吉林大学学报(医学版) ›› 2021, Vol. 47 ›› Issue (4): 904-910.doi: 10.13481/j.1671-587X.20210412
秦丽晶1,韩冰2,李忠起3,索齐4,贾臻1,崔红丽1,徐维强1,方芳1(),王志成1()
Lijing QIN1,Bing HAN2,Zhongqi LI3,Qi SUO4,Zhen JIA1,Hongli CUI1,Weiqiang XU1,Fang FANG1(),Zhicheng WANG1()
摘要: 靶向沉默HeLa细胞中α-地中海贫血/精神发育迟滞综合征X染色相关蛋白(ATRX),探讨其对辐射诱导的细胞周期阻滞和细胞凋亡的作用。 利用RNA干扰(RNAi)技术建立稳定沉默ATRX的HeLa细胞模型,命名为shATRX1-HeLa,以shCon-HeLa为阴性对照。分别给予0、2和8 Gy X射线照射后,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,采用PI单染和流式细胞术检测各组细胞中G0/G1、S和G2/M期细胞百分率,采用Annexin Ⅴ-PE/7-AAD双染和流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用Western blotting法检测各组细胞中多聚(腺苷酸二磷酸核糖基)聚合酶1(PARP1)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 9(cleaved caspase-9)和裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(cleaved caspase-3)蛋白表达情况。 0、2和8 Gy X射线照射后0、6、10、24和48 h,与shCon-HeLa组比较,不同照射剂量 shATRX1-HeLa组细胞增殖活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。0和2 Gy X射线照射后,与shCon-HeLa组比较, shATRX1-HeLa组G0/G1期细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率和细胞凋亡率则明显升高(P<0.05);8 Gy X射线照射后,与shCon-HeLa组比较,shATRX1-HeLa组G0/G1期细胞百分率明显升高(P<0.05),而G2/M期细胞百分率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,与shCon-HeLa组比较,经2和8 Gy照射后24和48 h,shATRX1-HeLa组细胞中PARP1、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3蛋白表达均明显增加。 靶向沉默HeLa细胞ATRX可降低辐射诱导的细胞G2/M期阻滞、抑制细胞增殖并促进细胞凋亡,本研究结果为肿瘤放疗提供了新的分子靶点。
中图分类号: