上调Mg2+/Mn2+依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

doi:10.13481/j.1671-587X.20230106

吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (1): 39-45.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230106

上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

赵杰^1,²,周宁³,刘冬芹⁴,代娟娟²,王丹丹^1,²,武艳^1,²()

^1.滨州医学院附属医院肿瘤科，山东滨州 256600
^2.滨州医学院附属医院医学研究中心，山东滨州 256600
^3.滨州医学院附属医院耳鼻咽喉头颈外科，山东滨州 256600
^4.山东省滨州市人民医院消化内科，山东滨州 256600

收稿日期:2021-12-26 出版日期:2023-01-28 发布日期:2023-02-03
通讯作者: 武艳 E-mail:wuyan55@126.com
作者简介:赵杰（1996－），女，山东省聊城市人，在读硕士研究生，主要从事肿瘤发病机制方面的研究。
基金资助:
国家自然科学基金项目(81903102);山东省科技厅重点研发计划（公益类）项目(2019GSF107099);山东省卫计委医药卫生科技发展计划项目(2017WS154);山东省科技厅自然科学基金项目(ZR2016HB55);滨州医学院科研计划与科研启动基金项目(BY2019KJ04);滨州医学院“临床+X”项目(BY2021LCX23)

Effects of up-regulation of protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺-dependent 1F on proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells

Jie ZHAO^1,²,Ning ZHOU³,Dongqin LIU⁴,Juanjuan DAI²,Dandan WANG^1,²,Yan WU^1,²()

^1.Department of Oncology，Affiliated Hospital，Binzhou Medical University，Binzhou 256600，China
^2.Medical Research Center，Affiliated Hospital，Binzhou Medical University，Binzhou 256600，China
^3.Department of Otorhinolaryngology Head and Neck Surgery，Affiliated Hospital，Binzhou Medical University，Binzhou 256600，China
^4.Depatment of Gastroenterology，Binzhou People’s Hospital，Shandong Province，Binzhou 256603，China

Received:2021-12-26 Online:2023-01-28 Published:2023-02-03
Contact: Yan WU E-mail:wuyan55@126.com

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F（PPM1F）对鼻咽癌HONE-1细胞增殖、迁移的影响，并阐明其作用机制。方法鼻咽癌HONE-1细胞分为pcDNA3.1组（转染pcDNA3.1质粒）和pcDNA3.1-Flag-PPM1F组（转染pcDNA3.1-Flag-PPM1F质粒）。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法和Western blotting法检测2组细胞中PPM1F和E-钙黏蛋白（E-cadherin）mRNA及蛋白表达水平，CCK-8法和克隆形成实验检测2组细胞增殖活性和克隆形成率，细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率，Transwell实验检测2组细胞中迁移细胞数。结果与pcDNA3.1组比较，pcDNA3.1-Flag-PPM1F 组细胞中PPM1F mRNA表达水平明显升高（P<0.01），且PPM1F蛋白表达量明显增加，细胞中E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01），细胞增殖活性、克隆形成率和划痕愈合率明显降低（P<0.05或P<0.01），迁移细胞数明显减少（P<0.05）。结论上调PPM1F表达能够抑制鼻咽癌HONE-1 细胞增殖和迁移，其机制可能与细胞间的黏附作用有关。

关键词: Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F, 鼻咽肿瘤, 细胞增殖, 细胞迁移

Abstract:

Objective To investigate the effects of up-regulation of protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺-dependent 1F （PPM1F） on the proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells， and to clarify their mechanisms. Methods The nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells were divided into pcDNA3.1 group （transfected with pcDNA3.1 plasmid） and pcDNA3.1-Flag-PPM1F group （transfected with pcDNA3.1-Flag-PPM1F plasmid）. The expression levels of PPM1F and E-cadherin mRNA and proteins in the cells in two groups were detected by real-time fluorescence quantitative PCR（RT-qPCR） and Western blotting methods； the activities of proliferation and clone formation rates of the cells in two groups were detected by CCK-8 method and clone formation assay； the scratch healing rates of the cells in two groups were detected by cell scratch assay，and the numbers of migation cells in two groups were detected by Transwell experiment. Results Compared with pcDNA3.1 group， the expression level of PPM1F mRNA in the cells in pcDNA3.1-Flag-PPM1F group was significantly increased（P<0.01），the expression amount of PPM1F protein was significantly increased，the expression levels of E-cadherin mRNA and protein in the cells were significantly increased（P<0.01），the proliferation activity，the clone formation rate and the scratch healing rate were significantly decreased （P<0.05 or P<0.01）， and the number of migration cells was significantly reduced（P<0.05）. Conclusion Up-regulation of PPM1F expression can inhibit the proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells， and its mechanism may be related to intercellular adhesion.

Key words: Protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺-dependent 1F, Nasopharyngeal neoplasms, Cell proliferation, Cell migration

中图分类号:

R739.63

赵杰,周宁,刘冬芹,代娟娟,王丹丹,武艳. 上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2023, 49(1): 39-45.

Jie ZHAO,Ning ZHOU,Dongqin LIU,Juanjuan DAI,Dandan WANG,Yan WU. Effects of up-regulation of protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺-dependent 1F on proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells[J]. Journal of Jilin University(Medicine Edition), 2023, 49(1): 39-45.

图/表 6

图1

图2

图3

图4

图5

图6

参考文献 24

1	CHEN Y， CHAN A T C， LE Q， et al. Nasopharyngeal carcinoma［J］. Lancet， 2019，394（10192）： 64-80.
2	GUAN S Z， WEI J R， HUANG L K， et al. Chemotherapy and chemo-resistance in nasopharyngeal carcinoma［J］. Eur J Med Chem， 2020， 207： 112758.
3	COHEN P. The regulation of protein function by multisite phosphorylation： a 25 year update［J］. Trends Biochem Sci， 2000， 25（12）： 596-601.
4	SINGH V， RAM M， KUMAR R， et al. Phosphorylation： implications in cancer［J］. Protein J， 2017， 36（1）： 1-6.
5	MENG F T， LIU J， DAI J J， et al. PPM1F in dentate gyrus modulates anxiety-related behaviors by regulating BDNF expression via AKT/JNK/p-H3S10 pathway［J］. Mol Neurobiol， 2021， 58（7）： 3529-3544.
6	ISHIDA A， SUEYOSHI N， KAMESHITA I. Functions and dysfunctions of Ca²⁺/calmodulin-dependent protein kinase phosphatase （CaMKP/PPM1F） and CaMKP-N/PPM1E［J］. Arch Biochem Biophys， 2018， 640： 83-92.
7	KOH C G， TAN E J， MANSER E， et al. The p21-activated kinase PAK is negatively regulated by POPX1 and POPX2， a pair of serine/threonine phosphatases of the PP2C family［J］. Curr Biol， 2002， 12（4）： 317-321.
8	KIM P R， KOON Y L， LEE R T C， et al. Phosphatase POPX2 interferes with cell cycle by interacting with Chk1［J］. Cell Cycle， 2020， 19（4）： 405-418.
9	SUSILA A， CHAN H， LOH A X， et al. The POPX2 phosphatase regulates cancer cell motility and invasiveness［J］. Cell Cycle， 2010， 9（1）： 179-187.
10	WENG T， KOH C G. POPX2 phosphatase regulates apoptosis through the TAK1-IKK-NF-κb pathway［J］. Cell Death Dis， 2017， 8（9）： e3051.
11	PHANG H Q， HOON J L， LAI S K， et al. POPX2 phosphatase regulates the KIF3 kinesin motor complex［J］. J Cell Sci， 2014， 127（Pt 4）： 727-739.
12	LIU X R， ZHANG Y P， WANG Y J， et al. Protein phosphorylation in cancer： role of nitric oxide signaling pathway［J］. Biomolecules， 2021， 11（7）： 1009.
13	TU S H， LIN Y C， HUANG C C， et al. Protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺ dependent 1F promotes smoking-induced breast cancer by inactivating phosphorylated-p53-induced signals［J］. Oncotarget， 2016， 7（47）： 77516-77531.
14	ZHANG S J， WENG T， CHERUBA E， et al. Phosphatase POPX2 exhibits dual regulatory functions in cancer metastasis［J］. J Proteome Res， 2017， 16（2）： 698-711.
15	ZHANG J， JIN M， CHEN X Y， et al. Loss of PPM1F expression predicts tumour recurrence and is negatively regulated by miR-590-3p in gastric cancer［J］. Cell Prolif， 2018， 51（4）： e12444.
16	LUO G， CHAO Y L， TANG B， et al. miR-149 represses metastasis of hepatocellular carcinoma by targeting actin-regulatory proteins PPM1F［J］. Oncotarget， 2015， 6（35）： 37808-37823.
17	MOHAJAN S， JAISWAL P K， VATANMAKARIAN M， et al. Hippo pathway： Regulation， deregulation and potential therapeutic targets in cancer［J］. Cancer Lett， 2021， 507： 112-123.
18	RAHMAT M B， ZHANG S J， KOH C G. POPX2 is a novel LATS phosphatase that regulates the Hippo pathway［J］. Oncotarget， 2019， 10（15）： 1525-1538.
19	ELLENBROEK S I J， IDEN S， COLLARD J G. Cell polarity proteins and cancer［J］. Semin Cancer Biol， 2012， 22（3）： 208-215.
20	毛元鹏，魏红山. 肝细胞极性调控［J］. 临床肝胆病杂志， 2022，38（11）： 2654-2658.
21	HOON J L， LI H Y， KOH C G. POPX2 phosphatase regulates cell polarity and centrosome placement［J］. Cell Cycle， 2014， 13（15）： 2459-2468.
22	秦雯，杨建宇，陈泰文，等. 胰腺癌组织中L1细胞黏附分子和转化生长因子β1的表达及意义［J］. 临床肝胆病杂志， 2021，37（6）： 1404-1408.
23	WONG S H M， FANG C M， CHUAH L H， et al. E-cadherin： its dysregulation in carcinogenesis and clinical implications［J］. Crit Rev Oncol Hematol， 2018， 121： 11-22.
24	EBNET K， KUMMER D， STEINBACHER T， et al. Regulation of cell polarity by cell adhesion receptors［J］. Semin Cell Dev Biol， 2018， 81： 2-12.

[1]	金俊伊,李木,胡耀元,王熠辉. miR-150-5p与NCAPG的靶向关系及其对肝细胞肝癌Huh7细胞的抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2023, 49(1): 122-130.
[2]	陈艳雅,招锦兰,李婵,黄丽珊. 卵巢癌组织中miR-223的表达及其对卵巢癌OVCAR3细胞增殖和侵袭的促进作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2023, 49(1): 150-157.
[3]	陈星竹,于明岳,刘双,李佳凝,谢尊玄,刘金瑶,刘玉艳. 载氟聚碳酸丙烯酯牙贴片再矿化性能及其对小鼠成纤维L929细胞的毒性作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(6): 1429-1436.
[4]	张庆宇,徐庭瑞,矫君君,夏德庚,张天翼,张莉,马宁. 富血小板纤维蛋白和羟基磷灰石复合物的制备方法及其性能评价[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(6): 1448-1454.
[5]	谢先顺,王伟,蒋海兵. miR-431-3p对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其靶向调控CTDP1基因表达机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(6): 1555-1565.
[6]	孙红霞,刘春旭,安学俊,崔光华,王靖宇,佟双喜,杨晓秋. 北五味子多糖对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(5): 1216-1222.
[7]	张蒨,李静. 过表达TLR4基因对胃癌细胞自噬的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(5): 1238-1246.
[8]	黄晓妹,王洪伟,韩贞艳,韦秋园,黄素静. lncRNA GHET1通过Wnt/β-catenin信号通路对子痫前期滋养层细胞生物学行为的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(5): 1324-1332.
[9]	王志娟,张明姝,叶丽平. 血小板衍生生长因子D通过ERK信号通路对肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(4): 898-904.
[10]	马琰迪,卢香云,何尚峰,俞雪燕,胡云华,高海霞,陈云昭,禹洁,王文洁,李锋,崔晓宾. m6A甲基化修饰结合蛋白YTHDF2在食管癌组织中的表达及其对食管癌细胞增殖和迁移的影响[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(4): 962-970.
[11]	汪国武,姚远,张雨,徐娜,刘芳. miR-152降低低密度脂蛋白受体表达对子宫内膜癌细胞增殖和侵袭的抑制作用[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(3): 591-599.
[12]	李官虎,郎庆旭,刘纯岩,刘沁,耿梦柔,李晓倩,王珍琦. 丙戊酸联合X射线照射对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(3): 622-629.
[13]	颜培玉,张爱臣,章宏,李杨,张萌萌,洛梦泽,潘颖. 脂肪间充质干细胞对卵巢早衰模型大鼠的治疗作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(3): 648-656.
[14]	刘翠兰,胡凤爱,刘晶,王丹,邱长云,柳敦江,赵娣. 脂联素受体激动剂AdiopRon对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(3): 702-710.
[15]	吴壮志,贺小宁,陈思祺. miR-124-3p对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭的抑制作用及其机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2022, 48(3): 718-727.

上调Mg²⁺/Mn²⁺依赖性蛋白磷酸酶1F表达对鼻咽癌HONE-1细胞增殖和迁移的影响

Effects of up-regulation of protein phosphatase Mg²⁺/Mn²⁺-dependent 1F on proliferation and migration of nasopharyngeal carcinoma HONE-1 cells

RichHTML

PDF (PC)

赞