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期刊信息

吉林大学学报(医学版)
双月刊
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:李欣欣
编 辑:姜瑾秋 韩宏志 官 鑫
陈思含 李昕蔚
电 话:0431-85619279
E-mail:xuebao@jlu.edu.cn
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2024年, 第50卷, 第2期 刊出日期:2024-03-28
上一期   
基础研究
川陈皮素对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道黏液高分泌的抑制作用及其分子机制
陈家亮,李琪,周向东,陈小妹,刘峰,刘畅,钟有清,李亮
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  295-302.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240201
摘要 ( 398 )   [HTML]( ) PDF(1027KB) ( 209 )  

目的 探讨川陈皮素(NOB)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道黏液高分泌的影响,阐明其对内质网应激(ERS)信号通路调控的分子机制。 方法 按随机数字表法将45只SD大鼠随机分为对照组、模型组、NOB组、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)组和NOB+4-PBA组,每组 9只。除对照组外,其他各组大鼠均采用烟熏联合气道内注入脂多糖(LPS)建立COPD大鼠模型,建模成功后给予相应药物(50 mg·kg-1·d-1 Nob或0.35 g·kg-1·d-1 4-PBA)干预,每天1次,连续干预4周。完成药物干预后,采用小动物呼吸机和血气分析仪检测各组大鼠肺功能指标[肺动态顺应性(Cdyn)和气道阻力(RL)]和动脉血气指标[血二氧化碳分压(PaCO2)和动脉血氧分压(PaO2)];苏木精-伊红(HE)染色法观察各组大鼠肺组织杯状细胞增生情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中气道杯状细胞内黏蛋白5AC(MUC5AC)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织中MUC5AC mRNA表达水平;Western blotting法检测各组大鼠肺组织MUC5AC和ERS相关蛋白肌醇依赖酶1α(IRE1α)、转录激活因子6(ATF6)、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平。 结果 与对照组比较,模型组大鼠肺气道杯状细胞大量增生,Cdyn和PaO2水平明显降低(P<0.05),而RL和PaCO2水平明显升高(P<0.05),BALF中MUC5AC、IL-1β、TNF-α和IL-6水平及肺组织中MUC5AC、IRE1α、ATF6、CHOP以及GRP78蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,NOB组、4-PBA组和NOB+4-PBA组大鼠肺功能、动脉血气指标以及肺气道杯状细胞增殖情况均有明显缓解,且BALF中IL-1β、TNF-α和IL-6水平及肺组织中MUC5AC、IRE1α、ATF6、CHOP以及GRP78蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),而NOB+4-PBA组大鼠的缓解效果最佳。 结论 NOB能有效缓解COPD大鼠肺气道黏液高分泌情况,其作用机制可能与抑制ERS介导的MUC5AC高表达有关。

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抗单纯疱疹病毒1型的IgY制备及其生物学活性检测
苏海涛,翟玥,宋秀玲,徐坤
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  303-309.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240202
摘要 ( 116 )   [HTML]( ) PDF(743KB) ( 127 )  

目的 制备抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的卵黄抗体(IgY),探讨该抗体的生物学活性,阐明其抗HSV-1的能力。 方法 制备HSV-1灭活疫苗,采用鸡胸多点注射法免疫高产蛋鸡,采用聚乙二醇-6000(PEG-6000)法提纯IgY,采用间接ELISA法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术和蛋白浓度定量试剂盒测定IgY效价、纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测IgY中和病毒的能力,测定病毒阻断率,以Vero细胞为病毒感染靶细胞,测定不同抗体浓度(0.015 60、0.031 25、0.062 50、0.125 00、0.500 00、和1.000 00 g·L-1)作用后细胞病变效应(CPE),根据CPE程度测定IgY体外抗HSV-1能力。 结果 制备的IgY效价随免疫时间逐渐升高,达到1/1 024 000后保持稳定;IgY轻链重链条带清晰;IgY平均蛋白水平为11.544 g·L-1;IgY对HSV-1的阻断率可高达77.90%;HSV-1致CPE程度随抗体浓度升高而逐渐降低,当IgY浓度达到0.500 00 g·L-1及以上时,25%以下细胞(甚至无细胞)发生病变。 结论 成功制备出抗HSV-1的IgY,该抗体对HSV-1具有明显的中和阻断能力和体外抑制活性,可用于药物及诊断方法的开发。

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miR-126过表达和ADAM9基因沉默对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响及其机制
魏海峰,倪志强,魏雁虹,王起来,李首庆,马寅芙,谭岩,方艳秋
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  310-319.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240203
摘要 ( 227 )   [HTML]( ) PDF(1037KB) ( 110 )  

目的 探讨微小RNA-126(miR-126)过表达和解整联蛋白金属蛋白酶9(ADAM9)基因沉默对胃癌细胞生物学行为的影响,并阐明其作用机制。 方法 体外培养人胃低分化腺癌SGC-7901细胞和人正常胃黏膜上皮NGEC细胞,提取细胞中总RNA,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2种细胞中miR-126和ADAM9 mRNA表达水平。将处于对数生长期的SGC-7901细胞分为 miR-126 过表达组(miR-126-OE组)和ADAM9基因沉默组(ADAM9 siRNA组), 以LipofectamineTM 2000为载体分别转染miR-126模拟物(miR-126 mimics)和敲低ADAM9的RNA寡核苷酸,并设置相应的阴性对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞的迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平。TargerScan网站预测miR-126的靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-126和ADAM9的靶向调控关系,采用RT-qPCR法和Western blotting法检测转染miR-126 mimics后SGC-7901细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平。 结果 RT-qPCR法检测,与人正常胃黏膜上皮NGEC细胞比较,胃癌SGC-7901细胞中miR-126表达水平明显降低(P<0.05),而ADAM9 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。MTT法检测,SGC-7901细胞过表达miR-126或沉默ADAM9基因48和72 h后,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞增殖活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。细胞划痕实验检测,与相应阴性对照组比较,48 h后miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组细胞迁移率明显降低(P<0.05)。Transwell小室实验检测,与相应阴性对照组比较,miR-126 OE组和ADAM9 siRNA组迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05或P<0.01)。Western blotting法检测,与相应阴性对照组比较,miR-126-OE组和ADAM9 siRNA组细胞中E-钙黏蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),而N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。靶基因预测,ADAM9的3'-UTR含有与miR-126-3p互补的核苷酸序列。双荧光素酶报告基因实验,ADAM9是miR-126靶向负调控的下游基因。SGC-7901细胞转染miR-126 mimics 48 h后,与mimics NC组比较,miR-126 OE组细胞中ADAM9 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。 结论 胃癌SGC-7901细胞中miR-126低表达而ADAM9基因高表达。miR-126过表达可抑制胃癌SGC-7901细胞增殖活性、迁移和侵袭能力,其机制可能与miR-126靶向负调控ADAM9并抑制胃癌细胞的上皮-间质转化(EMT)进程有关。

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苦参总黄酮对醋酸铅诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激的改善作用及对Keap1/Nrf2信号通路的影响
刘玥欣,来永巍,王艳春,徐博,路倩,安英,任旷,范红艳
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  320-325.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240204
摘要 ( 233 )   [HTML]( ) PDF(549KB) ( 82 )  

目的 观察苦参总黄酮(SF)对醋酸铅(LA)诱导的小鼠睾丸间质细胞TM3氧化应激的改善作用及其对KELCH状ECH相关蛋白1(Keap1)/细胞中核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,探讨SF改善由LA诱导的TM3细胞氧化应激的相关作用机制。 方法 利用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度(0、10、20、50和80 μmol·L-1)LA和不同浓度(0、12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L-1)SF分别干预24 h后的TM3细胞存活率;将TM3细胞随机分为空白对照组、LA组、LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组。除空白对照组外,其他各组均采用50 μmol·L-1 LA诱导TM3细胞24 h建立TM3细胞氧化应激模型,其中LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞再分别给予12.5、25.0和50.0 mg·L-1 SF。利用MTT法检测TM3细胞存活率;WST-1法和硫代巴比妥酸(TBA)法检测TM3细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平;Western blotting法检测Nrf2、Keap1和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白表达水平。 结果 MTT法检测,与0 μmol·L-1 LA组比较,10、20、50和80 μmol·L-1 LA组TM3细胞存活率明显降低(P<0.01);与0 mg·L-1 SF组比较,12.5、25.0、50.0和80.0 mg·L-1 SF组TM3细胞存活率明显降低(P<0.05或P<0.01);与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞存活率明显升高(P<0.01); WST-1法和TBA法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平明显降低(P<0.01);Western blotting法检测,与LA组比较,LA+低剂量SF组、LA+中剂量SF组和LA+高剂量SF组TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平明显升高(P<0.01),Keap1和Caspase-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。 结论 SF对LA诱导TM3细胞氧化应激具有一定改善作用,并可降低TM3细胞中Keap1蛋白表达水平,升高TM3细胞中Nrf2蛋白表达水平。

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甜叶悬钩子苷对脊髓损伤小鼠运动功能障碍和神经炎症的改善作用及其机制
杨爽,许娜,张剑旭,孙成彪,王燕,董明鑫,刘文森
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  326-335.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240205
摘要 ( 182 )   [HTML]( ) PDF(2268KB) ( 90 )  

目的 探讨甜叶悬钩子苷(RUB)对小鼠脊髓损伤(SCI)和神经炎症的影响,并阐明其作用机制。 方法 将48只雌性昆明小鼠随机分为假手术组、SCI组、SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组,每组12只;采用脊髓损伤行为学(BBB)评分法评估SCI小鼠后肢运动功能,脊髓组织含水量法检测SCI小鼠脊髓水肿情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠促炎细胞因子环氧化酶2(COX-2)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平,ELISA法检测各组小鼠血清中炎症因子水平,HE染色观察各组小鼠脊髓组织病理形态学,免疫荧光法检测各组小鼠脊髓组织中小胶质细胞活化情况,Western blotting法检测SCI小鼠脊髓组织中相关蛋白表达水平。 结果 BBB评分,与假手术组比较,SCI组小鼠评分低至0分;与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠BBB评分逐步升高。脊髓组织含水量法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织含水量明显升高(P<0.01);与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠脊髓组织含水量明显降低(P<0.01)。RT-qPCR法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织中COX-2、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平明显升高(P<0.001);与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠脊髓组织中COX-2、IL-1β和TNF-α mRNA表达水平明显降低(P<0.001)。ELISA法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠血清中IL-1β(P<0.01)和TNF-α(P<0.001)水平升高;与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠血清中IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.001);Western blotting法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织中核因子κB(NF-κB)抑制因子α(IκB-α)、磷酸化IκB-α(p-IκB-α)、磷酸化p65(p-p65)、p-65、磷酸化p38(p-p38)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)和磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.001);与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠脊髓组织中IκB-α、p-IκB-α、p-p65、p-65、p-p38、p-ERK和p-JNK蛋白表达水平明显降低(P<0.001)。HE染色观察,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织中可见组织疏松,有空泡形成,脊髓中间有一较大的坏死空洞区域;与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠脊髓中央坏死空洞区域明显减小(P<0.05)。免疫荧光法检测,与假手术组比较,SCI组小鼠脊髓组织中小胶质细胞阳性细胞数明显增加(P<0.001);与SCI组比较,SCI+低剂量RUB组和SCI+高剂量RUB组小鼠脊髓组织中小胶质细胞阳性细胞数明显减少(P<0.001)。 结论 RUB可改善SCI小鼠运动功能障碍,减轻脊髓组织神经炎症,抑制小胶质细胞活化,其机制可能与下调脊髓组织中NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达有关。

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载外泌体银纳米颗粒抗菌水凝胶的构建及其对人表皮HaCaT细胞增殖的影响
刘韬,傅家财,钟秤明,滕旭,齐玲
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  336-345.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240206
摘要 ( 89 )   [HTML]( ) PDF(1070KB) ( 106 )  

目的 构建负载间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)和银纳米颗粒(AgNPs)抗菌水凝胶,初步探讨该水凝胶的抗菌活性及促人表皮HaCaT细胞增殖的效果,阐明其在皮肤损伤治疗方面的应用潜力。 方法 利用氧化葡聚糖(ODex)和改性透明质酸(HA-ADH)制备基础水凝胶骨架,以十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)为稳定剂制备AgNPs;培养间充质干细胞(MSC)获取MSC-Exo。构建AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶和MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶。通过BCA法评估外泌体的负载率,选用动态光散射(DLS)分析、Zeta电位分析、紫外-可见分光光度计表征AgNPs形貌、表面带电情况和结构,利用红外光谱表征HA-ADH/ODex水凝胶骨架的结构组成,通过透射电子显微镜(TEM)、纳米流式检测仪和蛋白免疫印迹(Western blotting)法对MSC-Exo进行鉴定,CCK-8法检测HA-ADH/ODex水凝胶和AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶的细胞存活率及MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶对HaCaT细胞的细胞增殖率的影响,平板涂布法和比浊法评估AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶的抗菌活性。 结果 DLS分析、Zeta电位分析和紫外分光光度计检测,成功制备了粒径大小均一、表面带正电的AgNPs。红外光谱检测,HA-ADH/ODex水凝胶制备成功。TEM、纳米流式检测和Western blotting法验证MSC-Exo成功提取,BCA法证实在MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶中MSC-Exo负载率为77.8%。CCK-8法检测,稀释倍数为0、1、2、4、8、16、32和64的HA-ADH/ODex水凝胶浸提液处理的HaCaT细胞存活率接近100%。稀释8倍及以上的AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶浸提液处理的HaCaT细胞存活率均大于85%。平板涂布法检测,AgNP/HA-ADH/ODex和MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶具有明显的抗菌活性,其对金黄色葡萄球菌(S.aureus)的抗菌率分别为(96.44±0.16)%和(96.62±0.16)%,对大肠杆菌(E.coli)的抗菌率分别为(95.73±0.28)%和(95.58±0.14)%。CCK-8法检测,MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶能够促进HaCaT细胞增殖,细胞增殖率为(115.00±7.42)%。 结论 MSC-Exo@AgNP/HA-ADH/ODex水凝胶具有优异的抗菌性能,能够有效促进人表皮HaCaT细胞的增殖,可作为一种安全有效的生物敷料,用于皮肤创伤的治疗。

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TPX2基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/DDP顺铂化疗敏感性的增强作用及其机制
张鹰,蒋先训,万朝辉
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  346-354.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240207
摘要 ( 226 )   [HTML]( ) PDF(1569KB) ( 89 )  

目的 探讨爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)基因沉默对膀胱癌耐药细胞株T24/顺铂(DDP)的化疗敏感性的影响,并阐明其作用机制。 方法 采用DDP浓度梯度刺激法建立DDP耐药细胞株T24/DDP,将细胞分为T24细胞组和T24/DDP细胞组。MTT法检测各组细胞增殖活性,并根据半数抑制浓度(IC50)值计算耐药指数(RI);实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和Western blotting法检测细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平。通过小干扰RNA(siRNA)沉默T24/DDP细胞中TPX2基因表达,再将细胞分为空白对照组、阴性对照干扰(si-NC)组、TPX2沉默(si-TPX2)组、si-NC+DDP(2 mg·L-1 DDP)组和si-TPX2+DDP(2 mg·L-1 DDP)组。RT-qPCR法和Western blotting法检测转染后细胞中TPX2 mRNA及蛋白表达水平,MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组凋亡细胞率和细胞周期G2/M期百分率,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、P-糖蛋白(P-gp)、锌指蛋白转录因子1(Snail1)和Survivin蛋白表达水平。 结果 成功建立膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP,RI值为8.76。与T24细胞组比较,T24/DDP细胞组中TPX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与空白对照组和si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞中TPX2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且DDP的IC50值明显降低(P<0.01)。与si-NC组比较,si-TPX2组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与si-NC+DDP组比较,si-TPX2+DDP组T24/DDP细胞凋亡率和细胞周期G2/M期百分率明显升高(P<0.01),迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低(P<0.01),T24/DDP细胞中β-catenin、P-gp、Snail1和Survivin蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。 结论 TPX2基因沉默通过抑制Wnt/β-catenin信号通路增强膀胱癌耐药细胞株T24/DDP对DDP的化疗敏感性。

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非小细胞肺癌A549细胞基因组不稳定性和MYC基因突变在吉西他滨耐药中的作用
陈宗军,陈亚红,黄丽云,梁紫盈
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  355-363.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240208
摘要 ( 198 )   [HTML]( ) PDF(1250KB) ( 74 )  

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞基因不稳定性和MYC基因突变在吉西他滨耐药中的作用,并阐明其作用机制。 方法 采用2 mg·L-1吉西他滨持续作用A549细胞(A549组),构建耐药细胞株A549R(A549R组),并将si-NC和si-MYC转染至A549R细胞,作为si-NC A549R组和si-MYC A549R组。采用CCK-8法检测不同浓度(0、1、2、4、8、16和32 mg·L-1)吉西他滨对各组细胞的抑制率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。转录组测序技术(RNA-seq)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析A549组及A549R组细胞中的差异表达基因,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测A549组和A549R组细胞中基因组不稳定性相关基因错配修复基因2(MSH2)、错配修复基因6(MSH6)和DNA修复蛋白RAD50(RAD50)的表达水平,Western blotting法检测基因组不稳定性相关蛋白MYC原癌基因(MYC)和磷酸化组蛋白(γH2AX)的表达水平,染色质免疫共沉淀(ChIP)法检测RNA polⅡ和γH2AX在MYC基因上的富集程度,PCR法扩增并检测A549R细胞MYC基因突变情况。 结果 与A549组比较,2、4、8、16和32 mg·L-1吉西他滨作用后A549R组细胞抑制率降低(P<0.05),8 mg·L-1吉西他滨作用后细胞凋亡率降低(P<0.05)。与A549组比较,A549R组细胞中有234个mRNAs表达水平升高,205个mRNAs表达水平降低,其中错配修复相关基因(MSH2和MSH6)、RAD50和MYC表达水平明显升高(P<0.05)。KEGG信号通路富集分析,表达水平升高基因主要参与非同源末端连接、mRNA监测途径和DNA复制等信号通路。与A549组比较,A549R组细胞中MYC和γH2AX蛋白表达水平升高(P<0.05)。ChIP法检测,RNA pol Ⅱ和γH2AX在MYC转录起始位点及exon 2上富集程度增加,MYC exon 2上存在G254A基因突变。与si-NC A549R组比较,si-MYC A549R组细胞中MYC mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),2、4、8、16和32 mg·L-1吉西他滨作用后si-MYC A549R组细胞抑制率升高(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05)。 结论 对吉西他滨耐药的NSCLC细胞中A549R基因组不稳定性增加,MYC基因发生突变和扩增,而敲减MYC可以恢复A549R细胞对吉西他滨的敏感性。

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丹参酮ⅡA磺酸钠对尿毒症毒素作用下人脐静脉内皮细胞功能的影响
王立华,贾岚,陈海燕,杨波,王喆,毕学青
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  364-370.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240209
摘要 ( 182 )   [HTML]( ) PDF(2221KB) ( 84 )  

目的 探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对尿毒症毒素作用下人脐静脉内皮细胞(hUVECs)功能的影响,并阐明其作用机制。 方法 将hUVECs进行传代培养并分为空白对照组、尿毒症毒素刺激组、尿毒症毒素+STS组和尿毒症毒素+STS+细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂组,其中后2组中STS的浓度为10 mg·L-1;先给予各组剪切力刺激,剪切力大小为12 dyn·cm-2;采用CCK-8法测定各组细胞增殖活性,Western blotting法检测各组细胞中ERK、核因子κB(NF-κB)和Ⅰ型胶原蛋白表达水平,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达情况;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测各组细胞凋亡率。 结果 CCK-8法检测,在剪切力作用后,尿毒症毒素刺激组和尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞增殖活性低于尿毒症毒素+STS组(P<0.01)。Western blotting法检测,与尿毒症毒素组比较,尿毒症毒素+STS组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原蛋白表达水平升高(P<0.01);抑制ERK信号通路后,与空白对照组、尿毒症毒素组和尿毒症毒素+STS组比较,尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。RT-qPCR法检测,与尿毒症毒素组比较,尿毒症毒素+STS组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达水平升高(P<0.01);抑制ERK通路后,与空白对照组、尿毒症毒素组和尿毒症毒素+STS组比较,尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。TUNEL法检测,尿毒症毒素+STS组的细胞凋亡率小于尿毒症毒素刺激组和尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组(P<0.05)。 结论 一定浓度STS能通过ERK信号通路调节NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达来改善尿毒症毒素作用下的内皮细胞增殖,减少细胞凋亡。

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沉默FOXK1基因对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响
陈爽,李红
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  371-378.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240210
摘要 ( 198 )   [HTML]( ) PDF(1175KB) ( 202 )  

目的 探讨沉默叉头框K1(FOXK1)对胃癌HGC-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并阐明其可能的机制。 方法 基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)数据库查询在胃癌组织和正常胃组织中FOXK1 mRNA表达水平;利用化学合成的si-FOXK1体外转染胃癌HGC-27细胞,实验分为空白对照组、nc-FOXK1组和si-FOXK1组,采用Western blotting法评估各组的转染效率,MTT法检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的增殖能力,克隆形成实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的克隆形成数,细胞划痕实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的迁移率,Transwell小室实验检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞的细胞迁移数和细胞侵袭数,Western blotting法检测si-FOXK1转染后各组胃癌HGC-27细胞中核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白[NF-κB p65和磷酸化核因子κB p65 (p-NF-κB p65)]的表达水平。 结果 GEPIA数据库查询,在胃癌组织中FOXK1 mRNA表达水平高于正常胃组织(P<0.05);Western blotting法检测,在胃癌HGC-27细胞中FOXK1蛋白表达水平高于人正常胃黏膜GES-1细胞(P<0.01);与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组FOXK1蛋白表达水平明显降低(P<0.01);MTT法检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞的增殖能力降低(P<0.05);克隆形成实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞克隆形成数减少(P<0.05);细胞划痕实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌细胞的迁移率降低(P<0.05);Transwell小室实验检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较,si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞的迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);Western blotting法检测,与空白对照组和nc-FOXK1组比较, si-FOXK1组胃癌HGC-27细胞中p-NF-κB p65蛋白表达水平降低(P<0.05)。 结论 FOXK1在胃癌HGC-27细胞中高表达,沉默FOXK1可抑制胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与NF-κB通路有关。

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临床研究
基于剪接因子SRSF9在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义的生物信息学分析
刘玉婷,喻莹,黎桂珍,史沁雪,李彬彬
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  379-391.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240211
摘要 ( 175 )   [HTML]( ) PDF(2470KB) ( 181 )  

目的 基于生物信息学方法分析富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子9(SRSF9)在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达情况、临床意义以及与肿瘤免疫浸润的关系,并探讨其作用机制。 方法 利用癌症基因图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库中GSE30784和GSE13601数据集、临床蛋白质组学肿瘤分析联盟(CPTAC)数据库、基因表达交互分析(GEPIA)数据库和Kaplan-Meier plotter数据库分析SRSF9在HNSCC中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系;利用cBioPortal数据库分析SRSF9基因变异情况;应用ESTIMATE算法和肿瘤免疫估计资源(TIMER)数据库评估SRSF9表达与肿瘤微环境和肿瘤免疫细胞浸润的关系;利用LinkedOmics数据库分析SRSF9在HNSCC中的共表达基因及其调控通路;基于TCGA SpliceSeq数据库分析HNSCC中SRSF9调控的可变剪接事件,并对靶基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。 结果 TCGA数据库、GEO数据库中GSE30784和GSE13601数据集分析,HNSCC组织中SRSF9 mRNA表达水平较癌旁正常组织明显升高(P<0.01);CPTAC数据库分析,与正常组织比较,HNSCC组织中SRSF9蛋白表达水平明显升高(P<0.001)。TCGA数据库分析,SRSF9 mRNA表达与HNSCC患者病理分级(P=0.004)和HPV感染(P=0.031)有关联。GEPIA和Kaplan-Meier plotter数据库分析,HNSCC组织中SRSF9 mRNA高表达均与患者总生存期(OS)较差相关[风险比(HR)=1.40,P=0.019;HR=1.55,P=0.003]。cBioPortal数据库分析,HNSCC中SRSF9基因拷贝数变异(CNV)占26.85%,其CNV与SRSF9 mRNA表达水平呈正相关关系(r=0.44,P<0.001)。ESTIMATE算法分析,SRSF9 mRNA高表达组基质评分和免疫评分均较SRSF9 mRNA低表达组低(P<0.001),肿瘤纯度则高于SRSF9 mRNA低表达组(P<0.001)。TIMER数据库分析,SRSF9 mRNA表达水平与CD4+T淋巴细胞浸润呈正相关关系(r=0.186,P<0.001),而与B淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞和树突状细胞浸润呈负相关关系(r=-0.269,P<0.001;r=-0.353,P<0.001;r=-0.304,P<0.001)。SRSF9共表达基因富集分析,核糖体、剪接体和代谢通路等相关基因上调,而黏着斑、细胞因子和细胞黏附分子等相关基因下调。SRSF9相关可变剪接靶基因主要涉及脂类代谢、胰高血糖素和紧密连接等通路。 结论 SRSF9在HNSCC中呈高表达,且与患者预后不良和肿瘤微环境免疫细胞浸润相关,可成为HNSCC诊断、预后评估和治疗的潜在分子靶标。

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基于TCGA数据库筛选与三阴型乳腺癌预后相关的miRNAs及其基因网络
宋玥莹,高超,陈文俊,邵艾彧,乔乙春,李卓林
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  392-399.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240212
摘要 ( 184 )   [HTML]( ) PDF(2406KB) ( 82 )  

目的 筛选与三阴型乳腺癌(TNBC)预后相关的关键微小RNA(miRNAs)及其靶基因,探讨其参与调控的生物学功能和信号通路,为TNBC患者预后标志物的筛选提供理论依据。 方法 基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛选TNBC患者与非TNBC患者差异表达miRNAs,通过生存分析明确与患者预后相关的miRNAs。利用miRDB和miRWalk3.0在线数据库筛选miRNAs的靶基因,Cytoscape 3.8.2软件明确miRNA-信使核糖核酸(mRNA)调控网络,利用R软件limma数据包筛选TNBC患者与非TNBC患者差异表达miRNAs,利用R软件clusterProfiler包分析靶基因参与的生物学功能和通路。 结果 生存分析,miR-9、miR-17、miR-31、miR-146a、miR-188和miR-190b与TNBC患者的预后有关,且上述miRNAs表达量越低,TNBC患者预后越差。筛选出受这6种miRNAs调控的靶基因224个。基因本体论(GO)功能富集分析,靶基因主要参与乳腺腺泡的发育、DNA转录的正向调控以及血管生成等功能;京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析,靶基因主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用以及胰岛素分泌信号等通路。网络分析,miR-9、miR-17、溶质载体家族24成员2(SLC24A2)、vav鸟苷酸交换因子3 (VAV3)、三部结构域含有36(TRIM36)、突触标记素1(SYT1)、 富勒林和Sec7结构域含有3(PSD3)、过氧化物酶体增殖物活化受体α(PPARA)、RNA聚合酶Ⅲ亚基G(POLR3G)、多形性腺瘤基因1(PLAG1)、泛素相关和SH3结构域含有B(UBASH3B)及SH3结构域和四重肽重复2(SH3TC2)是调控网络中的关键基因,其中miR-9-SYT1、miR-9-KIF13B、miR-9-KITLG、miR-17-SLC24A2、miR-31-SLC24A2、miR-146a-SYT1、miR-146a-KIF13B、miR-188-SLC24A2和miR-188-SLC24A2的miRNA-mRNA相互作用最为密切。 结论 miR-9、miR-17、miR-31、miR-146a、miR-188和miR-190b及其靶基因参与乳腺腺泡发育和血管生成等生理过程,与TNBC患者的不良预后密切相关。

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组蛋白去乙酰化酶抑制剂CUDC-101对前列腺癌DU145细胞DNA损伤、迁移和上皮-间质转化的影响
那佈其,权春姬,赵芳,杨凡,肖茹,金雪梅,李珍玲
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  400-410.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240213
摘要 ( 206 )   [HTML]( ) PDF(1722KB) ( 95 )  

目的 探讨泛素化组蛋白(H2AX)在前列腺癌(PCa)和癌旁良性前列腺组织中的表达及与其PCa患者临床病理参数之间的关系,阐明新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)CUDC-101对PCa的DNA损伤、迁移及上皮-间质转化(EMT)的影响。 方法 肿瘤基因组谱(TCGA)数据库和UALCAN数据库检索各种癌症组织中H2AX mRNA的表达情况及其在PCa与正常前列腺组织中的表达差异,分析其表达与PCa患者临床预后的关系;采用免疫组织化学染色法检测在PCa组织和癌旁良性前列腺组织中H2AX蛋白的表达情况,分析H2AX蛋白表达与PCa患者临床病理参数的关系;体外培养DU145细胞,分为对照组、5% FBS组、5% FBS+100 μmol·L-1 CUDC-101组和5% FBS+200 μmol·L-1 CUDC-101组,采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测CUDC-101处理前后PCa DU145细胞的细胞划痕面积及迁移细胞数;免疫荧光染色法检测CUDC-101处理后PCa DU145细胞中上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)和磷酸化组蛋白γ-H2AX表达情况;Western blotting法检测CUDC-101处理后EMT相关蛋白、γ-H2AX和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)表达情况。 结果 TCGA数据库和UALCAN数据库分析,H2AX mRNA在PCa组织中高表达,并且H2AX低表达组患者的无病生存期(DFS)明显高于H2AX mRNA高表达组(P<0.001);免疫组织化学染色,在PCa组织中H2AX蛋白强阳性表达率高于在癌旁良性前列腺组织(64.34% vs 14.29%),其过表达与PCa的T分期(P=0.001)和世界卫生组织/国际泌尿科病理学会(WHO/ISUP)预后分级分组(P=0.004)有关,但与PCa患者的年龄、Gleason评分、淋巴结转移、神经和脉管浸润无关(P>0.05);免疫荧光染色法检测,与对照组和EMT诱导组比较,CUDC-101处理组E-cadherin和γ-H2AX蛋白的荧光表达增强;细胞划痕实验和Transwell小室实验检测,与对照组比较,CUDC-101处理组DU145细胞愈合面积和迁移细胞数明显下调;Western blotting法检测,与EMT诱导组比较,CUDC-101处理组E-cadherin和γ-H2AX蛋白表达水平升高P<0.05或P<0.01),波形蛋白(Vimentin)和p-AKT蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01)。 结论 H2AX蛋白过表达与PCa患者的不良预后密切关联。新型HDACi抑制剂CUDC-101可调控H2AX和AKT的磷酸化,抑制PCa细胞EMT过程。

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基于重症支气管哮喘差异表达基因及其治疗中药筛选的生物信息学分析
陈丽平,韩立,卞华,庞立业
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  411-421.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240214
摘要 ( 187 )   [HTML]( ) PDF(2678KB) ( 79 )  

目的 通过生物信息学方法探讨重症支气管哮喘[简称重症哮喘(SA)]的差异表达基因,分析其作用机制,并筛选潜在具有治疗作用的中药及活性成分。 方法 在高通量基因表达(GEO)数据库中选取GSE136587和GSE158752数据集,利用R软件对数据集进行差异分析获得差异表达基因,并进行蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络分析,筛选核心基因,寻找关键通路和枢纽基因。最后将核心基因提交至Coremine数据库筛选具有潜在治疗作用的中药,并通过《中华医典》检索相关中药方剂。 结果 共筛选出466个差异表达基因。通过STRING平台构建PPI网络共筛选包括25 kDa突触关联蛋白(SNAP25)、谷氨酸离子型受体2(GRIA2)、轴突蛋白1(NRXN1)、钾电压门控通道亚家族A成员1(KCNA1)、突触囊泡蛋白 1(SYT1)和嗜铬蛋白A(CHGA)等核心靶点25个。基因本体(GO)功能富集显示SA的生物学过程与细胞趋化性和白细胞迁移等有重要关系,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集的通路主要涉及骨髓白细胞迁移、白细胞趋化性、细胞趋化性、白细胞迁移、对外部刺激反应的正向调节和骨髓白细胞活化等信号通路。采用网络药理学方法基于核心靶点筛选得到具有潜在治疗SA作用的中药367种,其中人参、水牛角、全蝎和黄芪等中药涉及多个核心靶点,与SA具有高度相关性,在《中华医典》中检索具有高度相关性的中药,共得到17个潜在具有治疗效果的中药方剂。 结论 通过生物信息学筛选SA的潜在标志物和具有治疗作用的中药,为SA早期诊断和发病机制研究提供新的靶点,为其治疗的中药方剂研发提供思路。

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呼吸道与非呼吸道标本分离MRSA临床株耐药性比较及其分子流行病学特征
额尔德木图null,王艳艳,李喻瞳,陈贵林,王俊瑞
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  422-430.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240215
摘要 ( 188 )   [HTML]( ) PDF(626KB) ( 70 )  

目的 探讨呼吸道与非呼吸道标本分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性、分子分型和生物膜形成能力的差异。 方法 选取住院患者送检标本中分离出的100株MRSA,其中50株MRSA分离自呼吸道标本,50株MRSA分离自非呼吸道标本。对100株MRSA进行14种抗菌药物的体外药敏试验,采用多位点序列分型(MLST)和金黄色葡萄球菌A 蛋白(Spa) 分型方法进行分子分型,结晶紫染色实验检测MRSA菌株生物膜形成能力。 结果 体外药敏试验,100株MRSA对青霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、莫西沙星和四环素的总体耐药率较高,均大于60.0%,对复方新诺明耐药率仅为9.0%,且所有菌株均对万古霉素、利奈唑胺、替加环素和奎奴普丁/达福普汀敏感。呼吸道标本分离的MRSA对莫西沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、四环素和庆大霉素的耐药率明显高于非呼吸道标本分离株(P<0.05)。100株MRSA中共检出17种基因型,其中优势型别为ST5-t2460型(26.0%)、ST239-t030型(23.0%)和 ST59-t437型(20.0%)。呼吸道标本分离MRSA中优势型别为ST5-t2460型(20.0%)和ST239-t030型(13.0%),其次为ST59-t437型(7.0%);非呼吸道标本分离MRSA中共检出13种基因型,优势型别为ST59-t437型(13.0%)和ST239-t030型(10.0%)。100株MRSA全部为产膜菌株,强产膜菌株、中产膜菌株和弱产膜菌株比例分别为2.0%(2/100)、24.0%(24/100)和74.0%(74/100)。ST59-t437型克隆株整体产膜能力较强,60.0%(12/20)为中产膜株和强产膜株。 结论 呼吸道标本分离MRSA菌株整体耐药率明显高于非呼吸道标本分离MRSA株。ST59-t437基因型和ST239-t030基因型为2类标本共有优势克隆株,ST59-t437型菌株呈现较强的生物膜形成能力,而ST239-t030型菌株整体耐药性最强。

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沉默FOXO1基因对人主动脉血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响
王琳茹,张晶,赵冬婵,王晋军,胡文贤
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  431-441.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240216
摘要 ( 197 )   [HTML]( ) PDF(1960KB) ( 71 )  

目的 探讨叉头框转录因子O1(FOXO1)基因对腹主动脉瘤(AAA)血管平滑肌细胞自噬和凋亡的影响,阐明其可能的作用机制。 方法 收集19例AAA患者动脉瘤组织(AAA组)及邻近正常主动脉组织(对照组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1 mRNA表达水平,透射电镜观察2组研究对象动脉瘤组织中自噬溶酶体形成情况;Western blotting法检测2组研究对象动脉瘤组织中FOXO1及自噬相关蛋白卷曲螺旋肌球蛋白样B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)结合蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3 α(LC3)和P62蛋白表达水平。体外培养人主动脉血管平滑肌细胞(hVSMCs),并采用FOXO1 siRNA(si-FOXO1)及其阴性对照(si-NC)慢病毒感染hVSMCs,10 μmol·L-1血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)联合自噬激活剂雷帕霉素(Rap)进行干预,将细胞分为空白对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+si-NC组、Ang Ⅱ+si-FOXO1组、Ang Ⅱ+si-NC+Rap组和Ang Ⅱ+si-FOXO1+Rap组。CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡水平,ELISA法检测各组细胞上清中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,RT-qPCR法检测各组细胞中FOXO1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中FOXO1、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、Beclin1、LC3和P62蛋白表达水平。 结果 与对照组比较,AAA组动脉瘤组织中FOXO1 mRNA表达水平升高(P<0.05),自噬溶酶体数量增多(P<0.05),Beclin1蛋白表达水平和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值升高(P<0.05),P62蛋白表达水平降低(P<0.05)。与空白对照组比较,Ang Ⅱ组hVSMCs增殖活性降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平升高(P<0.05),细胞中Bax、Cleaved caspase-3和Beclin1蛋白表达水平及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值升高(P<0.05),Bcl-2和P62蛋白表达水平降低(P<0.05);与Ang Ⅱ+si-NC组比较,Ang Ⅱ+si-FOXO1组hVSMCs增殖活性升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平降低(P<0.05),细胞中Bax、Cleaved-caspase-3和Beclin1蛋白表达水平及LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值降低(P<0.05),Bcl-2和P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。与Ang Ⅱ+ si-FOXO1组比较,Ang Ⅱ+si-FOXO1+Rap组细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞上清中MMP-2和MMP-9水平升高(P<0.05),细胞中Beclin1蛋白表达水平和LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值降低(P<0.05),P62蛋白表达水平升高(P<0.05)。 结论 FOXO1基因沉默可能通过降低自噬水平来提高Ang Ⅱ暴露下hVSMCs增殖活性,并抑制其凋亡,从而参与AAA的发病。

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缺氧对宫颈癌SiHa细胞中Gli1与Sox2表达的影响
朱长吉,刘兴哲,玄延花
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  442-450.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240217
摘要 ( 208 )   [HTML]( ) PDF(1795KB) ( 87 )  

目的 分析胶质瘤相关癌基因同源物1(Gli1)和性别决定区Y框蛋白2(Sox2)在宫颈癌细胞中的表达及其病理学意义,探讨Gli1与宫颈癌干性特征的相关性。 方法 采用免疫组织化学染色方法检测159例宫颈癌组织中Gli1、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、Sox2、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)、分化簇44(CD44)、八聚体结合转录因子4(OCT4)和赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)的表达并分析其相关性;使用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)明确Gli1对宫颈癌状细胞患者预后的影响及其与干细胞标志物的相关性;缺氧条件下检测SiHa细胞的球体形成能力及其干细胞标志物表达。 结果 免疫组织化学染色,在宫颈癌组织中Gli1表达率与HIF-1α(r=0.374,P<0.001)和Sox2表达水平(r=0.176,P<0.05)呈正相关关系;GEPIA数据库分析,宫颈癌中Gli1阳性表达的患者预后差(P<0.05)。缺氧条件下SiHa细胞中Gli1、HIF-1α和Sox2的mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.001),且具有较强的球体形成能力。 结论 缺氧上调宫颈癌细胞Gli1和Sox2 mRNA及蛋白表达水平,促进癌细胞的干性特征形成。

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超声剪切波弹性成像技术检测糖尿病患者不同功能状态下腓肠肌硬度及其临床意义
方雪,康彧,沙晓溪,韩志芬,张嬿
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  451-456.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240218
摘要 ( 80 )   [HTML]( ) PDF(650KB) ( 72 )  

目的 应用超声剪切波弹性成像(SWE)技术检测2型糖尿病患者不同功能状态下腓肠肌的硬度,为临床早期发现骨骼肌损害提供客观化评价依据。 方法 选取70例2型糖尿病患者作为糖尿病组,以70名健康体检者作为对照组。应用SWE技术分别测量2组研究对象腓肠肌在踝关节自然位松弛状态、踝关节跖屈位等张收缩状态和直立位等长收缩状态下的杨氏模量(E)值,并采用体质量指数(BMI)对E值进行标准化(EBMI=E/BMI),比较2组研究对象腓肠肌不同状态下被动硬度和主动硬度的差异,采用Person相关性分析糖尿病患者E值与患者年龄、病程、糖化血红蛋白(HbA1c)水平和糖基化终产物(AGEs)水平的相关性。 结果 2组研究对象腓肠肌在踝关节自然位被动硬度E值和EBMI值比较差异无统计学意义(P>0.05);踝关节跖屈位主动硬度E值比较差异无统计学意义(P>0.05),糖尿病组患者EBMI值组低于对照组(P<0.01);糖尿病组患者直立位主动硬度E值和EBMI值均低于对照组(P<0.01)。糖尿病组患者腓肠肌主动硬度E值与患者病程、HbA1c水平和AGE水平呈负相关关系(r=-0.645,P<0.05;r=-0.741,P<0.05;r=-0.675,P<0.05),与患者年龄无相关性(r=-0.116,P>0.05)。 结论 2型糖尿病患者存在腓肠肌主动硬度减低,被动硬度早期可能不受影响;采用超声SWE技术在直立位等长收缩状态下检测腓肠肌主动硬度有助于发现2型糖尿病患者亚临床阶段肌肉收缩功能减退。

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通用转录因子2I在胶质母细胞瘤替莫唑胺化疗抵抗中的作用
周建国,姜红建,朱其辉,张耿强,邓琪琳,齐玲,李凯舒,于洪泉
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  457-464.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240219
摘要 ( 223 )   [HTML]( ) PDF(1026KB) ( 157 )  

目的 探讨通用转录因子2I(GTF2I)在胶质母细胞瘤(GBM)替莫唑胺化疗抵抗中的作用,并阐明其作用机制。 方法 基于转录因子预测网站(PROMO网站),生物信息学分析GBM组织中甲基转移酶1(DNMT1)、损伤特异性DNA结合蛋白1(DDB1)、染色盒同源物5(CBX5)和着色性干皮病基因组C(XPC)的共同转录因子,并基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库进行DDB1、CBX5、XPC和DNMT1与GTF2I和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)的相关性分析及生存分析。分别用小干扰序列(siRNA)转染并沉默人脑多形性成胶质细胞瘤T98细胞和人脑胶质瘤LN229细胞中MGMT及GTF2I的基因表达,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测上述基因的mRNA表达水平。沉默GTF2I基因后,平板克隆形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力,CCK-8法检测细胞对替莫唑胺的敏感性。 结果 生物信息学分析,GBM组织中DDB1、CBX5、XPC和DNMT1表达水平与GTF2I表达水平呈显著正相关关系(P<0.05),与MGMT表达水平呈负相关关系(P<0.05);GTF2I表达水平与MGMT表达水平呈显著负相关关系(P<0.05)。剔除未接受替莫唑胺治疗的GBM患者的生存分析,GTF2I高表达的患者总体生存时间降低。沉默MGMT基因后,人脑胶质瘤T98细胞中GTF2I、DDB1、CBX5和XPC mRNA表达水平升高(P<0.001);沉默GTF2I基因后,人脑胶质瘤LN229细胞中MGMT mRNA表达水平升高(P<0.05),而DDB1、CBX5、XPC和DNMT1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.001)。平板克隆形成实验,沉默GTF2I基因前后,细胞集落形成能力比较差异无统计学意义(P=0.138);CCK-8法检测,与对照组比较,观察组细胞活力明显降低(P<0.05)。 结论 转录因子GTF2I可以调控MGMT、DDB1、CBX5和XPC等关键DNA损伤修复蛋白的mRNA表达,参与GBM细胞替莫唑胺化疗抵抗,可能是GBM潜在的治疗新靶点。

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内窥镜辅助龈下刮治联合赤藓糖醇龈下喷砂治疗种植体周围炎的疗效评价
李红艳,王琦琦,徐文洲,赵斌
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  465-472.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240220
摘要 ( 192 )   [HTML]( ) PDF(701KB) ( 79 )  

目的 研究内窥镜辅助龈下刮治联合赤藓糖醇龈下喷砂技术治疗种植体周围炎的临床疗效,为种植体周围炎的有效治疗提供理论依据。 方法 选择本院牙周科就诊并接受治疗的种植体周围炎患者,按就诊时间共有58例种植体周围炎患者陆续进入观察,按随机数字表法分为对照组(28例)和微创组(30例);对照组患者采用传统盲视龈下刮治治疗,微创组患者采取内窥镜辅助龈下刮治联合赤藓糖醇龈下喷砂治疗。分析2组患者治疗前后探诊深度(PD)、改良菌斑指数(mPLI)和改良龈沟出血指数(mSBI)以及龈沟液中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α (TNF-α)水平。 结果 治疗前2组患者PD、mPLI和mSBI及龈沟液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。治疗后2组患者PD、mPLI和mSBI,龈沟液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平均较治疗前明显下降(P<0.05)。与对照组比较,微创组患者治疗后PD、mPLI和mSBI明显降低(P<0.05);龈沟液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平也明显降低(P<0.05)。 结论 在短期内采用内窥镜辅助龈下刮治联合赤藓糖醇龈下喷砂技术治疗种植体周围炎更有助于控制种植体周围组织的炎症,改善临床症状。

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慢性直立不耐受人群血流动力学模式与缺血性卒中发病风险关系的前瞻性研究
李贯绯,张逊娟,庞猛,李淞
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  473-480.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240221
摘要 ( 177 )   [HTML]( ) PDF(491KB) ( 78 )  

目的 探讨慢性直立不耐受(OI)人群血流动力学模式与缺血性卒中发病风险的关联,为早期评估缺血性卒中的发病提供依据。 方法 以多阶段随机抽样的方法抽取吉林省长春市3个街道/乡镇≥40岁638名居民作为研究对象,经颅多普勒(TCD)联合直立倾斜试验(HUTT)评估OI人群血流动力学模式,建立OI研究队列;按血流动力学改变模式将患者分为直立位低血压(OH)组、直立位高血压(OHT)组、体位性心动过速综合征(POTS)组和直立性脑低灌注综合征(OCHOs)组;对入选的研究对象每半年随访1次,随访2年;以首次缺血性卒中发病为观察终点,收集研究对象基线资料和随访期间缺血性卒中发病情况,采用Cox比例风险模型分析与缺血性卒中发病风险关联的因素。 结果 121例研究对象符合OI诊断标准,其中OH组 80例(66.12%),OHT组 35例(28.93%),POTS 组5例(4.13%),OCHOs组 1例(0.82%);随访期间,总体人群确诊新发缺血性脑卒中事件共43例;在控制相关混杂因素后,以非OI者为参照,OI全人群、OH和OHT患者发生缺血性卒中的风险分别增加1.527倍[风险比(HR)=2.527,95%CI:1.269~5.032,P<0.01]、2.268倍(HR=3.268,95%CI:1.603~6.663,P=0.001)和2.153倍(HR=3.153,95%CI:1.213~8.916,P=0.008)。 结论 OI与缺血性卒中发病风险增加有关,其中OH组和OHT组患者发病风险增加尤为明显。

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重症肌无力患者外周血单个核细胞中线粒体自噬和凋亡相关基因表达及其诊断价值
蔡东红,李青,柯铃铃,钟慧雅,江其龙,张涵,宋雅芳
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  481-488.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240222
摘要 ( 68 )   [HTML]( ) PDF(955KB) ( 89 )  

目的 探讨重症肌无力(MG)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中线粒体自噬和凋亡相关基因的表达水平,阐明其对MG诊断的指导价值。 方法 收集并提取50名健康对照者(对照组)和50例MG患者(MG组)的PBMCs,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测线粒体自噬因子磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)诱导激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶PARK2(Parkin)、泛素结合蛋白62(p62)、微管相关蛋白1轻链3(LC3Ⅱ)及凋亡因子细胞色素C(Cyt-C)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶 3(caspase 3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶 9(caspase 9)的mRNA以及蛋白表达水平,根据mRNA检测结果设定多个不同临界值,在每个临界值处计算出相应的灵敏度和特异度,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线。 结果 与对照组比较,MG组患者PBMCs中的自噬因子PINK1、Parkin和LC3Ⅱ的mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.01),p62 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01);凋亡因子Cyt-C、Bax、caspase 3和caspase 9 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Cyt-C mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。ROC曲线检测,PINK1、Parkin、p62和LC3Ⅱ的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.969 6(95%CI:0.943 5~0.995 7)、0.944 0(95%CI:0.904 7~0.983 3)、0.855 6(95%CI:0.776 7~0.934 5)及0.908 8(95%CI:0.852 6~0.965 0)(P<0.01),灵敏度分别为92%、92%、78%和84%,特异度分别为88%、82%、92%和82%;而Cyt-C、Bax、Bcl-2、caspase 3和caspase 9的AUC均为1.000(P<0.01),灵敏度和特异度均达到100%。 结论 MG患者PBMCs中存在线粒体自噬障碍和凋亡增加现象,其对临床诊断MG具有较高的指导价值。

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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因型分布及在不同遗传基因背景下的耐药谱分析
梁进,付明霞,李娜,王凤霞,陈宇佳,胡远芳,纪冰
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  489-497.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240223
摘要 ( 91 )   [HTML]( ) PDF(783KB) ( 82 )  

目的 调查某三甲医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因型分布,探讨菌株各分子分型间的相关性,并构建不同遗传背景下的耐药谱模型。 方法 选取来源于医院25个科室的金黄色葡萄球菌(S.aureus)共计204株,采用全自动VITEK 2 Compact细菌鉴定和药敏分析仪及E-test条检测菌株的抗菌药物敏感性,以聚合酶链式反应(PCR)法检测mecA基因作为确证实验,比较头孢西丁(FOX)和(或)苯唑西林(OXA)作为表型检测方法筛选MRSA的能力。采用PCR法检测MRSA菌株的分子分型,包括S. aureus A蛋白分型(spa)、附属基因调节器分组(agr)、多位点序列分型(MLST)和S. aureus染色体盒mec分型(SCCmec)。结合药物敏感实验和分子分型结果,构建不同遗传背景下的耐药谱。 结果 通过检测mecA基因共获得39株MRSA。通过检测FOX和OXA共获得51株表型MRSA。spa分型中,共鉴定出包括5种新型(t20226、t20227、 t20228、 t20229和t20230)在内的57种不同型别,主要为t309(30.9%)、t078(11.8%)和t437(11.8%)。agr分型,94.9%的MRSA属于agrⅠ。MLST分析MRSA种群,ST59克隆(61.5%)最流行,其次为ST72(20.5%)。87.2%的MRSA携带Ⅳ型SCCmec,其中亚型Ⅳa 24株,亚型ⅣF 10株。 结论 MRSA的主要基因型为ST59-t437-agrⅠ-Ⅳa,其耐药谱主要表现为FOX-OXA-青霉素(PEN)-红霉素(ERY)-克林霉素(CLI)。

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IL-33、IL-8和NETs在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达及其意义
张妤,卢献灵
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  498-507.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240224
摘要 ( 244 )   [HTML]( ) PDF(1295KB) ( 77 )  

目的 探讨白细胞介素33(IL-33)、白细胞介素8(IL-8)和中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的主要成分髓过氧化物酶(MPO)及瓜氨酸化组蛋白3(CitH3)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中的表达情况,阐明IL-33、IL-8和NETs对COPD发生发展的影响。 方法 选取因肺部结节或肺部肿瘤行肺叶切除术的77例患者作为研究对象,分为不吸烟对照组20例、吸烟对照组18例,不吸烟COPD组19例和吸烟COPD组20例。收集研究对象的肺组织标本,HE染色观察各组患者肺组织病理形态表现,免疫组织化学染色检测各组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO蛋白的表达。采用 Spearman 相关分析COPD组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO的蛋白表达水平之间及其与肺功能指标、平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和Bosken评分的相关性。 结果 吸烟对照组患者气道Bosken评分明显高于不吸烟对照组(P<0.001);不吸烟COPD组患者气道Bosken评分和MLI明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05),MAN明显低于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);吸烟COPD组患者气道Bosken评分明显高于不吸烟对照组、吸烟对照组和不吸烟COPD组(P<0.05),MLI明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05),MAN明显低于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05)。免疫组织化学染色,吸烟COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组、吸烟对照组和不吸烟COPD组(P<0.05),IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);不吸烟COPD组患者肺组织中IL-33、IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平明显高于不吸烟对照组和吸烟对照组(P<0.05);Spearman相关性分析,COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平与第1秒用力呼气容积占用力肺活量的百分比(FEV1/FVC)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)和MAN等呈负相关关系(r=-0.406,P<0.05;r=-0.493,P<0.01;r=-0.567,P<0.05),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.935,P<0.001;r=0.590,P<0.001);COPD组患者肺组织中IL-8蛋白表达水平与FEV1/FVC、FEV1%pred和MAN等呈负相关关系(r=-0.527,P<0.01;r=-0.497,P<0.01;r=-0.463,P<0.01),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.557,P<0.001; r=0.486, P<0.01); COPD组患者肺组织中 CitH3 蛋白表达水平与 FEV1/FVC、FEV1%pred和MAN等呈负相关关系(r=-0.527,P<0.01;r=-0.640,P<0.001;r=-0.531,P<0.01),与Bosken评分和MLI等呈正相关关系(r=0.565,P<0.001;r=0.585,P<0.001);COPD组患者肺组织中MPO蛋白表达水平与FEV1/FVC呈负相关关系(r=-0.329,P<0.05),与Bosken评分呈正相关关系(r=0.410,P <0.05);COPD组患者肺组织中IL-8蛋白表达水平与CitH3和MPO蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.390,P<0.05;r=0.349,P<0.05);COPD组患者肺组织中IL-33蛋白表达水平与IL-8、CitH3和MPO蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.602,P<0.001;r=0.616,P<0.001;r=0.387,P<0.05)。 结论 IL-33、IL-8 和 NETs在COPD 患者肺组织中的表达水平升高,三者可能参与COPD的慢性炎症,并与疾病严重程度相关。

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早产儿机械通气常频模式对无创灌注指数的影响及其临床意义
赵晓琦,李静,王欣
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  508-514.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240225
摘要 ( 188 )   [HTML]( ) PDF(576KB) ( 126 )  

目的 对比早产儿撤机前后右手掌(导管前)和右脚掌(导管后)的无创灌注指数(PI)的差异,探讨机械通气(MV)常频模式是否对其产生影响,阐明呼吸系统严重程度评分(RSS)与PI的相关性。 方法 选择胎龄(GA)≥32周,体质量(BW)≥1 500 g的早产儿,出生后因呼吸窘迫,行无创辅助通气治疗,脉搏血氧饱和度(SpO2)<90%,需要常频MV辅助呼吸。共纳入符合标准病例55例。出生24 h后符合撤机标准,进行撤机。记录撤机前后右手掌和右脚掌PI稳定后的30 s内数值,取其中位数。同时记录撤机前呼吸机参数吸入气体氧浓度分数(FiO2)和平均气道压(Pmean)。使用配对样本t检验比较撤机前后患儿右手掌和右脚掌PI差异。采用多元线性回归分析患儿GA、BW和RSS与撤机前右手掌(导管前)PI的相关性及FiO2和Pmean与PI的相关性。 结果 撤机前右手掌PI低于撤机后(P<0.05),撤机前右脚掌PI低于撤机后(P<0.05);GA、BW、RSS与PI线性回归分析,GA与PI无相关性(P>0.05),BW与PI存在正相关关系[b=0.44,标准化回归系数(β)=0.25,P<0.05],RSS与PI存在负相关关系(b=-0.56,β=-0.68,P<0.05),回归方程PI=1.9+0.44×BW-0.56×RSS;进一步对构成RSS的呼吸机参数FiO2和Pmean进行多元线性回归分析,FiO2b=-2.52,β=-0.27,P<0.05)和Pmeanb=-0.39,β=-0.63,P<0.05)均与PI存在线性关系,且为其危险因素,回归系数中Pmeanβ值大于FiO2,前者对PI影响更大。 结论 常频MV模式可以影响PI,该模式下RSS是PI的危险因素,较高的RSS可对循环产生不利影响,其中Pmean较FiO2对PI影响更大。

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抑制miR-151表达对低氧条件下人绒毛膜滋养层细胞生物学行为的影响
钟黎黎,杨春芬,盛莹
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  515-522.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240226
摘要 ( 196 )   [HTML]( ) PDF(1979KB) ( 66 )  

目的 探讨微小RNA-151(miR-151)对低氧条件下人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo生物学行为的影响,并阐明其可能的作用机制。 方法 选择47例子痫前期产妇(子痫前期组)和36例正常产妇(正常组)作为研究对象,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组产妇胎盘组织中miR-151表达水平。将miR-151 inhibitor及其阴性对照inhibitor NC转染至HTR-8/SVneo细胞中,进行低氧(1% O2)干预48 h,设立对照组、低氧组、低氧+inhibitor NC组和低氧+inhibitor组。采用RT-qPCR法检测各组细胞中miR-151表达水平,MTT法检测各组细胞存活率,Transwell小室实验检测各组迁移细胞数和侵袭细胞数,Western blotting法检测各组细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9及上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。采用生物信息学分析预测miR-151下游靶基因,并结合STRING数据库对交集靶基因进行蛋白-蛋白互作(PPI)网络分析。 结果 与正常组比较,子痫前期组产妇胚胎组织中miR-151表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,低氧组HTR-8/SVneo细胞存活率、迁移细胞数和侵袭细胞数及细胞中MMP-2、MMP-9、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平明显降低(P<0.05),miR-151和E-钙黏蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与低氧组比较,低氧+inhibitor组HTR-8/SVneo细胞中MMP-2、MMP-9、N-钙黏蛋白和波形蛋白表达水平明显升高(P<0.05),miR-151和E-钙黏蛋白水平明显降低(P<0.05),而低氧+inhibitor NC组上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。生物信息学分析,miR-151下游有34个潜在靶基因,其中环指CCCH-型锌指蛋白域蛋白1(RC3H1)、AGO2、AGO3、脆性X相关蛋白1(FXR1)和转化因子2β(TRA2B)可能是关键潜在靶基因。 结论 miR-151在子痫前期患者胎盘组织中高表达,下调miR-151表达可促进低氧条件下滋养层细胞的增殖、迁移和侵袭。

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APRI、AAR和FIB-4等预测模型对自身免疫性肝硬化伴食管胃底静脉曲张的诊断价值
王素梅,王楠,于珍,张金卷,张健东
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  523-528.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240227
摘要 ( 162 )   [HTML]( ) PDF(635KB) ( 78 )  

目的 评价无创模型对自身免疫性肝硬化伴食管胃底静脉曲张(EGV)的诊断价值,为早期诊断自身免疫性肝硬化伴EGV提供依据。 方法 回顾性收集238例诊断为自身免疫性肝硬化患者的临床资料,根据是否伴发EGV分为有EGV组和无EGV组。比较2组患者的谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、血小板(PLT)、AST/PLT指数(APRI)、纤维化-4指数(FIB-4)和AST/ALT比值(AAR)水平并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,评价各模型对自身免疫性肝硬化伴EGV的诊断价值。 结果 有EGV组患者的APRI、FIB-4和ALT明显高于无EGV组(P<0.01),而PLT水平和AAR则明显低于无EGV组(P<0.01)。单指标诊断模型以ALT的AUC最大,AUC为0.645(95%CI: 0.580~0.705,P<0.001),其灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.75%、34.04%、68.53%及78.05%。多指标联合模型中以ALT+FIB-4+AAR+PLT联合模型的AUC最大,AUC为0.787(95%CI:0.730~0.838,P<0.001),其灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为72.22%、73.40%、80.62%及63.30%。ALT+FIB-4+AAR、ALT+FIB-4+AAR+PLT和ALT+FIB-4+AAR+PLT+APRI联合模型的AUC与ALT和ALT+FIB-4模型比较差异均有统计学意义(P<0.05)。而上述3种模型AUC比较差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论 APRI、FIB-4、ALT、PLT和AAR联合检测可提高自身免疫性肝硬化伴EGV的早期诊断效能。

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临床医学
急性左下肢动脉栓塞并发肌病肾病代谢综合征的心力衰竭患者1例报告及文献复习
俞凯华,尉昆,张杰,衣雪梅,王刚,庞磊
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  529-535.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240228
摘要 ( 174 )   [HTML]( ) PDF(495KB) ( 129 )  

目的 报道1例急性左下肢动脉栓塞并发肌病肾病代谢综合征(MNMS)的心力衰竭患者诊治过程,为此类患者诊断、麻醉和治疗提供参考。 方法 回顾性分析1例急性左下肢动脉栓塞并发MNMS的心力衰竭患者的临床资料、麻醉方法和围术期管理,并进行相关文献复习。 结果 患者,男性,56岁,于2017年3月25日因突发左下肢疼痛、麻木伴感觉运动障碍入院,入院35 min后血管超声检查提示左股浅动脉末段至腘动脉全段继发血栓。入院77 min后实验室检查显示肌红蛋白(MB)698.7 μg·L-1、肌钙蛋白I(TnI) 0.092 μg·L-1和肌酸激酶同工酶(CK-MB)4.78 μg·L-1。入院63 min后心电图检查结果显示心动过速、左心室肥大、心房颤动和房室传导阻滞。初诊为急性左下肢动脉栓塞,冠心病,陈旧性心肌梗死,心律失常,2型糖尿病。患者拟于入院3 h后在全麻下行急诊左下肢动脉栓塞取栓术,术中患者生命体征平稳,术后8 min患者突发室颤,考虑再发急性心肌梗死并发MNMS,经过积极的抢救处理,仍未能挽救患者生命。 结论 对于急性肢体动脉栓塞并发心力衰竭的患者,及时恢复肢体的血液供应是治疗的关键,适当补液扩容,维持电解质平衡,保护心肾功能可以有效降低患者的病死率和截肢率。

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自体富血小板纤维蛋白应用于根尖周炎磨牙即刻种植1例报告及文献复习
贾克文,朱悦萌,陈思宇,李明慧,游佳倩,陈升,周延民
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  536-544.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240229
摘要 ( 210 )   [HTML]( ) PDF(1792KB) ( 69 )  

目的 将自体富血小板纤维蛋白(PRF)单独应用于根尖周炎磨牙即刻种植,观察其临床疗效并探讨其作用机制,以拓宽其临床应用并为其临床实践提供指导。 方法 收集1例将PRF单独应用于根尖周炎磨牙即刻种植患者的临床资料,采用锥形束CT(CBCT)和口腔扫描数据三维重建的方法对种植体周围组织改变量进行评估,并结合相关文献分析PRF的治疗方法和治疗效果。 结果 采用微创拔除患者46患牙行即刻种植的治疗方法。术前取患者自体血液30 mL(3管),将血液置于不含抗凝剂的10 mL玻璃涂层塑料管中,采用3 000 r·min-1离心10 min的方法制备3枚PRF,并将其作为唯一材料充填跳跃间隙。治疗后采用CBCT和口腔扫描三维重建对比分析,术后6个月时,种植体周围骨组织增加203.19 mm3,颊侧骨高度增加5.83 mm,且颊侧骨组织增加量大于1 mm;术后12个月时,种植体周软硬组织基本保持稳定。 结论 将自体PRF单独应用于根尖周炎磨牙即刻种植,获得了良好的治疗效果,种植体周骨组织再生且种植体周软硬组织基本保持稳定。

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异时性多复发灶耐药基因分子异质性的胃肠道间质瘤1例报告及文献复习
王玥,吴迪,于丹丹,段秀梅
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  545-550.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240230
摘要 ( 171 )   [HTML]( ) PDF(993KB) ( 106 )  

目的 分析1例长期伊马替尼治疗后多部位、异时性复发病灶敏感/耐药共存的少见胃肠道间质瘤(GISTs)患者的临床资料,揭示GISTs继发突变的异质性是复发耐药过程中的重要属性。 方法 收集1例复发GISTs患者的临床资料,采用HE染色法进行组织学观察,免疫组织化学染色检测相关蛋白表达,一代和二代测序技术分析肿瘤基因变异情况。 结果 患者,男性,66岁,因胃间质瘤行胃部分切除术。一代测序技术检测结果显示为原癌基因,受体酪氨酸激酶(KIT)基因11号外显子缺失突变(p.551-554del)。伊马替尼治疗1年左右,停药4个月后复发,患者出现脾区病灶,继续采用伊马替尼一线治疗,脾区病灶得到控制。59个月后盆腔发现新病灶,采用伊马替尼加量(600 mg·d-1)并舒尼替尼二线治疗,治疗2个月后CT检查结果显示患者脾区病灶大小趋于稳定,而盆腔新病灶体积持续增大。二代测序技术检测结果显示两复发灶在原有KIT基因11号外显子缺失突变的基础上,分别继发KIT基因13号外显子(p.V654A)和17号外显子(p.Y823D)突变。 结论 GISTs在靶向药物选择作用的压力下,肿瘤生物学行为表现出复杂性,即时间异质性、空间异型性和分子异质性,不同复发灶可以出现不同的耐药机制。

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同侧上下颌骨单纯性骨囊肿1例报告及文献复习
阚少宁,吴涵,李双季,向镜成,李裕洋,金丽鸥,刘炜炜
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  551-555.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240231
摘要 ( 204 )   [HTML]( ) PDF(653KB) ( 158 )  

目的 分析同侧上下颌骨单纯性骨囊肿(SBC)患者的临床表现、影像学特征、手术探查情况和病理学表现,以提高临床医生对该类疾病诊断和治疗的认识。 方法 收集1例右侧上下颌骨SBC患者的临床资料、影像学特征、手术探查情况、病理学表现、临床诊断和治疗经过,并结合相关文献进行复习。 结果 患者,男性,11岁;曲面断层检查,发现右侧上下颌骨内边界清楚的低密度影;无创伤史,就诊前无自觉症状和面部不对称;专科检查未见任何阳性体征;结合手术探查情况及病理学诊断确诊为右侧上下颌骨SBC;采用传统刮治术治疗,术后患者恢复良好,无明显不适。术后6个月随访,患者口内创口愈合良好,无红肿;锥形束计算机断层扫描(CBCT)影像检查结果显示骨腔变小,骨腔内可见新生骨小梁,成骨情况良好,目前患者处于定期随访中。 结论 同侧上下颌骨SBC无特征性的临床表现和影像学表现,极易与颌骨常见的疾病混淆。需结合影像学检查、手术探查情况和病理学检查最终确诊。

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综述
角化龈形成机制及增量移植材料的研究进展
石雅茹,杨庆祎,徐晓薇
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  556-563.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240232
摘要 ( 278 )   [HTML]( ) PDF(450KB) ( 118 )  

角化龈对于维持牙周组织健康有重要意义,但其具体形成机制目前尚不十分明确。口腔上皮细胞的分化由基因决定,同时上皮下结缔组织和牙周膜也会影响上皮的类型,其中上皮下结缔组织中的弹性纤维对于维持上皮的表型起重要间接作用。由于形成机制不明,目前角化龈增量的主要治疗方法是膜龈手术,使用的移植材料包括自体组织(游离龈移植物、上皮下结缔组织移植物和自体血小板浓缩物等)、异体材料(脱细胞真皮基质、异种胶原基质和羊膜等)以及两者结合而成的组织工程制品(以层状壳聚糖或纳米纤维水凝胶复合材料为支架的组织工程制品)。现从牙龈角化过程、角化决定因素和现有的移植材料进行综述,总结目前在牙龈角化机制及角化龈增量材料方面的研究进展,为进一步的机制研究及新型材料的开发提供依据。

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DMSCs三维培养方法及其在组织再生和疾病治疗中应用的研究进展
李国鑫,赵小琳,李晨曦,刘影驰,朱芷墨,袁瑶,安政雯
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  564-571.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240233
摘要 ( 278 )   [HTML]( ) PDF(515KB) ( 120 )  

牙源性间充质干细胞(DMSCs)是来源于神经嵴外胚层的间充质干细胞,具有优越的自我更新和多向分化的能力,被广泛应用于组织工程和再生医学研究。利用三维培养方法可对DMSCs进行大量体外扩增以满足研究和治疗的需要。与传统的二维培养方法比较,三维培养技术可更有效地模拟干细胞在体内所处的结构和微环境,从时间和空间上共同调控干细胞的增殖及分化。近年来开展的体外三维培养方法较多,悬滴培养法操作简单,但较难控制培养组织的气象环境;微流控芯片可更好地控制细胞参数,但成本高昂,且存在技术平台的难题而难以广泛应用;磁悬浮培养费用低廉,操作简便,细胞成球速度快,但由于磁化作用难以用来定量分析。其他三维培养方法还包括旋转细胞培养系统、离心成球培养法、液体覆盖法和人工支架法等,上述培养方法都存在不同的优势和一定的局限性。现对体外三维培养DMSCs的不同方法及其在不同组织再生和疾病治疗中的应用进行综述,为DMSCs功能的精准调控和再生医学研究提供参考。

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14-3-3ɛ蛋白与肿瘤发生发展关系的研究进展
庞海垚,孟峻
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  572-578.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240234
摘要 ( 235 )   [HTML]( ) PDF(466KB) ( 104 )  

14-3-3ε蛋白也被称为YWHAE蛋白,是属于14-3-3蛋白家族的一种小相对分子质量的蛋白质。不同于蛋白激酶,14-3-3ε蛋白在细胞内并不参与蛋白质磷酸化反应,而是通过形成特殊的二聚体结构并与特定的磷酸化蛋白质结合,调节蛋白质配体的活性和亚细胞定位,从而参与多种细胞生命活动的调节。目前,在多种肿瘤中均已发现14-3-3ε蛋白的异常表达,异常表达的14-3-3ε蛋白对蛋白质配体的调节效应改变,进而影响蛋白质配体的亚细胞定位和酶活性,导致肿瘤细胞发生发展和侵袭转移。14-3-3ε蛋白的二聚体结构是其在肿瘤发生发展过程中发挥生物学功能的重要结构基础,破坏这一二聚体结构可有效靶向攻击肿瘤细胞。现基于国内外对14-3-3ε蛋白的研究成果,针对14-3-3ε蛋白的结构、作用机制及其在胃癌、肝癌、皮肤癌和其他多种肿瘤中发生发展过程中的影响及作用机制进行综述。

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环核苷酸门控离子通道及其功能的研究进展
方琳,李世鹏
吉林大学学报(医学版). 2024 (2):  579-586.  DOI: 10.13481/j.1671-587X.20240235
摘要 ( 171 )   [HTML]( ) PDF(468KB) ( 99 )  

环核苷酸门控(CNG)离子通道是一种非选择性的四聚体阳离子通道,可以直接被细胞内信使小分子——环核苷酸活化,是钙离子进入细胞的主要通道之一。CNG通道蛋白由6种不同基因编码:4个A亚单位和2个B亚单位。CNG离子通道的活性可被钙离子/钙调素(Ca2+/CaM)及磷酸化或膜上磷酸肌醇作用调节,从而改变细胞内钙离子浓度,参与多种生物学功能的调控。自从在视杆细胞中发现CNG离子通道以来,经历了对其生理功能、克隆相关基因、理解调控方式、解析晶体结构和开发相关的基因治疗方法等研究过程,在视觉和嗅觉感觉神经元(OSNs)的信号转导中发挥着重要作用。现就CNG离子通道的功能、结构、调控机制及其与相关疾病关系等方面进行简要综述,以期为CNG离子通道相关疾病的治疗提供理论依据。

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