lncRNA-CCAT2对宫颈癌CaSki细胞凋亡的影响及其机制

doi:10.13481/j.1671-587x.20200622

摘要/Abstract

摘要： 目的

研究长链非编码RNA（lncRNA）-结肠癌相关转录本2（CCAT2）对宫颈癌细胞凋亡的作用及其机制。

方法

将人宫颈癌CaSki细胞分为对照组、CCAT2过表达组、CCAT2干扰组、过表达NC组和干扰NC组。构建CCAT2过表达载体和干扰载体，分别转染CCAT过表达组和CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞。qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中CCAT2 mRNA表达水平，MTT法检测各组宫颈癌CaSki细胞增殖率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中第十号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源基因（PTEN）mRNA表达水平，Western blotting法检测各组宫颈癌CaSki细胞中PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、B淋巴细胞瘤 2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达水平。

结果

与对照组比较，CCAT2过表达组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与对照组比较，CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与对照组比较，过表达NC组和干扰NC组细胞增殖率、凋亡率和细胞中CCAT2 mRNA及PTEN、Bcl-2、Bax、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。

结论

lncRNA-CCAT2可抑制人宫颈癌细胞凋亡，其机制可能与PTEN/PI3K/AKT通路有关联。

Abstract: Objective

To investigate the effect of long non-coding RNA （lncRNA）-colon cancer-associated transcript 2 （CCAT2） on the apoptosis of cervical cancer CaSki cells and its mechanism.

Methods

The human cervical cancer CaSki cells were divided into control group， over-expression CCAT2 group， sh-CCAT2 group， over-expression NC group and sh-NC group. The over-expression and interference vectors of CCAT2 were constructed and transfected into the cervical cancer CaSki cells in over-expression CCAT2 and sh-CCAT2 groups， respectively. The expression levels of CCAT2 mRNA in cervical cancer CaSki cells in various groups were detected by qRT-PCR method； MTT assay was used to detect the viability of cervical cancer CaSki cells in various groups；flow cytometry was used to detect the apoptotic rates of cervical cancer CaSki cells in various groups； qRT-PCR method was used to detect the expression levels of phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten （PTEN） mRNA in cervical cancer CaSki cells in various groups；Western blotting method was used to detect the expression levels of PTEN， phosphoinositide 3-kinase （PI3K），phosphorylated PI3K（ p-PI3K）， protein kinase B （AKT），phosphorylated AKT （p-AKT）， B-cell lymphoma-2 （Bcl-2）， and Bcl-2 associated X protein （Bax） proteins in the cervical cancer CaSki cells in various groups.

Results

Compared with control group， the cell proliferation rate and the expression levels of CCAT2 mRNA and Bcl-2， p-PI3K，and p-AKT proteins in the cervical cancer CaSki cells in over-expression CCAT2 group were significantly increased（P<0.05）， while the apoptotic rate and the expression levels of Bax protein， PTEN mRNA and protein were significantly decreased （P<0.05）. Compared with control group， the proliferation rate of cervical cancer CaSki cells and the expression levels of CCAT2 mRNA and Bcl-2， p-PI3K， and p-AKT proteins in the cervical cancer CaSki cells in sh-CCAT2 group were significantly decreased （P<0.05）； the apoptotic rate and the expression levels of Bax protein， PTEN mRNA and protein were significantly increased （P<0.05）. Compared with control group， the cell proliferation rate， apoptotic rate， and expression levels of CCAT2 mRNA and PTEN， Bcl-2， Bax， p-PI3K，and p-AKT proteins in the cervical cancer CaSki cells in over-expression NC group and sh-NC group had no significant differences（P>0.05）.

Conclusion

LncRNA-CCAT2 can inhibit the apoptosis of cervical cancer cells， and its mechanism may be related to the PTEN/PI3K/AKT pathway.

Key words: colon cancer-associated transcript 2, cervical cancer, cell apoptosis, phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, phosphoinositide 3-kinase, protein kinase B

中图分类号:

R737.33

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图/表 6

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