吉林大学学报(医学版) ›› 2023, Vol. 49 ›› Issue (5): 1140-1146.doi: 10.13481/j.1671-587X.20230505
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胡志宽1,2,何思琦2,3,蒋维杰2,3,赵贵芳2,张佳2,3(),齐玲2()
Zhikuan HU1,2,Siqi HE2,3,Weijie JIANG2,3,Guifang ZHAO2,Jia ZHANG2,3(),Ling QI2()
摘要:
目的 观察脂多糖(LPS)诱导小鼠视网膜单独培养Müller细胞和Müller细胞与小胶质细胞共培养2种体系中的炎症反应,阐明Müller细胞与小胶质细胞的相互作用机制。 方法 培养Müller细胞QMMuC-1和小胶质细胞BV2,免疫荧光染色方法观察2种细胞形态表现。实验分为单独培养对照组[QMMuC-1细胞单独培养,采用磷酸盐(PBS)缓冲液处理]、共培养对照组(QMMuC-1细胞和BV2细胞共培养,细胞比例1∶1,采用PBS缓冲液处理)、单独培养实验组(QMMuC-1细胞单独培养,采用10 mg·L-1 LPS处理)和共培养实验组(QMMuC-1细胞和BV2细胞共培养,采用10 mg·L-1 LPS处理)。采用免疫荧光染色法观察各组细胞中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组QMMuC-1细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平。 结果 QMMuC-1细胞中神经胶质细胞标志物谷氨酰胺合成酶(GS)和GFAP阳性,BV2细胞中小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白分子1(Iba-1)阳性。与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.7倍(P=0.005);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高2倍(P=0.003),细胞形态逐渐变成梭形;与单独培养实验组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中GFAP水平升高1.4倍(P=0.000 6),大部分细胞呈梭形。与单独培养对照组比较,单独培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05);与共培养对照组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.05);与单独培养实验组比较,共培养实验组QMMuC-1细胞中IL-1β和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.05)。 结论 LPS可能通过诱导小胶质细胞激活后释放炎症因子作用于Müller细胞,并加剧了Müller细胞的炎症反应。
中图分类号: