目的：构建成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）真核表达载体MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN，并检测FGFR3蛋白在人白血病细胞系K562中的表达。方法:通过PCR法获得FGFR3全长基因（fgfr3-WT）和截短失活型的FGFR3（fgfr3-DN），经双酶切后与真核表达载体MSCV/puro连接，构建MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组表达质粒。经PCR、双酶切及测序鉴定正确后，脂质体介导转染至人白血病细胞系K562中，经puromycin抗性筛选后，Western blotting法和流式细胞术检测细胞中FGFR3蛋白的表达。结果：PCR法鉴定MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组质粒，2个质粒分别扩增出2　400 bp的fgfr3-WT全长基因片段和1　200 bp的fgfr3-DN截短型片段,表明成功扩增fgfr3-WT全长基因和1　200 bp的fgfr3-DN基因；双酶切MS
CV/puro-fgfr3-WT重组质粒，获得2　400 bp的目的基因片段；测序显示，fgfr3-WT片段大小为2　400 bp,Blast对比分析表明测序结果与GenBank中的FGFR3序列完全一致。fgfr3-DN片段大小与预先设计的序列完全一致,表明成功构建野生型FGFR3和突变失活型FGFR3真核表达载体；Western blotting 检测，与对照组（K562-MSCV）比较，MSCV/puro-fgfr3-WT转染组（K562-WT）FGFR3蛋白表达水平增加，表达水平是对照组的10倍以上；MSCV/puro-fgfr3-DN转染组（K562-DN）的截短型的FGFR3（K562-DN）高表达，而对照组和K562-WT转染组则无此片段；流式细胞术检测，K562-WT组有57.5%的细胞高表达FGFR3，K562-DN组有41.5%的细胞高表达FGFR3-DN。结论：成功构建高表达野生型和突变型FGFR3的人白血病细胞系K562。

目的：探讨人参二醇组皂苷(PDS)对家兔酒精性心力衰竭的保护作用，阐明PDS保护心肌的作用机制。方法：15只健康家兔随机分为对照组、模型组和PDS组，每组5只。对照组家兔静脉滴注生理盐水0.2 g•mL^-1，模型组家兔恒速静脉滴注20%酒精（0.1 g•kg^-1?•min^-1）,PDS组家兔静脉滴注酒精前给予PDS 0.025 g•kg^-1。心室内插管检测各组家兔的血流动力学变化；比色法检测家兔血清中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CKMB）水平，检测心肌组织匀浆中丙二醛（MDA）水平、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。结果：与对照组比较，模型组家兔左心室内舒张末期压(LVEDP)在开始记录３０　min时显著降低（P<0.05），血清LDH、CK和CKMB水平升高(P<0.05)，心肌组织匀浆中MDA水平升高(P<0.05)，T-SOD、GSH-Px和CAT活性下降（P<0.05）；与模型组比较，PDS组家兔LVEDP显著升高，血清LDH、CK及CKMB水平下降(P<0.05)，心肌组织匀浆中MDA水平下降（P<0.05），T-SOD、GSH-Px及CAT活性升高（P<0.05）。结论：PDS对家兔急性酒精性心力衰竭具有保护作用，其作用机制可能与改善心肌过氧化损伤有关。

目的：探讨纳米二氧化硅（SiO2）颗粒的血管内皮细胞毒性，阐明其作用机制。方法：选用粒径约60 nm的纳米SiO2颗粒，以体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）为模型，分为对照组和纳米SiO2颗粒暴露组（浓度分别为12.5、25.0、50.0和100.0 mg•L^-1），采用MTT法测定细胞活力；乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞膜的完整性；流式细胞术（FCM）检测细胞内活性氧（ROS）水平；实时荧光定量PCR法检测细胞内核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶2（SOD2）和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位（GCLC）　mRNA表达水平。结果：MTT检测，与对照组比较，纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力降低，呈现明显的剂量依赖效应；当作用时间为12 h时，仅100.0 mg•L^-1纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力显著降低（P<0.05）；当作用时间延长至24 h，25.0～100.0 mg•L^-1纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力明显降低（P<0.05）；同一浓度作用下，随着作用时间的延长，细胞活力也呈现下降趋势，呈时间效应关系。LDH和FCM检测，与对照组比较，除12.5 mg•L^-1组外，其余纳米SiO2颗粒暴露组细胞培养液中LDH活力和细胞内ROS水平均明显升高（P<0.05），且随着暴露剂量的增加而逐渐升高。实时荧光定量PCR法检测，与对照组比较，100.0 mg•L-1纳米SiO2颗粒暴露组，细胞内Nrf2、HO-1、SOD2和GCLC mRNA表达水平均显著升高（P<0.05）。结论：纳米SiO2颗粒具有降低细胞活力、破坏细胞膜完整性、诱导ROS生成和转录调控氧化还原因子等血管内皮细胞毒性，氧化损伤是纳米SiO2颗粒发挥血管内皮细胞毒性的作用机制之一。

目的：探讨瘦素促进单核细胞THP1分泌趋化因子的作用及其相关机制，为研究瘦素调节机体免疫功能提供依据。方法：采用RT-PCR法和流式细胞术检测 THP1细胞瘦素受体 (Ob-Rb和Ob-Rt) 表达。选取对数生长期THP1细胞，随机分为空白对照组和10、50、100及200  μg•L^-1瘦素组，采用Transwell实验检测各处理组穿膜细胞数。THP1细胞分为空白对照组和100  μg•L^-1瘦素组，采用Western blotting法检测信号通路关键分子p-AKT、 p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平。THP1细胞分为空白对照组、100  μg•L^-1瘦素组、100  μg•L^-1瘦素+DMSO组、100  μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组、100  μg?L-1瘦素+10 μmol•L^-1 LY294002组和100  μg•L^-1瘦素+10 mol•L^-1PD980590组，采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组细胞因子IL-8表达水平。结果：瘦素长受体Ob-Rb和短受体Ob-Rt在THP1细胞中均有高表达。与空白对照组比较，50、100和200  μg•L^-1瘦素组穿膜细胞数明显增加(P<0.05)。与空白对照组比较，100  μg•L^-1瘦素组THP1细胞中p-AKT、p-ERK 1/2和p-STAT3表达水平明显升高 (P<0.05)。与空白对照组比较，50、100和200  μg•L^-1瘦素组THP1细胞中IL-8表达水平明显升高(P<0.05)；与100  μg?L-1瘦素组比较，100  μg•L^-1瘦素+10  μmol•L^-1 LY294002组和100  μg?L-1瘦素+10 mol•L^-1 PD980590组THP1细胞中IL-8表达水平明显降低(P<0.05)，而100  μg?L-1瘦素+50 μmol•L^-1 AG490组IL-8表达水平变化不明显 (P>0.05)。结论：瘦素能促进单核细胞T
HP1分泌趋化因子，其机制可能与 PI3K/AKT和MAPK/ERK 1/2信号通路有关。

目的：探讨转录因子FOXC2对乳腺癌MCF-7细胞血管生成的影响，阐明FOXC2促进肿瘤血管生成的作用机制。方法：应用FOXC2慢病毒基因转染技术将FOXC2基因和空载体基因分别转染至乳腺癌MCF-7细胞株中，获得稳定转染细胞株；实验分为未转染组、空载体组和过表达组。采用Matrigel基质胶血管形成实验和Transwell小室实验检测各组细胞上清作用下人脐静脉内皮细胞（HUVECs）成管能力和迁移能力，RT-PCR和Western blotting法检测各组细胞中FOXC2、DLL4和Notch1 mRNA和蛋白表达。结果：与未转染组和空载体组比较，过表达组MCF-7细胞上清诱导HUVECs闭合小管数和迁移细胞数增加（P<0.05）；FOXC2、DLL4和Notch1 mRNA和蛋白相对表达水平明显增加（P<0.05）。结论：MCF-7细胞中过表达FOXC2能显著增加HUVECs的成管能力和迁移能力，其机制可能是通过Notch信号通路来实现的。

目的：利用实时定量RT-PCR技术和双荧光蛋白报告基因分析系统检测miR-205在肺癌组织及A549细胞系中的表达水平以及其直接靶基因YES1，探讨miR-205抑制肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法: 实时定量RT-PCR技术检测10例肺癌组织和10例癌旁正常肺组织中miR-205的表达水平；miR-205 mimics和control mimics分别转染A549细胞，利用细胞计数和集落形成实验检测转染后A549细胞的增殖情况。选取表达绿色荧光蛋白的质粒 pcDNA3/EGFP，将YES1 3′UTR的一段特异性序列、YES1 3′UTR（miR-205互补位点）点突变后的序列分别插入该质粒中，构建YES1-3′UTR和mut-YES1-3′UTR的绿色荧光表达质粒。实验分为YES1-3′UTR、YES1-3′UTR与miR-205 mimics、YES1-3′UTR与control mimics、mut-YES1-3′UTR、mut-YES1-3′UTR与miR-205 mimics和mut-YES1-3′UTR与control mimics共6组，均与表达红色荧光蛋白pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系A549，荧光分光光度计进行蛋白定性和定量检测。结果：与癌旁正常肺组织比较，miR-205在肺癌组织及A549细胞中表达水平降低(P<0.05)；miR-205mimics 转染组A549细胞增殖率明显低于转染control mimics对照组（P<0.05）；YES1-3′UTR与miR-205 mimics共转实验组荧光蛋白表达水平低于YES1-3′UTR与control mimics共转染组（P<0.01）；YES1蛋白高表达组A549细胞细胞克隆形成数高于细胞对照组（P<0.05）。结论： miR-205可能通过靶定靶基因YES1抑制了肺癌细胞A549的增殖，提示miR-205和YES1有可能成为肿瘤生物治疗的新靶点。

