北五味子多糖对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及其机制

doi:10.13481/j.1671-587X.20220515

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨北五味子多糖（SCP）对体外培养人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响，并阐明其可能的作用机制。方法体外培养人膀胱癌T24细胞，分为对照组和50、100及200 mg·L^－1 SCP组。不同剂量SCP干预24~48 h后，采用MTT法检测各组T24细胞增殖抑制率，Hoechst 33258荧光染色法检测各组T24细胞凋亡情况，Annexin Ⅴ-FITC/碘化丙啶（PI）双染法检测各组T24细胞凋亡率，流式细胞术检测各组T24细胞不同细胞周期细胞百分率和细胞凋亡率，Western blotting法检测各组T24细胞中磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）、磷酸化磷脂酰肌醇-3激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B（Akt）和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达水平。结果与对照组比较，50、100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞增殖抑制率明显升高（P<0.05或P<0.01）；T24细胞凋亡率明显升高（P<0.05或P<0.01）；50、100和200 mg·L^－1 SCP组 T24细胞G₀/G₁期细胞百分率明显升高（P<0.05或P<0.01），100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞S期和G₂/M期细胞百分率明显降低（P<0.01）；50、100和200 mg·L^－1 SCP组T24细胞中PTEN蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01），p-PI3K蛋白表达水平和p-Akt/Akt比值明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论 SCP 能够抑制T24细胞增殖，促进其凋亡，其机制可能与调控PTEN和PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。

关键词: 北五味子多糖, 人膀胱癌细胞, 细胞增殖, 细胞凋亡, 磷酸酶和张力蛋白同源物, 磷脂酰肌醇-3激酶, 蛋白激酶B

Abstract:

Objective： To investigate the effect of Schisandra chinensis polysaccharide （SCP） on the proliferation and apoptosis of human bladder cancer T24 cells， and to elucidate its possible mechanisms. Methods The human bladder cancer T24 cells were cultured in vitro and divided into control group and 50， 100， and 200 mg·L^－1 SCP groups. After 24－48 h of intervention with different doses of SCP， the inhibitory rates of proliferation of T24 cells in various groups were detected by MTT method， the apoptosis of T24 cells in various groups was detected by Hoechst 33258 fluorescence staining method，the apoptotic rates of T24 cells in various groups were detected by Annexin Ⅴ-FITC/propidium iodide（PI） double staining method， the percentages of T24 cells in different cell cycles and the apoptotic rates of T24 cells in various groups were detected by flow cytometry， and the expression levels of phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten（PTEN）， phosphorylated phosphatidylinositol-3 kinase （p-PI3K），protein kinase B （Akt） and phosphorylated Akt （p-Akt） proteins in the T24 cells in various groups were detected by Western blotting method. Results Compared with control group， the inhibitory rates of proliferation of T24 cells in 50，100，and 200 mg·L^－1 SCP groups were significantly increased（P<0.05 or P<0.01）； the apoptotic rates of T24 cells were significantly increased （P<0.05 or P<0.01）；the percentages of T24 cells in 50，100 and 200 mg·L^－1 SCP groups in G₀/G₁ phase were significantly increased （P<0.05 or P<0.01）， the percentages of T24 cells in 100 and 200 mg·L^－1SCP groups in S phase and G₂/M phase were significantly decreased （P<0.01）； the expression levels of PTEN protein in the T24 cells in 50，100，and 200 mg·L^－1 SCP groups were significantly increased （P<0.05 or P<0.01）， the expression levels of p-PI3K protein and the ratios of p-Akt/Akt in the T24 cells were significantly decreased （P<0.05 or P<0.01）. Conclusion SCP can inhibit the proliferation of T24 cells and promote their apoptosis，and its mechanism may be related to the regulation of expressions of PTEN and PI3K/Akt signaling pathway-related proteins.

Key words: Schisandra chinensis polysaccharide, Human bladder cancer Cells, Cell proliferation, Apoptosis, Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten, Phosphatidylinositol-3 kinase, Protein kinase B

中图分类号:

R969.4

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图/表 7

表1

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图2

表2

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参考文献 27

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Group	Inhibitory rate of proliferation
Control	0
SCP(mg·L^－1)
50	18.69±4.32^*
100	39.13±5.36^**
200	64.76±8.45^**

Group	Apoptotic rate
Control	13.47±2.25
SCP(mg·L^－1)
50	30.32±5.21^*
100	37.69±4.35^*
200	45.68±3.38^**

Group	Percentage of T24 cells			Apoptotic rate
Group	G₀/G₁	S	G₂/M	Apoptotic rate
Control	27.43±2.56	48.54±3.82	24.03±1.98	5.87±0.97
SCP(mg·L^－1)
50	38.62±4.75^*	40.21±4.75	21.17±2.59	28.73±4.56^**
100	65.39±4.21^**	30.77±2.85^**	3.84±0.45^**	38.35±5.73^**
200	80.71±6.57^**	16.91±2.96^**	2.38±0.81^**	60.52±7.48^**

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