吉林大学学报(医学版) ›› 2024, Vol. 50 ›› Issue (6): 1572-1586.doi: 10.13481/j.1671-587X.20240611
• 基础研究 • 上一篇
王馨1,赵杰瑞2,郭玉苗3,陈姝彤1,侯宗昊1,张若文1()
Xin WANG1,Jierui ZHAO2,Yumiao GUO3,Shutong CHEN1,Zonghao HOU1,Ruowen ZHANG1()
摘要:
目的 探讨姜黄素对人前列腺癌C4-2细胞和LNCaP细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法 采用慢病毒转染系统分别转染C4-2细胞和LNCaP细胞,作为shCD147-C4-2组和shCD147-LNCaP组。采用RNA干扰技术制备沉默CD147基因细胞,以转入空载体的细胞作为阴性对照,分为shNC-C4-2组(shNC-C4-2细胞)和shNC-LNCaP组(shNC-LNCaP细胞)。取生长对数期C4-2、LNCap、shCD147-C4-2和shCD147-LNCaP细胞,加入20 μmol·L-1姜黄素,处理0和24 h时,显微镜观察各组细胞形态表现。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡、侵袭和迁移相关蛋白表达水平。 结果 与C4-2组比较,沉默CD147基因后shCD147-C4-2组细胞中CD147蛋白表达量明显减少;与LNCaP组比较,沉默CD147基因后shCD147-LNCaP组细胞中CD147蛋白表达量明显减少。与处理0 h比较,20 μmol·L-1姜黄素处理24 h后C4-2组和LNCaP组部分细胞出现凋亡征象,且有典型凋亡小体存在;shCD147-C4-2组和shCD147-LNCaP组细胞凋亡现象减弱。MTT法检测,与C4-2+ 0 μmol·L-1姜黄素组比较,C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组、C4-2+40 μmol·L-1姜黄素组、C4-2+ 60 μmol·L-1姜黄素组和C4-2+80 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性均明显降低(P<0.01);与LNCaP+ 0 μmol·L-1姜黄素组比较,LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组、LNCaP+40 μmol·L-1姜黄素组、LNCaP+60 μmol·L-1姜黄素组和LNCaP+80 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性均明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2组比较,shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性明显升高(P<0.01);与shNC-LNCaP组比较,shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性明显降低(P<0.01);与shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞增殖活性明显升高(P<0.01)。细胞划痕愈合实验检测,姜黄素处理24 h,与C4-2组比较,C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组和C4-2+40 μmol·L-1姜黄素组细胞迁移率均明显降低(P<0.01);与LNCaP组比较,LNCaP+20 μmol·L-1 姜黄素组和LNCaP+40 μmol·L-1 姜黄素组细胞迁移率均明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2组比较,shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组细胞迁移率明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-C4-2+20 μmol·L-1 姜黄素组细胞迁移率明显升高(P<0.05);与shNC-LNCaP组比较,shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞迁移率明显降低(P<0.01);与shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞迁移率明显升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与C4-2组比较,C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组和C4-2+40 μmol·L-1姜黄素组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、裂解的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3(cleaved Caspase-3)和聚二磷酸腺苷(ADP)-核糖聚合酶1(PARP1)蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);与LNCaP组比较,LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组和LNCaP+40 μmol·L-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),LNCaP+40 μmol·L-1 姜黄素组Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2组比较,shNC-C4-2+20 μmol·L-1 姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)。与shNC-LNCaP组比较,shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中Bax、cleaved Caspase-3和PARP1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与C4-2组比较,C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组和C4-2+40 μmol·L-1姜黄素组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),神经钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与LNCaP组比较,LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组和LNCaP+40 μmol·L-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),LNCaP+40 μmol·L-1姜黄素组细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2组比较,shNC-C4-2+ 20 μmol·L-1姜黄素组细胞中N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与shNC-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-C4-2+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与shNC-LNCaP组比较,shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);与shNC-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组比较,shCD147-LNCaP+20 μmol·L-1姜黄素组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),N-cadherin表达水平明显升高(P<0.05)。 结论 姜黄素对体外前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭有抑制作用,并诱导细胞凋亡,沉默CD147基因可在一定程度上降低其抑制作用和诱导细胞凋亡能力。
中图分类号: