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期刊信息

吉林大学学报(医学版)
双月刊
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:李欣欣
编 辑:姜瑾秋 韩宏志 官 鑫
陈思含 李昕蔚
电 话:0431-85619279
E-mail:xuebao@jlu.edu.cn
地 址:吉林省长春市新民大街828号
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2023年, 第49卷, 第5期 刊出日期:2023-09-28
上一期   
基础研究
Sirtuins蛋白在双酚A诱导的雄性生殖系统损伤模型小鼠睾丸组织和GC-2细胞中的表达及其意义
符璐, 叶严珏, 李江英, 汤子怡, 尹俐
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1107-1116.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230501
摘要 ( 425 )   [HTML]( ) PDF(2215KB) ( 226 )  

目的 探讨Sirtuins(Sirt)蛋白家族在双酚A(BPA)诱导的雄性生殖系统损伤细胞和动物模型中的作用,阐明其对BPA诱导的雄性生殖系统损伤的影响。 方法 40只昆明种小鼠随机分为对照组、低剂量BPA组(给予3 mg·kg-1·d-1 BPA)、中剂量BPA组(给予30 mg·kg-1·d-1 BPA)和高剂量BPA组(给予300 mg·kg-1·d-1 BPA),每组10只。低、中和高剂量BPA组小鼠采用玉米油(0.01 mL·g-1)配成相应浓度BPA灌胃,对照组小鼠给予0.01 mL·g-1玉米油。5周后,检测各组小鼠体质量、睾丸指数和附睾指数,计算机辅助精液分析(CASA)系统检测各组小鼠精子质量,HE染色观察各组小鼠睾丸组织形态表现,Western blotting法检测各组小鼠睾丸组织中Sirt1~Sirt7蛋白表达水平。小鼠GC-2细胞分为0、20、40和80 μmol·L-1 BPA组(给予0、20、40和80 μmol·L-1 BPA处理),EdU荧光染色法检测各组GC-2细胞增殖率,流式细胞术检测不同细胞周期各组GC-2细胞百分率和细胞凋亡率,Western blotting法检测各组GC-2细胞中Sirt1~Sirt7蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,高剂量BPA组小鼠的睾丸指数降低(P<0.05);与对照组比较,中和高剂量BPA组小鼠不动精子百分率升高(P<0.01),快速前向运动精子百分率降低(P<0.01),中速前向运动精子百分率降低(P<0.05),高剂量BPA组小鼠精子畸形率升高(P<0.01)。HE染色,各剂量BPA组小鼠曲细精管内各级生精细胞呈现数量减少且排列疏松的趋势。与对照组比较,低剂量BPA组小鼠睾丸组织中 Sirt6蛋白表达水平降低(P<0.01),中剂量BPA组小鼠睾丸组织中Sirt1、Sirt2和Sirt6蛋白表达水平降低(P<0.01),高剂量BPA组小鼠睾丸组织中Sirt1、Sirt2、Sirt3、Sirt4、Sirt5、Sirt6和Sirt7蛋白表达水平降低(P<0.05或 P<0.01)。EdU染色法,与0 μmol·L-1 BPA组比较,20、40和80 μmol·L-1 BPA组细胞增殖率降低(P<0.01)。流式细胞术,作用48 h后,与0 μmol·L-1 BPA组比较,20、40和80 μmol·L-1 BPA组GC-2细胞凋亡率升高(P<0.01)。Western blotting法,作用24 h后,与0 μmol·L-1 BPA组比较,20 μmol·L-1 BPA组小鼠GC-2细胞中Sirt4和 Sirt7蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),80 μmol·L-1 BPA组小鼠GC-2细胞中Sirt4和Sirt7蛋白表达水平降低(P<0.05或 P<0.01)。作用48 h后,与0 μmol·L-1 BPA组比较,20 μmol·L-1 BPA组小鼠GC-2细胞中Sirt2、 Sirt3、Sirt4 和Sirt6蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01),40 μmol·L-1 BPA组小鼠GC-2细胞中Sirt1、Sirt2、Sirt3、Sirt4和Sirt6蛋白表达水平降低(P<0.05或 P<0.01),80 μmol·L-1 BPA组小鼠GC-2细胞中Sirt1、 Sirt2、Sirt3、Sirt4、Sirt 5和Sirt6蛋白表达水平降低(P<0.05或 P<0.01)。 结论 BPA诱导的雄性生殖损伤细胞和动物模型中Sirt1~Sirt7蛋白表达水平降低,加重了BPA诱导的雄性生殖系统损伤。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
可食用植物来源外泌样纳米颗粒体外抗氧化能力及其对过氧化氢诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用
张娇,马宝莲,张永兰
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1117-1124.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230502
摘要 ( 245 )   [HTML]( ) PDF(663KB) ( 152 )  

目的 探讨生姜、青椒、大蒜、蘑菇、柠檬、山药、葡萄、番茄、西兰花和洋葱10种可食用植物来源外泌样纳米颗粒(ELNs)的体外抗氧化能力及其对过氧化氢诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用,为深入研究ELNs提供依据。 方法 将PC12细胞分为对照组、外泌体组、过氧化氢组和过氧化氢+ELNs组。高速差速离心法分离提取10种ELNs,采用二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除体系、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二按盐(ABTS)阳离子自由基体系和铁离子总还原能力(FRAP)体系检测10种ELNs的体外抗氧化能力,MTT法检测各组PC12细胞活力。 结果 10种ELNs对DPPH自由基的清除能力从高到低依次为蘑菇、洋葱、生姜、柠檬、葡萄、番茄、青椒、西兰花、山药和大蒜。10种ELNs对ABTS阳离子自由基的清除能力从高到低依次为生姜、蘑菇、洋葱、柠檬、山药、葡萄、青椒、大蒜、番茄和西兰花。10种ELNs对FRAP体系的总抗氧化能力从高到低依次为生姜、青椒、洋葱、蘑菇、柠檬、西兰花、葡萄、山药、番茄和大蒜,其中抗氧化能力相对较强的5种ELNs对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除能力以及FRAP随着ELNs浓度升高而增大,半数抑制浓度(IC50)值分别为洋葱73.15、123.02和83.00 g·L-1,生姜124.07、91.24和91.24 g·L-1,蘑菇310.44、518.04 和237.10 g·L-1,青椒969.06、847.32 和237.10 g·L-1,柠檬1 718.94、544.38 和962.12 g·L-1;与对照组比较,600 μmol·L-1过氧化氢组PC12细胞活力下降约30%。与过氧化氢组比较,过氧化氢+ELNs组(青椒、柠檬、山药和西兰花)PC12细胞活力明显提高21.08%、26.2%、11.72%和15.15%。 结论 生姜、蘑菇、柠檬和洋葱来源ELNs外泌体在DPPH自由基清除体系、ABTS阳离子自由基体系和FRAP体系中均表现出较强的抗氧化能力。青椒、柠檬、山药和西兰花来源ELNs对过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤具有保护作用。

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二氧化硫对大鼠急性心肌缺血损伤后心肌纤维化的改善作用及其机制
刘星,刘佳丽,聂连桂,刘茂军,赵俊雄,汪刘洋,杨军
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1125-1133.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230503
摘要 ( 126 )   [HTML]( ) PDF(1583KB) ( 103 )  

目的 观察二氧化硫(SO2)对大鼠急性心肌缺血损伤后心肌纤维化(MF)的影响,并探讨其作用机制。 方法 24只雄性SD大鼠随机分为对照组(不处理)、异丙肾上腺素(ISO)组(给予ISO)、ISO+SO2组(给予ISO+SO2)和SO2组(给予SO2),每组6只。ISO组和ISO+SO2组大鼠连续2 d腹腔注射大剂量ISO (50 mg·kg-1·d-1)构建急性心肌缺血损伤模型。造模成功后,ISO+SO2组和SO2组大鼠给予Na2SO3溶液(0.54 mmol·kg-1·d-1)和NaHSO3溶液(0.18 mmol·kg-1·d-1),连续4周,对照组和ISO组大鼠给予等量生理盐水。检测4组大鼠血浆肌钙蛋白水平和心电图,超声心动图检测4组大鼠左室短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF),Masson染色检测4组大鼠心肌组织中胶原沉积情况并计算胶原体积分数(CVF),Tunel染色检测4组大鼠心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测4组大鼠心肌组织中自噬相关蛋白3(Atg3)、自噬相关蛋白5(Atg5)、自噬相关蛋白16L1(Atg16L1)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)、基质金属蛋白酶8(MMP-8)和金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,ISO组和ISO+SO2组大鼠心电图ST段明显抬高,肌钙蛋白水平升高(P<0.05),提示急性心肌缺血损伤大鼠造模成功;与对照组比较,ISO组大鼠LVFS和LVEF降低(P<0.05),心肌组织中CVF升高(P<0.05),心肌细胞凋亡率升高(P<0.05),心肌组织中Atg3、Atg5、Atg16L1、Caspase-3、Caspase-9和MMP-8蛋白表达水平升高(P<0.05),TIMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与ISO组比较,ISO+SO2组大鼠LVFS和LVEF升高(P<0.05),心肌组织中CVF降低(P<0.05),心肌细胞凋亡率降低(P<0.05),心肌组织中Atg3、Atg5、Atg16L1、Caspase-3、Caspase-9和MMP-8蛋白表达水平降低(P<0.05),TIMP-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。 结论 SO2可以改善大鼠急性心肌缺血损伤后MF,其机制可能与抑制心肌细胞过度自噬并减少心肌细胞凋亡有关。

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MiR-491-5p过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响
王丹丹,周宁,刘冬芹,赵杰,梁超,代娟娟,武艳
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1134-1139.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230504
摘要 ( 1751 )   [HTML]( ) PDF(750KB) ( 121 )  

目的 探讨微小RNA-491-5p(miR-491-5p)过表达对人鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响,为研究鼻咽癌的发病机制和靶向治疗提供依据。 方法 将人鼻咽癌HONE-1细胞分为对照组(转染对照质粒)和miR-491-5p组(转染miR-491-5p质粒)。采用荧光显微镜观察2组鼻咽癌HONE-1细胞转染效率,CCK-8法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性,Transwell小室实验检测2组鼻咽癌HONE-1细胞的迁移细胞数,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素mRNA表达水平,Western blotting法检测2组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白和上皮钙黏素蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,作用24、48和72 h时miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞增殖活性(t=2.832,P=0.047 3;t=4.522,P=0.001 4;t=9.308,P<0.01)和迁移细胞数(t=9.639,P<0.01)明显降低;与对照组比较,miR-491-5p组鼻咽癌HONE-1细胞中波形蛋白mRNA(t=7.535,P=0.001 7)和蛋白(t=7.219,P=0.018 7)表达水平明显降低,上皮钙黏素mRNA(t=4.88,P=0.039 5)和蛋白(t=5.754,P=0.028 9)表达水平明显升高。 结论 MiR-491-5p过表达可以抑制人鼻咽癌细胞的增殖、迁移和上皮-间质转化(EMT)。

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脂多糖对小鼠视网膜Müller细胞和小胶质细胞共培养体系中炎症因子水平的影响及其机制
胡志宽,何思琦,蒋维杰,赵贵芳,张佳,齐玲
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1140-1146.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230505
摘要 ( 135 )   [HTML]( ) PDF(1465KB) ( 62 )  

目的 观察脂多糖(LPS)诱导小鼠视网膜单独培养Müller细胞和Müller细胞与小胶质细胞共培养2种体系中的炎症反应,阐明Müller细胞与小胶质细胞的相互作用机制。 方法 培养Müller细胞QMMuC-1和小胶质细胞BV2,免疫荧光染色方法观察2种细胞形态表现。实验分为单独培养对照组[QMMuC-1细胞单独培养,采用磷酸盐(PBS)缓冲液处理]、共培养对照组(QMMuC-1细胞和BV2细胞共培养,细胞比例1∶1,采用PBS缓冲液处理)、单独培养实验组(QMMuC-1细胞单独培养,采用10 mg·L-1 LPS处理)和共培养实验组(QMMuC-1细胞和BV2细胞共培养,采用10 mg·L-1 LPS处理)。采用免疫荧光染色法观察各组细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组QMMuC-1细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。 结果 QMMuC-1细胞中神经胶质细胞标志物谷氨酰胺合成酶(GS)和GFAP阳性,BV2细胞中小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)阳性。与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.7倍(P=0.005);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高2倍(P=0.003),细胞形态逐渐变成梭形;与单独培养实验组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.4倍(P=0.000 6),大部分细胞呈梭形。与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.05);与单独培养实验组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.05)。 结论 LPS可能通过诱导小胶质细胞激活后释放炎症因子作用于Müller细胞,并加剧了Müller细胞的炎症反应。

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人lncRNA-GACAT2 过表达载体的构建及其对肺癌细胞增殖和干性的影响
倪娜,董洪亮,高海洋,陈微微,孟新宇,崔冰洁,杜静
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1147-1153.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230506
摘要 ( 3301 )   [HTML]( ) PDF(758KB) ( 68 )  

目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)胃癌相关转录本2(GACAT2)基因对肺癌A549和H1299细胞增殖和干性的影响,阐明lncRNA GACAT2基因在肺癌发生发展中的作用。 方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法扩增lncRNA GACAT2基因的全长序列,克隆至pc3.1(+)真核表达载体,采用菌液PCR法和基因测序法检测GACAT2过表达载体的构建情况。将pc3.1-GACAT2过表达质粒和对照质粒pc3.1分别转入人肺癌A549和H1299细胞,采用G418筛选并建立稳定过表达GACAT2的A549和H1299细胞,分为空载体组(转染pc3.1空载体)和pc3.1-GACAT2组(转染pc3.1-GACAT2重组质粒)。采用RT-qPCR法检测2组A549和H1299细胞中GACAT2 mRNA表达水平, CCK-8法检测2组细胞增殖活性,细胞克隆形成实验检测各组细胞克隆形成数,干细胞成球实验观察2组细胞成球数。 结果 成功构建GACAT2真核过表达载体。与空载体组比较,pc3.1-GACAT2组A549和H1299细胞中GACAT2 mRNA表达水平升高(P<0.05P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.05P<0.01),细胞克隆形成数明显降低(P<0.05P<0.01),细胞成球数明显降低(P<0.05P<0.01)。 结论 过表达人lncRNA GACAT2基因能抑制肺癌A549和H1299细胞的增殖能力和细胞干性。

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睾酮在体外对人卵巢颗粒细胞SVOG凋亡的影响及其内质网应激机制
仝晓丽,范明慧,孟娇,朱继红,盛敏佳
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1154-1160.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230507
摘要 ( 124 )   [HTML]( ) PDF(699KB) ( 58 )  

目的 探讨睾酮在体外对颗粒细胞凋亡的诱导作用,并阐明其作用机制。 方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测人卵巢颗粒细胞SVOG的细胞增殖抑制率,筛选最佳药物作用浓度后,将SVOG 细胞分为对照组、睾酮组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮)、睾酮+氟他胺组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮+1.0×10-5 mol·L-1氟他胺)、睾酮+牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)组(1.0×10-5 mol·L-1睾酮+1.5 g·L-1 TUDCA)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组 SVOG 细胞中剪切型X盒结合蛋白1 (XBP1s)、激活转录因子4(ATF4)、转录因子C/EBP同源蛋白(CHOP)和死亡受体5(DR5) mRNA表达水平,流式细胞术检测各组 SVOG 细胞凋亡率。 结果 与对照组比较,睾酮组SVOG细胞形态改变,异型细胞增多,胞质中出现较多颗粒,培养基中细胞碎片增多,SVOG细胞增殖抑制率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞形态变化减少,细胞增殖抑制率降低(P<0.05);流式细胞术,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞凋亡率升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞凋亡率降低(P<0.05)。RT-qPCR法,作用48 h后,与对照组比较,睾酮组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);与睾酮组比较,睾酮+氟他胺组和睾酮+TUDCA组SVOG细胞中XBP1s、ATF4、CHOP和DR5 mRNA表达水平降低(P<0.05)。 结论 睾酮可诱导人卵巢颗粒细胞凋亡并引起卵泡闭锁,其作用机制可能是雄激素与雄激素受体(AR)结合激活CHOP-DR5通路,诱导内质网应激(ERS)发生,促进颗粒细胞凋亡。

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FOXP3调控非小细胞肺癌A549细胞对阿霉素敏感性的作用及其机制
盖晓东,赵颖,王鹤霏,何程远,王星翔,历春
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1161-1167.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230508
摘要 ( 3237 )   [HTML]( ) PDF(862KB) ( 79 )  

目的 探讨叉头蛋白3(FOXP3)基因沉默后非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞对阿霉素(Dox)敏感性的变化,阐明其参与Dox耐药的机制。 方法 采用脂质体法将FOXP3小干扰RNA(siRNA)片段转染至人NSCLC A549细胞,细胞分为空白对照组(不转染)、si-NC组(转染对照siRNA)和si-FOXP3组(转染FOXP3-siRNA)。采用Western blotting法和免疫荧光法检测各组A549细胞中FOXP3蛋白表达水平,CCK-8法检测各组A549细胞增殖活性和半数抑制浓度(IC50)值。各组A549细胞中分别加入0、10和20 μmol·L-1 DAPT,作为0、10和20 μmol·L-1 DAPT组;另取A549细胞,分别加入0 μmol·L-1 DAPT、1.0 mg·L-1 Dox和1.0 mg·L-1 Dox联合10 μmol·L-1 DAPT,作为0 μmol·L-1 DAPT组、1.0 mg·L-1 Dox组和1.0 mg·L-1 Dox联合10 μmol·L-1 DAPT组。Western blotting法检测各组细胞中Notch1、Hes1和FOXP3蛋白表达水平,CCK-8和Western blotting法检测0、10和20 μmol·L-1 DAPT组A549细胞的IC50值和细胞中Notch1、Hes1及FOXP3蛋白表达水平,Western blotting法检测0 μmol·L-1 DAPT组、1.0 mg·L-1 Dox组和1.0 mg·L-1 Dox联合10 μmol·L-1 DAPT组A549细胞中FOXP3、P-糖蛋白(P-gp)、Notch1和Hes1蛋白表达水平。 结果 与空白对照和si-NC组比较,si-FOXP3组A549细胞中FOXP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),增殖活性和IC50值降低(P<0.05或P<0.01),细胞中Notch1、Hes1和FOXP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与0 μmol·L-1 DAPT组比较,10 和20 μmol·L-1 DAPT组A549细胞中Notch1、Hes1和FOXP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与0 μmol·L-1 DAPT组比较,1.0 mg·L-1 Dox组A549细胞中FOXP3、P-gp、Notch1和Hes1蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与1.0 mg·L-1 Dox组比较,1.0 mg·L-1 Dox联合10 μmol·L-1 DAPT组A549细胞中FOXP3、P-gp、Notch1和Hes1蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。 结论 沉默FOXP3可提高NSCLC细胞对Dox的敏感性,其作用机制与抑制Notch1/Hes1信号通路有关。

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人参皂苷Rh2对糖尿病肾病变大鼠肾损伤的保护作用及其机制
曲萌,姜雨竹,黄睿,马振卓,夏吉辰,张媛,董志恒
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1168-1173.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230509
摘要 ( 1840 )   [HTML]( ) PDF(508KB) ( 64 )  

目的 探讨人参皂苷Rh2对糖尿病肾病变(DKL)大鼠肾脏损伤的保护作用,并阐明其作用机制。 方法 通过高脂高能量饲料配以链脲佐菌素(STZ)腹腔注射方法制备DKL大鼠模型。将30只SD成模大鼠随机分为模型组、低剂量(10 mg·kg-1)Rh2组和高剂量(20 mg·kg-1)Rh2组,每组10只,另选取10只SD大鼠作为正常对照组。检测各组大鼠体质量和肾脏质量,并计算肾指数,干预8周后全自动分析仪检测各组大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白(UP)水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠肾组织中Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)水平,Western blotting法检测各组大鼠肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7蛋白表达水平。 结果 与正常对照组比较,模型组大鼠体质量降低(P<0.01),肾脏质量和肾指数明显升高(P<0.01),血清中Scr、BUN和24 h UP水平均升高(P<0.01),肾组织中Col Ⅳ水平升高(P<0.01),肾组织中TGF-β1和Smad3蛋白表达水平升高(P<0.01),而肾组织中Smad7蛋白表达水平降低(P<0.01)。与模型组比较,低和高剂量Rh2组大鼠体质量升高(P<0.05或P<0.01),肾脏质量和肾指数均降低(P<0.05或P<0.01),血清中Scr、BUN和24 h UP水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),肾组织中Col Ⅳ水平降低(P<0.01),肾组织中TGF-β1和Smad3蛋白表达水平降低(P<0.01),肾组织中Smad7蛋白表达水平升高(P<0.01)。 结论 人参皂苷Rh2可抑制DKL大鼠肾脏纤维化,改善肾功能,对DKL大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与Rh2调节TGF-β1/Smads信号通路表达有关。

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红景天苷对高原红细胞增多症模型大鼠骨髓CD71+有核红细胞凋亡的影响
郭勇,王生艳,易静静,崔森
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1174-1181.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230510
摘要 ( 167 )   [HTML]( ) PDF(978KB) ( 242 )  

目的 探讨红景天苷对高原红细胞增多症(HAPC)模型大鼠骨髓CD71+有核红细胞(RBC)凋亡的影响,并阐明其作用机制。 方法 45只SD雄性大鼠随机分为对照组(海拔1 500 m条件+NaCl溶液)、模型组(海拔5 000 m条件+NaCl溶液)和药物组(海拔5 000 m条件+ 0.15 g·kg-1·d-1红景天苷),每组15只。检测各组大鼠血常规中RBC数、血红蛋白(Hb)水平和红细胞比容(HCT)水平,流式细胞术检测各组大鼠骨髓CD71+有核RBC百分率、骨髓CD71+有核RBC凋亡率、骨髓CD71+有核RBC中线粒体膜电位(MMP)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠骨髓CD71+有核RBC中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠外周血中RBC数、Hb水平和HCT水平均升高(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC百分率和骨髓CD71+有核RBC凋亡率升高(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC中Bax、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,药物组大鼠外周血中骨髓CD71+有核RBC百分率均明显降低(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC百分率和骨髓CD71+有核RBC凋亡率降低(P<0.01),骨髓CD71+有核RBC中MMP水平升高(P<0.05),Caspase-3、Bax和Caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.01)。 结论 红景天苷可有效抑制HAPC大鼠骨髓有核RBC凋亡增加,并改善低氧引起的RBC过度积累,可能在大鼠HAPC发病过程起预防和保护作用。

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色甘酸二钠对大鼠脑缺血/再灌注损伤的改善作用及其机制
朱娴,陈薪旭,陈奕斌,黎昌炫,刘杰,王埮
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1182-1191.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230511
摘要 ( 93 )   [HTML]( ) PDF(1473KB) ( 26 )  

目的 探讨色甘酸二钠(SCG)对缺血性卒中(CIS)大鼠神经功能和认知功能的影响,阐明其作用机制。 方法 选取80只雄性SD大鼠,随机选取18只作为假手术组,剩余大鼠采用线栓法构建大鼠脑缺血/再灌注(I/R)损伤模型。将造模成功的45只大鼠随机分为I/R组、I/R+低剂量SCG组和I/R+高剂量SCG组,每组15只。造模后24 h,I/R+低剂量SCG组和I/R+高剂量SCG组大鼠分别腹腔注射20 和60 mg·kg-1 SCG,连续2周。采用改良的神经功能缺损程度评分(mNSS)法评估各组大鼠神经功能评分,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠脑梗死面积,Y型迷宫实验检测各组大鼠记忆能力,电生理检测各组大鼠正确反应率、正确反应时间和兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率,高尔基染色检测各组大鼠脑组织中海马齿状回区树突棘密度,免疫荧光法检测各组大鼠脑组织中海马齿状回区5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数和双肾上腺皮质激素(DCX)蛋白表达水平, Western blotting法检测各组大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、抗酪氨酸激酶受体B(TrkB)、神经生长因子3(NT-3)和抗酪氨酸激酶受体C(TrkC)蛋白表达水平。 结果 与假手术组比较,I/R组大鼠神经功能评分升高(P<0.05),脑梗死区域面积增大(P<0.05),正确反应率降低(P<0.05),正确反应时间增加(P<0.05),fEPSP斜率和树突棘密度降低(P<0.05),脑组织齿状回区BrdU阳性细胞数和DCX蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),海马组织中NT-3蛋白表达水平升高(P<0.05),而BNDF、TrkB和TrkC蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与I/R组比较,I/R+高剂量SCG组大鼠神经功能评分降低(P<0.05),脑梗死面积减少(P<0.05),正确反应率升高(P<0.05),正确反应时间减少(P<0.05),fEPSP斜率和树突棘密度升高(P<0.05),脑组织中海马齿状回区BrdU阳性细胞数和DCX蛋白表达水平明显升高(P<0.05),大鼠海马组织中BDNF、TrkB、NT-3和TrkC蛋白表达水平升高(P<0.05)。 结论 SCG对I/R损伤模型大鼠神经功能与认知功能具有保护作用,其作用机制可能与SCG提高BDNF/TrkB和NT-3/TrkC信号通路蛋白表达及促进神经元增殖有关。

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过表达FOXO1的BMSCs对哮喘模型小鼠肺嗜酸性粒细胞浸润和气道重构的抑制作用及其机制
何小双,徐丽娜,崔梅,辛雯艳
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1192-1201.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230512
摘要 ( 1702 )   [HTML]( ) PDF(2478KB) ( 73 )  

目的 探讨过表达叉头转录因子1(FOXO1)的骨髓间充质干细胞(BMSCs)对哮喘小鼠肺嗜酸性粒细胞浸润和气道重构的抑制作用,并阐明其可能的作用机制。 方法 分离小鼠的BMSCs,采用油红O染色和茜素红染色鉴定BMSCs,流式细胞术鉴定BMSCs的表型。取对数生长期的BMSCs,分为对照组(不进行处理),FOXO1-BMSCs组(感染携带FOXO1基因的重组慢病毒)和NC-BMSCs组(感染阴性对照重组慢病毒)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组BMSCs中FOXO1 mRNA表达水平,Western blotting 法检测各组BMSCs中FOXO1蛋白表达水平。将40只小鼠随机分为对照组(给予生理盐水)、模型组(给予生理盐水)、NC-BMSCs组(给予NC-BMSCs悬液)和FOXO1-BMSCs组(给予FOXO1-BMSCs悬液),每组10只。除对照组外,其他3组小鼠采用卵清蛋白(OVA)和雾化激发的方法制备哮喘动物模型。检测各组小鼠BALF中细胞分类计数,HE染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现,免疫荧光法检测各组小鼠肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和增殖细胞核蛋白(PCNA)表达情况,Image-Pro Plus软件测量各组小鼠支气管管腔内周长(Pi)、管壁面积(W)、支气管平滑肌面积(S)和支气管平滑肌细胞核数目(N),并计算S/Pi、W/Pi和N/Pi,Western blotting法检测各组小鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶12(MMP-12)和基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)蛋白表达水平。 结果 分离培养的BMSCs呈纺锤形,油红O染色和茜素红染色后可见明显红色脂滴形成和橘红色沉淀,BMSCs表面CD29、CD44和CD71表达量升高,CD34、CD45和HLA-DR表达量降低。与对照组和NC-BMSCs组比较,FOXO1-BMSCs组BMSCs中FOXO1 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组和NC-BMSCs组比较,FOXO1-BMSCs组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数减少(P<0.05),气道及肺泡中炎性细胞浸润程度减轻,S/Pi、W/Pi和N/Pi降低(P<0.05),肺组织中α-SMA和PCNA表达量降低,MMP-9、MMP-12和TIMP-1蛋白表达水平降低(P<0.05)。 结论 过表达FOXO1的BMSCs能够减轻哮喘小鼠肺部炎性细胞浸润,尤其以嗜酸性粒细胞为主,并抑制气道重构,从而缓解哮喘的症状。

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丹皮酚对人骨肉瘤MG-63细胞增殖、迁移和CXCR4/STAT3通路的影响
吴琪,陈建锋,李浩,文峰
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1202-1209.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230513
摘要 ( 1752 )   [HTML]( ) PDF(1159KB) ( 139 )  

目的 探讨丹皮酚对人骨肉瘤(OS)MG-63细胞增殖、迁移和趋化因子受体4(CXCR4)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)通路的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法 体外培养MG-63细胞,分为对照组(不给予药物干预)和不同浓度丹皮酚组(给予10、20、40、80、160和320 mg·L-1丹皮酚)。采用CCK-8法检测各组细胞存活率并选择半数抑制浓度(IC50)值作为后续实验药物浓度。将MG-63细胞分为对照组和丹皮酚(215.8 mg·L-1)组,采用Western blotting法检测各组细胞中CXCR4、白细胞介素6(IL-6)、磷酸化STAT3(p-STAT3)和STAT3蛋白表达水平。将MG-63细胞分为对照组(不给予药物干预)、丹皮酚组(给予215.8 mg·L-1丹皮酚)、丹皮酚+空载组(给予215.8 mg·L-1丹皮酚+空载质粒)和丹皮酚+过表达组(给予215.8 mg·L-1丹皮酚+CXCR4过表达质粒)。采用细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成率,Western blotting法检测各组细胞中CXCR4、IL-6、p-STAT3和STAT3蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,40、80、160和320 mg·L-1丹皮酚组MG-63细胞存活率降低(P<0.05),丹皮酚IC50值为215.8 mg·L-1。与对照组比较,丹皮酚(215.8 mg·L-1)组MG-63细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05)。与对照组比较,丹皮酚组和丹皮酚+空载组MG-63细胞划痕愈合率及细胞克隆形成率降低(P<0.05),细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05);与丹皮酚组比较,丹皮酚+空载组MG-63细胞划痕愈合率、细胞克隆形成率和细胞中CXCR4、IL-6、p-STAT3及STAT3蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);与丹皮酚组比较,丹皮酚+过表达组MG-63细胞划痕愈合率和细胞克隆形成率升高(P<0.05),细胞中CXCR4、IL-6和p-STAT3蛋白表达水平升高(P<0.05)。 结论 丹皮酚能抑制MG-63细胞的增殖、迁移和克隆形成,其机制可能与调控CXCR4/STAT3信号通路有关。

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小鼠各期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白的动态表达及其亚细胞定位
何文宁,冯少青,庞海垚,孟峻
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1210-1216.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230514
摘要 ( 119 )   [HTML]( ) PDF(859KB) ( 55 )  

目的 检测小鼠各期卵母细胞中血清和糖皮质激素诱导蛋白激酶3(SGK3 )mRNA和蛋白的表达及其亚细胞定位,为阐明SGK3对小鼠卵母细胞周期变化的调控作用机制提供依据。 方法 通过超排卵技术收集小鼠生发泡(GV)期、生发泡破裂(GVBD)期、第1次减数分裂(MⅠ)期卵母细胞和第2次减数分裂(MⅡ)期卵母细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各期小鼠卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平,收集GV、GVBD和MⅠ期卵母细胞后采用Western blotting法检测小鼠各期卵母细胞中Cdc25B-Ser30的磷酸化表达情况,免疫荧光法观察小鼠各期卵母细胞中SGK3亚细胞定位情况。 结果 在小鼠各期卵母细胞中均有SGK3 mRNA和蛋白表达。与GV期比较,GVBD和MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01);与GVBD期比较,MⅠ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高 (P<0.01);与MⅠ期比较,MⅡ期卵母细胞中SGK3 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。Cdc25B-Ser30在GV期被去磷酸化,在GVBD和MⅠ期被磷酸化。小鼠的GV期卵母细胞中SGK3定位于细胞核膜,在GVBD期前进入细胞核,在GVBD期定位于细胞核,MⅠ期则分布于整个细胞,在MⅡ期则由细胞浆再次进入细胞核。 结论 小鼠各期卵母细胞中SGK3均呈动态表达,SGK3存在核浆穿梭,SGK3定位的动态变化可能参与了细胞周期B的激活。

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巨噬细胞外泌体lncRNA HULC对肝癌细胞迁移、侵袭和转移的影响及其机制
董勇,徐菱遥,华静,梁晗,刘东亚,赵俊波,孙正路,程序,魏书堂
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1217-1226.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230515
摘要 ( 1667 )   [HTML]( ) PDF(1990KB) ( 38 )  

目的 探讨巨噬细胞外泌体长链非编码RNA(lncRNA)肝癌高表达转录本(HULC)在肝细胞癌(HCC)转移中的作用,并阐明其作用机制。 方法 分离小鼠骨髓单核细胞,采用佛波酯诱导分化为骨髓源巨噬细胞(BMDM),并用白细胞介素4(IL-4)将BMDM诱导分化为M2巨噬细胞,即肿瘤相关巨噬细胞(TAM)。差速离心法收集M2巨噬细胞外泌体(TAM-exos)。在TAM中分别转染lncRNA HULC-siRNA或NC质粒后提取各组TAM分泌的外泌体(lncRNA HULC-siRNA-exos或NC-exos)。将HepG2细胞按照实验目的分为对照组和TAM-exos组;NC-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos组;lncRNA HULC-siRNA-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos+SKL2001组。给予相应处理后,Transwell小室实验检测HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测HepG2细胞中lncRNA HULC表达水平,Western blotting法检测HepG2细胞中Wnt3A、β-连环蛋白(β-catenin)、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平。构建裸鼠原位肝癌移植模型,分为对照组、NC-exos组、TAM-exos组和lncRNA HULC-siRNA-exos组,检测M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后裸鼠原位移植瘤肺转移灶数。 结果 TAM-exos符合外泌体的形态和生物学特征。与对照组比较,TAM-exos组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中lncRNA HULC、Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.05)。与NC-exos组比较,lncRNA HULC-siRNA-exos组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中lncRNA HULC、Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与lncRNA HULC-siRNA-exos组比较,lncRNA HULC-siRNA-exos+SKL2001组HepG2细胞的迁移和侵袭细胞数及细胞中Wnt3A、β-catenin、c-Myc和Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.05)。裸鼠实验,M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后,TAM-exos组裸鼠原位移植瘤肺转移灶数较对照组增多(P<0.05);M2巨噬细胞外泌体lncRNA HULC作用后,lncRNA HULC-siRNA-exos组裸鼠原位移植瘤肺转移灶数较TAM-exos组和NC-exos组减少(P<0.05)。 结论 TAM外泌体lncRNA HULC具有促进HCC细胞侵袭和转移的作用,其作用机制可能与激活Wnt信号通路有关。

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CXC趋化因子配体10对肝细胞癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响及其机制
邓文俊,胡连涛,赵彬男,董新宇,李学斌,李杰,杨馨妍,郭晓莉,李玥,曲义坤,王伟群
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1227-1233.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230516
摘要 ( 1650 )   [HTML]( ) PDF(1086KB) ( 89 )  

目的 探讨外源性CXC趋化因子配体10(CXCL10)对肝细胞癌(HCC)SMMC-7721细胞增殖和迁移的影响,并阐明其作用机制。 方法 按照CXCL10作用浓度,将人HCC SMMC-7721细胞分为0 mg· L-1 CXCL10组、10 mg·L-1 CXCL10组和30 mg·L-1 CXCL10组。上述部分细胞给予细胞外调节蛋白激酶(ERK)抑制剂PD98059(80 μmol· L-1)后,将SMMC-7721细胞分为0 mg·L-1 CXCL10+PD98059组、10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组和30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组。CCK-8法检测各组SMMC-7721细胞增殖率,EdU法检测各组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率,Transwell小室实验检测各组SMMC-7721细胞迁移率,Western blotting法检测各组SMMC-7721细胞中ERK、磷酸化ERK(p-ERK)和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达水平。 结果 CCK-8法检测,培养24 h后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞增殖率升高(P<0.05或P<0.01)。EdU法检测,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞中EdU阳性表达率升高(P<0.01);Transwell小室实验检测,培养48 h后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞迁移率升高(P<0.01)。Western blotting法检测,细胞培养24 h后,采用CXCL10溶液处理24 h,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg· L-1 CXCL10组和30 mg·L-1 CXCL10组SMMC-7721细胞中ERK、p-ERK及Cyclin D1蛋白表达水平升高(P<0.01)。CCK-8法检测,加入ERK抑制剂PD98059后,与0 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组和30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与10 mg·L-1 CXCL10组比较,10 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05);与30 mg·L-1 CXCL10组比较,30 mg·L-1 CXCL10+PD98059组SMMC-7721细胞增殖率降低(P<0.05)。 结论 CXCL10能够促进HCC SMMC-7721细胞增殖和迁移,其作用机制与上调ERK/p-ERK/Cyclin D1通路蛋白表达有关。

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沉默CDKL1基因通过调控PTEN/Akt/mTOR信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的抑制作用
赵月生,李祖彬,刘海鸥,陶昆麟,赵齐海,李娜
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1234-1242.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230517
摘要 ( 147 )   [HTML]( ) PDF(1231KB) ( 77 )  

目的 探讨细胞周期蛋白依赖性蛋白样激酶1(CDKL1)基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖、侵袭和转移的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法 选择乳腺癌MCF-7细胞作为研究对象,采用小干扰RNA技术(siRNA)沉默CDKL1基因表达。采用1 μmol·L-1 磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)抑制剂BpV或10 μmol·L-1 蛋白激酶B(Akt)激动剂SC79进行干预。取对数生长期MCF-7细胞,分为空白对照组(MCF-7细胞不作任何处理)、转染对照(siRNA-NC)组(MCF-7细胞转染siRNA-NC质粒)、siRNA-CDKL1组(MCF-7细胞转染siRNA-CDKL1质粒)、siRNA-CDKL1+PTEN抑制剂BpV(siRNA-CDKL1+BpV)组(转染siRNA-CDKL1的MCF-7细胞,再采用1 μmol·L-1 PTEN抑制剂BpV处理2 h)和siRNA-CDKL1+Akt激动剂SC79(siRNA-CDKL1+SC79)组(转染siRNA CDKL1的MCF-7细胞,再采用10 μmol·L-1 Akt激动剂SC79处理2 h)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测各组乳腺癌MCF-7细胞中CDKL1 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组乳腺癌MCF-7细胞增殖活性,EdU法检测各组乳腺癌MCF-7细胞中EdU阳性细胞率,细胞划痕愈合实验检测各组乳腺癌MCF-7细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测各组乳腺癌MCF-7细胞的迁移和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组乳腺癌MCF-7细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、PTEN、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。 结果 与siRNA-NC组比较,siRNA-CDKL1组乳腺癌MCF-7细胞中CDKL1 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.01),EdU阳性细胞率降低(P<0.01),乳腺癌MCF-7细胞迁移和侵袭细胞数降低(P<0.01),细胞中MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平降低(P<0.01),PTEN蛋白表达水平升高(P<0.01)。与siRNA-CDKL1组比较,siRNA-CDKL1+BpV组和siRNA-CDKL1+SC79组乳腺癌MCF-7细胞增殖活性升高(P<0.01),EdU阳性细胞率升高(P<0.01),迁移和侵袭细胞数增加(P<0.01),细胞中MMP-2、MMP-9、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平升高(P<0.01),PTEN蛋白表达水平降低(P<0.01)。 结论 CDKL1基因的沉默可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖、侵袭和转移能力,其作用机制可能与调控PTEN/Akt/mTOR信号通路有关。

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临床研究
乙型肝炎病毒相关肝细胞癌关键基因筛选及其与预后关系的生物信息学分析
徐雅琪,王艳玉,张文婧,韩梅,穆华夏,杨希,卜伟晓,陶子琨,孔雨佳,石福艳,王素珍
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1243-1252.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230518
摘要 ( 1593 )   [HTML]( ) PDF(2703KB) ( 174 )  

目的 采用生物信息学方法识别与乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(HBV-HCC)的早期诊断和不良预后相关的关键基因,阐明HBV-HCC 发生发展的潜在分子机制。 方法 从基因表达综合数据库(GEO)中检索“hepatitis B induced HCC ”,下载基因数据集GSE121248,通过R软件中的“limma”数据包筛选差异表达基因(DEGs),采用“clusterProfiler” 数据包对DEGs进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用STRING数据库和Cytoscape软件建立蛋白-蛋白互作(PPI)网络并筛选关键基因。采用基因表达水平值的交互式分析(GEPIA)、Kaplan Meier-Plotter和人类蛋白质图谱(HPA)数据库验证关键基因及其蛋白质表达水平,采用“CIBERSORT”数据包分析免疫细胞的浸润情况。 结果 共筛选出574个DEGs,其中上调基因173个,下调基因401个。GO功能富集分析,DEGs主要富集于小分子代谢、信号转导、免疫应答和炎症反应等生物学过程;KEGG通路富集分析,DEGs主要富集于视黄醇代谢、细胞色素P450对外源药物代谢通路和化学致癌作用等。筛选PPI网络中的细胞分裂周期20(CDC20)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、细胞周期蛋白A2(CCNA2)、纺锤体检测点蛋白(BUB1B)、拓扑异构酶Ⅱα(TOP2A)、Discs大同源相关蛋白5(DLGAP5)、异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)、中心体蛋白55(CEP55)、驱动蛋白超家族11(KIF11)和驱动蛋白超家族20A(KIF20A)为HBV-HCC的关键基因。GEPIA数据库分析,上述10种关键基因在HCC患者中均呈高表达。Kaplan-Meier生存曲线分析,关键基因高表达的HCC患者总生存期短于低表达患者。 结论 细胞周期与病毒致癌作用相关基因(CDC20、CDK1、CCNA2和BUB1B)与HBV-HCC患者的发生发展及不良预后有密切关联,可能成为诊断标志物和治疗新靶点。

数据和表 | 参考文献 | 相关文章 | 计量指标
基于LC-MS/MS多反应监测技术的食管鳞状细胞癌能量代谢物分析
董宇航,高海霞,崔晓宾,李锋
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1253-1261.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230519
摘要 ( 1733 )   [HTML]( ) PDF(1428KB) ( 31 )  

目的 分析食管鳞状细胞癌(ESCC)患者的血清代谢物成分,筛选出潜在的差异代谢物,探讨ESCC的发生和能量代谢之间的关系,为ESCC的早期诊断提供有价值的能量代谢物。 方法 收集ESCC患者(ESCC组)和健康志愿者(对照组)的血清样本,每组7例。采用超高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术检测2组研究对象血清代谢物。通过偏最小二乘判别分析(PLS-DA)模型和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)模型鉴定ESCC组和对照组研究对象血清代谢物是否存在差异,并按照血清代谢物的化学分类归属进行分类。基于多反应监测(MRM)模式靶向代谢组学分析血清能量代谢物,确定显著差异能量代谢物及其通路。 结果 纳入ESCC组和对照组血清样本进行检测,正和负离子模式合并后共鉴定到 266 种代谢物,2种模式分别鉴定到164和102种代谢物。单变量统计分析,ESCC组和对照组研究对象血清代谢物存在显著差异。在有化学分类归属的代谢物中,脂质和类脂质分子占比最高(18.421%)。ESCC组中显著性差异能量代谢物共有3种,其中L-苹果酸和异柠檬酸表达水平上调、环磷腺苷(cAMP)表达水平下调。 结论 ESCC患者和健康志愿者血清能量代谢物表达存在差异,ESCC的发生与能量代谢有关。

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男性不育患者Y染色体AZF区域STS微缺失位点多重PCR法检测及其意义
冯乔,王曼伊,于鸿浩,李君,曾丹,侯任
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1262-1267.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230520
摘要 ( 188 )   [HTML]( ) PDF(444KB) ( 73 )  

目的 探讨Y染色体无精子症因子(AZF)区域的15个标签位点(STS)序列片段微缺失位点与男性不育(MI)的关系,为干预遗传性MI提供依据。 方法 选择2 586例疑似MI患者作为研究对象,按照年龄分为≤ 20岁组(14例)、21~30岁组(988例)、31~40岁组(1 318例)和≥41岁组(266例)。采用聚合酶链式反应(PCR)法对Y染色体AZF区域的15个STS序列片段进行检测并筛选异常结果,比较各组MI患者Y染色体微缺失情况。 结果 在2 586例参检人群样本中发现207例Y染色体异常,占总体样本的8.00%;其中≤20岁组、21~30岁组、31~40岁组和≥41岁组检出Y染色体异常率分别为7.14%(1/14)、8.10%(80/988)、8.04%(106/1 318)和7.52%(20/266);各组患者基础位点合并扩展位点的缺失率比较差异有统计学意义(χ2=10.836,P=0.013),21~30岁组患者基础位点合并扩展位点的缺失率明显高于31~40岁组(P<0.05);在总体受检样本中,发生基础位点片段缺失者52例,异常率为2.01%,各组患者异常率比较差异有统计学意义(χ2=9.658,P=0.022);AZFc片段缺失者占所有受检人数1.39%,21~30岁组和31~40岁组患者AZFc缺失率明显高于≥41岁组(P<0.05),21~30岁组和31~40岁组患者总体缺失率比较差异有统计学意义(χ2=3.612,P=0.040);各组患者sY127、sY134合并sY105、sY121、sY1192、sY153和sY160位点缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05),各组患者sY254、sY255合并sY105、sY121、sY1192、sY153和sY160位点缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05) 结论 广西壮族自治区东北部地区主要生育年龄段男性Y染色体异常的主要原因是sY1192和sY153位点微缺失,其中以sY1192位点微缺失为主,且随着年龄增长,该位点突变检出率越高。

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细胞焦亡分型和APOD预测胃癌患者预后作用的生物信息学分析
崔海康,张旭东,李晓宁,杨希,杨兰,张文杰
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1268-1279.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230521
摘要 ( 1788 )   [HTML]( ) PDF(2527KB) ( 110 )  

目的 寻找胃癌(GC)患者的预后标志物,实现GC的早诊早治,为提高GC患者的生存率提供依据。 方法 从癌症基因图谱(TCGA)数据库和GSE84437数据集下载407和433例GC患者的临床数据和转录组数据并合并,根据细胞焦亡相关基因的表达水平和ConsensusClusterPlus数据包对GC组织样本进行聚类分型,分为A分型(342例)和B分型(465例),将GC患者按照载脂蛋白D(APOD)水平分为低表达组和高表达组。采用survminer数据包比较不同分型患者预后的差异,采用ssGSEA算法比较不同分型患者免疫浸润的差异,采用Lasso回归和Cox回归构建GC患者预后风险模型,对模型基因进行临床性状过滤,采用公共数据库分析APOD在癌旁正常组织和GC组织中表达水平的差异,采用基因富集分析(GSEA)分析APOD的京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集情况,采用CIBERSORT 算法评估免疫细胞含量并分析其与APOD表达的相关性,采用在线网站分析APOD的药物敏感性。 结果 2种细胞焦亡分型患者预后比较差异有统计学意义(P=0.002);A分型患者中22种免疫细胞含量均高于B分型(P<0.01);不同年龄(P<0.01)、N分期(P=0.04)患者2种细胞焦亡分型百分率差异有统计学意义。公共数据库分析,在GC患者肿瘤组织中APOD表达水平低于癌旁正常组织;生存分析,高表达组GC患者预后较低表达组差;临床相关性分析,不同T分期患者APOD表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05);GSEA分析,高表达组在细胞黏附通路、白细胞内皮迁移通路和缝隙连接通路富集;免疫浸润分析,高表达组中滤泡辅助T淋巴细胞、CD4+记忆激活T淋巴细胞、静息自然杀伤(NK)细胞和中性粒细胞含量少于低表达组;APOD与CXC趋化因子配体12(CXCL12)(r=0.500,P<0.01)、转化生长因子B1(TGFB1)(r=0.313,P<0.01)、CC趋化因子配体 19(CCL19)(r=0.518,P<0.01)和CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)(r=0.444,P<0.01)呈正相关关系;药物敏感性分析,APOD与AZD-7762、KW-2449和TG-101348呈正相关关系(0<r<0.3,P<0.05)。 结论 依据焦亡分型可以较好地评估GC患者的预后;APOD可以成为GC新的预后标志物和治疗靶点。

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多形性胶质母细胞瘤相关基因和候选通路的生物信息学分析
赵一明,许海洋
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1280-1289.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230522
摘要 ( 1718 )   [HTML]( ) PDF(1079KB) ( 80 )  

目的 采用生物信息学方法分析与多形性胶质母细胞瘤(GBM)发生发展相关的关键基因和候选通路,探讨GBM的发病机制和治疗靶点。 方法 自癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因表达综合(GEO)数据库获得基因表达数据集TCGA-GBM及GSE7696,分别采用Deseq2和limma R数据包筛选GBM组织与癌旁正常组织中的差异表达基因(DEGs),并对DEGs进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用STRING数据库进行蛋白-蛋白互作(PPI)网络分析,采用Cytoscape 3.9.1软件对PPI网络进行可视化并进行模块分析。 结果 对TCGA-GBM转录数据和芯片数据集GSE7696进行DEGs分析后共获取13个共同上调差异表达基因(UDEGs)和77个共同下调差异表达基因(DDEGs)。GO功能富集分析,DDEGs主要富集于氯离子通道活性、γ-氨基丁酸(GABA)受体活性、GABA门控氯离子通道活性、GABA-A受体活性、顺行突触传递信号和化学突触传递等生物学过程;KEGG信号通路主要富集于GABA能突触、神经活性配体-受体相互作用、含血清素的神经突触和突触囊泡循环等信号通路。PPI和模块构建确定了2个重要的基因模块。Cytoscape 3.9.1软件分析,PPI网络中溶质载体家族17成员6(SLC17A6)、溶质载体家族1成员2(SLC1A2)、前速激肽前体1(TAC1)、突触结合蛋白1(SYT1)、RNA结合蛋白fox1同源物3(RBFOX3)和γ-氨基丁酸A型受体亚基γ2(GABRG2)被筛选为关键基因。 结论 SLC17A6、SLC1A2、TAC1、SYT1、RBFOX3和 GABRG2基因可能参与了GBM的发生发展,GABA能突触传递相关基因与通路调控网络的失调可能是GBM发病的主要机制。

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2型糖尿病患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其剪接异构体的表达水平和临床意义
王嘉欣,王珍琦,张萱
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1290-1295.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230523
摘要 ( 1840 )   [HTML]( ) PDF(418KB) ( 54 )  

目的 探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血淋巴细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶5调节亚基相关蛋白1类似物1(CDKAL1)基因及其剪接异构体的表达水平,并探讨其临床意义。 方法 收集65例糖尿病患者,其中T2DM患者20例(T2DM组)、糖尿病肾病(DN)患者23例(DN组)和糖尿病视网膜病变(DR)患者22例(DR组),并选择同期健康体检者28名(健康对照组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组研究对象外周血淋巴细胞中CDKAL1基因及其2种剪接异构体CDKAL1-X1和CDKAL1-X2表达水平,分析其表达与T2DM及其糖尿病微血管并发症的关系。 结果 与健康对照组比较,T2DM组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平升高(Z=4.705,P<0.01),CDKAL1-X1表达水平升高(Z=2.698,P=0.007)。与健康对照组比较,DR组和DN组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高(P<0.05); DR组患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因表达水平高于DN组(P<0.05)。 结论 T2DM患者外周血淋巴细胞中CDKAL1基因和CDKAL1-X1表达水平升高可能参与糖尿病及其并发症的发生发展。

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基于淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤药物有效化学成分及其作用靶点的网络药理学与分子对接技术分析
王春玲,吴思诺,于晓艳,张伟东
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1296-1303.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230524
摘要 ( 1873 )   [HTML]( ) PDF(1644KB) ( 94 )  

目的 采用网络药理学方法联合分子对接技术分析淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤药物有效化学成分及其作用靶点,并初步阐明其作用机制。 方法 采用中药系统药理学(TCMSP)数据库和分析平台结合相关文献资料获取淫羊藿的有效化学成分及其对应的靶点蛋白,采用Uniprot数据库将靶点蛋白信息标准化得到对应的标准基因名,检索GeneCards 数据库和DisGeNET数据库收集下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤的相关靶点基因,采用Cytoscape 3.7.1软件绘制淫羊藿有效化学成分和疾病作用靶点关系的网络图,采用STRING数据库绘制药物与疾病的交集靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,采用基迪奥生物信息平台(OmicShare)进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用Pymol软件和Autodock Tools软件进行淫羊藿药材有效化学成分与下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤靶点蛋白的分子模拟对接和可视化。 结果 筛选得到27个淫羊藿有效化学成分和217个相对应作用靶点,下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤靶点基因465个,其中62个靶点基因与淫羊藿治疗下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤有密切关联。得到淫羊藿关键有效成分为槲皮素、木樨草素、山柰酚和淫羊藿苷等,关键靶点蛋白为含半胱氨酸的半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、白细胞介素6(IL-6)、低聚糖(FOS)、肿瘤坏死因子(TNF)、低氧诱导因子1α(HIF1A)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素1B(IL-1β)、雌激素受体1(ESR1)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)等。KEGG信号通路富集分析,其共同靶点主要富集于免疫炎症、激素调节和能量代谢等相关通路上。分子对接,淫羊藿中的潜在有效成分与IL-6、PTGS2、醛糖还原酶(AR)和促分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)等靶点蛋白有较好的亲和作用。 结论 淫羊藿可通过多靶点和多通路在抗炎免疫、激素调节及能量代谢等方面对下丘脑-垂体-肾上腺/性腺/甲状腺轴功能损伤发挥潜在的治疗作用。

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老年慢性病患者认知衰弱的危险因素分析及风险模型构建
沈童,王洋,金巍,林志辉,闫力
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1304-1309.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230525
摘要 ( 162 )   [HTML]( ) PDF(463KB) ( 102 )  

目的 探讨老年慢性病患者认知衰弱的危险因素,并构建相应的风险模型。 方法 收集207例老年慢性病患者的一般临床资料,采用FRAIL量表和蒙特利尔认知评估问卷(MoCA)明确患者有无认知衰弱,并分为认知衰弱组(n=75)和非认知衰弱组(n=132)。采用单因素分析和二元Logistic回归分析明确影响老年患者认知衰弱的危险因素。 结果 所纳入的207例老年患者中,共计75例(36.23%)存在认知衰弱,2组患者年龄、体质量指数(BMI)、体育锻炼情况、工作性质、社交活动情况、夜间睡眠情况、日间精神状态及患慢性病数比较差异均有统计学意义(P<0.05)。将年龄因素进行倾向性匹配后,二元Logistic回归分析,低BMI、工作性质为体力劳动、夜间睡眠时间≤5 h、日间精神状态差和患慢性病数>2个是影响认知衰弱的危险因素。受试者工作特征曲线(ROC),本研究所构建的风险模型鉴别患者是否发生认知障碍的曲线下面积(AUC)为0.87。 结论 本研究基于危险因素构建的风险模型对老年慢性病患者认知障碍有较好的预测效能,具有潜在的临床应用前景。

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不同垂直骨面型骨性Ⅰ类错成人患者颧牙槽嵴区骨质特征分析及其临床意义
张惠超,刘佳,曹宇,叶素荣,余岭,许竞予,叶子桐,杨陆一
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1310-1317.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230526
摘要 ( 148 )   [HTML]( ) PDF(809KB) ( 33 )  

目的 采用锥形束计算机断层扫描(CBCT)评估不同垂直骨面型骨性Ⅰ类错成人患者颧牙槽嵴区骨质厚度差异,为正畸科医生临床治疗方案的选择提供依据。 方法 选取骨性Ⅰ类成人患者共90例,分为低角组、均角组和高角组,每组30例。采用CBCT测量不同垂直截面及近远中层面各组患者颊侧牙槽骨厚度,且在颊侧牙槽骨厚度≥3 mm处以50°、60°和70°植入并测量有效骨量。 结果 在不同垂直截面上,除上颌第一磨牙近中颊根(U6mb)层面,其余层面患者颊侧牙槽骨厚度由牙槽嵴顶向根方逐渐增大(P<0.05)。在不同近远中层面上,除U6mb层面,其余层面患者颊侧牙槽骨厚度由近中向远中方向逐渐增大(P<0.05)。颊侧牙槽骨最大厚度位于上颌第二磨牙近中颊根(U7mb)距牙槽嵴顶11 mm处;最小厚度位于U6mb距牙槽嵴顶7 mm处。不同垂直骨面型患者颊侧牙槽骨厚度比较差异有统计学意义(P<0.05),低角组患者颊侧牙槽骨厚度大于均角组和高角组(P<0.05), 均角组患者颊侧牙槽骨厚度大于高角组(P<0.05)。在低角组患者中,上颌第一磨牙远中颊根与上颌第二磨牙近中颊根间(U6db-U7mb)距牙槽嵴顶7 mm、U7mb距牙槽嵴顶7 mm和9 mm、U6mb-U6db距牙槽嵴顶11 mm层面以3种角度植入的骨质厚度比较差异有统计学意义(P<0.05),于U6db-U7mb距牙槽嵴顶7 mm和U7mb距牙槽嵴顶7 mm以3种角度植入、在U7mb距牙槽嵴顶9 mm处以70°植入时骨质厚度≥6 mm。在均角组患者中,U6db-U7mb 距牙槽嵴顶9 mm、U7mb 距牙槽嵴顶9 mm和11 mm层面以3种角度植入的骨质厚度比较差异有统计学意义(P<0.05),在U7mb 距牙槽嵴顶7 mm以3种角度植入、在U7mb 距牙槽嵴顶9 mm以70°植入时骨质厚度≥6 mm。在高角组患者中,U6db-U7mb 距牙槽嵴顶11 mm和U7mb 距牙槽嵴顶11 mm层面以3种角度植入的骨质厚度比较差异有统计学意义(P<0.05)。各层面以3种角度植入的骨质厚度排序为70°>50°>60°。 结论 不同垂直骨面型骨性Ⅰ类错成人患者颧牙槽嵴区颊侧牙槽骨厚度有差异,低角组患者可选择的植入位点更多,高角组患者易出现上颌窦穿孔的情况,临床上在此处植入种植钉和设计正畸方案时应将垂直骨面型纳入考虑范围。

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颈椎后路单开门椎管扩大成形术对患者术后颈椎矢状面平衡的影响
王理想,李春根,尹辛成,齐英娜,赵思浩,李伟,唐浩杰
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1318-1324.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230527
摘要 ( 1775 )   [HTML]( ) PDF(593KB) ( 45 )  

目的 观察颈椎后路单开门椎管扩大成形术后患者颈椎矢状面平衡的变化,为患者术后康复训练提供影像学依据。 方法 选择接受颈椎后路单开门椎管扩大成形术患者32例,根据术前矢状位轴向距离(SVA)值的中位数(15.75 mm)将患者分为低SVA组和高SVA组,每组16例。对2组患者术前及末次随访的影像学及临床资料进行回顾性分析,检测术前及术后末次随访时患者颈椎X线侧位片SVA值、颈椎前凸角(Cobb角)和T1倾斜角(T1s),分析2组患者术后日本骨科协会(JOA)评分、颈椎残障功能指数(NDI)评分和满意度评分。 结果 与术前比较,术后高SVA组患者NDI评分降低(P<0.01), JOA评分升高(P<0.01)。与术前比较,术后低SVA组患者NDI评分降低(P<0.01),JOA评分升高(P<0.01),SVA值升高(P<0.01),Cobb角和T1s差异无统计学意义(P>0.05)。低SVA组和高SVA组患者轴性症状发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 在术后至少2年的随访中,颈椎后路单开门椎管扩大椎板成形术对患者颈椎矢状面平衡有一定影响,主要表现为颈椎有前倾趋势和重心前移,但整体稳定性尚可,术前高SVA患者术后轴性症状发生率更高。

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临床医学
改良针内针穿刺技术在老年患者单侧全髋关节置换术中的应用
官永银,林华阳,饶福东,林洁,修忠标,刘洪,张良志,杨婷婷,屈云宵,方寒冰,孙鹤
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1325-1331.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230528
摘要 ( 1752 )   [HTML]( ) PDF(714KB) ( 44 )  

目的 探讨改良针内针穿刺技术在老年患者单侧全髋关节置换术中的应用,阐明其在超声定位引导下单次等比重脊椎麻醉中的麻醉效果和可行性。 方法 选择行单侧全髋关节置换术且实施单次等比重脊椎麻醉的60例老年患者为研究对象,患者均采用患侧在上的侧卧手术体位进行穿刺。60例患者随机分为传统组和改良组,每组各30例。所有患者经超声定位棘突间隙后,行正中入路的单次蛛网膜下腔穿刺,以穿刺针见脑脊液流出或抽出判定为穿刺成功。传统组患者采用传统的针内针技术(破皮后16 G硬膜外穿刺针穿刺引导、套用25 G笔尖式侧孔脊麻穿刺针);改良组患者采用改良的针内针技术(20 G注射针直接破皮引导、套用25 G笔尖式侧孔脊麻穿刺针)。观察2组患者1次穿刺成功率、2次穿刺成功率、1次皮肤穿刺成功率、2次皮肤穿刺成功率、穿刺时间、患者满意率、麻醉起效时间、满足所需麻醉平面率、麻醉平面固定时间、术者对肌松满意度、手术时间、PACU停留 时间和麻醉操作即刻不良反应及术后48 h内不良反应。 结果 所有患者穿刺成功。与传统组比较,改良组患者1次穿刺成功率、2次穿刺成功率、1次皮肤穿刺成功率和2次皮肤穿刺成功率高(P<0.01),穿刺时间短(P<0.01),患者满意率高(P<0.01),麻醉起效时间缩短(P<0.01),麻醉平面固定时间延迟(P<0.01),术者对肌松满意率高(P<0.01),麻醉10 min和术后10 min患者平均动脉压(MAP)及心率(HR)升高(P<0.05)。与传统组比较,改良组患者麻醉穿刺操作过程即刻不良反应和术后48 h内不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 行单侧全髋关节置换术的老年患者,穿刺前先超声定位,采用改良针内针穿刺技术行非可视条件下单次等比重脊椎麻醉,可明显减少穿刺次数和穿刺时间, 提高穿刺成功率。

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度普利尤单抗治疗成人难治性特应性皮炎2例报告及文献复习
赵雪琪,朱文静,牟妍,许蒙,董帅,夏建新
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1332-1336.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230529
摘要 ( 210 )   [HTML]( ) PDF(505KB) ( 74 )  

目的 观察度普利尤单抗治疗难治性特应性皮炎(AD)的疗效,为该类患者的治疗提供参考。 方法 收集2例难治性重度AD患者应用度普利尤单抗治疗的临床资料和随访结果,结合相关文献复习,分析度普利尤单抗治疗难治性AD的疗效及安全性。 结果 患者1,女性,30岁,双手背见密集充实丘疹,似皮肤淀粉样变改变,四肢及躯干散在红斑、丘疹伴瘙痒25年,并发过敏性鼻炎5年,诊断为成人重度AD,应用度普利尤单抗治疗16周后停药,皮损完全消退,随访至今未复发,过敏性鼻炎症状明显缓解,无须应用口服药。患者2,女性,59岁,全身暗红斑、丘疹和结节伴瘙痒10余年,曾多次住院治疗,既往应用环孢素、沙利度胺和激素治疗,效果不佳,诊断为成人重度AD,应用度普利尤至今,皮损基本消退。 结论 度普利尤单抗对难治性AD有良好疗效且安全,患者生活质量改善,AD并发其他2型炎症驱动的过敏性疾病症状得到控制。

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手术清创联合负压引流灌洗治疗Fournier坏疽患者40例临床分析
周鑫,孔祥力,张喜,赵景春,洪雷,张修航,薛岩,张楠,于家傲,石凯
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1337-1343.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230530
摘要 ( 139 )   [HTML]( ) PDF(736KB) ( 48 )  

目的 观察40例Fournier坏疽(FG)患者临床表现和治疗效果,探讨改良后负压引流灌洗技术在FG治疗中的应用前景。 方法 采用病历回顾性分析法分析本科室收集的40例FG患者的临床资料,并进行手术清创联合负压灌洗技术治疗。记录术前患者病因、并发症、临床表现、病理检查结果、实验室检查结果、创面细菌培养和术后住院时长,观察患者创面愈合情况和预后远期随访情况。 结果 40例患者中,男性35例,女性5例,年龄22~81岁,伴有肛周感染28例,糖尿病11例,外伤5例,截瘫致压疮1例,无明显诱因6例。病理检查,慢性化脓性炎症伴脓肿形成;采用手术清创,根据创面结果,覆盖负压同时改良引流灌洗方式进行创面治疗。患者全部治愈出院,无复发,平均住院时间24.65 d,25例肛周脓肿患者术后未出现明显狭窄;8例累及阴囊患者恢复良好,外形及功能正常;7例植皮患者皮片生长良好;2例皮瓣修复患者皮瓣血供良好,未出现红肿破溃;8例累及下肢患者患部运动及感觉功能恢复良好,未出现明显残疾及瘢痕增生。 结论 采用手术清创联合负压引流灌洗技术治疗FG有利于观察创面的变化,减少换药次数,缩短住院时间,提高治愈率,值得临床推广使用。

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经尿道等离子前列腺剜除术和经尿道等离子前列腺切除术治疗良性前列腺增生的临床疗效比较
任家祥,金光俊,王永刚
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1344-1350.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230531
摘要 ( 1830 )   [HTML]( ) PDF(441KB) ( 28 )  

目的 比较经尿道等离子前列腺剜除术(PKEP)和经尿道等离子前列腺切除术(PKRP)2种术式治疗良性前列腺增生(BPH)的临床疗效,为BPH的治疗方式选择提供依据。 方法 收集60例因下尿路症状(LUTS)就诊且门诊初诊为BPH的患者的临床资料,在患者知情同意的情况下将患者随机分为PKEP组(采用PKEP进行治疗)和PKRP组(采用PKRP进行治疗),每组各30例。观察2组患者术前年龄、体质量、体质量指数(BMI)、总前列腺特异抗原(tPSA)水平、红细胞比容(HCT)、血红蛋白(Hb)水平、术前和术后钠离子水平、前列腺体积、中叶突入程度、并发症(高血压、糖尿病和呼吸系统疾病)发生率和口服5α还原酶抑制剂百分率,手术时间、术中出血量、切除组织体积、切除速率、切除效率,术后总住院时间、留置尿管时间、膀胱冲洗时间、术前和术后生活质量(QOL)评分及国际前列腺症状评分(IPSS),并比较2组患者术后不良反应发生情况。 结果 2组患者术前年龄、体质量、BMI、tPSA水平、术前HCT、术前Hb水平、术前钠离子水平、前列腺体积和中叶突入程度比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者并发症(高血压、糖尿病和呼吸系统疾病)发生率和口服5α还原酶抑制剂百分率比较差异无统计学意义(P>0.05);PKRP组患者术中出血量、切除组织体积、切除速率和切除效率高于PKRP组(P<0.05);2组患者总住院时间、术后留置尿管时间和术后膀胱冲洗时间比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术前和术后钠离子水平、QOL评分和IPSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术前和术后各自组内QOL评分及IPSS评分比较差异有统计学意义(P<0.05);PKEP组患者出现尿失禁1例,PKRP组患者出现尿失禁2例,未出现其他手术相关并发症。 结论 2种术式疗效和安全性相似,均可获得满意的手术效果; PKEP术中患者出血量较少,腺体切除量、切除效率和切除速率较高,是治疗BPH的较好方法。

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3D打印钛合金胸骨治疗传统钛板胸骨重建术失败患者1例报告及文献复习
刘帅,商圣涛,尹腾程,薛锦儒,刘曦宇,侯奕楠,王岩
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1351-1357.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230532
摘要 ( 194 )   [HTML]( ) PDF(991KB) ( 82 )  

目的 观察3D打印钛合金胸骨对于传统钛板胸骨重建术失败患者术后胸骨重建的治疗效果,为该类疾病的治疗提供依据。 方法 收集1例胸骨恶性肿瘤患者的临床资料,观察患者的手术过程,随访患者身体功能恢复情况,并结合相关文献进行总结和复习。 结果 患者,男性,59岁,因无明显诱因出现胸骨疼痛行胸部计算机断层扫描(CT)检查,提示胸骨占位性病变,以“胸骨肿物”收入院,2017年行胸骨部分切除术并置入传统钛板,术后1年患者肢体活动严重受限并出现钛板折断和变形,于2019年行3D打印钛合金胸骨植入修复胸骨缺损及胸廓重建术,术后患者肢体活动逐渐恢复,活动幅度由小到大,由被动活动过渡到主动活动,逐渐恢复肩关节的正常活动范围,肢体活动情况较术前改善较大,2020年因患者皮下脂肪较薄且纤维结缔组织已形成稳定连接,按计划行手术治疗将3D打印钛合金胸肋骨锁骨板取出,术后患者康复顺利,随访至今,双上肢活动正常,生活质量大幅度提升,预后良好。 结论 3D打印钛合金胸骨能实现精准个性化治疗,效果优于传统钛板胸骨,可保证患者人体解剖复位并减少并发症发生。

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方法学
Fah-/-Rag2-/-IL2Rg-/-小鼠肝脏原位异种重建模型的建立及其评价
张蒙,周琪,胡正
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1358-1365.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230533
摘要 ( 1897 )   [HTML]( ) PDF(1297KB) ( 109 )  

目的 构建猪-小鼠肝细胞嵌合模型,探讨猪肝细胞在无T淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)介导排斥条件下的移植及再生的相关条件,评估猪肝细胞在异种受体中的定居、增殖和功能因子分泌情况,为提高猪源化小鼠模型中猪肝细胞的重建效率提供依据。 方法 采用脾脏内注射法将猪肝细胞移植至Fah-/-Rag2-/-IL2Rg-/-(FRG)小鼠体内,构建移植模型。将16只FRG小鼠随机分为对照组、空白对照组、实验组和绿色荧光蛋白(GFP)基因实验组,每组4只。空白对照组小鼠停止给予2-(2-硝基-4-三氟甲基苯甲酰基)-1,4-环己二酮(NTBC),监测体质量;对照组4只小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;实验组小鼠注射猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d;GFP基因实验组小鼠注射携带GFP基因猪肝细胞,移植前1周停止给予NTBC,移植后监测体质量,当体质量下降20%时,给予NTBC 3 d。观察各组小鼠体质量、生存情况。检测各组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,流式细胞术检测各组小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞表达情况,ELISA法检测各组小鼠血清中猪白蛋白表达水平,免疫组织化学法检测各组小鼠猪肝细胞再生效率。 结果 与剪碎后再以胶原酶消化的方式比较,两步灌注法消化过程更温和、对细胞损伤更小,细胞活性可以达到92%。停止给予NTBC后,对照组小鼠体质量进行性降低,生命活力逐渐降低。连续停药第28天小鼠开始出现死亡现象。小鼠肝组织中出现肝细胞肿大、细胞浆疏松透亮和细胞核溶解等不可逆细胞损伤。空白对照组小鼠停药后血清中ALT水平逐渐升高。对照组停药小鼠重新给予NTBC后,体质量逐渐恢复至正常水平。流式细胞术,停止给予NTBC后,小鼠外周血中CD19+、CD3+和NK1.1+细胞完全缺失。免疫组织化学染色,实验组小鼠肝组织中未见深色Fah+阳性细胞,移植小鼠肝组织中可见深色Fah+阳性细胞,猪肝细胞再生效率为(11±4)%。GFP基因实验组小鼠可见同一视野经三色激光分别激发,猪肝细胞再生效率为(10±2)%。 结论 成功构建了猪源化FRG小鼠肝脏嵌合模型,建立了长效稳定扩增猪肝细胞的小鼠模型。

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基于杂合肽H5LL活性的生物信息学分析和重组乳酸菌表达载体的构建
赵潇颖,宿建胜,马嘉辉,王岳峰,王丹,孙丽媛
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1366-1374.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230534
摘要 ( 149 )   [HTML]( ) PDF(1060KB) ( 239 )  

目的 以人源性抗菌肽(AMPs)富组蛋白5(Hst5)和LL-37为亲本,设计新型杂合肽H5LL,并通过基因工程技术构建重组乳酸菌表达载体,实现AMPs的高效和安全表达。 方法 采用生物信息学方法对H5LL进行理化参数、亲/疏水性、剪切位点、磷酸化位点、信号肽、跨膜区域、亚细胞定位和二级结构预测;将目的序列和空载质粒pMG36e经HindⅢ及KpnⅠ双酶切后,构建乳酸菌重组表达载体pMG36e-H5LL,克隆转化获得含目的基因的重组质粒。 结果 H5LL成为AMPs的可能性较高,含36个氨基酸,相对分子质量为4 625 380,总电荷数为+10,具有亲水性;有3个磷酸化位点,无糖基化位点;属于膜内蛋白,无跨膜区域,无信号肽;亚细胞定位预测,线粒体靶向肽的可能性为0.333。二级结构中α-螺旋结构和β-转角占比分别52.78%及22.22%,三级结构中α-螺旋数量较多。含目的基因的重组质粒PCR电泳,于138 bp处有单一特异性条带;双酶切电泳,重组质粒在136和3 500 bp处有清晰条带。 结论 设计并合成的新型杂合肽H5LL具有较高稳定性、抑菌活性和低毒性;成功构建重组乳酸菌表达载体pMG36e-H5LL。

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综述
抗菌声动力疗法的作用机制及其抗菌效果影响因素的研究进展
李芳,李红艳,潘启源,郭晶莹,刘敏
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1375-1381.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230535
摘要 ( 373 )   [HTML]( ) PDF(450KB) ( 518 )  

抗菌声动力疗法(aSDT)作为一种基于超声的非侵入性抗菌方式,近些年来受到学者们的广泛关注。aSDT通过将超声能量集中在组织深处的细菌感染部位,局部激活声敏剂产生高细胞毒性的活性氧(ROS),诱导细菌死亡。与传统的抗生素治疗细菌感染性疾病比较,aSDT不产生细菌耐药性,同时还具备优越的组织穿透性、良好的生物相容性和超声部位特异性等优点,因此具有更广阔的应用前景。aSDT的抗菌效果受多种因素影响,包括超声参数、氧气、声敏剂和细菌的类型及结构等,调控上述因素可以增强aSDT的作用效果。现对aSDT的作用机制(声化学效应和声力学效应)及其抗菌效果的影响因素进行综述,并总结该疗法对不同类型耐药菌种的抗菌作用,为深入理解aSDT的作用机制提供依据。

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宏基因二代测序技术在肺部感染病原学检测中应用的研究进展
李俏,苏振中,许璐璐,张捷
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1382-1387.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230536
摘要 ( 1820 )   [HTML]( ) PDF(428KB) ( 148 )  

肺部感染作为常见的感染性疾病,全球发病率高、死亡率高,致病菌类型多种多样,目前常用的病原体检测主要有形态学鉴定、细菌培养和抗原抗体检测,部分罕见的病原体不易被检测出,给临床诊断带来困难。宏基因二代测序(mNGS)技术作为一项新的检测技术,处于高速发展阶段,并已逐步应用于临床,具有高通量、高灵敏度和检测周期短等特点。mNGS对提高肺部感染性疾病的病原学诊断效率和检测效能具有巨大的潜力,特别是常规检测方法存在局限性的领域,如罕见疾病、新发传染病及检测条件苛刻的微生物等。现针对mNGS技术在肺部感染病原体诊断的优势和局限性等方面进行综述,探讨其临床应用价值,为通过mNGS技术实现肺部感染性疾病的精准诊断和治疗提供依据。

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瑞芬太尼在无肌松全身麻醉诱导和维持中作用的研究进展
刘小颖,石玉博,宋建利,崔飞宇,苏振波
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1388-1393.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230537
摘要 ( 273 )   [HTML]( ) PDF(444KB) ( 136 )  

临床麻醉工作中,术中神经监测技术的应用和神经肌肉疾病患者的麻醉使得肌肉松弛(肌松)药的使用受限,而无肌松麻醉成为临床麻醉方式的新挑战。瑞芬太尼是具有超短效药代动力学和药效学的阿片类镇痛药物,其呼吸抑制的不良反应可为无肌松麻醉气管插管和麻醉维持提供有利条件。与其他阿片类药物比较,瑞芬太尼具有起效迅速、快速清除和持续静脉输注无明显蓄积的特点,并可基本满足无肌松全身麻醉诱导的气管插管条件。瑞芬太尼和丙泊酚的药代动力学模式互补,能协同消除麻醉对机体的伤害性刺激,维持稳定的通气状态和血流动力学,满足手术条件,在停药后患者苏醒迅速,可避免肌松药残余作用导致呼吸恢复延迟和术后肺部并发症的发生,是实现无肌松麻醉的优选组合。现综合分析瑞芬太尼复合丙泊酚在不同手术需求和不同年龄患者中的应用效果,为无肌松全身麻醉诱导及维持提供依据。

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遗传性出血性毛细血管扩张症所致消化道出血的研究进展
李欣彤,汤赢,唐彤宇,陈更
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1394-1399.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230538
摘要 ( 189 )   [HTML]( ) PDF(421KB) ( 104 )  

遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)所致消化道出血临床少见,在中老年人群中不明原因消化道出血更易被忽视,从而延误治疗。HHT发病机制主要与ENG、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACVRL4)、激活素受体样激酶1(ALK1)和母亲DPP 同源物4(Smad4)基因突变有关,消化道出血作为HHT的少见并发症,考虑与多种危险因素有关,消化道出血可发生于胃肠道任何部位,以中老年患者多见,常伴有家族遗传史和鼻出血病史。临床诊断主要依靠内镜检查,并需与其他毛细血管疾病相鉴别。目前国内外尚无统一的治疗标准,但随着内镜诊疗技术的发展,内镜联合药物治疗可取得满意的疗效。现就HHT所致消化道出血的临床研究进展进行综述,旨在提高临床医生对HHT所致消化道出血的认识,提高疾病诊断率,为治疗不明原因消化道出血提供依据。

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Currarino综合征诊治和预后的研究进展
魏佳琦,孙嘉良,具杨花
吉林大学学报(医学版). 2023 (5):  1400-1406.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20230539
摘要 ( 290 )   [HTML]( ) PDF(427KB) ( 121 )  

Currarino 综合征(CS)是一种罕见的常染色体显性遗传病,主要致病基因是MNX1,以骶骨发育不全、骶前肿物和肛门直肠畸形三联征为特征性表现,多变的临床表现是该病临床诊断的一大难点。充分了解CS患者的临床特点和并发症,有利于其及时诊断和有效治疗,从而改善患者的预后。现基于近年来关于CS遗传背景的探索,针对该疾病的流行病学、临床和影像学表现、手术治疗方式及预后进展进行综述,以加深临床医生对CS的认识,为该病的诊治提供新思路。

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