外周血中AD相关生物学标志物，探讨AD患者血液中抗氧化功能指标活性和水平、相关基因和蛋白表达及富硒饮食干预后的变化情况。 方法 采用简易智力量表（MMSE）结合脑电图或脑CT及临床医生诊断进行AD筛查。纳入75~90岁老年AD患者56例，其中28例作为AD正常饮食组（AD组），28例作为饮食硒干预组（Se-AD组），同时抽取30名同年龄者作为健康对照组。Se-AD组患者给予日常饮食硒补充（每日增加饮食硒15~20 μg），持续3个月。采用试剂盒和酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组研究对象血清中超氧化物歧化酶（SOD）、胆碱酯酶（CHE）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、同型半胱氨酸（Hcy）和一氧化氮（NO）水平以及血清中β淀粉样蛋白（Aβ）、微管相关蛋白（Tau）和磷酸化微管相关蛋白（p-Tau）水平，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组研究对象血液中载脂蛋白E4（ApoE4）、早老素1（PS1）、早老素2（PS2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase3）、分拣相关蛋白受体1（SORL1）、β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE1）、缺氧诱导因子1（HIF1）、核因子κB（NF-κB）、β淀粉样前体蛋白（APP）、蛋白激酶C（PKC）和Aβ mRNA表达水平。 结果 与健康对照组比较，Se-AD组和AD组患者血清中SOD活性明显降低（P<0.05），CHE活性和MDA及Hcy水平明显升高（P<0.05）；AD组患者血清中GSH-Px活性明显降低（P<0.05），NO水平明显升高（P<0.05）。与Se-AD组比较，AD组患者血清中CHE活性和Hcy水平明显升高（P<0.05）。Se-AD组和AD组患者血液中ApoE4、PS1、Caspase3、BACE1、NF-κB和APP mRNA表达水平均明显升高（P<0.05），PKC mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）；AD组患者血液中PS2 mRNA表达水平明显升高（P<0.05）；Se-AD组和AD组患者血液中Aβ mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 AD患者血清中SOD、GSH-Px和CHE 活性，MDA、NO和Hcy水平，Aβ、Tau蛋白和p-Tau蛋白水平以及外周血液中ApoE4、PS1、Caspase3、BACE1、NF-κB、PKC、PS2、Aβ和APP mRNA表达水平有变化，可用于AD患者临床诊断的参考；富硒食品对AD有一定改善作用，其作用机制与减少脑组织氧化损伤及降低AD相关基因PS2和Aβ表达有关。

目的 探讨短链脂肪酸（SCFAs）对多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢颗粒细胞损伤的改善作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 分别从PCOS患者和非PCOS患者的卵泡液中提取卵巢颗粒细胞，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blotting法检测2种细胞中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-6和IL-18 mRNA和蛋白表达水平，Western blotting法检测2种细胞中微管相关蛋白1轻链3（LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和泛素结合蛋白p62表达水平。使用不同浓度（0、6、12、24和48 mmol·L^-1）3种SCFAs乙酸钠（NaA）、丙酸钠（NaP）及丁酸钠（NaB）分别处理人卵巢颗粒细胞KGN，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测3种SCFAs作用后正常KGN细胞增殖活性。取人卵巢颗粒细胞KGN，分为对照组、脂多糖（LPS）组（1 mg·L^-1 LPS）、NaA+LPS组（48 mmol·L^-1 NaA+1 mg·L^-1 LPS）、NaP+LPS组（48 mmol·L^-1 NaP+1 mg·L^-1 LPS）、NaB+LPS组（48 mmol·L^-1 NaB+1 mg·L^-1 LPS）。采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测各组细胞上清液中雌二醇（E₂）和孕酮（P）水平，RT-qPCR法检测各组细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和 IL-18 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18蛋白表达水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值及p62蛋白表达水平。 结果 与非PCOS患者比较，PCOS患者卵巢颗粒细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18 mRNA及蛋白表达水平明显升高（P<0.05），LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值升高（P<0.05），p62蛋白表达水平降低（P<0.05）。与对照组比较，经不同浓度（6、12、24和48 mmol·L^-1）NaA、NaP和NaB处理后各组KGN细胞增殖活性差异无统计学意义（P>0.05）。与LPS组比较，NaA+LPS组、NaP+LPS组和NaB+LPS组细胞增殖活性均升高（P<0.05），细胞上清液中E₂和P水平升高（P<0.05），细胞中TNF-α、IFN-γ、IL-6和IL-18 mRNA表达水平降低（P<0.05），LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低（P<0.05），p62蛋白表达水平升高（P<0.05）。 结论 PCOS患者卵巢颗粒细胞中炎症因子水平升高，并诱导细胞自噬。SCFAs可改善炎症诱导下的卵巢颗粒细胞自噬性损伤，提高细胞增殖活性。

目的 分析单侧双通道内镜技术（UBE）和经皮椎间孔镜下椎间盘切除术（PETD）治疗腰椎间盘突出症（LDH）的疗效，探讨LDH患者微创手术方式的选择。 方法 对2020年1月—2024年6月于广东省广州市荔湾中心医院接受手术治疗的64例LDH患者临床资料进行回顾性分析，根据医患沟通结果确定手术方式，分为UBE组（30例）和PETD组（34例）。记录2组患者临床资料，包括性别、年龄、体质量指数（BMI）、责任节段百分率、病程、住院时长、手术时长、术中出血量、术中X线透视次数、手术切口长度和完全负重时间等，通过Oswestry功能障碍指数（ODI）、腰痛和腿痛视觉模拟评分（VAS）、MacNab评级及责任节段椎管面积进行疗效评价，并分析2组患者术后并发症发生情况。 结果 2组患者年龄、性别构成比、BMI、病程和责任节段百分率比较差异无统计学意义（P>0.05）。与PETD组比较，UBE组患者术中出血量、手术切口长度和完全负重时间均明显增加（P<0.01），术中透视次数减少（P<0.01）。与术前比较，2组患者术后末次随访时ODI和腰痛及腿痛VAS评分均明显降低（P<0.01），责任节段椎管面积明显增加（P<0.01）。末次随访时，与PETD组比较，UBE组患者ODI及腰痛和腿痛VAS评分均明显降低（P<0.01），责任节段椎管面积明显增加（P<0.01）。术后MacNab评级，2组患者术后优和良百分率比较差异无统计学意义（P>0.05）。2组患者并发症发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 UBE和PETD在治疗单节段LDH方面均取得了较为满意的疗效。PETD创伤更小，患者完全负重时间更早；UBE减压更彻底，患者远期治疗效果好；临床上应根据患者实际情况选择最适宜的术式。

分析1例分化型甲状腺癌（DTC）患者术后行碘-131（¹³¹I）治疗后发生胸腺生理性摄取的临床资料及该患者治疗后3年的随访病情变化，复习相关文献并结合诊疗过程探讨DTC术后行¹³¹I治疗后全身扫描可能出现假阳性的原因及胸腺良性摄取¹³¹I的发生机制、临床特点和鉴别方法等，以提高临床医师对该类情况的认识及鉴别能力，避免不必要的多次碘治疗。患者，女性，28岁，第1次¹³¹I治疗后即出现纵隔部位显影，第2次纵隔摄碘更明显，经过单光子发射计算机断层成像技术/计算机断层（SPECT/CT）扫描定位于增大的胸腺组织，该患者2次¹³¹I治疗前的刺激状态下甲状腺球蛋白（Tg）水平均较高，但Tg水平逐渐下降，除胸腺部位摄取外，无其他相关检查证据提示该患者存在DTC转移灶，随访3年，胸腺未发生病变，证实为胸腺组织生理性摄取。胸腺摄取¹³¹I是甲状腺癌术后患者全身扫描假阳性的常见原因之一，当¹³¹I治疗后的全身显像仅显示纵隔摄取时，尤其是多次¹³¹I治疗的年轻患者出现胸腺对¹³¹I的摄取浓聚程度随¹³¹I治疗次数增加而愈加明显时，即使Tg水平升高，也应充分结合SPECT/CT等影像学检查结果明确其是否为正常胸腺，从而避免不必要的重复治疗。

安氏Ⅱ类错畸形常出现下颌后缩和开唇露齿等，影响患者侧貌，甚至还可能引起上气道狭窄。安氏Ⅱ类错可分为牙性与骨性两类。针对处于生长发育高峰期的伴下颌后缩骨性Ⅱ类患者，临床常采用功能性矫治器进行下颌前导为首选治疗方案。目前国内外关于无托槽隐形矫治器应用于下颌前导治疗的临床应用仍缺乏报道。本文作者报道1例使用无托槽隐形矫治器进行下颌前导配合颌间Ⅱ类牵引以纠正骨性Ⅱ类错畸形伴深覆的青少年患者。治疗采用垂直向对前牙进行压低以改善深覆，水平向对上下颌进行扩弓以协调牙弓宽度，应用不对称前导技术改善中线。经过35个月矫治，患者凸面型和下颌后缩得到明显改善，上牙槽座点-鼻根点-下牙槽座点角（ANB）由6.8°减小至3.9°；覆、覆盖恢复正常；双侧尖牙及磨牙达到中性关系；颏唇沟深度（Si-LiPg'）和颏唇沟厚度（Pm-Pm'）较矫治前减小，颏唇沟变浅，面部软组织侧貌更为协调。下中切牙-下颌平面角（IMPA）由116.6°减小至110.7°，表明下颌前导过程中下前牙得到内收。综上，骨性Ⅱ类患者采用隐形矫治器进行下颌前导的矫治策略可以避免上下前牙过度代偿，并缩短正畸治疗周期。

穿牙槽嵴上颌窦底提升术（TSFE）在上颌后牙区垂直骨增量应用上具有侵入性小、术后反应小和手术时间短的优势。本文作者报道1例上颌后牙区剩余骨高度（RBH）严重不足，上颌窦外侧壁可见一血管且上颌窦底可见分隔患者的临床资料，应用柔性两阶段TSFE，在减小创伤和降低施耐德膜破裂及上颌窦感染等风险的同时，改善了术区的垂直骨高度，并结合相关文献进行复习。患者，男性，26岁，自诉左侧上颌后牙缺失1年余，要求修复。患者27牙缺失，角化龈正常，牙槽嵴丰满，对颌牙无伸长，缺牙近远中间隙宽度尚可，龈距离正常。锥形束CT（CBCT）显示27牙位处窦嵴距约3 mm，牙槽骨宽度约12.8 mm，骨密度正常，未见残留牙根及其他异常情况；双侧上颌窦壁未见囊肿样病变，左侧上颌窦底可见分隔，上颌窦外侧壁可见一血管。诊断为肯氏Ⅲ类上颌牙列缺损。经过两阶段TSFE，施耐德膜完整，上颌窦未发生感染，种植区骨高度由术前的3 mm提升至修复完成后的9.6 mm，骨增量效果稳定，骨结合良好，恢复了正常的咬合功能。对于上颌后牙区骨高度严重不足的患者，可以考虑柔性两阶段TSFE，在降低上颌窦感染和施耐德膜破裂等风险的同时，减小损伤并获得理想的骨增量效果。

下肢动脉硬化闭塞症（LEASO）是由于下肢动脉粥样硬化性斑块形成，引起下肢动脉狭窄和闭塞，导致肢体慢性缺血的疾病。现分析1例LEASO伴碘造影剂过敏患者的临床资料，结合其血管内超声（IVUS）引导在无造影剂的条件下进行血管内介入手术治疗的情况和相关文献进行分析。患者，女性，53岁，左下肢发凉麻木，行走后疼痛2年，加重2个月，最远跛行距离<50 m。下肢动脉CT血管造影（CTA）提示“左髂动脉闭塞，左股浅动脉狭窄”。检查后患者出现过敏症状，入院后排除其他疾病，因为下肢症状严重影响患者日常生活，且患者存在造影剂过敏的可能，放弃使用造影剂，单纯使用IVUS引导技术评估血管腔内情况行介入手术治疗，术中选择左股浅动脉药物涂层球囊血管成形术和左髂动脉支架置入术。患者术后可正常行走，不适症状消失，治疗效果满意。对于造影剂过敏或其他原因导致不能使用造影剂的LEASO患者，单纯使用IVUS引导同时应用有创血压监测评估术中疗效，可有效避免使用造影剂，为临床医师治疗该类患者提供参考。

非典型脂肪瘤样肿瘤（ALT）是一种起源于脂肪细胞组织且少见的软组织肉瘤。现报道1例下肢ALT患者的临床表现、影像学资料及病理检查资料，为该疾病的临床诊治提供参考。患者，男性，64岁，因左大腿肿物伴胀痛5年入院。查体于左大腿内侧触及皮下肿物，质软，活动性良好，压痛阳性。磁共振成像（MRI）平扫检查结果显示肿物边界清楚，包膜完整；T1WI图像呈高信号，其信号强度似皮下脂肪信号；T2加权成像（T2WI）-Ideal序列同相位图像呈高信号，水像显示肿块大部分呈低信号，其内可见多发高信号；T2WI脂肪抑制序列可见低信号肿块，内有多发斑片状高信号。患者入院3 d后行病损切除术。术中见肿物位于筋膜内、股四头内侧肌肉间，呈脂肪样，有完整包膜，与周围组织局部粘连较轻，肌肉部分有侵蚀，完整切除肿物及侵蚀肌肉。术后病理检查见灰黄色结节1枚，体积为16.0 cm×10.0 cm×4.0 cm，表面光滑，包膜完整，实质呈灰黄色，脂肪样，质软；另见灰黄色组织数块，总体积为5.0 cm×4.0 cm×1.2 cm，实质呈灰褐色，质地中等。显微镜下见病变组织主要由相对成熟的脂肪组织构成，可见细胞核增大、浓染，散在分布单核或多核的不典型间质细胞，纤维分隔区内存在数量不等的单泡状或多泡状脂肪母细胞。免疫组织化学染色显示细胞周期蛋白依赖性激酶4（CDK4）和鼠双微体2（MDM2）阳性，荧光原位杂交（FISH）基因检测显示肿瘤细胞内MDM2基因扩增。病理诊断为左下肢ALT。术后6个月随访，未见肿瘤复发。术前MRI检查可为ALT诊断提供有效依据，术后病理学检查可验证ALT诊断，有助于判定患者预后。

目的 制备纹带棒杆菌（C.striatum）生物膜形成相关蛋白菌毛组装蛋白D（SpaD）多克隆抗体，分析其抑制C.striatum强产膜株生物膜形成的作用和潜在应用价值。 方法 选取2011-2021年内蒙古医科大学附属医院住院患者临床标本中分离的117株C.striatum为研究对象。采用结晶紫染色法检测各菌株生物膜形成能力，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测SpaD编码基因spaD在C.striatum强产膜株中的分布。将C.striatum强产膜株分为对照组和蛋白酶K组，采用结晶染色法检测蛋白酶对C.striatum强产膜株生物膜形成能力的抑制作用。蛋白重组技术构建C.striatum SpaD重组蛋白，实验分为对照组和5及10 mg·L^-1 SpaD重组蛋白组，采用结晶染色法检测SpaD重组蛋白对C.striatum强产膜株生物膜形成能力的抑制作用。并通过动物免疫获得兔抗SpaD多克隆抗体实验分为对照组和1∶400、1∶200及1∶100SpaD多克隆抗体组，采用结晶紫染色法检测SpaD多克隆抗体对C.striatum强产膜临床株生物膜形成能力的抑制作用。 结果 结晶紫染色法检测，强产膜株、中等产膜株和弱产膜株占比分别为47.9%（56/117）、29.0%（34/117）及23.1%（27/117）。RT-qPCR法，所有强产膜株均携带spaD基因。与对照组比较，5和10 mg·L^-1 SpaD重组蛋白组13株强产膜菌生物膜形成能力均明显降低（P<0.05）。与对照组比较，1∶100和1∶200倍数稀释SpaD兔多克隆抗体组中分别有61.5%（8/13）及7.7%（1/13）的强产膜菌株生物膜形成能力明显降低（P<0.05）。 结论 spaD基因在C.striatum强产膜株中呈高表达状态。SpaD多克隆抗体可明显抑制C.striatum强产膜株生物膜形成，其抑制效应呈浓度依赖性。SpaD可作为防治C.striatum产膜株感染的新靶点。

目的 建立环介导等温扩增（LAMP）和簇状规则间隔短回文重复序列（CRISPR）/CRISPR相关蛋白12a（Cas12a）（CRISPR/Cas12a）系统相结合的病原微生物快速检测方法，并评价其检测副溶血性弧菌（Vp）不耐热溶血毒素（tlh）基因的效果。 方法 以Vp的tlh基因作为靶基因，设计LAMP引物和CRISPR RNA（crRNA），构建并优化LAMP-CRISPR检测体系各成分最佳浓度配比，以蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌为对照组，建立快速检测Vptlh基因的LAMP-CRISPR/Cas12a方法，并对该方法的特异性、灵敏度、重复性和阳性符合率进行评价。 结果 该方法能特异性检出Vp，蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均为阴性结果。Vp DNA提取浓度为190.67 mg·L^-1时吸光度（A）（260）/A（280）比值为1.84。在定量PCR（qPCR）仪37 ℃、80个循环、40 min反应条件下，LAMP-CRISPR/Cas12a体系中Cas12a蛋白和crRNA的浓度为50 nmol·L^-1时肉眼亮度及相对荧光强度峰高，检测Vp DNA浓度灵敏度可达10^-6 mg·L^-1；重复性试验表明，不同实验人员在不同实验环境、不同时间重复检测结果一致。 结论 建立的LAMP-CRISPR/Cas12a方法可以快速检测Vp的tlh基因，其灵敏度高、特异度强，可实现现场短时间的可视化检测。

目的 制备表面表达程序性细胞死亡配体1（PD-L1）纳米抗体的细菌外膜囊泡（OMV），探讨其结构特性、细胞相容性、细胞内分布及其对程序性细胞死亡受体1（PD-1）/PD-L1信号轴的阻断效果。 方法 构建pET28a-ClyA-PD-L1nb原核表达载体，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，通过超速离心法从转化PD-L1nb表达载体的BL21（DE3）单克隆菌落中分离OMV，利用组氨酸（His）标签进行蛋白纯化。采用透射电子显微镜和纳米粒径分析仪对OMV进行分析鉴定。将转化PD-L1nb表达载体的BL21（DE3）单克隆菌落所分离的OMV作为实验组，以未转化的BL21（DE3）单克隆菌落所分离的OMV作为对照组，采用Western blotting 法检测2组OMV中ClyA-PD-L1nb融合蛋白表达情况，采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）法检测OMV处理后小鼠巨噬细胞RAW264.7、小鼠三阴性乳腺癌细胞4T1和人胚胎肾细胞HEK293T活性，应用荧光成像技术观察OMV的肿瘤细胞内吞情况，采用流式细胞术检测PBS组、OMV-PD-L1nb组和aPD-L1＋OMV-PD-L1nb组OMV与肿瘤细胞表面PD-L1的结合效果。 结果 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），大肠杆菌诱导后在预计相对分子质量（约49 000）附近出现明显加粗的蛋白条带，ClyA-PD-L1nb蛋白成功表达，纯化后泳道中无明显杂蛋白存在。利用超速离心法分离得到尺寸约120 nm的OMV-PD-L1nb，透射电子显微镜下呈现为尺寸均一的圆球形结构。Western blotting法，实验组OMV中检测到ClyA-PD-L1nb特异性条带。CCK-8法，经不同浓度OMV处理后，RAW 264.7细胞、4T1细胞和HEK293T细胞活性均接近100%。荧光成像，OMV-PD-L1nb被4T1细胞内吞后分散在细胞质中。与OMV-PD-L1nb组比较，aPD-L1＋OMV-PD-L1nb组细胞中平均荧光强度明显降低（P<0.001）。 结论 成功制备并分离了表面表达PD-L1nb的OMV即OMV-PD-L1nb，其在小鼠巨噬细胞、肿瘤细胞和人胚胎肾细胞上显示出良好的相容性，可被肿瘤细胞内吞并成功阻断PD-1/PD-L1信号通路。

糖尿病肾病（DN）是全球范围内终末期肾病的主要致病因素，其发病机制涉及多重细胞和激素分子通路失调。足细胞在DN进程中发挥核心作用，其损伤程度与蛋白尿、肾小球滤过率和肾小球硬化等肾脏损伤的病理变化有密切关联。然而，由于氧化应激、脂质代谢异常和线粒体损伤等多种机制复杂且相互影响，足细胞损伤的确切机制尚待阐明。现结合国内外关于DN足细胞损伤核心机制的研究进展，并归纳总结针对上述机制在DN治疗中的研究和应用，特别是其所衍生的潜在治疗靶点及相关药物研发动态，为开发DN临床治疗策略提供理论依据。

缺氧缺血性脑损伤（HIBD）是导致新生儿死亡和婴幼儿神经系统功能障碍的主要原因，是新生儿学界研究的热点。微小RNA（miRNA）参与神经发育，其变化与HIBD病理演变存在密切关联，但目前缺乏对miRNA在疾病不同病理阶段具体作用及其机制研究的有效整合。现综述近年有关 miRNA在HIBD不同阶段的研究，在缺氧缺血期，一些缺氧相关miRNA的异常表达可作为新的生物学诊断指标；而在脑水肿期，miRNA可能通过维护血脑屏障完整性，减轻神经元肿胀和结构改变；在脑梗死期，miRNA可抑制凋亡蛋白的表达，提高神经元存活率，减少脑梗死面积，改善神经行为。miRNA在HIBD中的作用机制研究有助于为HIBD的诊疗策略研究提供新的思路。

皮肤常驻记忆性T细胞（T_RM）是皮肤组织内重要的免疫监视细胞，是一个高度异质化的群体。皮肤T_RM通过表达CD69和CD103等驻留标志物实现组织驻留，其产生和存活受白细胞介素15（IL-15）等分子的调控。除感染及肿瘤免疫外，T_RM特别是CD8+T_RM在自身免疫性皮肤病如白癜风的发生发展及复发中也发挥重要作用。在自身黑色素细胞抗原持续刺激下，黑色素细胞特异性CD49a+T_RM1细胞可通过表达干扰素γ（IFN-γ）、颗粒酶B和穿孔素直接杀伤黑色素细胞，同时还可以通过IFN-γ-Janus激酶（JAK）-信号转导和转录激活因子（STAT）信号通路招募循环中记忆性CD8+T细胞共同对黑色素细胞进行杀伤，从而促进了白癜风的发生发展及复发。结合国内外最新研究进展，现对皮肤T_RM的来源、功能和生物学特性等进行总结，对其在白癜风的发生发展及复发方面的研究进行概述，并对基于T_RM干预白癜风复发的策略进行阐述和展望，为白癜风的发病机制研究及临床精准治疗提供新思路。

巨噬细胞极化参与骨性膝关节炎（KOA）发生发展的全过程。巨噬细胞通过极化为不同表型，在炎症产生、基质降解、软骨生成抑制和疾病进展中发挥调控作用。M1型巨噬细胞通过分泌大量促炎因子参与炎症反应，促进关节软骨破坏。M2型巨噬细胞则通过释放抗炎因子，维持细胞外基质稳定并促进软骨形成，发挥抗炎和组织修复功能。M1/M2型巨噬细胞比值（简称M1/M2比值）失衡与KOA的发生和进展有密切关系，恢复其动态平衡对KOA的治疗和预防具有重要意义。现基于PubMed和中国知网数据库，以“膝关节骨性关节炎”和“巨噬细胞”为关键词，检索并筛选近10年相关文献并进行综述，聚焦调控巨噬细胞极化治疗KOA这一热点，系统概述巨噬细胞极化过程及其不同表型在KOA中的作用机制，并分别从化学药物、生物活性分子及中医药领域等方面总结通过调控M1/M2比值治疗和预防KOA的最新研究进展，为KOA的防治提供理论参考。