目的: 探讨赖氨大黄酸（RHL）对糖尿病模型大鼠肝脏的保护作用，阐明RHL对肝脏的保护作用机制。方法：通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立大鼠糖尿病模型。将40只大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组、25和50 mg•kg^-1 RHL治疗组，每组10只。采用硫代巴比妥酸法检测肝脏组织中丙二醛(MDA) 水平，联苯三酚自氧化法和NADPH 偶联法分别检测超氧化物歧化酶(SOD) 和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性；HE染色观察肝脏组织病理学变化；Nile red染色观察肝脏组织脂肪水平；Western blotting法检测脂肪合成相关蛋白表达水平。结果：与对照组比较，糖尿病模型组大鼠体质量减低，血糖、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平升高(P<0.05)，肝脏组织中SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05)，肝脏组织出现大量脂肪空泡和脂肪蓄积。糖尿病模型大鼠脂肪合成信号通路ERK1/2-SREBP-1c被激活；与模型组比较，25和50 mg•kg^-1 1 RHL治疗组大鼠脂肪合成信号通路被抑制。与模型组比较，RHL治疗组大鼠体质量无显著变化，但血糖、TG和TC水平显著降低(P<0.05)，SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05)。与糖尿病模型组比较，RHL治疗组大鼠肝脏组织中的脂肪空泡和脂肪蓄积明显减少。结论：RHL能抑制氧化应激、肝脏脂肪变性和脂肪蓄积从而发挥对糖尿病大鼠肝脏的保护作用。

目的：构建 UCA1a(CUDR) 基因真核表达载体 pcDNA-UCA1a(CUDR)，观察其在膀胱癌 UM-UC-2 细胞中的表达，为研究 UCA1a(CUDR) 基因与膀胱癌的关系提供实验依据。方法：以膀胱癌 BLZ-211 细胞的 5′-RACE-Ready cDNA 为模板，采用 PCR 法克隆 UCA1a(CUDR) 全基因，经EcoRⅠ和 BamHⅠ双酶切后与真核表达载体 pcDNA3.1(＋) 连接，构建 pcDNA-UCA1a(CUDR) 重组质粒。双酶切及测序鉴定后，稳定转染至体外培养的人膀胱癌 UM-UC-2 细胞系，利用 RT-PCR法检测转染 pcDNA-UCA1a(CUDR) 的 UM-UC-2 细胞和转染空质粒 pcDNA3.1(＋) 的 UM-UC-2 细胞中 UCA1a(CUDR) 基因的表达。结果：克隆的目的基因片段约为 2 200 bp，与预期结果相符，表明成功扩增 UCA1a(CUDR) 基因；经双酶切及测序鉴定，成功构建真核表达载体pcDNA-UCA1a(CUDR)。半定量 RT-PCR 法检测，与转染空质粒的细胞比较，转染表达载体 pcDNA-UCA1a(CUDR) 的UM-UC-2 细胞中 UCA1a(CUDR) 基因表达量升高。结论：成功构建pcDNA-UCA1a(CUDR)真核表达载体，且UCA1a(CUDR) 基因在转染表达载体的 UM-UC-2 细胞中高表达。

目的：探讨大鼠孤束核(NTS)内谷氨酸受体亚型对心包内注射辣椒素诱发的心脏-躯体运动反射(CMR)的影响，阐明NTS对心脏伤害性信息调控的作用机制。方法：SD大鼠60只随机分为鹅膏蕈氨酸(IBO)组、谷氨酸组、5-甲基二氢丙环庚烯亚胺马来酸（MK-801）组、α-甲基，4-羧基苯丙氨酸（MCPG）组、MCPG联合MK-801组和6，7-二硝基喹喔啉-2，3-二酮（DNQX）组；各组大鼠孤束核内分别微量注射13 mmol•L^-1 IBO　100 nL,100、200、500 mmol•L^-1谷氨酸100 nL，NMDA受体拮抗剂 40和60 mmol•100•^-1 MK-801 100　nL，代谢型谷氨酸受体拮抗剂 25 和50 mmol•L^-1 MCPG 100 nL，25 mmol•L^-1MCPG 50 nL联合40 mmol•L^-1MK-801 50 nL，非NMDA受体拮抗剂20和50 mmol•L^-1 DNQX 100 nL；观察各组大鼠CMR的变化。结果：与对照组比较， IBO组大鼠CMR减少(P<0.05)；谷氨酸组随着谷氨酸浓度的增加，大鼠CMR不断增加(P<0.05)； MK-801和MCPG组CMR均减少(P<0.05)； MCPG联合MK-801组CMR减少(P<0.05)； DNQX组CMR无明显变化(P>0.05)。结论：NTS对心脏伤害性感受信息有易化调控作用，这种易化调节作用主要由NMDA和mGluRs受体介导。

目的：观察大鼠心脏-躯体运动反射（CMR），阐明中缝大核(NRM)对大鼠心脏伤害性感受的下行抑制性调控作用及其调控通路。方法：34只雄性健康SD大鼠随机分为NRM电刺激组（n=8）、NRM电刺激联合脊髓背外侧束（DLF）横断组（n=8）和NRM电刺激联合5-羟色胺（5-HT）受体拮抗剂鞘内微注射组（n=18）。所有大鼠均采用心包插管术制作为CMR模型，以心包内注入致痛剂辣椒素（CAP）所诱发的背斜方肌肌电（EMG）为检测指标，通过NRM区域放置刺激电极和(或)脊髓鞘内置管的方法，观察NRM高强度电刺激对CMR的下行调控作用及双侧DLF横断和鞘内5-HT受体拮抗剂注射对NRM下行调控作用的影响。 结果：给予NRM 75 μA 高强度电刺激后，CAP注射诱发的EMG反应与其未实施NRM电刺激前的基础对照比较明显减小（P<0.05）；实施双侧DLF横断后，NRM高强度电刺激后的EMG反应明显大于DLF横断前（P<0.05），且与其基础对照比较差异无统计学意义（P>0.05）；5-HT受体拮抗剂鞘内微注射后，NRM高强度电刺激后的EMG反应较鞘内注射前明显增加（P<0.05），但仍小于其基础对照（P<0.05）。 结论: NRM高强度电刺激对心脏伤害性感受具有下行抑制性调控作用，其下行抑制性调控通路主要由DLF所介导，且脊髓内5-HT能神经系统可能参与了源自NRM的抑制性调控过程。

目的：探讨红芪多糖对糖尿病肾病(DN)db/db小鼠肾功能和肾脏组织中葡萄糖转运蛋白-1(GluT-1)的mRNA和蛋白表达的影响，阐明其可能的作用机制。方法：将10只db/m小鼠作为正常对照组；50只肥胖型2型糖尿病模型db/db小鼠随机分为模型组，依那普利组，红芪多糖低、中和高剂量组；每组10只。正常对照组和模型组小鼠分别灌胃给予生理盐水0.5 mL•kg-¹•d^-1，其他各组小鼠分别灌胃给予依那普利10 mg•kg^-1•d^-1和红芪多糖100、200和400 mg•kg^-1•d^-1，共8周。苦味酸法测定小鼠血肌酐(SCr)水平，酶偶联速率法测定血尿素氮(BUN)水平，ELISA法测定24 h尿微量白蛋白(UMALB)水平；RT-PCR法测定小鼠肾脏组织中GluT-1 mRNA的表达；Western blotting法和免疫组织化学法测定小鼠肾脏组织中GluT-1蛋白的表达。结果：与模型组比较，依那普利组和红芪多糖各剂量组SCr、BUN、UMALB和GluT-1 mRNA及蛋白表达水平均降低，其中红芪多糖高剂量组和依那普利组降低明显(P<0.01)。HE及Masson染色，红芪多糖高剂量组小鼠肾小球内炎症细胞浸润较少，毛细血管腔通畅，肾小管及肾间质内胶原蛋白沉积不明显。结论：红芪多糖可改善db/db小鼠的肾功能并明显抑制GluT-1 mRNA和蛋白的表达，提示红芪多糖可能通过抑制肾小球系膜细胞膜上GluT-1的表达而延缓DN的发展。
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目的：探讨狂犬病病毒街毒株（RV）感染神经细胞的形态学表现，揭示狂犬病病毒致神经功能异常的机制。方法：体内实验，20只C57/BL小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只，实验组小鼠脑内接种30 μL　RV病毒液（10TCID50）,对照组小鼠脑内接种等量细胞维持液，利用抗RV抗体检测病毒抗原在小鼠脑组织的分布。体外实验，培养原代海马神经细胞，培养1周后，感染狂犬病病毒，免疫荧光检测感染72、96和120 h后病毒的增殖情况。结果：体内实验，狂犬病病毒感染4 d后，在海马CA1区锥状神经元胞体和树突中均能检测到狂犬病毒抗原；狂犬病病毒感染7 d后，仅在海马CA1区胞体中检测到狂犬病病毒抗原。体外实验，狂犬病RV感染体外培养的原代神经细胞120 h后，感染的神经元数量最多，且感染的神经元树突数量减少。结论：狂犬病RV可感染、损伤海马CA1区树突，从而引起小鼠神经功能异常。

目的：构建高效分泌表达重组人淀粉样蛋白前体Kunitz型蛋白酶抑制剂结构域变异体（rhKD/APPvar）的毕氏酵母工程菌，建立适合大规模发酵、纯化rhKD/APPvar的工艺。方法：利用已构建的rhKD/APP表达质粒，在其活性中心两侧设计2个酶切位点（ApaⅠ和SacⅡ），实现人KD/APP活性中心RAM与BPTI活性中心KAR的替换,构建rhKD/APPvar表达质粒。将重组质粒转化到酵母菌X-33中，优化rhKD/APPvar表达最佳pH值，使rhKD/APPvar获得高效表达。利用阳离子交换树脂和超滤除盐对重组蛋白进行纯化。结果：酶切鉴定和测序分析显示成功构建了KD/APPvar-pPICZαC重组质粒。经电转化成功地将重组质粒转化至酵母菌X-33中。SDS-PAGE分析，甲醇诱导表达后在相对分子质量约6 700处出现蛋白条带，pH 6.0、甲醇诱导 120 h蛋白表达水平最高，经纯化获得纯度达95%的重组蛋白。结论：成功构建KD/APPvar- pPICZαC重组质粒，经毕赤酵母表达和纯化获得了rhKD/APPvar蛋白。

目的：研究二甲双胍对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞生长的影响，初步探讨二甲双胍抑制Dami细胞增殖的分子机制。方法：将培养的Dami细胞分为空白对照组,1、2、4、8、16和32 mmol?L-1二甲双胍处理组；MTT法检测不同浓度二甲双胍作用后Dami细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞周期分布，免疫印迹分析Cdc2和Cyclin B1蛋白的表达以及Cdc2蛋白的磷酸化修饰。结果：MTT检测，与空白对照组比较，32 mmol/L二甲双胍处理组0、24、48、72和96 h Dami细胞增殖抑制率明显升高［（35.1±2.3）%、（49.7±5.1）%、（78.8±0.9）%、（79.1±3.0）%和（85.2±3.2）%］（P<0.01）；在二甲双胍处理72 h后，1、2、4、8、16和32 mmol/L处理组Dami细胞增殖抑制率分别为（33.8±1.3）%、（51.9±2.2）%、（59.4±1.6）%、（65.5±2.0）%、（75.5±0.9%）和（79.1±3.0）%，二甲双胍对Dami细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测，与空白对照组比较，1、2和4 mmol/L二甲双胍处理组G2/M期细胞比例从（26.0±0.5）%升高至（38.5±1.5）%、（48.4±1.1）%和（58.2±2.7）%，4 mmol?L-1二甲双胍处理组G2/M期细胞比例明显高于对照组（P<0.01）。免疫印迹分析，与空白对照组比较，4 mmol/L二甲双胍处理组Cdc2和Cyclin B1的表达水平明显下降，Cdc2在Try15位点磷酸化明显上调，而在Thr161位点的磷酸化明显下调。结论：二甲双胍能抑制Dami细胞增殖并诱导其发生G2/M期阻滞，其机制可能与Cdc2/Cyclin B1复合物的活化受到抑制有关。

目的：评价超滤技术去除纯化后重组MUC1-MBP融合蛋白（MUC1-MBP）溶液中内毒素的效果，阐明超滤技术对去除内毒素的作用。方法：选取表达MUC1-MBP大肠杆菌基因工程菌，分别通过CM Sepharose FF离子交换层析(CM)(CM组)、CM联合Phenyl Sepharose 6 FF疏水层析（C6）(CM+C6组)、CM加超滤(CM+超滤组)以及CM联合C6加超滤(CM+C6组+超滤)进行纯化，并去除内毒素；采用SDS-PAGE 分析蛋白纯度；鲎试剂显色基质法检测内毒素表达水平。结果：SDS-PAGE分析，在预期相对分子质量62 000处呈现单一条带，Quantity One 分析纯度>96%；CM组与CM+C6组内毒素表达水平均较高，但2组比较差异无统计学意义（P>0.05）；与CM组比较，CM+超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）；与CM+C6组比较，CM+C6超滤组内毒素表达水平明显降低（P<0.01）；CM+超滤组与CM+C6＋超滤组内毒素表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：CM或CM联合C6均不能有效去除内毒素，其中C6对去除内毒素几乎无作用；CM加超滤可有效去除内毒素，超滤技术在去除内毒素中发挥重要作用。

目的：探讨1-甲基海因（1-MH）对哮喘及咳嗽动物模型的干预作用，初步阐明其作用机制。方法：选取50只Wistar大鼠，采用卵清蛋白诱发大鼠哮喘后随机分为模型对照组1-MH 20、40、80 mg?kg-1剂量组和阳性对照组（氨茶碱60 mg?kg-1），另取10只Wistar大鼠作为空白对照组。收集各组大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF），测定白细胞介素5（IL-5）、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）水平及嗜酸性粒细胞（EOS）计数；选取40只引喘合格豚鼠随机分为模型对照组，1-MH 15、30和60 mg?kg-1剂量组及阳性对照组（氨茶碱50 mg/kg），记录各组豚鼠哮喘发生潜伏期；选取豚鼠10只，取支气管放于Krebs液中，记录并计算0.25、0.50 和 1.00 g/L1-MH 对抗磷酸组胺的解痉百分率；选取引咳合格小鼠50只，随机分成1-MH 25、50和100 mg?kg-1剂量组及阳性对照组（可待因50 mg/kg），记录各组小鼠咳嗽潜伏期及3 min内的咳嗽次数；选取引咳合格豚鼠40只，随机分成1-MH 15、30和60 mg/kg剂量组及阳性对照组（可待因20 mg/kg），记录各组豚鼠咳嗽潜伏期及5 min内的咳嗽次数。结果：与致敏模型对照组比较，1-MH 40和80 mg/kg剂量组大鼠BALF中IL-5、Eotaxin水平及EOS计数明显降低（P<0.05或P<0.01）；与乙酰胆碱诱导哮喘模型对照组比较，1-MH 30和60 mg/kg剂量组豚鼠哮喘发生潜伏期明显延长（P<0.05或P<0.01）；与空白对照组比较，1-MH 0.50和 1.00 g/L剂量组豚鼠离体气管平滑肌的解痉百分率明显升高（P<0.01）；与小鼠咳嗽模型对照组比较，1-MH 50和100 mg/kg剂量组小鼠咳嗽潜伏期延长，咳嗽次数减少（P<0.05或P<0.01）；与豚鼠咳嗽模型对照组比较，1-MH 30和 60 mg/kg剂量组豚鼠咳嗽潜伏期延长，咳嗽次数减少（P<0.05或P<0.01）。结论：1-MH具有良好的平喘及镇咳作用，平喘作用可能与其抑制气道炎症和直接舒张支气管平滑肌有关。

目的：观察眼针对局灶性大脑中动脉缺血再灌注（MCAO/R）模型大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中脑原性神经生长因子（BDNF）和酪氨酸激酶受体B（TrkB）表达水平的影响，探讨眼针对缺血性脑病的脑保护作用机制。方法：62只SD大鼠随机分为空白对照组（11只）、假手术组（11只）和模型复制组（40只）。模型复制组大鼠采用线栓法建立脑缺血再灌注模型，将模型复制成功的大鼠（32只）随机分为模型组（16只）及眼针组（16只）；眼针组大鼠参照人体取穴方法，取肝区、上焦区、下焦区和肾区进行针刺干预。再灌注后2 h即开始针刺，每8 h 1次，连续针刺10次，末次干预后30 min，断髓处死大鼠，剥离缺血区域周围半暗带部位的脑组织，采用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠脑组织中BDNF和TrkB mRNA及蛋白表达水平。结果：与空白对照组比较，假手术组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均无明显变化（P>0.05）；与假手术组比较，模型组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.01）；与模型组比较，眼针组MCAO/R模型大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平上升（P<0.05或P<0.01）。结论：脑缺血再灌注损伤发生后可促进BDNF及其受体TrkB表达以对抗损伤。眼针可通过上调BDNF及其受体TrkB表达水平实现其脑保护作用。

目的: 研究雄性大鼠青春前期灌胃摄入外源性雌激素苯甲酸雌二醇（EB）对生殖系统发育的影响及停止干预后机体自然修复情况，阐明外源性雌激素产生生殖毒性的可能机制。方法:选择21日龄雄性Wistar大鼠90只，随机分为对照组、低剂量EB组和高剂量EB组，每组30只。于青春前期，即出生后第21天（PND21）时低剂量EB组和高剂量EB组分别灌胃给予15和15 000  μg?kg-1 EB，对照组仅给予等剂量的溶媒花生油，隔日1次，连续给药2周，停药后正常饲养，于性成熟期（PND60）及自然恢复65 d（PND125）时分批从每组中随机抽取15只大鼠处死取材，放射免疫法检测大鼠血清卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、催乳素（PRL）、睾酮（T）和雌二醇（E2）水平，称量睾丸质量，光学显微镜观察睾丸组织形态学表现。结果: 染毒2周后饲养至生后60 d解剖大鼠，与对照组比较，低和高剂量EB组大鼠血清T水平均降低（P<0.05或P<0.01）,FSH、LH及E2水平均升高 (P<0.05或P<0.01),PRL水平无明显变化（P>0.05），睾丸质量均下降（P<0.01）；睾丸组织切片可见睾丸生精小管排列欠致密，小管间隙增大，生精上皮中生精细胞层数减少。与低剂量EB组比较,高剂量EB组大鼠血清T和FSH水平降低(P<0.05或P<0.01)，E2和LH水平升高( P<0.01)，PRL水平无明显变化（P>0.05），高剂量睾丸质量降低(P<0.01)；睾丸组织切片可见管径较小，高剂量EB组未见精子，低剂量EB组可见少量精子。经自然恢复65 d后，与对照组比较，低和高剂量EB组大鼠血清T、FSH和PRL水平均降低(P<0.01)，E2水平升高( P<0.01)；低剂量EB组大鼠血清LH水平升高（P<0.05）；高剂量EB组大鼠血清LH水平降低(P<0.01)，睾丸质量降低（P<0.01），睾丸组织切片可见管径较恢复前无明显变化，生精细胞层数较恢复前增多，但仍少于对照组；与低剂量EB组比较，高剂量EB组大鼠血清T和LH水平降低（P<0.01），FSH和E2水平升高（P<0.01），PRL无明显变化（P>0.05），睾丸质量降低（P<0.01）；睾丸组织切片可见生精小管，与恢复前比较无明显变化，高剂量EB组仍未见成熟精子细胞,低剂量EB组可见精子数较恢复前增多，但仍少于对照组。结论: 外源性雌激素可导致血清性激素分泌紊乱和生殖系统损伤，严重时甚至可引起不可逆损伤。

摘 要］ 目的：动态观察术后早期进食对兔胃肠吻合口愈合的影响，初步阐明胃肠道手术术后早期进食与兔胃肠吻合口瘘的形成及愈合时间的关系。方法：将48只家兔随机分为实验组与对照组，每组24只，均行胃肠吻合术，实验组家兔于术后24 h进全流食，对照组家兔术后全程禁食水，予以静脉提供能量。分别于术后36 h、72 h、5 d、7 d、10 d和15 d每组取2只家兔行剖腹探查，观察2组家兔吻合口愈合率、吻合口破裂压力、吻合口抗张力强度和吻合口羟脯氨酸水平。结果：对照组家兔吻合口愈合率为91.6%（22/24），实验组家兔吻合口愈合率为95.8%（23/24），2组家兔吻合口愈合率比较差异无统计学意义（P>0.05）；术后72 h 2组吻合口破裂压力明显降低，为各自最低值，术后5 d 2组吻合口破裂压力明显上升，实验组破裂压力略低于对照组，术后7 d对照组达到峰值，术后10 d对照组破裂压力较术后7 d略微下降，实验组此时达到峰值，各时间点2组吻合口破裂压力比较差异无统计学意义（P>0.05）；术后72 h 2组吻合口抗张力强度差异不明显，2组均达到最低值。术后10 d 2组吻合口抗张力强度均显著上升，达到各自最大值，各时间点2组间吻合口抗张力强度比较差异无统计学意义（P>0.05）；术后72 h实验组吻合口羟脯氨酸水平略低于对照组，术后7 d 2组均达到峰值，各时间点2组间吻合口羟脯氨酸水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：术后早期进食不会延长吻合口的愈合时间，不会增加吻合口瘘发生的几率。

目的：探讨银丹心脑通软胶囊对大鼠急性心肌梗死（AMI）后心肌组织中骨桥蛋白（OPN）表达的影响，阐明银丹心脑通软胶囊改善大鼠AMI的作用机制。方法：将90只Wistar大鼠结扎冠脉前降支建立AMI模型，术后存活动物随机分为模型组、银丹心脑通软胶囊小剂量组（银丹心脑通软胶囊0.8 g/kg/d）、银丹心脑通软胶囊大剂量组（银丹心脑通软胶囊1.6 g/kg/d ）、阳性药卡托普利组（卡托普利5 g/kg/d），每组12只，同时设假手术组(只穿线不结扎)(n=10)，连续给药4周。HE和Masson染色观察各组大鼠心肌组织学表现；脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL） 原位检测凋亡细胞的DNA碎片，计算凋亡指数（AI）；RT-PCR法检测非梗死区心肌中OPN mRNA表达水平。结果：与假手术组比较，模型组大鼠AI明显升高(P<0.05)；与模型组比较，各给药组大鼠AI明显降低（P<0.01）；与卡托普利组比较，银丹心脑通大剂量组大鼠AI明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)，银丹心脑通小剂量组大鼠AI无明显改变(P>0.05)。RT-PCR检测，与假手术组比较，模型组大鼠左心室非梗死区心肌组织中OPN mRNA表达水平明显升高(P<0.01)；与模型组比较，各给药组大鼠左心室非梗死区心肌组织中OPN mRNA表达水平明显降低（P<0.01）；与卡托普利组比较，银丹心脑通大剂量组大鼠左心室非梗死区心肌组织中OPN　mRNA表达水平明显降低(P<0.05)，而银丹心脑通小剂量组OPN　mRNA表达水平无明显改变（P>0.05）。结论：银丹心脑通软胶囊能够显著改善心肌梗死后大鼠心肌组织细胞凋亡，降低左心室非梗死区OPN mRNA表达水平，提示银丹心脑通软胶囊对大鼠AMI的心肌保护作用可能与降低OPN mRNA表达有关。

目的：测定碳纤维增强型聚醚醚酮(CF/PEEK)的力学性能，评价其植入下颌骨后的生物相容性及生物活性。方法：将27只成年日本大耳白兔随机分为实验组（9只）和对照组（18只），建立双侧下颌骨单层骨皮质缺损模型。实验组白兔双侧下颌骨植入长条形CF/PEEK复合材料，对照组白兔左侧下颌骨植入自体骨（阳性对照组），右侧不植入任何材料（空白对照组），分别于术后8、12和16周处死白兔（每组3只），截取缺损区颌骨，对标本的材料-骨界面进行大体、影像学和光镜观察，并进行局部组织学评分。结果：大体观察，白兔术后均未出现感染及二次骨折。影像学观察，实验组及阳性对照组白兔颌骨缺损区有明显骨痂形成，修复效果好于空白对照组。组织学观察，与术后第8周比较，术后第12周实验组、阳性对照组和空白对照组局部细胞免疫定量评分明显减小（P<0.01），第16周时最小（P<0.05）；实验组、阳性对照组和空白对照组在相同时间点的局部免疫细胞评分比较差异无统计学意义（P>0.05）。第16周时实验组材料周围及阳性对照组缺损区有大量骨小梁形成和成骨细胞散布于骨小梁周围。空白对照组骨缺损处由大量纤维结缔组织填充。随观察时间的延长，实验组及阳性对照组成骨率增高，优于空白对照组（P<0.01）。结论：CF/PEEK复合材料有较好的力学性能，植入白兔下颌骨后免疫反应小，且具有良好的生物相容性及生物活性。

目的：观察不同时间点Cy5标记寡脱氧核苷酸（ODN）MT01在大鼠体内重要脏器组织中的分布，初步探讨其分布的规律性。方法：选取60只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组，每组30只；实验组大鼠牙龈黏膜局部注射Cy5标记的MT01，对照组大鼠牙龈黏膜局部注射未经标记的MT01；于注射后15 min、1 h、4 h、8 h、16 h、1 d、2 d、3 d、4 d和5 d分别取大鼠肺、肝、脾、肾、心和脑组织；激光共聚焦显微镜下观测大鼠重要脏器组织中MT01的荧光分布，以荧光阳性细胞率表示各脏器组织内MT01进入各组织细胞量。结果：对照组大鼠重要脏器组织中未观察到荧光阳性细胞；实验组大鼠除心、脑组织外，肺、肝、脾和肾组织细胞中均可观察到荧光阳性细胞；肾组织中荧光阳性细胞呈片状分布，荧光主要集中于肾小管上皮细胞的胞质中；肝、脾和肾组织的荧光阳性细胞率呈规律性变化，峰值分别出现在注射后4、3和4 d时，肺组织的荧光阳性细胞率未见明显规律性。结论：MT01经大鼠牙龈局部注射后可进入肺、肝、脾和肾组织，主要集中在肾脏组织中，且分布具有一定规律性。

目的:研究新型组织工程纳米材料丝素蛋白/左旋聚乳酸（SF/PLLA）无纺网的生物相容性和安全性，探讨其作为生物植入材料的可行性。方法:采用静电纺丝方法制备SF／PLLA复合组织工程纳米材料，制备浸提液，并以生理盐水作为对照，注射入小鼠体内，观察2周内小鼠的一般情况和不良反应；将材料植入小鼠背部，以3-0缝线作为对照，于术后1、2、3和4周分别取材，HE染色并拍照，比较实验组与对照组周围组织的炎症反应情况；培养兔膝关节软骨细胞，传代后接种至材料表面，在体外继续培养，倒置光学显微镜观察细胞的黏附和生长情况。将关节软骨细胞分为阴性对照组 (空白培养液) 、实验组（含材料的培养液）和阳性对照组 (含苯酚培养液),不同组材料浸提液与细胞共培养 24和48 h,MTT法检测材料对软骨细胞增殖的影响。结果：注射浸提液后小鼠的全身状况与注射生理盐水后无差别；材料植入小鼠背部后，开始有少量成纤维细胞长入材料中，伴随出现少量的淋巴细胞及异物巨细胞，随后成纤维细胞数量增加，淋巴细胞及异物巨细胞无明显增多，材料慢慢降解，直至第4周时材料出现明显的降解；材料周围组织炎症反应，第2周时最严重，然后逐渐减轻，其周围组织炎症反应与缝线周围组织一致或略轻；将细胞接种于支架上24 h 后有细胞贴附于材料纤维上,48 h后贴附于纤维上的细胞数量增多。MTT法检测，实验组24和48 h细胞毒性均为Ⅰ级。除阳性对照组外，其他各组随着培养时间的延长,吸光度（A）值均增加；同一时间点，实验组与阴性对照组A值比较差异无统计学意义（P>0.05）,与阳性对照组比较A值明显升高 (P<0.01)。结论：SF/PLLA无纺网支架材料属于安全植入性材料，具有良好的生物相容性。

目的：构建细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)糖基化位点突变质粒，探讨其与肿瘤细胞增殖的关系。方法：利用PCR定点诱变技术构建EMMPRIN糖基化位点突变质粒。突变成功后，对突变质粒进行功能检测，Western blotting 法检测EMMPRIN蛋白表达；免疫荧光法检测细胞形态学变化；MTT法检测突变质粒与肿瘤细胞增殖的关系。结果：酶切鉴定和测序证实，将EMMPRIN序列中第44、152和186位的天冬酰胺突变成谷氨酰胺，成功构建EMMPRIN/GFP(N44Q)、EMMPRIN/GFP(N152Q)和EMMPRIN/GFP(N186Q)糖基化单点突变质粒；糖基化位点突变后，突变型细胞核分裂相显著减少，伪足数减少；MTT法检测，与对照组比较，野生型组细胞存活率明显升高（P<0.05）；而EMMPRIN糖基化位点突变后，与野生型比较，EMMPRIN（N44Q）、EMMPRIN（N152Q）和EMMPRIN（N186Q）细胞存活率均明显降低（P<0.05）。结论：EMMPRIN突变型能抑制肿瘤细胞的增殖，且随作用时间增加，抑制作用减弱；EMMPRIN糖基化修饰与肿瘤细胞的增殖有关联。

目的：通过检测慢性酒精中毒及葛根素预处理后的小鼠结肠Cajal间质细胞（ICC）形态、数量以及C-kit蛋白表达的变化，探讨葛根素对酒精中毒小鼠结肠组织的保护作
用。方法：选取健康雄性BALB/C 小鼠24只，随机分为盐水对照组、慢性酒精中毒组和葛根素预处理组，每组8只。慢性酒精中毒组和葛根素预处理组小
鼠建立慢性酒精中毒动物模型。通过测量印度墨汁推进长度测定肠道传输速率，应用免疫荧光和透射电镜技术检测ICC分布、数量以及超微结构
的改变，采用Western blotting方法分析C-kit蛋白的表达。结果：葛根素预处理组肠道传输速率较慢性酒精中毒组明显增加(P<0.05)，但仍低于盐水对照组（P<0.05）；葛根素预处理组结肠内ICC的数量较慢性酒精中毒组增多（P<0.05），与盐水对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；与盐水对照组比较，慢性酒精中
毒组小鼠结肠 ICC的超微结构发生明显改变，线粒体等细胞器明显减少，葛根素预处理组小鼠结肠ICC的超微结构基本恢复正常，线粒体等细胞器明显增加；葛根素预处理组小鼠结肠组织中C-kit蛋白表达水平明显高于慢性酒精中毒组（P<0.05），与盐水对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：葛根素干预对酒精造成的Cajal间质细胞数量、超微结构及C-kit表达的改变有一定的修复或逆转作用。

目的：探讨硫化氢（H2S）对高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞线粒体功能的影响，阐明其在高肺血流性肺动脉高压形成中的作用及其机制。方法：将27只大鼠随机分为假手术组、手术组和手术+硫氢化钠（NaHS）组，每组9只。行左肺切除术建立大鼠肺动脉高压模型。饲养35 d后，分别测定3组大鼠肺动脉平均压（mPAP），检测右心室/ 体质量(RV/BW) 和右心室/（左心室+ 室间隔）［RV/(LV + S)］ 比值。检测各组大鼠血浆H2S水平和肺动脉组织中硫化氢还原酶（CSE）活性；测定线粒体总ATP酶、超氧化物歧化酶（SOD）、谷甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）水平；透视电镜观察肺动脉平滑肌线粒
体超微结构。结果：与假手术组比较，手术组大鼠血浆H2S水平和肺动脉组织中CSE活性降低(P< 0.01)；肺动脉组织线粒体膜肿胀,线粒体活力下降(P<0.01)；线粒体中ATP 酶、SOD、GSH-Px 活性明显降低，MDA水平明显升高(P<0.01) 。与手术组比较,手术+NaHS组大鼠血浆H2S 水平和肺动脉组织中CSE 活性均升高( P< 0.01)； 线粒体膜肿胀度减轻，活力有所恢复； 肺动脉组织中 ATP 酶、GSH-Px和SOD的活性明显升高( P< 0.01)，MDA水平明显减少( P<0.01)。结论：H2S可增强线粒体ATP 酶、GSH-Px和SOD的活性,降低线粒体脂质过氧化水平，起到对大鼠肺动脉平滑肌的保护作用。

目的： 探讨尼莫地平对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑神经元的保护作用及其对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响并阐明其作用机制。方法：30只雄性Wistar大鼠随机分
为假手术组、模型组和尼莫地平组，每组10只。采用线栓法堵塞大鼠大脑中动脉制作脑缺血再灌注损伤模型。缺血2 h再灌注2 h后进行神经功能学评分。之后断头取脑，应用TUNEL染色及SP免疫组织化学方法观察脑组织梗死情况并检测Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果：与模型组比较，尼莫地平组大鼠脑组织凋亡细胞数明显减少(P<0.05)，Bax蛋白表达水平减少(P<0.05)，Bcl-2蛋白表达水平增加(P<0.05)。形态学观察，模型组大鼠脑细胞坏死严重，水肿明显；尼莫地平组大鼠脑组织坏死细胞数减少，水肿情况有所改善。结论：尼莫地平对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织具有保护作用，其作用可能是通过下调Bax和上调Bcl-2相关蛋白表达从而抑制
脑神经元凋亡实现的。

目的：探讨电针对高脂高胆固醇造模的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠的脂质调节作用，阐明血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平以及肝X受体α (LXR-α)和肝脏固醇调节元
件结合蛋白-1c (SREBP-1c)表达的调节作用机制。方法：44只雌性SD大鼠适应性喂养7 d，随机分为正常组、模型组、东宝肝泰组和电针组，每组11只。正常组大鼠用标准饲料喂养，其余各组大鼠用高脂高胆固醇饲料喂养。8周后电针组针刺“肝俞”、“脾俞”和“膈俞”进行治疗，电压9 V，电流强度1~3 mA，频率为1.5~2.0 Hz，疏密波，留针15 min，每天1次，连续28 d。检测各组大鼠空腹血糖（FBG）、血清游离脂肪酸(FFA)和肝组织匀浆甘油三酯（TC）、总胆固醇（TG）的变化，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清RBP4水平，采用Western blotting法检测大鼠肝组织中LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠的FBG、FFA、肝组织匀浆中TC和TG以及血清RBP4水平升高（P<0.01），LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平也升高（P<0.01）；与模型组比较，电针组和东宝肝泰组大鼠FBG、FFA、肝组织匀浆TC和TG水平下降（P<0.05或P<0.01），血清RBP4水平下降（P<0.01），LXR-α和SREBP-1c蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：电针“肝俞”、“脾俞”、“膈俞”能降低NAFLD大鼠血清RBP4水平，调节脂质代谢，改善脂质沉积，对NAFLD有明显的治疗作用，其机制可能与抑制肝组织中LXR-α和SREBP-1c蛋白表达上调有关。

目的：探讨盐霉素对人膀胱癌5637细胞生长、凋亡和侵袭力的影响，阐明其可能的作用机制。方法：取体外培养的对数生长期人膀胱癌5637细胞，分为空白对照组和不
同剂量（15、30和60 μmol?L-1）盐霉素组。MTT比色法检测各组人膀胱癌5637细胞的生长抑制率，流式细胞术检测各组人膀胱癌5637细胞的细胞凋亡率，Matrigel侵袭实验检测各组人膀胱癌5637细胞的侵袭能力，Western蛋白印迹实验检测各组人膀胱癌5637细胞中Wnt/β-catenin途径β-catenin蛋白表达水平。结果：与空白对照组比较，各剂量盐霉素组膀胱癌5637细胞的生长抑制率明显升高（P<0.05），细胞凋亡率明显升高（P<0.05），细胞穿膜数目减少（P<0.05），β-catenin蛋白表达水平减少（P<0.05）。与低剂量(15 μmol?L-1)盐霉素组比较，高剂量(60 μmol?L-1)盐霉组人膀胱癌5637细胞生长抑制率升高（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞穿膜数目减少（P<0.05），β-catenin蛋白表达量减少（P<0.05）。结论：盐霉素对人膀胱癌5637细胞的生长有较明显抑制作用，促进细胞凋亡，
降低细胞侵袭力，并且这种抑制作用可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号传导途径来实现的。

目的： 探讨肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺致生精障碍小鼠的治疗作用，并初步阐明作用机制。方法：乙醇浸提法提取肉苁蓉苯乙醇苷。40只BALB/C小鼠随机分为对照组、
模型组、肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组（50 mg/kg^-1）和高剂量组（100 mg/kg^-1）,每组10只。除对照组外，其余各组小鼠每天注射环磷酰胺（80 mg?kg-1）连续5 d，制备生精障碍小鼠模型。末次给药后，肉苁蓉苯乙醇苷低剂量组和高剂量组小鼠分别给予相应剂量灌胃，对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水灌胃，每天1次，连续30 d。末次灌胃后24 h，取小鼠睾丸组织。酶联免疫法测定小鼠睾丸组织匀浆中睾酮水平，比较各组小鼠精子密度、精子活率及精子畸形率，HE染色观察睾丸组织形态学变化。结果：与对照组比较，模型组小鼠精子密度和精子活率降低（P<0.01），精子畸形率升高（P<0.01），睾丸组织匀浆中睾酮水平降低（P<0.01）；与
模型组比较，肉苁蓉苯乙醇苷各剂量组小鼠精子密度和精子活率明显升高（P<0.01），精子畸形率降低（P<0.01），睾丸组织匀浆中睾酮水平升高（P<0.05或P<0.01）。组织学观察，模型组小鼠睾丸生精小管萎缩、退化，生精上皮明显变薄、生精细胞排列紊乱，腔内精子数目减少；肉苁蓉苯乙醇苷组小鼠睾丸生精上皮层数明显增多，层次分明，生精细胞排列整齐、紧密、规则，管腔内可见精子。结论：肉苁蓉苯乙醇苷对环磷酰胺所致小鼠生精障碍具有明显的治疗作用，其机制可能与改善睾丸组织中睾酮水平有关。

目的：探讨Akt抑制剂MK2206对舌鳞状细胞癌(舌鳞癌)TCA-8113细胞增殖和凋亡的影响，并阐明其可能的作用机制。方法：取处于对数生长期舌鳞癌TCA-8113细胞株随机分为对照组和1、5、25、125及250 nmol/L MK2206实验组。在不同剂量及时间处理因素下，采用MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率，蛋白质印迹分析检测细胞中caspase-9、Bad 、GSK-3β、p-Akt和T-Akt蛋白表达水平。 结果：舌鳞癌TCA-8113细胞在MK2206
作用12、24和36 h的半数抑制浓度（ＩＣ５０）分别为（112.54±1.67）、（79.67±2.01）和(33.33±1.98） nmol/L。FCM法检测，1、5、25、125和250 nmol?L-1 MK2206作用舌鳞癌TCA-8113细胞12 h后，细胞凋亡率分别为（14.2±0.74）%、（19.3±0.45）%、（35.1±0.45）%、（39.6±0.48）%和（52.1±0.19）%，与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.01）。蛋白质印迹分析,随着MK2206药物剂量和作用时间的增加，p-Akt、Bad 和GSK-3β蛋白表达水平下降，与对照组β-actin比较其条带的颜色变暗；caspase-9蛋白表达水平升高，与对照组β-actin比较其条带的颜色变深。T-Akt蛋白表达变化不明显，与对照组β-actin比较条带的颜色无明显不同。结论：Akt抑制剂MK2206可抑制舌鳞癌TCA-8113细胞增殖并诱导凋亡。

目的：探讨RNA干扰酪蛋白激酶2（CK2α）基因表达后对HCT116细胞生长的抑制作用并阐明其作用机制。方法：针对CK2α的mRNA序列设计CK2α-siRNA序列，将体外培养的HCT116细胞分为正常对照组(未转染)、阴性对照组(转染siRNA)和CK2α-siRNA组(转染CK2α-siRNA),应用Lipofectamine 2000进行转染，利用Western blotting 法检测CK2α、cyclin H、P53和P21蛋白表达水平；应用MTT法检测各组HCT116细胞增殖；采用流式细胞术检测细胞周期时相的分布。结果：与阴性对照组比较，CK2α-siRNA组CK2α和细胞周期蛋白cyclin H的表达水平明显降低（P<0.01），P53蛋白表达水平无明显变化（P>0.05），P21蛋白表达水平则明显升高（
P<0.01）；MTT检测，与阴性对照组比较，转染48和72 h，CK2α-siRNA组细胞存活率明显降低（P<0.01）；流式细胞术分析，与阴性对照组比较，CK2α-siRNA组S期细胞所占比例逐渐减少（P<0.01），G1期细胞则明显增加（P<0.01），细胞滞留在G1期。结论：RNA干扰CK2α表达能够抑制HCT116细胞增殖，发生G1期阻滞；其机制可能与RNA干扰CK2α表达后cyclin H表达下调及P53活性恢复有关。

目的：探讨中国人群血管性认知功能障碍（VCI）发生的主要危险因素，为VCI的防治提供科学依据。方法：计算机检索2002年1月—2013年1月PubMed数据库、中国期刊全文数据库（CNKI）、中国生物医学文献数据库（CBM）、中国科技期刊全文数据库（VIP）和万方数据库公开发表的有关中国人群VCI危险因素的观察性研究文献；采用Meta分析方法对文献进行定量综合分析，计算合并相对危险度（OR）或均差（MD）及其95%可信区间（95%CI）。结果：共纳入42篇合格文献，累计病例3 282例
，对照7 815例。分类型变量因素与VCI关系的合并OR及OR　95%CI分别为：高血压2.56(2.03~3.21)、高血脂1.79(1.39~2.30)、高血糖2.46(1.90~3.19)、脑白质稀疏病变5.46(2.60~11.46)、脑梗死多发病灶4.39(2.61~7.38)、多次脑卒中史3.79(2.35~6.11)、左半球梗死病变2.13(1.42~3.20)、吸烟1.51(1.08~2.11)、饮酒0.99(0.73~1.36)、基底节部位梗死2.15(1.55~2.99)和丘脑部位梗死2.34(1.57~3.47)；连续型变量因素与VCI关系的MD及MD 95%CI分别为：甘油三酯水平0.35(0.15~0.55)、总胆固醇水平0.44(－0.16~1.04)、叶酸水平－4.10(－5.50~－2.69)和维生素B12水平－130.44(－225.46~－35.41)。结论：除饮酒和总胆固
醇水平外，高血压、高血脂、高血糖、脑白质稀疏病变、脑梗死多发病灶、多次脑卒中史、左半球梗死病变、吸烟、基底节部位梗死、丘脑部位梗死、甘油三酯水平高、叶酸水平低和维生素B12水平低均可能是中国人群VCI发生的危险因素。
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目的：探讨慢性丙型肝炎（CHC）患者抗病毒治疗后甲状腺功能动态变化和转归，阐明基线因素对甲状腺功能改变的影响。方法:取基线甲状腺功能正常的CHC患者243例，均给予干扰素-α2b联合利巴韦林抗病毒治疗48周，分别在12、24、36、48、60和72周时对甲状腺功能和HCV RNA定量等进行检测，根据治疗后甲状腺功能变化情况分为持续正常组、亚临床甲状腺功能减退(亚甲减)组、甲状腺功能减退(甲减)组和甲状腺功能亢进(甲亢)组，观察各组患者甲状腺功能变化的规律。结果:82例（33.7%）患者发生甲状腺功能改变，其中亚甲减51例（20.9%），甲减13例（5.3%），甲亢18例（7.4%）。随访至72周时，亚甲减、甲减
、甲亢患者恢复正常的分别为32例（39.0%）、12例（14.6%）和7例（8.5%），甲减转变为亚甲减的为6例（7.3%），甲亢转变为亚甲减的为3例（3.7%）；19例（23.2%）患者病情无明显改善，1例（1.2%）表现为持续亚甲减，13例（15.9%）持续甲减，5例（6.1%）持续甲亢；3例（3.7%）患者由甲亢转变为甲减。女性甲减发生率高于男性（P<0.05）；发生甲亢患者平均年龄低于甲减、亚甲减及持续正常患者（P<0.05）；发生甲亢和甲减患者基线γ-谷氨酰转肽酶水平低于亚甲减和持续正常者（P <0.05）；发生甲亢患者中HCV 2a型患者所占比例明显高于发生甲减、亚甲减及持续正常者（P <0.05）。结论:CHC患者抗病毒治疗可使甲状腺功能发生改变，性别、年龄、肝功能和基因型对甲状腺功能改变具有预测意义。

目的：比较自身免疫性肝炎(AIH)和胆汁性肝硬化（PBC）与AIH/PBC重叠综合征患者的生物化学、免疫学指标及病理组织学特点，为制定AIH/PBC重叠综合征临床诊断的参考标准及合理的治疗方案提供依据。方法：选取135例自身免疫性肝病患者，其中AIH患者49例、PBC患者43例、AIH/PBC重叠综合征患者43例，检测各类型患者的生物化学、免疫学和组织病理学等指标，并对AIH/PBC患者行不同的治疗方案，分别给予患者熊去氧胆酸、泼尼松及熊去氧胆酸和泼尼松联合治疗，评价各治疗方案的有效性。结果：生化指标，AIH/PBC组患者γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)活性和IgM水平显著高于AIH组(P<0.05)， AIH/PBC组患者的丙氨酸转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和IgG水平显著高于PBC组（P<0.05）。自身抗体指标，与AIH组比较，AIH/PBC组患者抗线粒体抗体(AMA)和M2型线粒体抗体(AMA M2)检出率增高（P<0.05）；与PBC组比较，AIH/PBC组患者抗核抗体(ANA)和抗平滑肌抗体(SMA)检出率增高（P<0.05）。病理学检查，AIH/PBC组患者存在高发生率的碎屑样坏死（100.00%）、肝细胞玫瑰花环样改变（83.72％）及胆管病变（69.77％）。对AIH/PBC患者实施联合用药组有效率为85.7%，显著于各种单独用药组（P<0.05）。结论：AIH/PBC重叠综合征患者的生物化学、免疫学指标和病理组织学变化兼有AIH和PBC患者的特点，因此可以作为其诊断依据。泼尼松联合熊去氧胆酸治疗AIH/PBC综合征取得了较好的疗效，值得临床推广。

目的：检测骨关节炎(OA)患者关节镜清理术前后关节液中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)和基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP-9、MMP-13、MMP-14的表达水平，探讨关节清理手术对uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13和MMP-14表达的影响。方法：收集行关节镜诊治的膝OA患者关节液标本420份，术后半年随访时获取关节液标本350份，对符合本实验条件的228份标本应用ELISA法检测uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13和MMP-14的表达水平，比较术前术后uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13和MMP-14表达水平差异，采用Spearman相关分析探讨uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13和MMP-14与关节疼痛评分(VAS)之间的相关性。结果:所有患者均经临床随访6～70个月，平均随访时间36.5个月。与术前比较，术后半年时OA患者关节液中uPA和MMP-3表达水平明显降低(P<0.01)，MMP-9和MMP-13略有下降(P<0.05)，而MMP-14表达水平无明显变化(P>0.05)；术前uPA、MMP-3、MMP-9、MMP-13和MMP-14表达水平与VAS评分均呈正相关关系（r=0.361、r=0.417、r=0.136、r=0.514和r=0.156，P<0.05）；术后uPA与MMP-3表达水平呈正相关关系（r=0.814，P<0.05），uPA和MMP-3表达水平与VAS评分均呈正相关关系（r=0.981、r=0.831，P<0.01），MMP-13表达水平与VAS评分亦呈正相关关系（r=0.145，P<0.05），而MMP-9和MMP-14表达水平与VAS评分无相关关系（P>0.05）。结论：关节镜清理术能显著减轻患者关节疼痛症状，其作用机制可能与关节液中uPA、MMP-3和MMP-13表达水平下
降有关。

目的：探讨尿乳酸/肌酐比值与新生儿窒息发生的关系，阐明尿乳酸/肌酐比值在预测新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）中的应用价值。方法：采用病例-对照研究设计方法，选取40例发生窒息的新生儿患者为窒息组，40名健康新生儿作为对照组。检测出生后1 d新生儿尿乳酸/肌酐比值、尿
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/肌酐比值和Apgar评分，分析窒息组与对照组新生儿尿乳酸/肌酐比值、尿NAG/肌酐比值与新生儿HIE发生的关系。结果：窒息组新生儿1-min和5-min Apgar评分明显低于对照组（P<0.01）；窒息组新生儿生后1 d尿乳酸/肌酐比值及尿NAG/肌酐比值明显高于对照组（P<0.01）；窒息组新生儿生后1 d尿乳酸/肌酐比值与1-min和5-min Apgar评分均呈负相关关系(r=－0.636，P<0.01；r=－0.883，P<0.01)，窒息组新生儿生后1 d尿乳酸/肌酐比值与尿NAG/肌酐比值呈正相关关系（r=0.433，P<0.01）。结论：尿乳酸/肌酐比值对新生儿窒息的预后评估具有重要作用，同时可作为早期预测新生儿HIE的重要依据。
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目的：研究P53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族在结肠癌组织中的表达，探讨其与结肠癌临床病理学特征的关系，阐明ASPP家族在结肠癌中的作用。方法：选取结肠癌组织45例、健康人正常结肠组织20例。45例结肠癌组织分为高分化组（11例）、中分化组（21例）和低分化组（13例）；按TNM分期分为T1组（7例）、T2组（8例）、T3组（25例）和T4组（5例）； 有淋巴转移N1组（19例）和无淋巴转移N0组（26例）。应用免疫组织化学SP法检测结肠癌组织和正常结肠组织中的ASPP1、ASPP2和iASPP蛋白的表达，分析其与结肠癌的组织分化程度、浸润深度和淋巴结转移等临床病理学特征的相关性。结果：①ASPP家族成员在结肠癌组织和正常结肠组织中均有表达，结肠癌组织中ASPP1 和ASPP2阳性表达率与正常结肠组织比较差异无统计学意义（P>0.05）；结肠癌组织中iASPP阳性表达率高于正常结肠组织（P<0.01）。②结肠癌组织中ASPP1表达与肿瘤细胞的分化程度无相关性（rs =0.163,P>0.05）；ASPP2阳性表达率随肿瘤细胞的分化程度的降低而递减，二者呈正相关关系（rs =0.454,P<0.01）；结肠癌组织中iASPP的表达与肿瘤细胞的分化程度无相关性（rs =－0.171,P>0.05）。③结肠癌组织中ASPP1表达与肿瘤浸润深度无相关性（rs =－0.268,P>0.05）；ASPP2的阳性表达率随肿瘤浸润程度增加而递减，二者呈负相关关系（rs =－0.348,P<0.05）；结肠癌组织中iASPP的表达与肿瘤浸润深度无相关性（rs =0.231,P>0.05）。④结肠癌组织中ASPP1、ASPP2和iASPP的表达均与淋巴结转移无相关性（rs =0.089、rs=0.044和rs=0.210,P>0.05）。结论：iASPP在结肠癌组织和正常组织中表达水平不同，提示其有可能成为良恶性结肠疾病的诊断及鉴别指标；ASPP2与结肠癌病理分级和分期有相关性，可以成为结肠癌的预后指标。 
 　 

目的：探讨组织因子途径抑制剂2（TFPI-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在食管鳞状细胞癌中的表达及其与血管生成拟态（VM）的关系。方法：收集手术切除的162例食管鳞状细胞癌标本，采用过碘雪夫酸(PAS)和CD34双重染色法观察VM在食管鳞状细胞癌组织中的分布特征。采用免疫组织化学SP法检测TFPI-2和MMP-9在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况。分析VM与食管鳞状细胞癌临床病理参数以及TFPI-2和MMP-9表达的关系。结果：食管鳞状细胞癌组织中VM阳性率为20.37%。低分化组VM阳性率（40.38%）高于中分化组(11.76%）和高分化组(7.14%)，3组间比较差异有统计学意义（χ2=20.915，P<0.01）。TNM Ⅰ-Ⅱ期组VM阳性率(11.59%)低于Ⅲ期组（26.88%)(χ2=5.707，P=0.017）。在低分化组中，TFPI-2在VM(+)组的表达率［33.34%（7/21）］高于VM（-）组［6.45%（2/31）］（χ2=4.582，P=0.032）；MMP-9在VM(+)组的表达率［78.79%（26/33）］高于VM（-）组［44.96%（58/129）］（χ2=12.05，P=0.001）；低分化组TFPI-2的表达水平与VM呈正相关关系（r=0.166，P=0.032）,MMP-9的表达水平与VM呈正相关关系（r=0.183，P=0.018），VM（－）组5年生存率高于VM(+)组（χ2=22.84，P<0.001)。结论：低分化及晚期食管鳞状细胞癌易形成VM，VM与食管鳞状细胞癌的不良预后有关，且TFPI-2和MMP-9对VM的形成有促进作用。

目的：通过对供应碘盐的缺碘地区与山西省停供碘盐的水源性高碘地区孕妇、哺乳妇女和育龄女性亚临床甲状腺疾病检出率的比较，分析2组人群在不同碘来源和碘营养水平下亚临床甲状腺疾病的患病情况，为碘相关甲状腺疾病敏感人群的筛检提供依据。方法：在我国6个省份选择缺碘补碘地区，调查当地孕妇、哺乳妇女、18~45岁育龄妇女3类人群，共991名；孕妇碘营养水平按<150、150～249、250～499和≥500 μg?L-1进行分组，哺乳妇女碘营养水平按<100和≥100　μg?L-1进行分组；在山西省选择高水碘地区，按水碘水平选择50~99、100~149、150~299和≥300  μg?L-1  4个地区，每个地区选择孕妇、哺乳妇女和育龄妇女各20名，共计241名。分别采集上述调查对象的血样和尿样，采用化学发光免疫测定法或放射免疫法测定血清学甲状腺功能指标，采用砷铈催化分光光度方法测定尿碘水平。结果：在碘缺乏地区和高碘地区，女性人群亚临床甲状腺功能减退症（亚临床甲减）和甲状腺抗体阳性的并发率分别为2.32%和4.98%，亚临床甲减患者中甲状腺抗体阳性人群约占1/3~1/2。碘缺乏地区和高碘地区女性人群亚临床甲状腺疾病的患病率分别为27.55%和34.85%，约占总女性人群的1/3。高水碘地区孕妇、哺乳妇女、18~45岁育龄妇女亚临床甲减检出率明显高于碘缺乏地区（P<0.05）；高水碘地区哺乳妇女甲状腺抗体阳性和亚临床甲减伴抗体阳性检出率明显高于碘缺乏地区（P<0.05）。不同碘来源下，当摄碘量适宜时，女性亚临床甲状腺疾病检出率比较差异无统计学意义（P>0.05）。随着碘暴露水平的增加，女性人群亚临床甲减和甲状腺抗体阳性患病率增加，二者的重合率也增加。孕妇碘营养<100  μg?L-1组低T4血症和总亚临床甲状腺疾病检出率均明显高于碘营养250~499  μg.L^-1组（P<0.05），哺乳妇女碘营养<100  μg?L-1组低T4血症和总亚临床甲状腺疾病检出率均明显高于碘营养≥100  μg.L^-1组（P<0.05）。结论：在摄碘量适宜时，盐碘摄入碘与水碘摄入碘对亚临床甲状腺疾病的发生无影响；碘摄入量升高时，亚临床甲状腺疾病发病随之升高。         

目的：了解吉林省女性自然绝经年龄的状况，阐明影响吉林省女性自然绝经年龄的相关因素。方法：采用多阶段分层随机整群抽样方法，在吉林省9个市(州)共32个区/市/县选取18～79岁的23 050名居民进行面对面的问卷调查及体格检查，实际完成有效样本21 435名，共筛选出女性样本11 098名，其中已自然绝经女性4 875名作为本次研究样本。采用复杂加权方法估计平均自然绝经年龄和自然绝经年龄中位数，采用方差分析比较不同出生年份女性自然绝经年龄差异，并应用多元线性回归分析自然绝经年龄的影响因素。结果：吉林省女性平均自然绝经年龄为（49.11
±4.19）岁，自然绝经年龄中位数为50.00岁，自然绝经者4 881名，＜40岁绝经者111名（2.27%），40～45岁绝经者643名（13.17%），46～53岁绝经者3 513名（71.97%），54岁以上绝经者573名（11.74%），另有41名（0.85%）绝经年龄缺失。不同出生年份（70~79岁为1933—1942年、60～69岁为1943—1952年、57～59岁为1953—1955年）女性自然绝经年龄比较显示，城市和农村不同年份出生女性自然绝经年龄比较差异均有统计学意义(F=16.633，P<0.001；F=7.400，P<0.001)，未分地区女性自然绝经年龄比较差异有统计学意义（F=21.178，P<0.001），经SNK法
比较，3组女性自然绝经年龄两两之间比较差异均有统计学意义（P<0.01），自然绝经年龄分别为1953—1955年出生组50.38岁、1943—1952年出生组49.51岁、1933—1942年出生组48.81岁；城市不同年份出生女性自然绝经年龄差异有统计学意义（F=16.633，P<0.001），经SNK-q检验比较，3组女性自然绝经年龄任意2组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05)，自然绝经年龄分别为 1953—1955年出生组50.77岁、1943—1952年出生组49.73岁和1933—1942年出生组48.85岁；农村不同年份出生女性自然绝经年龄比较差异有统计学意义（F=7.400，P=0.001），经SNK-q检验比较，1953—1955年出生组与另外2组自然绝经年龄比较差异有统计学意义(P<0.05)，自然绝经年龄分别为 1953—1955年出生组50.09岁、1943—1952年出生组49.33岁和1933—1942年出生组48.74岁。多元线性回归分析显示，体质量指数（BMI）、体育锻炼与女性自然绝经年龄呈正相关关系(r=0.089，P＜0.001；r=0.150，P=0.025)，吸烟、心理健康状况得分与女性自然绝经年龄呈负相关关系(r=－0.257，P=0.002；r=－0.061，P=0.016)。饮食因素，例如蔬菜、水果、牛奶、豆制品和肉类食用频率与自然绝经年龄无相关性。结论：吉林省不同出生年份的女性平均自然绝经年龄有差异；BMI、吸烟、心理健康状况和体育锻炼可能是女性自然绝经年龄的影响因素。

目的：以膳食多样化评分(DDS)为评价指标，了解吉林省18~65岁农村成年居民膳食多样化与超重和肥胖状况，并分析膳食多样化与超重和肥胖的关系。方法：2012年6~7月本课题组采用多阶段分层随机抽样方法，在吉林省选取674名农村居民作为调查对象，运用食物频率法调查居民各类食物摄入频率和摄入量，测量居民身高和体质量，并计算体质量指数（BMI），计算DDS，采用Logistic回归模型在控制混杂因素作用的基础上，分析不同膳食多样化程度农村居民超重和肥胖发生的危险性。结果：吉林省农村居民DDS整体水平较低，62.4%的居民DDS在6分及以上，11.8%的农村居民DDS为3分及以下，肥胖检出率略高于全国平均水平。膳食多样化程度分级为适中和充足的居民，发生超重和肥胖的危险性分别是膳食多样化程度不足者的0.946和0.816倍。结论：目前吉林省农村成年居民膳食多样化程
度较低，发生超重和肥胖的危险性较高；随着膳食多样化程度增加，发生肥胖的危险性降低。

目的：建立利用实时荧光定量PCR法检测人粪便中双歧杆菌浓度的方法，为检测人肠道内菌群浓度提供有效手段。方法：提取60例儿童粪便样本中细菌总DNA。选择细
菌种属的特异性基因16SrRNA作为扩增区，依据双歧杆菌的16SrRNA序列共设计3条引物，以常规PCR扩增出的16SrRNA部分基因片段制作标准品，应用SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料，对连续稀释的标准品及待测样本进行分析，建立绝对定量的标准曲线，同时计算出待测样本双歧杆菌浓度；根据可检测到的标准品最低拷贝数计算反应灵敏度；分析PCR产物熔解曲线评价反应特异性；重复检测梯度稀释的标准品，用相同浓度标准品的Ct值变异系数（CV）评价反应稳定性。结果：常规PCR扩增出双歧杆菌16SrRNA部分基因片段长度约为613 bp，测序结果正确，成功构建了双歧杆菌实时荧光定量PCR反应中的标准品；生成的标准曲线R2=0.999，最低检测限度为每个反应1.48×102个拷贝；实时荧光定量PCR产物的熔解曲线为单峰。对待测样本分批进行荧光定量PCR检测，各组间每微升1.48×103~1.48×107个拷贝浓度标准品Ct值的变异系数为2.94%、3.39%、3.54%、3.08%和3.34%。60份儿童粪便样本双歧杆菌浓度对数值为7.77±0.86（拷贝数?g-1湿便）。结论：本研究所建立的实时荧光定量PCR法敏感性高、特异性强，且重复性好，适用于检测人粪便中双歧杆菌的浓度。

富血小板血浆富含多种生长因子和调控蛋白,可以参与细胞的迁移、分化及增殖等过程,促进牙髓损伤的修复。富血小板血浆作为一种易获得、无免疫原性的材料有广泛的临床应用前景，但目前国内外对其用于促进成骨等方面的研究相对较多，而对牙髓损伤修复的研究较少，本文从富血小板血浆的获取、对牙髓损伤修复作用机制及应用展望进行综述。

角膜移植手术是目前能使角膜盲患者复明的唯一有效手段。随着人们对角膜疾病认识程度的加深以及新技术和新器材的使用，目前国内外的研究从传统的穿透性角膜移植术和板层角膜移植术逐渐转向角膜成分移植，角膜成分移植是以组织成分移植置换角膜中有病变的部分，从而提高角膜供体材料的利用率，大大减少术后排斥反应和散光等并发症。本文对角膜成分移植的手术方式、适应证、并发症及优缺点等作一综述。