探讨虎杖苷（PD）对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘小鼠气道炎症的影响，阐明其可能作用机制。

将 50只雌性BALB/c 小鼠随机分成对照组， OVA组和低、中、高剂量PD组，每组10只。采用OVA致敏及激发制备实验性小鼠哮喘模型。于实验第1、7和14天采用OVA+Al （ OH）₃ 混合液腹腔注射致敏小鼠。从第21天起，低、中和高剂量PD组小鼠分别腹腔注射15、30和45 mg·kg^－1PD治疗液，对照组和OVA组小鼠采用生理盐水代替。每次给药1 h后，OVA组和各剂量PD组小鼠连续采用3% OVA 雾化激发，对照组小鼠采用生理盐水代替。HE和PAS染色法观察各组小鼠肺组织病理形态表现，Diff-Quick法检测各组小鼠肺泡灌洗液中（BALF）细胞总数和嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数，ELISA法检测各组小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素5（IL-5）和白细胞介素13（IL-13）水平，免疫组织化学染色法观察各组小鼠肺组织中沉默信息调节因子 1 （SIRT1）及核因子κB （NF-κB） p65表达情况，Western blotting法检测各组小鼠肺组织中SIRT1和乙酰化NF-κB p65蛋白表达水平。

与对照组比较，OVA组小鼠气管壁增厚，气道周围大量炎症细胞浸润，杯状细胞明显增生；与OVA组比较，各剂量PD组小鼠上述表现改善。与对照组比较，OVA组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数明显增多（P<0.05），IL-4、IL-5和IL-13水平明显升高（P<0.05）；与OVA组比较，中和高剂量PD组小鼠BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞减少（P<0.05），IL-4、IL-5和IL-13水平降低（P<0.05）。与对照组比较，OVA组小鼠肺组织中SIRT1和NF-κB p65及乙酰化NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与OVA组比较，中和高剂量PD组小鼠肺组织中SIRT1乙酰化水平升高（P<0.05），NF-κB p65和乙酰化NF-κB p65蛋白表达水平降低（P<0.05）。

PD能减轻哮喘小鼠气道炎症，其作用机制可能与SIRT1／NF-κB通路有关联。

探讨芦丁对肝癌HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用，并阐明其作用机制。

培养人肝癌HepG2细胞，取处于对数生长期的HepG2细胞分为对照组、叔丁基过氧化氢（TBHP）组（给予400 μmol·L^－1TBHP）和0.25、0.50、1.00 μmolL^－1芦丁组（给予0.25、0.50和1.00 μmol·L^－1芦丁+400 μmol·L^－1 TBHP）。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组HepG2细胞活性和各组肝癌HepG2细胞存活率，比色法检测各组肝癌HepG2细胞中丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）水平及超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用二氯荧光素乙酰乙酸盐（DCFH-DA）荧光染色法检测各组肝癌HepG2细胞中活性氧（ROS）水平，Western blotting法检测各组肝癌HepG2细胞中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化AktB（p-Akt）、核转录因子κB（NF-κB）、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）和p53蛋白表达水平。

MTT检测，芦丁摩尔浓度≤1 μmol·L^－1时，肝癌HepG2细胞的存活率均>90%，不显示细胞毒性；当芦丁摩尔浓度>1 μmol·L^－1时，肝癌HepG2细胞存活率逐渐降低，均<90%，显示细胞毒性。与对照组比较，TBHP组HepG2细胞存活率明显降低（P<0.01）；与TBHP组比较，不同浓度芦丁组HepG2细胞存活率明显升高（P<0.01）。比色法检测，与对照组比较，TBHP组肝癌HepG2细胞中MDA水平明显升高（P<0.01），GSH水平和SOD活性明显降低（P<0.01）；与TBHP组比较，不同浓度芦丁组肝癌HepG2细胞中MDA水平明显降低（P<0.01），GSH水平和SOD活性明显升高（P<0.01）。DCFH-DA染色，与对照组比较，TBHP组肝癌HepG2细胞中ROS水平明显升高；与TBHP组比较，不同浓度芦丁组肝癌HepG2细胞中ROS水平降低。Western blotting法检测，与对照组比较，TBHP组肝癌HepG2细胞中PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平降低（P<0.05），NF-κB、p-NF-κB和p53蛋白表达水平升高（P<0.05）；与TBHP组比较，不同浓度芦丁组肝癌HepG2细胞中PI3K、p-PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平升高（P<0.05），NF-κB、p-NF-κB和p53蛋白表达水平降低（P<0.05）。

芦丁对肝癌HepG2细胞损伤具有保护作用，其机制可能与调控PI3K/Akt和NF-κB两条信号通路有关联。

观察针药并用干预手段对ApoE基因敲除小鼠海马组织中自噬水平的影响，探讨针药并用干预手段通过磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路发挥调控自噬的作用机制。

50只8周龄ApoE基因敲除小鼠高脂饲料喂养，16周后随机分为模型组、低剂量中药组、高剂量中药组、针药组和针刺组，每组10只；10只同龄C57BL/6L小鼠采用普通饲料喂养作为对照组。第 17周起，除对照组外其他各组小鼠给予相应干预因素干预8周。干预结束后，采用水迷宫法观察各组小鼠逃避潜伏期，透射电镜下观察各组小鼠海马组织的超微结构，Western blotting和免疫组织化学法检测小鼠海马组织中PI3K、AKT和mTOR蛋白表达水平。

水迷宫实验，模型组小鼠逃避潜伏期较对照组明显延长（P<0.05），针药组小鼠逃避潜伏期较模型组明显缩短（P<0.05）。透射电镜下，模型组小鼠海马组织中神经元出现变形、不规则或萎缩，核膜粗糙不完整、双层结构模糊，胞质内自噬泡减少；针药组小鼠海马组织中神经元仍有部分不规则变形、萎缩，胞质内可见自噬泡。Western blotting和免疫组织化学检测，与对照组比较，模型组小鼠海马组织中PI3K、AKT 和mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与模型组比较，各剂量中药组、针刺组和针药组小鼠海马组织中PI3K、AKT 和mTOR的蛋白表达水平降低（P<0.05），以针药组最为明显（P<0.05）。

针药并用可改善ApoE基因敲除小鼠认知功能，其作用机制可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR 信号通路的过度活化而促进海马细胞自噬来实现的。

探讨单穴和腧穴配伍对胃溃疡大鼠胃黏膜损伤指数、胃黏膜组织形态表现及胃黏膜组织中上皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达的干预效应，阐明单穴和腧穴配伍的效应以及针灸治疗大鼠胃溃疡的机制。

100只SD大鼠随机分为空白组、模型组、中脘组、足三里组和合募配伍组，每组20只，除空白组外，其余各组采用束缚-水浸应激法制备应激性胃溃疡大鼠模型，造模成功后，空白组和模型组不予干预，中脘组、足三里组和合募配伍组大鼠分别进行电针中脘、电针足三里、电针合募配伍治疗，10 d后观察各组大鼠胃溃疡情况，检测各组大鼠胃黏膜损伤指数，HE染色观察各组大鼠胃组织病理形态表现，免疫组织化学法检测各组大鼠胃黏膜组织中EGFR蛋白表达水平。

与空白组比较，模型组大鼠胃溃疡指数升高（P<0.05）；与模型组比较，中脘组、足三里组和合募配伍组大鼠胃溃疡指数降低（P<0.05）。HE染色，模型组大鼠胃黏膜被破坏，中脘组、足三里组和合募配伍组大鼠胃黏膜均有不同程度的修复及愈合，以合募配伍组效果最佳。与空白组比较，模型组大鼠胃黏膜组织中EGFR蛋白表达水平升高（P<0.05）；与中脘组比较，足三里组大鼠胃黏膜组织中EGFR蛋白表达水平升高（P<0.05），合募配伍组大鼠胃黏膜组织中EGFR蛋白表达水平升高（P<0.05）；与足三里组比较，合募配伍组大鼠胃黏膜组织中EGFR蛋白表达水平升高（P<0.05）。

电针可通过促进EGFR的表达以治疗胃溃疡，且合募配伍治疗效果最佳，其机制可能与EGFR可以控制胃黏膜细胞增生、分化和生存有关联。

探讨M1型巨噬细胞对牙龈卟啉单胞菌诱导的慢性牙周炎模型小鼠免疫状态的影响，阐明M1型巨噬细胞在慢性牙周炎中的作用。

10只7周龄C57BL/6雌性小鼠随机分为对照组（n=5）和慢性牙周炎组（n=5）。以牙龈卟啉单胞菌涂抹小鼠口腔建立慢性牙周炎模型。测量2组小鼠从釉牙骨质界（CEJ）到牙槽嵴顶（ABC）的距离，评价牙槽骨吸收情况；HE染色法观察2组小鼠牙周组织中炎性细胞浸润、结缔组织附着丧失和牙槽骨吸收情况；流式细胞术检测2组小鼠牙龈组织中F4/80^＋iNOS^＋ M1型巨噬细胞百分率和细胞数；实时定量PCR法检测2组小鼠牙龈组织中M1型巨噬细胞相关因子iNOS mRNA表达水平。

与对照组比较，慢性牙周炎组小鼠CEJ至ABC的距离明显增加（P<0.01）；与对照组比较，慢性牙周炎组小鼠牙龈结合上皮附着位于CEJ的根方，ABC吸收变平，可见破骨细胞和骨吸陷窝形成；慢性牙周炎小鼠牙龈组织中M1型巨噬细胞百分率和细胞数明显高于对照组（P<0.01）；慢性牙周炎小鼠牙龈组织中iNOS mRNA表达水平高于对照组（P<0.01）。

在慢性牙周炎小鼠模型中，M1型巨噬细胞介导的免疫应答增强，M1型巨噬细胞参与慢性牙周炎的炎症反应和组织损伤。

采用蛋白质组学法探讨C57BL/6J小鼠下丘脑和海马组织中神经干细胞（NSCs）中蛋白质表达差异，阐明不同来源（区域）NSCs中蛋白表达谱不同的原因，为下丘脑和海马组织NSCs的基础研究和移植治疗提供参考。

提取出生24 h内C57BL/6J小鼠原代下丘脑和海马组织 NSCs，经传代进行扩增和纯化。观察细胞形态表现，免疫荧光法检测NSCs中Nestin和Sox2的表达，采用串联质谱标签（TMT）蛋白质组学法分析下丘脑和海马组织NSCs中的差异表达蛋白质，对得到的差异蛋白质进行生物信息学分析。

形态表现检测，下丘脑和海马组织NSCs均表现出不透明和折光率高的典型神经球形态。免疫荧光检测，下丘脑和海马组织NSCs中 Nestin和Sox2阳性表达率随培养代数增加而升高，在第4代达到98%以上，但下丘脑和海马组织NSCs比较差异无统计学意义（P>0.05）。蛋白质组学分析，与海马组织比较，下丘脑组织NSCs中有6种蛋白表达水平明显升高（P<0.05和P<0.01），4种蛋白表达水平明显降低（P<0.05和P<0.01）。基因本体（GO）分析，差异蛋白质主要参与包括突触传递中多巴胺摄取的负调控等8种生物过程、rRNA甲基转移酶活性等6类分子功能和高尔基体膜的组成部分等6种细胞组分。基因组百科全书（KEGG）通路分析，差异蛋白质主要参与包括囊泡运输中的SNARE相互作用等7条信号通路。

体外培养的原代C57BL/6J小鼠下丘脑和海马组织NSCs的形态表现和NSCs标志物表达无差异。某些特定蛋白质表达有差异，差异表达蛋白质主要在突触传递、囊泡转运和代谢等方面发挥作用，在不同区域NSCs的定分化倾向和功能特异性方面可能起重要作用。

构建GLI1真核表达载体，探讨过表达GLI1对肺癌PC9细胞增殖的影响。

采用PCR法扩增GLI1基因的全长序列，克隆至pcDNA3.1真核表达载体，将重组质粒pcDNA3.1-GLI1（重组质粒组）和对照质粒pcDNA3.1（空载体组）转染肺癌PC9细胞。采用酶切鉴定法检测GLI1过表达载体的构建情况。通过G418筛选建立稳定过表达GLI1的PC9细胞和空载体对照细胞。RT-PCR法检测2组PC9细胞中GLI1 mRNA表达水平，Western blotting法检测2组PC9细胞中GLI1蛋白表达水平，CCK-8法检测2组PC9细胞增殖活性，细胞克隆形成实验检测2组PC9细胞中克隆形成数。

成功扩增获得GLI1的特异基因片段；构建的GLI1真核表达载体经双酶切鉴定后分别获得目的基因和载体片段。RT-PCR法检测，重组质粒组PC9细胞中GLI1 mRNA表达水平明显高于空载体组（P<0.01）。Western blotting法检测，重组质粒组PC9细胞中GLI1蛋白表达水平明显高于空载体组（P<0.05）。CCK-8法检测，培养72和96 h后，重组质粒组细胞增殖活性明显高于空载体组（P<0.01）。细胞克隆形成实验，培养10 d时，重组质粒组细胞克隆形成数明显多于空载体组（P<0.01）。

成功构建GLI1基因的真核过表达载体和过表达GLI1稳定转染的PC9细胞系， GLI1过表达能够促进肺癌PC9细胞的增殖能力。

探讨叉头框蛋白O1（FOXO1） 对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道（ENaC）的调控作用，并阐明其可能的作用机制。

20只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和LPS组，每组10只。经相应处理后分别留取标本，HE染色观察2组小鼠肺组织病理形态表现，RT-PCR和Western blotting法检测2组小鼠肺组织中α亚基ΕΝαC（αENaC）mRNA表达水平及磷酸化FOXO1（pFOXO1）表达水平。培养肺泡上皮A549细胞，分别进行基因干预，使A549细胞过表达或沉默FOXO1基因，RT-PCR法检测αENaC mRNA表达水平。A549细胞分为对照组、胰岛素组、胰岛素+PI3K抑制剂组和胰岛素+AKT抑制剂组，分别干预后收集细胞，Western blotting法检测各组A549细胞中pFOXO1（Ser256）蛋白表达水平，RT-PCR法检测各组A549细胞中αENaC mRNA表达水平，免疫荧光法检测FOXO1在细胞中的定位情况。

与对照组比较，LPS组小鼠肺组织病理评分明显升高（P<0.05），肺组织中pFOXO1（Ser256）和αENaC蛋白表达水平降低（P<0.05），二者呈正相关关系 （r=0.703， P<0.05）；与对照组比较，过表达FOXO1组A549细胞中αENaC mRNA表达水平降低（P<0.05），沉默FOXO1组αENaC mRNA表达水平升高（P<0.05）；与对照组比较，胰岛素组A549细胞中pFOXO1（Ser256）蛋白和αENaC mRNA表达水平升高（P<0.05），pFOXO1主要分布于细胞质中，而胰岛素+PI3K抑制剂和胰岛素+AKT抑制剂组A549细胞中αENaC mRNA和pFOXO1蛋白表达水平低于胰岛素组P<0.05）。

FOXO1磷酸化失活后由细胞核穿梭至细胞浆，对αENaC的抑制作用减弱，从而上调αENaC表达。

探讨黄芪多糖（APS）对人肺癌顺铂（DDP）耐药A549/DDP细胞耐药性的影响，并阐明其可能的作用机制。

将对数生长期A549/DDP细胞分为对照组（不经药物干预）、APS组（给予25、50、100、200和400 mg·L^－1 APS）、DDP组（给予2、4、8、16和32 mg·L^－1 DDP）及APS+DDP组（给予100 mg·L^－1 APS和2、4、8、16和32 mg·L^－1 DDP），药物处理A549/DDP细胞24 h，采用CCK-8法检测各组A549/DDP细胞增殖抑制率，并计算半数抑制浓度（IC₅₀）。将A549/DDP细胞分为对照组（不经药物干预）、APS组（给予100 mg·L^－1 APS）、DDP组（给予11.46 mg·L^－1 DDP）及APS+DDP组（给予100 mg·L^－1 APS和11.46 mg·L^－1 DDP），药物处理细胞24 h，采用Transwell小室法检测各组A549/DDP细胞迁移情况，流式细胞术检测各组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位，Western blotting法检测各组A549/DDP细胞中B淋巴细胞瘤 2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、P糖蛋白（P-gp）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达水平。

CCK-8法检测，与DDP组比较，APS+DDP组的A549/DDP细胞IC₅₀降低。Transwell小室法检测，与对照组比较，APS组A549/DDP细胞迁移能力无明显变化；与DDP组比较，APS+DDP 组A549/DDP细胞迁移数降低。流式细胞术检测，与对照组比较，APS组A549/DDP细胞凋亡率和线粒体膜电位差异无统计学意义（P>0.05），DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高，线粒体膜电位降低（P<0.05）；与DDP组比较，APS+DDP组A549/DDP细胞凋亡率升高，线粒体膜电位降低（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，APS组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低（P<0.05），p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低（P<0.05），Bax蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）；与APS组比较，DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低（P<0.05），p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低P<0.05），Bax蛋白表达水平升高（P<0.05）；与DDP组比较，APS+DDP组A549/DDP细胞中Bcl-2和P-gp蛋白表达水平降低（P<0.05），p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值降低（P<0.05），Bax蛋白表达水平升高（P<0.05）。

APS能逆转A549/DDP细胞耐药性，其机制可能与其阻断PI3K/AKT信号通路和诱导线粒体损伤有关联。

探讨X射线全身照射后小鼠骨髓造血干/祖细胞（HSCs/HPCs）损伤和其中CD47表达水平的变化，初步阐明CD47在HSCs/HPCs电离辐射损伤中发挥的作用。

将C57BL/6小鼠分为未照射组和照射组，其中照射组分为照射后18 h组、5 d组、11 d组和6 周组，每组5只。除未照射组小鼠外，其他小鼠均一次性给予3.0或9.0 Gy X射线全身照射。在照射后相应时间点处死小鼠，流式细胞术检测各组小鼠骨髓HSCs与HPCs的百分率。检测照射后各时间点各组小鼠HSCs和HPCs 中CD47表达水平。

未照射组小鼠HSCs中CD47表达水平高于骨髓成熟造血系细胞1倍以上（P<0.01）。X射线照射后18 h、5 d与11 d后，与未照射组比较，照射组小鼠HSCs中 CD47表达水平差异无统计学意义（P>0.05）；HPCs占lineage-negative（lin^－）细胞百分率或占全骨髓细胞百分率降低（P<0.05），照射后6 周HSCs百分率恢复至正常水平。与未照射组比较，照射后18 h HSCs中CD47表达水平差异明显升高（P<0.01），照射后5 d、11 d和6 周组小鼠HSCs中CD47表达水平差异无统计学意义（P>0.05）；照射后18 h组小鼠HSCs占lin^－细胞百分率升高（P<0.01），照射后11 d组小鼠HSCs占全骨髓细胞百分率降低（P<0.01）。照射后18 h组小鼠HPCs中CD47低表达亚群的百分率明显低于CD47高表达亚群（P<0.01）。照射后5 d 组、照射后11 d组和照射组后6周组小鼠HPCs中CD47低表达亚群的百分率与CD47高表达亚群的百分率相近。

全身电离辐射造成了小鼠骨髓组织损伤，在骨髓细胞中HSCs/HPCs百分率降低，其机制可能与照射后HSCs中CD47表达一过性升高有关联。

探讨栀子苷对帕金森病（PD）大鼠睡眠障碍的影响，阐明其可能的作用机制。

取70只Wistar大鼠，采用6-羟基多巴（6-OHDA）建立PD大鼠模型。造模4周后，腹腔注射阿卟吗啡诱发旋转实验进行模型鉴定，模型构建成功的大鼠分为模型组、低剂量栀子苷组和高剂量栀子苷组，每组10只，另取10只正常大鼠作为正常对照组。低和高剂量栀子苷组大鼠给予栀子苷溶液（50 或100 mg·kg^－1 ），正常对照组和模型组大鼠灌胃等量生理盐水。采用脑电图（EEG）和肌电图（GME）记录各组大鼠睡眠时间，高效液相色谱法（HPLC）检测各组大鼠纹状体中多巴胺水平。

与正常对照组比较，模型组大鼠总睡眠时间、慢波睡眠时间和快波睡眠时间均明显缩短（P<0.01），觉醒时间明显延长（P<0.05）；与模型组比较，低和高剂量栀子苷组大鼠总睡眠时间、慢波睡眠时间及快波睡眠时间延长（P<0.05），觉醒时间明显缩短（P<0.05）；与模型组比较，低和高剂量栀子苷组大鼠纹状体中多巴胺水平明显升高（P<0.05）。

栀子苷可改善PD模型大鼠的睡眠障碍，其机制可能与提高纹状体中多巴胺水平有关。

探讨小豆蔻明（CAR）对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响，并阐明其可能的作用机制。

宫颈癌HeLa细胞分为对照组（不进行任何处理）和不同浓度（10、20和40 μmol?L^－1）CAR组（给予10、20和40 μmol?L^－1CAR）。CCK-8法检测处理24、48和72 h后各组宫颈癌HeLa细胞活性，菌落形成实验检测各组宫颈癌HeLa细胞克隆形成数，Hoechst33258染色观察各组宫颈癌HeLa细胞凋亡形态表现，Western blotting法检测各组宫颈癌HeLa细胞中B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶（p-PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）蛋白表达水平。

与对照组比较，各时间点不同浓度CAR组HeLa细胞活性明显降低（24 h：P=0.011 8； 48 h：P=0.000 4； 72 h：P=0.002 2）；与对照组比较，不同浓度CAR组HeLa细胞克隆形成数均明显降低（P<0.01）；与对照组比较，不同浓度CAR组HeLa细胞出现明显核聚集、皱缩或碎裂的凋亡形态；与对照组比较，不同浓度CAR组HeLa细胞中Bcl-2、p-PI3K（P=0.011 8）和p-AKT（P=0.034 9）蛋白表达水平明显降低，Bax蛋白表达水平明显升高，Bcl-2/Bax比值明显降低（P<0.01）。

CAR通过调控PI3K/AKT信号通路诱导凋亡并抑制HeLa细胞增殖。

探讨抑制B7-H4表达对结直肠癌HT-29细胞增殖、凋亡和迁移的影响，阐明B7-H4在结直肠癌发生发展中的作用。

以脂质体法转染pSilencer4.1-B7-H4-shRNA和pSilencer4.1-scrambled shRNA载体至HT-29细胞，作为B7-H4 shRNA组和scrambled shRNA组。RT-qPCR法检测2组HT-29细胞中B7-H4 mRNA表达水平，Western blotting法检测2组HT-29细胞中B7-H4 蛋白表达水平，CCK-8法检测2组HT-29细胞增殖活性，流式细胞术检测2组不同细胞周期HT-29细胞百分率和细胞凋亡率，Transwell实验检测2组迁移细胞数，ELISA法检测2组HT-29细胞上清液中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平，Western blotting法检测2组HT-29细胞中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达量，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路前后HT-29细胞中B7-H4 mRNA表达水平，Western blotting法检测抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路前后HT-29细胞中B7-H4蛋白表达水平。

B7-H4 shRNA组HT-29细胞中B7-H4 mRNA和蛋白表达水平明显低于scrambled shRNA组（P<0.01）。与scrambled shRNA组比较，B7-H4 shRNA组HT-29细胞增殖活性降低（P<0.05），G₀/G₁期和S期细胞百分率比较差异无统计学意义（P > 0.05），细胞凋亡率和细胞中Casapse-3蛋白表达水平明显升高（P<0.05），细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低（P<0.05），HT-29细胞的迁移细胞数减少（P<0.01），MMP-2和MMP-9水平也明显降低（P<0.05）。与对照组比较，LY294002组和雷帕霉素组HT-29细胞中B7-H4 mRNA和蛋白表达水平均降低（P<0.05）。

抑制B7-H4表达能够明显抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、凋亡和迁移，其作用机制可能与PI3K/AktmTOR信号通路活性有关联。

观察白细胞介素17A信号传导及转录蛋白3-血管内皮生长因子（IL-17A- Stat3-VEGF）信号通路激活对前列腺癌细胞迁移的作用，并探讨其相关机制。

选取73例前列腺手术标本，包括正常前列腺（NP）组织8例（癌旁正常组织）、良性前列腺增生组织（BPH）30例和前列腺癌组织35例，免疫组织化学染色法检测NP、BPH和前列腺癌组织中IL-17A、白细胞介素17 RA（IL-17RA）、Stat3和VEGF的表达，并分析其与前列腺癌恶性程度的相关性；ELISA法检测健康对照组和前列腺癌组研究对象血清IL-17A、IL-6、VEGF和基质金属蛋白酶9（MMP-9）水平。IL-17A重组蛋白处理前列腺癌细胞，细胞划痕实验和Transwell小室实验观察各组细胞迁移能力，Western blotting法检测各组PC3细胞中Stat3、p-Stat3和VEGF蛋白表达水平。

免疫组织化学染色检测，与NP组织比较，BPH组织中IL-17A和IL-17RA表达水平明显升高（P<0.05），前列腺癌组织中IL-17A、IL-17RA、Stat3和VEGF表达水平明显升高（P<0.05）；与BPH组织比较，前列腺癌组织中IL-17A、IL-17RA、Stat3和VEGF表达水平明显升高（P<0.05）。ELISA法检测，前列腺癌患者血清IL-17A、IL-6和VEGF水平明显高于健康对照者（P<0.05）。在前列腺癌组织中，随着Gleason评分增加，IL-17A、IL-17RA、Stat3和VEGF表达水平明显升高（P<0.05）；IL-17A重组蛋白与PC3细胞共培养24 h，与空白对照组（0 μg·L^－1 IL-17A）比较，50和100 μg·L^－1 IL-17A组细胞迁移数明显增加（P<0.05）；50和100 μg·L^－1 IL-17A组PC3细胞中Stat3、p-Stat3和VEGF蛋白表达水平明显高于0和20 μg·L^－1 IL-17A组（P<0.05）。

IL-17A可以明显促进前列腺癌细胞的迁移，其机制可能与激活IL-17A- Stat3-VEGF信号通路有关联。

观察黄芪注射液对人角质细胞（KC）增殖与黏附因子β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响，探讨黄芪注射液对银屑病治疗作用的可能机制。

增殖功能实验，将添加不同浓度黄芪注射液的HaCaT细胞作为实验组，不添加药物的HaCaT细胞作为对照组，同时设无细胞、无药物的空白组。采用细胞计数法确定黄芪注射液作用有效浓度，2倍梯度稀释不同浓度黄芪注射液加入实验组HaCaT细胞中孵育24、48和72 h，采用CCK-8法检测各组细胞增殖率。黏附功能实验，实验组为加入1.0 g·L^-1黄芪注射液的HaCaT细胞，对照组为不加入黄芪注射液的HaCaT细胞。细胞培养24和48 h后，定量聚合酶链反应（qPCR）法检测2组细胞中β-catenin mRNA表达水平；HaCaT细胞培养48 h后，Western blotting法检测2组细胞中β-catenin蛋白表达水平。

增殖功能实验，与0、0.01和0.10 g·L^－1黄芪注射液组比较，培养24和48 h后1.0 g·L^－1黄芪注射液组HaCaT细胞增殖率降低（P<0.01）；2倍浓度梯度稀释黄芪注射液（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0 g·L^－1）与HaCaT细胞孵育24、48和72 h后，与对照组比较，作用24和48 h时1.0 g·L^－1黄芪注射液组HaCaT细胞增殖率降低（P<0.05），72 h细胞增殖率升高（P<0.05）。黏附功能实验，与0 g·L^－1黄芪注射液组比较，作用24 h后1.0 g·L^－1黄芪注射液组HaCaT细胞中β-catenin　mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05），作用48 h后1.0 g·L^－1黄芪注射液组HaCaT细胞中β-catenin蛋白表达水平明显降低（P<0.01）。

黄芪注射液对银屑病的治疗作用机制可能与抑制人角质细胞的增殖、抑制黏附因子β-catenin蛋白表达有关联。黄芪注射液作为单一的因素可以抑制HaCaT细胞增殖并下调β-catenin蛋白表达，该抑制效应可能随时间衰减。

探讨携载微小RNA124（miRNA-124）纳米粒子经鼻吸入对缺血性脑卒中模型大鼠脑内药物分布、神经功能评分、脑组织含水量及血清炎性因子的药效学影响，阐明其对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。

将靶向物RVG29偶联在聚乙二醇?聚乳酸?羟基乙酸共聚物（PEG-PLGA）纳米粒子上，观察所制备纳米粒子的粒径和包封率，通过向大鼠施用载有近红外染料1，1'-双十八烷基-3，3，3，3-四甲基吲哚三碳花菁碘化物（DiR），并给予RVG29修饰的PEG-PLGA纳米粒子，分析经鼻吸入纳米粒子后不同时间药物的生物分布。采用线栓法建立脑缺血再灌注大鼠模型，90只大鼠随机分为假手术组、模型组、法舒地尔组、miRNA-124经鼻吸入给药组、PEG-PLGA/miRNA-124经鼻吸入给药组和RVG29-PEG-PLGA/miRNA-124经鼻吸入给药组，每组6只。检测各组大鼠神经功能评分和脑组织含水量，ELISA法检测各组大鼠外周血清中白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素 1β（IL-1β）水平。

可鼻吸入脑的RVG29-PEG-PLGA纳米粒子的平均粒径为204 nm，包封率为28%。假手术组大鼠无神经功能障碍；与假手术组比较，模型组大鼠神经学评分和脑组织含水量，血清中IL-4、IL-6、TNF-α和IL-1β水平升高（P<0.05）；与模型组比较，法舒地尔组、miRNA-124 经鼻吸入给药组、PEG-PLGA/miRNA-124经鼻吸入给药组和RVG29-PEG-PLGA/miRNA-124经鼻吸入给药组大鼠神经学评分，脑组织含水量，血清中IL-4、IL-6、TNF-α和IL-1β水平降低（P<0.05）；与法舒地尔组比较，RVG29-PEG-PLGA/miRNA-124经鼻吸入给药组大鼠神经学评分和脑组织含水量，血清中IL-4、IL-6、TNF-α和IL-1β水平降低（P<0.05）。

RVG29-PEG-PLGA纳米粒子具有较好的经鼻吸入脑能力。对缺血性脑卒中大鼠进行纳米粒子携载miRNA-124干预可以改善大鼠神经功能障碍、减轻脑水肿以及改善炎症，起到神经保护作用。

探讨北柴胡多糖（BCP）对D-半乳糖诱导的衰老模型小鼠的保护作用并阐明其作用机制。

将25只小鼠随机分为对照组（给予生理盐水）、模型组（给予120 mg·kg^－1 D-半乳糖）、阳性对照组（给予120 mg·kg^－1 D-半乳糖和100 mg·kg^－1 VE）、低剂量BCP组（给予120 mg·kg^－1 D-半乳糖和200 mg·kg^－1 BCP）、高剂量BCP组（给予120mg·kg^－1 D-半乳糖和400 mg·kg^－1 BCP）。对照组小鼠每日腹腔注射生理盐水，其余各组小鼠均腹腔注射D-半乳糖构建小鼠衰老模型。检测各组小鼠体质量、肝脏指数和肾脏指数，检测各组小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）水平，HE染色检测各组小鼠肝组织形态表现，Western blotting法检测各组小鼠肾组织中p53和p16蛋白表达水平。

连续注射D-半乳糖7周后，与对照组比较，模型组小鼠体质量明显降低（P<0.05），肝脏指数和肾脏指数增大（P<0.05），血清SOD和GSH-Px活性降低（P<0.01），MDA水平升高（P<0.01），肾脏组织中p53和p16蛋白表达水平升高（P<0.01），肝细胞水肿明显，肝组织损伤严重。与模型组比较，低和高剂量BCP组小鼠体质量明显升高（P_{<0.05），肝脏指数和肾脏指数降低（P<0.05），血清SOD和GSH-Px活性升高（P<0.01），MDA水平降低（P<0.01），肾脏组织中p53和p16蛋白表达水平降低（P<0.05或P<0.01），肝细胞形态逐渐趋于正常，肝损伤情况得到缓解。}

BCP可通过抑制氧化应激及其下游p53和p16信号通路进而抑制D-半乳糖诱导的小鼠衰老。

研究骨保护素对大鼠正畸牙齿移动过程中破骨细胞分化和p38-丝裂原活化蛋白激酶（p38-MAPK）信号通路的影响，探讨骨保护素在正畸治疗中抑制牙齿移动的可能机制。

将128只大鼠随机分为对照组和骨保护素组，每组64只。于开始建模前3 d，骨保护素组大鼠于左上颌第一磨牙鄂侧黏骨膜下注射重组人骨保护素（0.05 mg·kg^－1），对照组大鼠在相同部位注射等量生理盐水。采用弹簧牵引法建立正畸大鼠模型。检测加力1、2、3和4周时2组大鼠第一磨牙移动距离，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色检测2组大鼠牙周组织中破骨细胞数，免疫组织化学染色法检测2组大鼠压力侧牙周组织中p-p38表达水平，Western blotting法检测2组大鼠牙周组织中核因子κB受体活化因子（RANK）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白表达水平。

加力1周时，2组大鼠牙齿移动距离、破骨细胞数和p-p38 表达水平与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；加力2、3和4周时，骨保护素组大鼠牙齿移动距离、破骨细胞数和p-p38 表达水平小于对照组（P<0.05或P<0.01）；骨保护素组大鼠牙槽骨组织中RANK和MMP-9蛋白表达水平低于对照组（P<0.01）。牙周组织中破骨细胞数（r=0.654）、RANK（r=0.576）和MMP-9（r=0.583）蛋白表达水平与p-p38蛋白表达水平均呈正相关关系（P<0.05）。

骨保护素可抑制大鼠正畸牙齿移动过程中破骨细胞生成和分化、抑制p38 MAPK信号通路激活，从而抑制正畸牙齿移动，发挥增强支抗作用。

探讨雷公藤内酯醇对类风湿性关节炎大鼠血管新生和第10号染色体缺失的磷酸酯酶及张力蛋白同源物基因/磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PTEN/PI3K/AKT）通路的影响，阐明雷公藤内酯醇治疗类风湿性关节炎的可能机制。

将80只大鼠随机分为对照组、模型组、阳性药物组和治疗组，每组20只。采用Ⅱ型胶原（ColⅡ）诱导建立风湿性关节炎大鼠模型。阳性药物组大鼠给予双氯芬酸钠缓释片治疗，治疗组大鼠给予雷公藤内酯醇治疗。治疗后，检测各组大鼠体质量和足爪厚度，评估关节炎指数积分。HE染色检测各组大鼠关节滑膜组织病理形态表现，免疫组织化学染色测定关节滑膜组织中微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达水平， ELISA法检测各组大鼠血清VEGF水平，Western blotting法检测各组大鼠滑膜组织中PTEN、PI3K、AKT和磷酸化-AKT（p-AKT）蛋白水平。

与对照组比较，模型组大鼠体质量降低（P<0.05），足爪厚度升高（P<0.05），滑膜组织中MVD和VEGF表达水平升高（P<0.05），滑膜组织中PTEN蛋白表达水平降低（P<0.05），PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达水平升高（P<0.05）。与模型组比较，阳性药物组和治疗组大鼠体质量升高（P<0.05），足爪厚度降低（P<0.05），滑膜组织中MVD和VEGF表达水平降低（P<0.05），滑膜组织中PTEN蛋白表达水平升高（P<0.05），PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达水平降低（P<0.05）。与阳性药物组比较，治疗组大鼠滑膜组织中MVD和VEGF表达水平降低（P<0.05），滑膜组织中PTEN蛋白表达水平升高（P<0.05），PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达水平降低（P<0.05）。类风湿性关节炎大鼠足爪厚度和关节炎指数与VEGF（r=0.564，r=0.492）及p-AKT（r=0.561，r=0.468）表达水平呈正相关关系（P<0.05），与PTEN（r=－0.437，r=－0.521）呈负相关关系（P<0.05）；MVD与VEGF（r=0.587）、PI3K（r=0.567）、p-AKT（r=0.601）表达水平呈正相关关系（P<0.05），与PTEN水平（r=－0.502）呈负相关关系（P<0.05）。

雷公藤内酯醇可抑制类风湿性关节炎大鼠血管新生和PTEN/PI3K/AKT通路激活，从而发挥对类风湿性关节炎的治疗作用。

探讨B细胞转位基因3（BTg-3）在甲状腺滤泡癌组织和细胞中的表达及其对甲状腺滤泡癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响，阐明BTg-3在甲状腺滤泡癌发生发展中的可能作用机制。

选择经病理证实的甲状腺滤泡癌组织和甲状腺滤泡腺瘤组织标本各80例，免疫组织化学法检测甲状腺滤泡癌组织和甲状腺滤泡腺瘤组织中BTg-3表达情况，Western blotting法检测甲状腺滤泡症CGTHW-1和甲状腺滤泡上皮Nthy-ori细胞中BTg-3蛋白表达水平。将甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞随机分为空白对照组（不转染载体）、阴性对照组（转染阴性对照载体）和BTg-3过表达组（转染BTg-3过表达载体）。CCK-8法检测各组甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞增殖活性，平板克隆实验检测各组甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞克隆形成率，Transwell法检测各组甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞侵袭和迁移细胞数，Western blotting法检测各组甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞中Ki67、增殖细胞核抗原（PCNA）、波形蛋白（Vimentin）、上皮性钙黏蛋白（E-cadherin）、WNT1、β-连环蛋白（β-catenin）、糖原合成激酶3β（GSK3β）和磷酸化GSK3β（p-GSK3β）蛋白表达水平。

甲状腺滤泡癌组织中BTg-3阳性表达率低于甲状腺滤泡腺瘤组织（χ²=62.864，P<0.01）。甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞中BTg-3蛋白表达水平低于甲状腺滤泡上皮Nthy-ori细胞（t=34.484，P<0.01）。与空白对照组和阴性对照组比较，BTg-3过表达组甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞中BTg-3蛋白表达水平升高（P<0.05），细胞增殖活性、克隆形成率、侵袭细胞数和迁移细胞数降低（P <0.05），甲状腺滤泡癌CGTHW-1细胞中Ki67、PCNA、Vimentin、WNT1、β-catenin和p-GSK3β蛋白表达水平降低（P<0.05），E-cadherin蛋白表达水平升高（P<0.05）。

甲状腺滤泡癌组织和细胞中BTg-3表达水平降低，过表达BTg-3可抑制甲状腺滤泡癌细胞增殖、侵袭和迁移，抑制WNT/β-catenin信号通路激活。

观察威灵仙总皂苷（TSC）对类风湿关节炎（RA）大鼠外周血T淋巴细胞亚群和血清炎性因子水平的影响，并阐明其对RA的抑制作用机制。

将50只SD大鼠随机分为对照组（给予生理盐水），模型组（给予生理盐水），低、中和高剂量TSC组（给予50、100、200 mg·kg^－1 TSC）；每组10只。除对照组外，其余各组建立RA大鼠模型。连续给药6周后，测定大鼠踝关节肿胀度并计算大鼠关节炎指数，流式细胞术检测各组大鼠外周血CD4⁺T淋巴细胞和CD8⁺T淋巴细胞百分率及CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值，ELISA法检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平，称量各组大鼠脾脏质量并计算脾脏指数。

与对照组比较，模型组大鼠关节炎指数明显升高（P<0.05），CD4^＋T淋巴细胞百分率和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值明显升高（P<0.05），CD8^＋T淋巴细胞百分率明显降低（P<0.05），血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平和脾脏指数明显升高（P<0.05）；与模型组比较，低、中和高剂量TSC组大鼠关节炎指数明显降低（P<0.05），CD4^＋T淋巴细胞百分率和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值明显降低（P<0.05），CD8^＋T淋巴细胞百分率明显升高（P<0.05），血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及脾脏指数明显降低（P<0.05）；与低剂量TSC组比较，中和高剂量TSC组大鼠关节炎指数明显降低（P<0.05），CD4^＋T淋巴细胞百分率和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值明显降低（P<0.05），CD8^＋T淋巴细胞百分率明显升高（P<0.05），血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及脾脏指数明显降低（P<0.05）；与中剂量TSC组比较，高剂量TSC组大鼠关节炎指数明显降低（P<0.05），CD4^＋T淋巴细胞百分率和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞比值明显降低（P<0.05），CD8^＋T淋巴细胞百分率明显升高（P<0.05），血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及脾脏指数明显降低（P<0.05）。

TSC可通过调节CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群百分率，抑制炎性细胞因子分泌，对RA起到抑制作用，且呈剂量依赖性。

研究长链非编码RNA（lncRNA）-结肠癌相关转录本2（CCAT2）对宫颈癌细胞凋亡的作用及其机制。

将人宫颈癌CaSki细胞分为对照组、CCAT2过表达组、CCAT2干扰组、过表达NC组和干扰NC组。构建CCAT2过表达载体和干扰载体，分别转染CCAT过表达组和CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞。qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中CCAT2 mRNA表达水平，MTT法检测各组宫颈癌CaSki细胞增殖率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，qRT-PCR法检测各组宫颈癌CaSki细胞中第十号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源基因（PTEN）mRNA表达水平，Western blotting法检测各组宫颈癌CaSki细胞中PTEN、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、磷酸化PI3K（p-PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT（p-AKT）、B淋巴细胞瘤 2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达水平。

与对照组比较，CCAT2过表达组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。与对照组比较，CCAT2干扰组宫颈癌CaSki细胞增殖率和细胞中CCAT2 mRNA及Bcl-2、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显降低（P<0.05）；细胞凋亡率和细胞中Bax蛋白、PTEN mRNA及蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与对照组比较，过表达NC组和干扰NC组细胞增殖率、凋亡率和细胞中CCAT2 mRNA及PTEN、Bcl-2、Bax、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。

lncRNA-CCAT2可抑制人宫颈癌细胞凋亡，其机制可能与PTEN/PI3K/AKT通路有关联。

探讨雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞的保护作用，从自噬调控角度阐明雷诺嗪保护缺血再灌注损伤心肌的作用机制。

将H9C2心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧/复氧模型组、雷诺嗪预处理组、雷诺嗪+渥曼青霉素组、雷帕霉素组。正常对照组细胞不做任何处理，其余各组H9C2细胞以相应药物预处理30 min后，行缺氧4 h、复氧3 h处理。采用CCK-8法检测各组H9C2细胞活性，采用乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测各组H9C2细胞中LDH活性，免疫荧光法检测各组H9C2细胞中微管相关蛋白轻链 3（LC3）阳性表达率，Western blotting法检测各组H9C2细胞中LC3、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和磷酸化mTOR（p- mTOR）蛋白表达水平，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和p- mTOR/ mTOR比值。

与缺氧/复氧模型组比较，雷诺嗪预处理组和雷帕霉素组H9C2细胞活性升高（P<0.01），H9C2细胞中LDH活性降低（P<0.01），LC3 阳性表达率升高（P<0.05）。Western blotting法检测，与正常对照组比较，缺氧/复氧模型组H9C2细胞中LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高（P<0.01），p- mTOR/ mTOR比值降低（P<0.01）；与缺氧/复氧模型组比较，雷诺嗪预处理组和雷帕霉素组H9C2细胞中LC3 Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高（P<0.01），p- mTOR/mTOR比值降低（P<0.01）。

雷诺嗪预处理对缺氧/复氧损伤H9C2心肌细胞具有保护作用，其作用机制可能与雷诺嗪抑制mTOR蛋白磷酸化从而诱导缺氧/复氧H9C2心肌细胞自噬有关联。

检测川陈皮素对人前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响，探讨其作用机制。

将培养的人前列腺癌DU145细胞分为对照组和0.8、1.6、3.2、6.4、12.8、25.6和51.2 μmol·L^－1 川陈皮素组。MTT法检测各组人前列腺癌DU145细胞的增殖活性，细胞划痕实验分析各组人前列腺癌DU145细胞迁移能力，Transwell实验分析各组人前列腺癌DU145细胞侵袭能力，流式细胞术检测各组人前列腺癌DU145细胞凋亡率，Western blotting法检测各组人前列腺癌DU145细胞中磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）、磷酸化P38丝裂原活化蛋白酶（p-P38）和磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）蛋白表达水平。

与对照组比较，作用24、48和72 h 时，25.6 μmol·L^－1 川陈皮素组人前列腺癌 DU145细胞增殖活性明显降低（P<0.01），川陈皮素对DU145细胞的增殖抑制作用呈现时间和浓度依赖性。与对照组比较，作用48 h后，12.8 μmol·L^－1 川陈皮素组人前列腺癌DU145细胞划痕愈合率和侵袭细胞数明显降低（P<0.01），人前列腺癌DU145细胞中p-ERK蛋白表达水平降低（P<0.01）；25.6 μmol·L^－1 川陈皮素组人前列腺癌DU145细胞中p-ERK蛋白表达水平降低（P<0.01），但细胞凋亡率明显升高（P<0.01），p-JNK和p-P38蛋白表达水平升高（P<0.01）。

川陈皮素对人前列腺癌DU145细胞生长具有抑制作用，可促进细胞凋亡，抑制细胞增殖、迁移和侵袭；MAPK途径相关蛋白表达的改变可能是川陈皮素对DU145细胞生长抑制作用的机制之一。

探讨中性粒细胞/淋巴细胞比值（NLR）在判断接受表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）治疗的非小细胞肺癌（NSCLC）患者预后中的作用，为NSCLC患者的预后判断提供循证医学依据。

检索PubMed、Cochrane library、EMBASE、Web of Science和中国知网（CNKI）数据库公开发表的有关NLR与接受EGFR-TKIs治疗的NSCLC患者预后关系的研究。对符合纳入标准的文献进行Meta分析。

最终纳入8篇文献共1 451例患者。高NLR组患者的无进展生存期（PFS）［风险比（HR）=1.75，95%置信区间（95%CI）：1.24~2.48，Z=3.17，P=0.002］和总生存期（OS）（HR=1.87，95%CI：1.21~2.88，Z=2.84，P=0.005）明显低于低NLR组。亚组分析，按种族、NLR cutoff值分组后，高NLR组患者的PFS在亚裔人群（HR=1.70，95%CI：1.14~2.53，Z=2.62，P=0.009）、非亚裔人群（HR=2.00，95%CI：1.27~3.15，Z=3.00，P=0.003）和NLR cutoff值≥3.5人群（HR=2.21，95%CI：1.54~3.17，Z=4.29，P<0.001）明显低于低NLR组。敏感性分析，纳入的8篇研究结果稳定可信。

在接受EGFR-TKIs治疗的NSCLC患者中，高NLR与NSCLC患者的预后不良有关联。

检测胃癌患者血清中17种胃癌相关细胞因子的水平，研究其与miR-10b水平的相关性，筛选在实验诊断中对胃癌诊断有意义的肿瘤标志物并探讨其对胃癌诊断的应用价值。

基于病例对照研究设计，选取病理组织学明确诊断为胃腺癌的患者血清标本34例为胃癌组，选取体检中心经体检合格的健康人血清标本80例为对照组。采用Luminex检测技术检测2组研究对象血清样本中胃癌相关细胞因子的水平，选择巨噬细胞炎性蛋白3α （CCL20）、白细胞介素2 （IL-2）、白细胞介素4 （IL-4）、白细胞介素5 （IL-5）、白细胞介素6 （IL-6）、白细胞介素10 （IL-10）、白细胞介素17A （IL-17A）、肿瘤坏死因子α （TNF-α）、干扰素γ （IFN-γ）、单核细胞趋化因子（CCL13）、干扰素诱导T细胞alpha趋化因子（CXCL11）、B淋巴细胞趋化因子（CXCL13）、骨形成蛋白4 （BMP4）、骨形成蛋白7 （BMP7）、肝细胞生长因子（HGF）、粒细胞集落刺激因子（GM-CSF）和血小板衍生因子BB （PDGF-BB）共17种细胞因子，从中筛选对胃癌诊断有意义的肿瘤标志物。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法检测胃癌组患者血清miR-10b水平，采用电化学发光法检测胃癌组患者血清肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖链抗原19-9（CA19-9）和糖链抗原72-4（CA72-4）水平。

与对照组比较，胃癌组患者血清中CCL20、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、TNF-α、CCL13、BMP-4和HGF水平明显升高（P<0.05）；Logistic回归分析，血清中CCL20、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、TNF-α、CXCL11、CCL13、BMP-4、BMP-7和HGF水平与胃癌患病风险有关联（P<0.05）；受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析，CCL20对胃癌诊断的曲线下面积（AUC）明显优于3种肿瘤标志物CEA、CA19-9和CA72-4的联合诊断；将6.71 ng·L^－1 CCL20作为诊断临界值时，CCL20的诊断特异度为76.5%、灵敏度为91.3%、阳性预测值为78.8%、阴性预测值90.1%、阳性似然比为8.74、阴性似然比为0.26、诊断准确度为86.84%；Spearman相关性分析，17种细胞因子与miR-10b水平相关性较差，TNF-α水平与miR-10b水平有一定相关关系（r=0.335， P=0.075）。

当以6.71 ng·L^－1作为血清细胞因子CCL20的诊断临界值时，其诊断灵敏度明显优于临床上常用的肿瘤标志物CEA、CA19-9和CA72-4，且特异度也较高。

探讨结直肠癌组织与癌旁组织的差异表达circRNAs，阐明hsa_circ_0043278对结直肠癌抑制作用的潜在机制。

从GEO数据库下载数据， GSE126094芯片数据包含10例结直肠癌组织样本与10例癌旁组织样本。采用R软件筛选出差异表达circRNAs；在CSCD数据库中找到与差异表达circRNAs结合的miRNAs；采用Perl软件预测miRNAs的靶基因；对靶基因进行GO生物学功能富集分析与KEGG信号通路富集分析。

与癌旁组织样本比较，结直肠癌组织样本中表达水平升高的circRNAs有23个（logFC>2且P<0.05），表达水平降低的circRNAs有36个（logFC<－2且P<0.05）。hsa_circ_0043278表达水平降低最明显（logFC=－7.481且P<0.05）。共有66个miRNAs与hsa_circ_0043278结合，并预测其靶基因。GO富集分析，靶基因主要参与Wnt介导的细胞信号转导。KEGG富集分析，靶基因主要富集在PI3K-AKT信号通路。

hsa_circ_0043278表达水平在结直肠癌组织样本中明显降低，间接影响靶基因UTP18、CLIP4与STC2等的功能，进而影响其对Wnt介导的细胞信号转导与PI3K-AKT信号通路的调控作用，最终减弱其对结直肠癌的抑制作用。

总结Angelman综合征（AS）家系的病例资料，分析其临床和遗传学特点，提高临床医生对AS的认识。

收集1个AS家系中两兄弟及其亲属的病史、临床表现、辅助检查和基因检测结果，并进行相关的文献复习。

患儿，男性，年龄4个月3天，表现为发育迟滞、运动障碍、喂养困难；患儿二哥，年龄5岁2个月，表现为严重语言障碍、运动障碍、智力低下、不自觉笑、多动、有异常行为、癫痫发作和特征性脑电图（EEG）等。二代基因测序，患儿及其二哥存在UBE3A基因c.766C>T杂合无义突变，导致氨基酸终止编码。Sanger测序，该突变来源于其母亲。

AS是一种罕见的神经发育障碍性疾病，早期临床表现不典型，需通过分子生物学技术确诊。

探讨不同严重程度毛细支气管炎患儿血清转化生长因子β1（TGF-β1）水平及其与潮气呼吸肺功能指标的关联性，阐明TGF-β1水平在毛细支气管炎诊疗中的意义。

选取84 例毛细支气管炎患儿作为毛细支气管炎组，按病情严重程度分为轻度毛细支气管炎组（n=46）和中重度毛细支气管炎组（n=38），另以同期行体检的健康婴幼儿20人作为正常对照组。分别检测急性期毛细支气管炎患儿、恢复期毛细支气管炎患儿及正常对照婴幼儿血清TGF-β1水平及潮气呼吸肺功能指标，采用Pearson相关分析法分析血清TGF-β1水平与潮气呼吸肺功能指标的相关性。

急性期轻度毛细支气管炎组和中重度毛细支气管炎组患儿血清TGF-β1水平均明显高于正常对照组（P<0.01）；与急性期轻度毛细支气管炎组比较，急性期中重度毛细支气管炎组患儿血清TGF-β1水平升高（P<0.01）；与急性期比较，恢复期轻度和中重度毛细支气管炎组患儿血清TGF-β1 水平均明显降低（P<0.01）。轻度和中重度毛细支气管炎组患儿达峰时间比（TPTEF/TE）及达峰容积比（VPEF/VE）均明显低于正常对照组（P<0.05）；与轻度毛细支气管炎组比较，中重度毛细支气管炎组患儿TPTEF/TE和VPEF/VE明显降低（P<0.05）。3组研究对象每公斤体重潮气量（VT/kg）比较差异无统计学意义（P>0.05）。毛细支气管炎组患儿血清TGF-β1与TPTEF/TE及VPEF/VE均呈负相关关系（r =－0.552，P<0.01；r =－0.517，P <0.01）。

毛细支气管炎患儿血清TGF-β1水平能间接反映患儿的气道阻塞程度，可作为毛细支气管炎病情判断及肺功能预后评估的参考指标。

研究心脏瓣膜病并发心房纤颤（房颤）患者在接受瓣膜置换联合射频消融和左心耳闭合术术后心功能指标变化、血液中相关因子水平变化及脑梗死等并发症的发生情况。

回顾性分析心脏瓣膜病并发房颤128例患者临床资料，根据治疗方式分为二尖瓣瓣膜置换联合射频消融和左心耳闭合术治疗组（联合手术组）与二尖瓣瓣膜置换治疗组。检测2组患者的窦性转复率、心功能指标和并发症情况，血液中白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和同型半胱氨酸水平，评估患者的预后情况。

手术结束时及术后3个月、术后6个月、术后1年联合手术组患者窦性转复率均明显高于二尖瓣瓣膜置换治疗组（P<0.01）。二尖瓣瓣膜置换治疗组与联合手术组患者术前心功能指标比较差异无统计学意义（ P>0.05）；术后1年，与二尖瓣瓣膜置换治疗组比较，联合手术组患者左房内径（LAD）和左室舒末内径（LVEDD）均降低（ P<0.05），射血分数（EF）升高（P<0.05），并发症发生率降低（P<0.05），血液中IL-1β、IL-6和TNF-α及同型半胱氨酸水平降低（ P<0.01）。

瓣膜置换联合射频消融和左心耳闭合术治疗瓣膜病并发房颤患者取得良好效果，能够更好地改善患者心功能，降低炎性细胞因子和同型半胱氨酸水平，降低脑梗死和出血的发生率，提高患者生存质量。

探讨盐酸米诺环素对绝经妇女牙周炎患者的治疗效果及其对龈沟液中炎性因子与骨代谢因子水平的影响，阐明其在绝经妇女牙周炎患者治疗中的可能作用机制。

86例绝经牙周炎女性患者按照患者意愿分为盐酸米诺环素组（观察组，n=43）和碘甘油组（对照组，n=43）。评价2组患者治疗的总有效率，记录并比较治疗前和治疗4周后2组患者的牙周探诊深度（PD）、菌斑指数（PLI）和出血指数（BI）。在治疗前和治疗4周后分别取2组患者的龈沟液，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测2组患者龈沟液中炎性因子白细胞介素6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，采用电化学发光法检测2组患者龈沟液中骨代谢因子骨钙素（OC）水平。

治疗前2组患者的PD、PLI、BI和龈沟液中IL-6、hs-CRP、TNF-α及OC水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。治疗4周后，2组患者的PD、PLI、BI和龈沟液中IL-6、hs-CRP、TNF-α及OC水平均较治疗前明显降低（P<0.05）。与对照组比较，观察组患者总有效率明显升高（P<0.05），PD、PLI和BI明显降低（P<0.05），龈沟液中IL-6、hs-CRP和TNF-α水平均明显降低（P<0.05），龈沟液中OC水平明显降低（P<0.05）。

盐酸米诺环素治疗绝经妇女牙周炎患者的疗效显著，可改善患者牙周参数。

探讨腮腺良恶性肿瘤的磁共振弥散加权成像（DWI）表观扩散系数（ADC）和表观扩散系数比值（rADC）在鉴别腮腺良恶性肿瘤中的诊断价值。

选取经病理证实的腮腺肿瘤患者84例，根据患者术后病理类型分为腮腺良性肿瘤组和恶性肿瘤组，患者术前行常规MRI及DWI序列扫描，HE染色观察不同病理分型腮腺肿瘤组织病理形态表现，测定腮腺良恶性肿瘤及其临近腺体和腮腺良恶性肿瘤及其对侧腺体的ADC，计算相应rADC。

腮腺良性肿瘤60例，恶性肿瘤24例；良性肿瘤多边界清晰，混合瘤和腺淋巴瘤是最常见的类型。T2WI显示病灶呈等、低信号；恶性肿瘤以黏液表皮样癌较为多见，形态不规则，边界模糊，信号欠均匀，常伴周围结构的侵犯及颈部淋巴结的增大。与腮腺良性肿瘤比较，腮腺恶性肿瘤的ADC降低（P<0.05），腮腺恶性肿瘤对侧腺体rADC和邻近腺体rADC均降低（P<0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线检测，ADC、对侧腺体rADC和邻近腺体rADC曲线下面积（AUC）分别为0.859、0.874和0.894；多项指标联合并计算AUC结果显示ADC与对侧腺体rADC、ADC与邻近腺体rADC的 AUC分别为0.874和0.894。

DWI的ADC和rADC能够为腮腺良恶性肿瘤的诊断及鉴别诊断提供参考依据，具有重要的临床指导意义。

建立可快速检测水痘-带状疱疹病毒（VZV）糖蛋白抗原水平的双抗体夹心ELISA法，并验证其特异性、线性、准确性和精密性。

采用抗VZV糖蛋白基因工程抗体建立双抗体夹心ELISA法，检测VZV糖蛋白抗原水平。优化抗体组合、抗体工作浓度、包被条件、封闭条件、酶标抗体反应条件和显色条件，并对建立的方法进行特异性、线性、准确性及精密性验证。

捕获抗体VZV-mAb-03和酶标抗体VZV-mAb-HRP-02的组合为最优双抗组合，其最适浓度分别为450.0和0.1 μg·L^－1，最适包被条件为0.05 mol·L^－1 Tris-HCl（pH值为8.7±0.1）在4℃条件下包被过夜（18 h），最适封闭条件为1%牛血清白蛋白（BSA）在37 ℃条件下封闭2 h，最适样品稀释液为磷酸盐吐温缓冲液（PBST），抗原夹心与酶标抗体最适反应条件均为37 ℃、1 h，最适显色条件为37 ℃、15 min。经验证，该方法与其他人用疫苗及辅料成分无交叉反应；线性范围为500~2 600 PFU·mL^－1，回归系数（R²）> 0.95；批内回收率82.2%~115.7%，变异系数（CV）<10.2%；批间回收率80.5%~118.6%，板内CV<17.4%，板间CV<14.9%。

建立了一种基于检测双抗体夹心的VZV糖蛋白抗原水平的ELISA检测方法，符合定量检测需要，可用于 VZV 疫苗的研发和生产过程中的抗原水平检测。