吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (5): 1227-1233.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230516
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邓文俊1,2,胡连涛1,2,赵彬男2,3,董新宇1,2,李学斌4,李杰1,2,杨馨妍1,2,郭晓莉1,2,李玥1,2,曲义坤5(),王伟群1,2()
Wenjun DENG1,2,Liantao HU1,2,Binnan ZHAO2,3,Xinyu DONG1,2,Xuebin LI4,Jie LI1,2,Xinyan YANG1,2,Xiaoli GUO1,2,Yue LI1,2,Yikun QU5(),Weiqun WANG1,2()
摘要:
目的 探讨外源性CXC趋化因子配体10(CXCL10)对肝细胞癌(HCC)SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 按照CXCL10作用浓度,将人HCC SMMC-7721细胞分为0 mg· L-1 CXCL10组、10 mg·L-1 CXCL10组和30 mg·L-1 CXCL10组。上述部分细胞给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059(80 μmol· L-1)后,将SMMC-7721细胞分为0 mg·L-1 CXCL10+PD98059组、10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组和30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组。CCK-8法检测各组SMMC-7721细胞增殖率,EdU法检测各组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组SMMC-7721细胞迁移率,Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中ERK、磷酸化ERK(p-ERK)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。 结果 CCK-8法检测,培养24 h后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。EdU法检测,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率升高(P<0.01);Transwell小室实验检测,培养48 h后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞迁移率升高(P<0.01)。Western blotting法检测,细胞培养24 h后,采用CXCL10溶液处理24 h,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg· L-1 CXCL10组和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞中ERK、p-ERK及Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.01)。CCK-8法检测,加入ERK抑制剂PD98059后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组和30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与10 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与30 mg·L-1 CXCL10组比较,30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05)。 结论 CXCL10能够促进HCC SMMC-7721细胞增殖和迁移,其作用机制与上调ERK/p-ERK/Cyclin D1通路蛋白表达有关。
中图分类号: