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期刊信息

吉林大学学报(医学版)
ISSN 1671-587X
CN 22-1342/R
主 任:李欣欣
编 辑:姜瑾秋 韩宏志 官 鑫
电 话:0431-85619279
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2010年, 第36卷, 第2期 刊出日期:2010-03-28
基础研究
低剂量电离辐射对糖尿病小鼠肾脏ICAM-1 mRNA和蛋白表达的影响
张驰, 龚守良, 刘笑菊, 申文杰, 赵雪, 李才, 蔡露, 李校堃
J4. 2010 (2):  215-219. 
摘要 ( 1403 )   [HTML]( ) PDF(1305KB) ( 516 )  

目的:研究低剂量电离辐射(LDR)对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病(DM)小鼠肾脏细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及蛋白表达的影响,阐明LDR抗炎作用可能是其治疗糖尿病的主要机制。方法:选取健康适龄C57BL/6J小鼠,分为4组(对照、DM、LDR和DM/LDR组)。其中DM与DM/LDR组经腹腔注射STZ,建立DM模型,另2组给予等量枸橼酸溶液。造模后DM/LDR与LDR组给予25 mGy隔日照射,共照射4周。在照射后2、4、8、12及16周,利用RT-PCR及Western blotting方法检测其肾脏ICAM-1 mRNA及蛋白表达。结果:小鼠造模后照射前各组肾脏总ICAM-1 mRNA及蛋白表达差异无显著性(P>0.05)。给予LDR 2周时DM组肾脏ICAM-1 mRNA及蛋白表达显著高于其他3组(P<0.05)。照射后4周时DM/LDR 组ICAM-1 mRNA表达水平明显高于非DM组(P<0.05),但仍显著低于DM组,这种差异一直保持到照后16周。而LDR组其表达水平显著高于对照组(P<0.05)。免疫组织化学检测:与非DM组比较,DM组小鼠肾小球、肾小管结构异常,且阳性细胞染色数量明显增多。但DM/LDR组肾小球肾小管损伤较DM组有所减轻,且阳性细胞数量显著少于DM组。结论:在糖尿病状态下LDR能有效降低ICAM-1 mRNA及蛋白表达水平,缓解肾脏的炎症反应;在正常机体LDR可提高免疫力,促进免疫相关因子释放,提示LDR视机体所处不同状态发挥不同的调节功能。

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利用RNA干扰技术沉默p53基因突变子175H的效果评价
易贺庆, 马淑梅, 刘扬, 孔德娟, 高琳, 赵广通, 焦本蒸, 刘晓冬
J4. 2010 (2):  220-224. 
摘要 ( 1728 )   [HTML]( ) PDF(1742KB) ( 494 )  

目的:在p53基因缺失型细胞株H1299中转染p53基因突变子175H,构建H1299-175H细胞模型,并观察小发夹环RNA(shRNA)的基因沉默效果。方法:采用引物重叠PCR定点突变技术合成p53基因突变子175H,并利用基因重组技术构建出表达载体,以脂质体转染法建立细胞模型;合成针对p53-175H的shRNA并构建出反转录病毒表达载体Psuper-175HR,应用磷酸钙共沉淀法导入包装293T细胞,并收集假病毒颗粒感染H1299细胞。应用Western blotting法检测P53蛋白表达。结果:转染p53基因突变子175H的H1299-175H细胞模型P53蛋白表达阳性;H1299-175H细胞模型转染shRNA后,P53蛋白表达下调。结论:成功构建H1299-175H细胞模型;构建的Psuper-175HR基因沉默载体可以有效地抑制p53基因突变子175H的表达。

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新生大鼠视神经损伤后视觉系统中GAP-43的表达
霍妍, 袁容娣, 叶剑, 尹小磊, 邹欢
J4. 2010 (2):  225-228. 
摘要 ( 1224 )   [HTML]( ) PDF(1938KB) ( 427 )  

目的:研究新生大鼠视神经横断伤后视觉系统中神经生长相关蛋白质(GAP-43)的表达变化及意义。方法:新生健康SD大鼠(24 h)72 只,随机分为正常对照组和视神经横断组。采用免疫组织化学方法检测正常发育及视神经损伤后发育过程中1、3、7、14、28和56 d的SD大鼠视觉系统中GAP-43的表达。结果:正常对照组SD大鼠出生后整个发育阶段视觉系统中均可检测到GAP-43阳性细胞的表达,且随着神经元发育成熟表达逐渐下降(P< 0.05);视神经横断组GAP-43在损伤后发育过程中可检测到阳性表达,且较正常对照组增高,1 d变化不明显,3 d开始增高, 7~14 d达峰值,之后逐渐下降至正常水平,直至56 d基本恢复正常水平(P<0.05)。结论:GAP-43在新生鼠视觉系统中随生长发育而改变,在神经横断后GAP-43表达增强,表明GAP-43在视觉系统发育和再生过程中起重要作用。

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蒺藜皂苷预适应对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用
张爽, 李红, 梁蕾, 魏征人, 杨世杰
J4. 2010 (2):  229-232. 
摘要 ( 1176 )   [HTML]( ) PDF(1485KB) ( 385 )  

目的:研究蒺藜皂苷(GSTT)对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法:56只Wistar大鼠随机分为7组:正常对照组、缺血再灌注(I/R)组、心肌缺血预适应(IPC)组、阳性药腺苷(Ado)组、GSTT 200、100和50 mg/l组,缺血30 min、再灌注40 min,检测心脏灌流液中肌酸肌酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬酸氨基转移酶(AST)含量,以及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平;采用HE染色,观察GSTT作用下心肌组织病理形态学的变化。结果:与I/R组比较,GSTT 200和100 mg/L组灌流液中CK、LDH、AST的含量均明显降低(P<0.05或P<0.01),心肌组织SOD活性均明显升高(P<0.05或P<0.01),MDA含量均降低(P<0.05或P<0.01),心肌组织的病理损害减轻。结论:GSTT对心肌细胞的缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与其具有抗氧自由基作用有关。

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脂质体介导人端粒酶逆转录酶基因构建永生化软骨细胞方法的建立及评价
冯颖, 石毅, 马杰, 焦平, 顾地周, 周余来
J4. 2010 (2):  233-237. 
摘要 ( 1601 )   [HTML]( ) PDF(1778KB) ( 482 )  

目的:探索将人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转入兔软骨细胞以获取大量种子细胞的方法和技术。方法:分离培养原代兔软骨细胞,以pcDNA3.1/Zeo(+)-hTERT载体进行基因转染,对照组则为空载体pcDNA3.1/Zeo(+),筛选并挑选出阳性克隆后扩增,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转染hTERT基因后的软骨细胞hTERT mRNA表达;甲苯胺蓝染色判断转染hTERT基因后的软骨细胞是否具有软骨细胞的生物学特性;流式细胞术检测细胞周期及核型;裸鼠致瘤实验观察成瘤情况。结果:RT-PCR检测RNA水平上hTERT在细胞中的表达情况,hTERT转入兔软骨细胞后细胞形态未发生变化,长满单层后仍然呈现出多角形,与正常体外培养的软骨细胞形态基本一致。甲苯胺蓝染色后可见多糖染成蓝紫色,呈现较小蓝紫色颗粒,蛋白多糖等基质分布均匀,即转染hTERT基因后的软骨细胞具有合成和分泌软骨相关基质的功能。细胞周期测定转染hTERT的兔软骨细胞的增殖能力明显上升,细胞分裂基本以整数二倍体方式进行,保持了核型的基本稳定。裸鼠接种不致瘤。结论:转染hTERT的软骨细胞表型未发生转化,具有作为种子细胞和研究正常软骨细胞的生理、生化工具细胞的可行性。

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新型多胺缀合物NMMB逆转K562/ADM细胞多药耐药及其机制
盖晓东, 程鹏飞, 历春, 冯凯, 王超杰
J4. 2010 (2):  238-241. 
摘要 ( 1054 )   [HTML]( ) PDF(1668KB) ( 467 )  

目的:研究新型多胺缀合物NMMB对白血病细胞株K562/ADM的多药耐药(MDR)逆转作用,并进一步探讨其耐药逆转机制。方法:分别以不同浓度的NMMB(10~1 000 mg/L)作用于体外培养的K562和K562/ADM细胞24 h,采用MTT 法检测细胞增殖抑制率,确定NMMB的非毒性剂量;采用非毒性剂量,NMMB 0、 2.5 、5.0 和10.0 mg/L组,分别与不同浓度ADM(0.25~100.00 mg/L)联合作用,检测各组细胞生长抑制50%的ADM浓度,即IC50,计算逆转倍数;利用流式细胞术检测NMMB联合ADM作用后K562/ADM 细胞内ADM蓄积程度和细胞周期变化。结果:随着NMMB浓度的增加,细胞增殖抑制率也相应增加,呈剂量-效应关系;NMMB的最大无毒剂量为12.5 mg/L,逆转倍数为4倍;NMMB可明显提高ADM在K562/ADM细胞内的蓄积,与未加NMMB对照组比较差异有显著性(P<0.05);K562/ADM细胞被阻滞在G0/G1期,与未加NMMB对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:NMMB对白血病耐药细胞株K562/ADM有增殖抑制和多药耐药逆转作用,其部分逆转机制可能是通过增加细胞内化疗药物蓄积和将K562/ADM细胞阻滞在G0/G1期而实现的。

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低渗诱导人小梁细胞容积敏感性氯电流的电生理学特点
王霁雪, 张文杰, 袁海波, 郑雅娟, 李桂荣
J4. 2010 (2):  242-246. 
摘要 ( 984 )   [HTML]( ) PDF(2908KB) ( 441 )  

目的:探讨与小梁细胞容积调节有关的氯通道电流的生理学特点,阐明该电流与容积敏感性氯通道电流的关系。方法:体外培养人小梁细胞,全细胞膜片钳记录等渗和低渗条件下小梁细胞膜上的氯通道电流,观察该电流特点。低渗状态下在浴液中加入氯离子通道阻断剂NPPB和他莫昔芬及ATP后记录电流的变化。结果:在等渗条件下,仅观察到微弱且稳定的背景电流,在+100和-100 mV电压钳钳制下,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为1.48±0.36 和-0.91±0.10(n=6)。低渗刺激后,细胞迅速肿胀,电流较等渗时明显增大,呈外向优势,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为19.94±0.87 和-6.53±0.41(n=6,P<0.01)。在低渗状态下的浴液中分别加入NPPB(100  mol/L)、他莫昔芬(50  mol/L)和ATP (2  μmol/L)20 min后,外向和内向电流密度值(pA/pF)分别为7.61±0.50和-3.70±0.25、8.21±0.63和-3.83±0.25、9.08±0.67和3.89±0.22,均较低渗时明显减小(P<0.01)。结论:细胞外低渗诱导人小梁细胞产生呈外向优势氯电流,此电流对细胞容积的改变敏感,可被NPPB、他莫昔芬和ATP抑制,该电
流符合容积敏感性氯电流的特征。

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磷酸二酯酶抑制剂对C型钠尿肽作用下家兔心房机械活动的影响
丁大植, 崔勋, 金秀男, 兰颖, 刘丽萍, 洪兰
J4. 2010 (2):  247-251. 
摘要 ( 1084 )   [HTML]( ) PDF(2493KB) ( 503 )  

目的:观察磷酸二酯酶抑制剂(PDEI)对C型钠尿肽(CNP)作用下家兔心房机械活动及心房肌细胞内环核苷酸(cAMP,cGMP)浓度的影响。方法:采用大耳白兔麻醉后立即开胸取出心脏置于氧饱和的36.5℃生理盐水中,剥离左心房后立即固定在心房灌流装置上,用CNP及不同浓度PDEI检测心房搏出量和心房搏动压,采用放射免疫法测定cAMP和cGMP浓度。结果:①与对照循环组比较,CNP(30.0 nmol/L)组心房搏出量和心房搏动压明显降低(P<0.01),cGMP的含量显著增加(P<0.001),cAMP含量则无显著性变化 (P>0.05)。②与对照循环组比较,磷酸二酯酶(PDE)非选择性抑制剂IBMX组(1 000.0 nmol/L)心房搏出量和心房搏动压显著增加(P<0.001),cAMP及cGMP的含量显著增加(P<0.001);与IBMX组比较,IBMX(1 000.0 nmol/L)加CNP(30.0 nmol/L) 组心房搏出量、心房搏动压 、cAMP含量、cGMP含量则无显著性变化(P>0.05)。③与对照循环组比较,PDE2抑制剂EHNA(30.0 nmol/L)组心房搏出量和心房搏动压明显降低(P<0.05),cAMP含量无显著性变化(P>0.05);EHNA(30.0 nmol?L-1)加CNP(30.0 nmol?L-1)组心房搏出量和心房搏动压显著降低(P<0.01),cAMP含量无显著性变化(P>0.05);与EHNA组比较,EHNA加CNP组心房搏出量和心房搏动压明显降低(P<0.05),cAMP含量无明显变化(P>0.05)。④与对照循环组比较,PDE3抑制剂milrinone(1.0 nmol/)组心房搏出量和心房搏动压增加,但差异无显著性(P>0.05);cAMP含量则明显增高(P<0.05);milrinone(1.0 nmol/L) 加CNP(30.0 nmol/L)组心房搏出量和心房搏动压显著降低(P<0.001),cAMP含量明显增高(P<0.05)。与milrinone组比较,milrinone 加CNP组心房搏出量、心房搏动压显著降低(P<0.001),cAMP含量则无明显变化(P>0.05)。结论:CNP抑制家兔心房机械活动,其机制与增加细胞内cGMP含量有关;不同PDEI对CNP抑制心房机械活动产生不同的影响。

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高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞FOXO1、TSC2基因表达及细胞分泌功能的影响
乔伟, 刘丹, 孙情, 梁瑜祯, 冯乐平
J4. 2010 (2):  252-257. 
摘要 ( 1281 )   [HTML]( ) PDF(3561KB) ( 473 )  

目的:研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法: 将 NIT-1细胞按每孔5×10个放置于24孔细胞培养板,培养48 h后随机分为各处理组:5.6、7.8、11.1、16.7、22.2 和27.6 mmol/L葡萄糖组,继续培养24 h后再分别施加1×10-5mol/L罗格列酮,分别于干预24和48 h后取细胞培养上清液,采用放射免疫法检测胰岛素水平和免疫荧光法检测细胞增殖情况,RT-PCR半定量法检测FOXO1和TSC2 mRNA表达水平。结果:①1×10-6~1×10-5 mol/L罗格列酮可以分别在不同浓度葡萄糖培养条件下使胰岛NIT-1细胞增殖(P<0.05),且这种变化趋势随剂量的增加而增加(即1×10-5 mol/L罗格列酮组>1×10-6 mol/L罗格列酮组>1×10-7 mol/L罗格列酮组)。1×10-5 mol/L的罗格列酮干预后,可见细胞凋亡百分率增加趋势随着葡萄糖浓度不断升高;②在同一浓度罗格列酮作用下,当葡萄糖浓度为11.1 mmol/L时,胰岛素分泌水平最高,高于其他各组(均P<0.05),随着葡萄糖浓度增加,胰岛素分泌量逐渐下降(11.1 mmol/L葡萄糖组>16.7 mmol/L葡萄糖组>22.5 mmol/L葡萄糖组>27.6 mmol/L葡萄糖组),而葡萄糖为5.6 mmol/L时,胰岛素分泌量最低;③ 在1×10-5 mol/L罗格列酮干预后,FOXO1和TSC-2 mRNA的表达水平均较未干预组明显下降,且呈现出5.6 mmol/L组<11.1 mmol/L组<16.7 mmol/L组<22.5 mmol/L组<27.6 mmol/L组的变化趋势,而且葡萄糖浓度>16.7 mmol/L的各组均较前面小剂量葡萄糖组(≤11.1 mmol/L各组)表达明显。结论:罗格列酮可以通过直接影响胰岛β细胞内FOXO1和TSC2表达促进胰岛β细胞的增殖及影响细胞胰岛素分泌功能,提示通过调控FOXO1和TSC2表达,可以直接影响胰岛β细胞的生物学功能,如分泌功能、细胞的增殖与凋亡以及改善胰岛素抵抗状况。

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人NOB1基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定
林杨, 崔满华, 滕红, 许天敏
J4. 2010 (2):  258-261. 
摘要 ( 976 )   [HTML]( ) PDF(2501KB) ( 563 )  

目的:构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上定其沉默效率。 方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染卵巢癌SKOV3和HEY细胞,采用Real-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率。 结果:构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到8×108 PU/L。shRNA慢病毒颗粒感染SKOV3和HEY细胞后NOB1基因的 mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组分别下降了73.5%和82.2%。 结论:成功构建NOB1基因的shRNA慢病毒表达载体,该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因。

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乳糖诱导角质细胞生长因子-2在大肠杆菌中的表达
田海山, 唐禄, 王晓杰, 王会岩, 刘笑菊, 冯秀萍, 王一, 李校堃
J4. 2010 (2):  262-266. 
摘要 ( 1182 )   [HTML]( )

目的:研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行角质细胞生长因子-2(KGF-2)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法:分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的乳糖诱导条件。结果:对于重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到良好效果,以乳糖为诱导剂的A600值较IPTG高,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。以终浓度为10 g/L乳糖在33℃下诱导6 h,可以达到良好的诱导效果,并且具有较好的可溶性和促细胞生长活性。结论:乳糖可替代IPTG诱导角质细胞生长因子基因表达,并取得良好效果,为工程
化生产提供了良好的实验依据。

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双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗的构建及其免疫原性检测
白靓, 金宁一, 成岩, 石毅, 鲁会军, 田明尧, 南文龙, 赵翠青, 张金双, 关铭
J4. 2010 (2):  267-270. 
摘要 ( 991 )   [HTML]( )

目的:构建双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗,并检测其免疫原性。方法: 构建共表达流感病毒H5亚型血凝素(HA)和H7亚型HA的DNA疫苗,采用间接免疫荧光法(IFA)检测目的蛋白在幼仓鼠肾细胞(BHK cell)中的表达。分为pVAX1-H5-H7、pVAX1-H5、pVAX1-H7和pVAX1空质粒对照组4组(每组15只)进行小鼠免疫实验,并应用ELISA法检测小鼠血清抗体,流式细胞术检测小鼠脾T淋巴细胞亚群数量。结果:所构建的双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗在BHK细胞中的表达产物可激发荧光抗体产生绿色免疫荧光,且对照pVAX1空载体转染BHK细胞无免疫荧光产生。使用双亚型(H5/H7)流感病毒DNA疫苗免疫小鼠后,小鼠产生了针对H5和H7抗原的血清特异性抗体,流式细胞术检测免疫组小鼠脾T淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的数量显著高于对照组(P<0.05)。结论: 成功构建的双亚型(H5/H7)流感病毒 DNA疫苗可以诱导小鼠产生特异性的细胞免疫和体液免疫应答。

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RNA干扰乳腺癌MCF-7细胞HSPA8基因表达
盖晋宏, 牟特, 邢沈阳, 倪劲松, 李建华, 张西臣
J4. 2010 (2):  271-275. 
摘要 ( 1719 )   [HTML]( )

目的:构建并筛选高干扰率的热休克蛋白8(HSPA8)(相对分子质量70 000)基因干扰质粒,为进一步研究HSPA8基因在乳腺癌中的作用提供材料。方法:根据GenBank所发表的HSPA8的基因序列合成4个干扰片段,依次构建1、2、3和4组干扰质粒:pGPU6/GFP/Neo-349、pGPU6/GFP/Neo-818、 pGPU6/GFP/Neo-931和pGPU6/GFP/Neo-1180,将这4组干扰质粒分别转染至人乳腺癌MCF-7细胞,并设阴性及空白对照组。经过G418筛选后得到稳定转染的细胞株,采用RT-PCR 和Western blotting方法分别从mRNA 和蛋白质水平检测各组干扰质粒对HSPA8基因的干扰效果。结果:RT-PCR检测转染shRNA干扰质粒的各组MCF-7细胞的HSPA8基因mRNA转录水平与未转染组比较,干扰质粒1组HSPA8基因的表达量下降了25.0%,干扰质粒2组下降了37.5%,干扰质粒3组下降了43.7%,干扰质粒4组下降了68.5%。Westen-blotting检测结果显示:各实验组与对照组之间蛋白表达比较差异有显著性(P<0.05),pGPU6/GFP/Neo-1180干扰质粒的干扰效率最高。结论: 成功构建了HSPA8基因的干扰质粒,提示HSPA8基因及其表达产物为研究HSPA8基因在乳腺癌的发生、发展中的作用提供了材料。

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蛋白酶体抑制剂Lactacystin对胶质瘤C6细胞的增殖抑制作用及其机制
王海峰, 钟加滕, 王伟伟, 葛鹏飞, 李文臣, 罗毅男
J4. 2010 (2):  276-280. 
摘要 ( 1180 )   [HTML]( )

目的:通过观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin(LAC)对C6细胞增殖率的影响,探讨LAC引起胶质瘤细胞增殖率发生改变的机制,为临床上治疗胶质瘤提供理论依据。方法:体外培养大鼠胶质瘤C6细胞,选择处于对数生长期的细胞,实验分为对照组、LAC 2.5 μmol/L组、LAC 5.0 μmol/L组及LAC 10.0 μmol/L组,MTT法检测各组C6细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电势,RT-PCR方法检测各组细胞中Bax和bcl-2 mRNA表达,Western blotting方法检测各组细胞中Bax、bcl-2和P65 蛋白表达。结果:与对照组比较,LAC 5.0 μmol/L组和LAC 10.0 μmol/L组细胞增殖率、线粒体膜电势和P65蛋白表达水平降低(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax/bcl-2 mRNA和蛋白的比值增加(P<0.05)。结论:LAC通过诱导细胞凋亡抑制C6细胞的增殖率,其引起凋亡的方式可能是通过线粒体途径,此外在这个过程中NF-κB信号通路也可能影响细胞的增殖率。

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下丘脑视前区性二态核神经元的投射
张春晓, 滨田知宏, 黄民
J4. 2010 (2):  281-284. 
摘要 ( 948 )   [HTML]( )

目的:检查大鼠下丘脑视前区性二态核(SDN-POA)的神经投射部位,探讨SDN-POA的功能。方法:实验使用30只Wistar转基因大鼠,这种转基因大鼠的雌激素α受体基因启动子0/B上标记有绿色荧光蛋白。雌、雄性大鼠(各15只)随机各分成3组,分别通过离子电渗法将示踪剂Fluoro-Ruby注入下丘脑腹内侧核(VMH)、终纹床核(BST)、杏仁核后背侧核(MePD)。5 d后,灌流固定鼠脑,做冷冻冠状切片,荧光显微镜下确定示踪剂注入位置,并观察SDN-POA绿色荧光和Fluoro-Ruby标记荧光。结果:在雌、雄性转基因大鼠,SDN-POA呈现绿色荧光,雄性SDN的体积和细胞数量明显大于雌性,即存在明显的两性差异。示踪剂注入VMN和BST组,在SDN均发现Fluoro-Ruby逆行标记细胞。来自VMH的标记细胞主要位于SDN的边缘;来自BST的标记细胞分散在SDN核团内。示踪剂注入MePD组,在SDN未发现逆行标记的神经元,而发现大量标记Fluoro-Ruby的神经纤维。结论:SDN-POA是决定性二态性的重要中枢部位,它可接受MePD的传入神经纤维,发出传出神经纤维影响VMN和BST神经元的活动,进而调节生殖功能。

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抗菌肽CM与血管内皮生长因子VEGF121在大肠杆菌中表达及鉴定
王会岩, 尹海燕, 尹翌秋, 刘孝菊, 赵宏鑫, 秦玉侠, 刘敏, 李校堃
J4. 2010 (2):  285-290. 
摘要 ( 1152 )   [HTML]( )

目的:构建和表达人VEGF121的基因工程菌,为肿瘤血管的靶向治疗提供实验数据。方法:通过PCR引物延伸的方法,获得SUMO-CM-VEGF121融合基因;将该融合基因与原核表达载体pET22b连接后转化至Rosetta-gami(DE3)宿主细胞中,通过IPTG诱导获得可溶性表达。将融合蛋白经DEAE阴离子交换层析、Ni-NTA和分子筛等方法进行纯化,用SUMO酶切除分子伴侣SUMO后,最终获得融合蛋白CM-VEGF121。结果:DNA测序,设计合成的SUMO-CM-VEGF121融合基因为774 bp;所构建的表达菌株Rosetta-gami(DE3)/pET22b-SUMO-CM-VEGF121在20℃诱导24 h可溶性最好,其可溶性表达为菌体可溶性蛋白的21%。Western  blotting检测该表达产物与人VEGF单克隆抗体具有特异性结合能力。结论:原核表达载体pET22b和Rosetta-gami宿主菌为CM-VEGF121最合适的条件,解决了其表达量低和不可溶问题。

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嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸和附睾组织中腺苷脱氨酶活性及基因表达的影响
崔佳乐, 何海涛, 洪新雨, 邓志会, 赵丽艳, 洪敏
J4. 2010 (2):  291-294. 
摘要 ( 894 )   [HTML]( )

目的:研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠睾丸、附睾腺苷脱氨酶(ADA)活性及基因表达的影响,阐明海洛因对男性生殖系统嘌呤核苷酸代谢的损害及嘌呤核苷酸补偿的对抗作用。方法:建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,80只建模成功的雄性Wistar大鼠随机分为对照组(生理盐水)、海洛因组、海洛因戒断3 d组、海洛因戒断9 d组、核苷酸组(不给海洛因)、海洛因+核苷酸组(同时给药)、核苷酸3 d组及核苷酸9 d组(每组10只),检测睾丸和附睾组织内ADA活性及基因表达的情况。结果:睾丸和附睾组织中ADA活性,海洛因组和海洛因戒断3 d组均明显高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05);睾丸组织中ADA mRNA水平,海洛因组明显高于对照组(P<0.05),附睾组织中ADA mRNA水平,海洛因组、海洛因戒断3 d组和海洛因戒断9 d组均明显高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论:海洛因对大鼠睾丸和附睾组织中ADA活性和基因表达有持续增强作用,补偿嘌呤核苷酸可以对抗海洛因的作用。

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 “血瘀证”下急性心肌梗死模型与单纯急性心肌梗死模型大鼠心脏血流动力学及心电图变化的比较
于晓风, 王佳, 曲绍春, 周金影, 西月, 睢大筼
J4. 2010 (2):  295-298. 
摘要 ( 1446 )   [HTML]( )

目的:观察 “血瘀证”下急性心肌梗死模型与单纯急性心肌梗死模型大鼠心脏血流动力学及心电图的变化,阐明单纯急性心肌梗死模型与“血瘀证”下急性心肌梗死模型之间的差异。方法:Wistar大鼠随机分为空白对照组、急性血瘀模型组、急性心肌梗死假手术组、单纯急性心肌梗死模型组及“血瘀证”下急性心肌梗死模型组(在大鼠急性“血瘀”情况下复制急性心肌梗死模型)(每组12只),测定各组大鼠的左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力变化最大速率(±dp/dt max)、颈总动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及平均动脉压(MAP)等各项血流动力学指标。同时测定大鼠心率(HR)及心电图(ECG)V5导联和Ⅱ导联ST段等参数,并与单纯急性心肌梗死模型进行对比。结果: ①大鼠“血瘀证”下急性心肌梗死模型与单纯急性心肌梗死模型在SBP、DBP、MAP、LVSP、LVEDP及±dp/dt max等指标上差异无显著性(P>0.05);②大鼠“血瘀证”下急性心肌梗死模型的HR加快及V5、Ⅱ导联心电图ST段抬高程度均明显大于单纯急性心肌梗死模型组(P<0.05 或P<0.01)。结论:大鼠“血瘀证”下急性心肌梗死模型与单纯急性心肌梗死模型在心电图变化上存在明显差异,在血流动力学各项指标上无明显差异,提示采用“血瘀证”下急性心肌梗死模型来评价治疗胸痹心痛中药的药效学更为合理。

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重组质粒Psilencer1.0-U6-siRNA-stat3对移植静脉新生内膜的增生抑制作用
孙江滨, 谢众上, 赵科研, 李博, 柳克祥
J4. 2010 (2):  299-302. 
摘要 ( 971 )   [HTML]( )

目的:观察重组质粒Psilencer1.0-U6-siRNA-stat3对移植静脉内膜增生的影响,为预防冠状动脉旁路移植术后移植血管再狭窄提供新的方法。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为空质粒组和重组质粒组,每组20只。脂质体Lipofectamine 2000与该空质粒或者重组质粒混合15 min再与生物蛋白胶混合后,转染大鼠移植静脉(右颈外静脉中段),在3、7、14和28 d时,经左心室灌注4%甲醛并提取移植静脉,采用免疫组织化学方法(增殖细胞核抗原 PCNA)检测移植静脉内膜血管平滑肌细胞(VSMCs)的增生及表达,以增殖指数表示。采用HE法检测移植静脉新生内膜增生病理形态学变化,在40倍镜下测量其内膜厚度。结果:免疫组织化学检测,术后7和14 d空质粒组移植血管管壁内膜层可见许多PCNA阳性细胞,重组质粒组PCNA阳性细胞数明显少于空质粒组。7 d时重组质粒组增殖指数(23.3±2.8)低于空质粒组(31.3±4.7)(P<0.05);14 d时重组质粒组增殖指数(15.6±0.4)低于空质粒组(27.2±5.7) (P<0.05)。7 d时重组质粒转染组内膜厚度[(0.50±0.02)μm]明显低于空质粒组[(0.90±0.02)μm](P<0.05)。结论:重组质粒Psilencer1.0-U6-siRNA-stat3对冠状动脉旁路移植术后移植静脉内膜增生有明显的抑制作用。

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细菌纤维素构建组织工程角膜基质的方法及其评价
贾卉, 贾原媛, 王娇, 胡源, 张媛| 周余来, 王苹
J4. 2010 (2):  303-307. 
摘要 ( 1112 )   [HTML]( )

目的:探讨以细菌纤维素(BC)为支架构建组织工程角膜基质的可行性。方法: 体外分离培养兔和人角膜基质细胞,种植到BC膜中,构建完成后进行兔和人角膜基质细胞-BC复合膜的生物检测,并将兔角膜细胞生物复合物进行同种异体移植。术后1、4和8周时分别活体行前节OCT、角膜共焦显微镜检查,离体后组织学及免疫组织化学检查。结果: 人和兔角膜基质细胞长入BC的网架结构,细胞生长状态良好。移植术后1周兔眼无炎症反应及新生血管,4周后植片边缘出现新生血管,表面无水肿及溃疡形成。术后8周角膜共焦显微镜显示:移植片周围基质细胞增生活跃,邻近的角膜内皮细胞数量和形态正常。前节OCT显示:移植后复合膜逐渐降解,4周时复合膜边界模糊,8周时密度接近正常角膜组织。离体组织学检查显示:BC复合膜与正常角膜基质相似,有炎细胞浸润和血管形成,角膜组织无坏死和溶解。结论: BC无细胞毒性,具有良好的组织相容性和可降解性,可作为构建组织工程角膜基质的生物支架。

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成人骨间前神经及其肌支的应用解剖
李波, 王政, 董国军, 夏长丽, 苏略, 高振平
J4. 2010 (2):  308-311. 
摘要 ( 882 )   [HTML]( )

目的:观察成人骨间前神经及其肢支的解剖特点,为手术治疗骨间前神经卡压综合征及修复正中神经和尺神经损伤提供形态学依据。方法:解剖剥离30侧(左右各15侧)成人上肢标本,在测量骨间前神经及其肌支长度、径线等基本解剖学数据的同时,肉眼重点观察骨间前神经及其肌支在前臂的位置百分比。结果:骨间前神经于肱骨髁间连线下方(45.7±10.5)mm处起自正中神经,于肱骨髁间连线下方(79.06±7.49)mm处发出肌支,其在前臂的位置为13.2%~32.8%。拇长屈肌支(93.3%)和旋前方肌支(100%)以1支型、指深屈肌支(86.7%)以4支型出现率最多。骨间前神经发出的肌支主要位于前臂的27.6%~88.1%,其中拇长屈肌支为27.6%~48.3%,指深屈肌支为32.8%~49.9%,旋前方肌支为41.3%~88.1%。结论:测量并总结得出的有关手术治疗骨间前神经卡压综合征及修复正中神经和尺神经损伤的解剖学数据和定位方法有助于提高操作的准确性和安全性。

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多药耐药相关蛋白-2在白血病耐药细胞株K562/A02的表达
姜振宇, 许颖, 荆蕾, 姚程, 马宁
J4. 2010 (2):  312-315. 
摘要 ( 952 )   [HTML]( )

目的:研究多药耐药相关蛋白-2(MRP-2)与白血病细胞耐药的关系,并探讨其在白血病多药耐药中的意义。方法:应用RT-PCR方法检测白血病细胞株K562与耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA的差异表达,然后将MRP-2反义及正义寡核苷酸片段分别用脂质体转染至耐药细胞株K562/A02,采用MTT法、流式细胞术及RT-PCR法检测转染后细胞内阿霉素的荧光强度、耐药指数及MRP-2 mRNA的表达情况。结果:耐药细胞株K562/A02中MRP-2 mRNA表达水平明显高于白血病细胞株K562(P<0.05)。MRP-2反义寡核苷酸片段转染后耐药细胞株K562/A02细胞内的阿霉素浓度升高,耐药指数较未转染细胞明显降低(P<0.05);转染后耐药细胞株K562/A02细胞MRP-2 mRNA表达水平较未转染细胞下降了67.5%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:MRP-2的高表达导致白血病耐药细胞内化疗药物浓度降低,可能是其导致白血病多药耐药的机制之一。

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TREM-1、TNF-α和IL-8在单核细胞源性泡沫细胞中的表达
王宇石, 刘心刚, 郑杨
J4. 2010 (2):  316-319. 
摘要 ( 1079 )   [HTML]( )

目的:探讨髓系细胞触发受体1(TREM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)在巨噬细胞源性泡沫细胞产生过程中的表达情况。方法:人单核细胞株(U937)经佛波酯(PMA)诱导贴壁后,分为PMA诱导组、低密度脂蛋白(LDL)诱导组及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导组。应用RT-PCR法检测上述3组细胞中TREM-1 mRNA表达;用ELISA法检测上述3组细胞培养上清中TNF-α和IL-8含量。结果:与PMA诱导组、LDL组细胞比较,ox-LDL组细胞TREM-1 mRNA表达水平均明显增高(P<0.05);ox-LDL组培养上清中TNF-α、IL-8含量明显高于LDL组及PMA诱导组(P<0.05)。结论:TREM-1、TNF-α和IL-8在动脉粥样硬化(AS)发生发展中可能存在相互诱导、相互协同作用,共同参与AS的形成。

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貂心及其易混品种中微量元素的测定
孙晶波, 张丽华, 姜爽, 崔龙, 苑广信, 李洪宇
J4. 2010 (2):  320-322. 
摘要 ( 1237 )   [HTML]( )

目的:研究貂心与其易混品种鸡心中的人体必需微量元素的种类及其含量差异,为貂心与易混品种鸡心的鉴定提供一种科学的方法。方法:应用电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)法测定经消化后的貂心和鸡心中的微量元素。[JP3]结果:貂心中含有8种微量元素,其中镁(Mg)含量(干重)最高,为685.31 mg/kg[JP];鸡心中含有9种微量元素,其中钾(K)含量(干重)最高,为11 829.7 mg/g。 各种微量元素的检测线为0.4~12.1  μg/L,回收率为92.0%~111.9%,相对标准偏差为0.5%~3.8%,各种微量元素的标准曲线均为R≥0.9 999。结论:貂心与鸡心中所含微量元素的种类、含量及各种元素含量间的比例相差悬殊,可
利用ICP-AES法对二者进行微量元素检测比较和鉴定。

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氯化锂对高糖致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制
张彬, 李法琦, 翟福利, 常晓东, 周平, 张德梅
J4. 2010 (2):  323-326. 
摘要 ( 836 )   [HTML]( )

目的: 观察不同浓度氯化锂(LiCl)对高糖环境培养下乳鼠心肌细胞的影响,探讨经典Wnt信号途径对高糖致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用。方法: 40只1~3 d SD乳鼠,原代心肌细胞培养后,随机分为对照组、高糖损伤组、氯化锂5、10 mmol/L组。倒置显微镜下观察心肌细胞形态学改变,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫细胞化学方法检测心肌细胞磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)的表达变化。结果: 与高糖损伤组比较,LiCl 5 、10 mmol?L-1组心肌细胞的搏动频率趋于正常,心肌细胞的凋亡减少(P<0.05),p-GSK-3β和β-catenin的表达增多(P<0.05)。随着LiCl浓度的增加,p-GSK-3β和β-catenin的表达增强。结论: LiCl明显抑制高糖致乳鼠心肌细胞的损伤,该效应可能与经典Wnt信号途径的激活有关。

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人脂肪源性干细胞成骨诱导过程中Ⅰ型胶原的表达
王敏, 孙新华, 申玉芹, 王景云, 冯志远
J4. 2010 (2):  327-330. 
摘要 ( 921 )   [HTML]( )

目的:研究人脂肪源性干细胞(hADSCs)成骨诱导后其合成和分泌Ⅰ型胶原能力的变化,探讨hADSCs作为组织工程骨的种子细胞的效能。方法:从人脂肪抽吸物中分离基质细胞,体外培养、扩增及鉴定。采用成脂诱导剂诱导hADSCs向脂肪细胞分化,采用油红O染色鉴定。采用成骨诱导剂诱导hADSCs向成骨细胞分化,将成骨诱导组分为0、7、14、21和28 d组,分别于0、7、14、21及28 d行茜素红染色检测矿化结节、Van Gieson胶原纤维特殊染色染胶原纤维、Ⅰ型胶原细胞免疫荧光染色检测细胞Ⅰ型胶原的表达。用FV Viewer 1.7软件对Ⅰ型胶原表达的强度进行定量检测。结果:hADSCs成脂诱导14 d后油红O染色阳性;hADSCs成骨诱导21 d茜素红染色阳性;成骨诱导21 d Van Gieson胶原纤维特殊染色阳性;hADSCs成骨诱导后Ⅰ型胶原染色21 d所有的细胞均阳性表达,28 d呈强阳性表达。统计结果显示:Ⅰ型胶原的表达从7 d开始,到28 d逐渐升高,7、14、21和28 d组与0 d组比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:hADSCs成骨诱导后全部细胞呈现成骨表型,成骨能力强,可以作为骨种子细胞应用于临床骨再生治疗。

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衔接蛋白2基因siRNA表达载体的构建及鉴定
张勇, 刘宁, 周蔷, 李洪岩, 刘全
J4. 2010 (2):  331-335. 
摘要 ( 950 )   [HTML]( )

目的:构建针对衔接蛋白2的μ2亚单位(AP2-μ2)的短链干涉RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对AP2-μ2基因的干涉作用。方法:设计AP2-μ2靶向的发夹状siRNA,据此设计合成3条互补的寡核苷酸链,退火后分别连接到pSilencer 3.1 neo H1载体,转化扩增后进行序列测定。待转染细胞分为对照组、Scramble plasmid、AP2 plasmid-1、AP2 plasmid-2和AP2 plasmid-3组。用脂质体转染法将3组siRNA重组质粒与阴性对照质粒(Scramble plasmid)转染大鼠心肌细胞株H9C2,通过RT-PCR法检测AP2-μ2基因表达水平的变化。结果:合成的6条寡核苷酸单链凝胶电泳显示多个电泳条带,分别退火后,产物经凝胶电泳显示形成单一条带。双链DNA模板与载体质粒连接后,用BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切,凝胶电泳可见4 300和66 bp的酶切片段。DNA测序连接的核酸序列与设计序列一致,表明AP2-μ2基因的3条siRNA载体构建成功。RT-PCR检测,在AP2 plasmid-1组,转染的H9C2细胞中AP2-μ2的基因表达水平较阴性对照组降低约96%。结论:成功地构建了针对AP2-μ2基因的3条siRNA载体,其中AP2 plasmid-1转染细胞后可显著抑制AP2-μ2基因表达。

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小寡核苷酸对大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响
申玉芹, 孙新华, 于丽, 王学菊, 冯志远, 王丽颖, 于永利
J4. 2010 (2):  336-339. 
摘要 ( 1103 )   [HTML]( )

目的:筛选具有促进大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化作用的小寡核苷酸(ODN),探讨ODN对BMSCs向成骨细胞分化的影响。方法:取第3代BMSCs孵育24 h后进行成骨诱导,双盲法加入12条不同的ODN,PBS作为溶媒对照组,应用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ODN于不同工作浓度(4.0、 2.0、 1.0和 0.5 mg/L)、不同时间点(24、72和120 h)刺激经成骨诱导后的BMSCs内ALP的表达水平,筛选出具有促成骨分化作用的ODN。结果:与PBS溶媒对照组比较,ODN工作浓度为4.0和0.5 mg/L时,实验组与对照组ALP表达水平差异无显著性(P>0.05),ODN工作浓度为2.0和1.0 mg/L时,有2条ODN在不同时间点(24、72和120 h)均可促进BMSCs内ALP的表达(P<0.01)。结论:在12条不同的ODN中共筛选出2条具有促进BMSCs成骨分化作用的ODN,表明特定序列的ODN能够影响大鼠BMSCs向成骨细胞的分化。

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黄芪甲苷诱导NO生成并激活PKCε对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
关凤英, 李红, 杨世杰
J4. 2010 (2):  340-344. 
摘要 ( 1074 )   [HTML]( )

目的:研究黄芪甲苷(AsⅣ)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、再灌注模型组、阳性药尼可地尔(10 mg/kg) 组、AsⅣ (5 mg/kg)组及AsⅣ+氯化白屈莱赤碱(CHE)(3 mg/kg)组,每组6只,结扎左冠状动脉前降支30 min,松扎再灌注120 min 制备大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,检测AsⅣ对其血清中LDH、MDA和SOD以及NO的影响,同时光镜下观察心肌细胞病理组织形态学变化, Western blotting 法检测心肌细胞胞浆及胞膜PKCε 蛋白表达。结果:AsⅣ组与模型组比较,LDH漏出量降低 (P<0.05), MDA含量明显降低(P<0.01), SOD活力增强(P<0.01), NO含量增加(P<0.01)。HE染色组织形态学观察,与模型组比较,AsⅣ组心肌细胞形态有明显的改善,炎细胞浸润也有减轻。Western blotting 法检测,AsⅣ组心肌细胞胞膜PKCε表达量高于模型组(P<0.05)。CHE减弱了ASⅣ的这种保护作用;与AsⅣ组比较,AsⅣ+CHE组LDH漏出量升高 (P<0.05), MDA含量升高(P<0.01), SOD活力降低(P<0.01),PKCε胞膜表达量降低(P<0.05),心肌细胞水肿明显、胞质着色较浅。结论:AsⅣ通过诱导NO的生成对大鼠心肌缺血再灌注损伤产生保护作用,PKCε的激活可能是AsⅣ保护心肌细胞信号传导通路的组成部分。

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20(s)-原人参二醇诱导体外培养Siha细胞凋亡的作用
赵丽晶, 许多, 梁作文, 程宏, 郭亚雄, 李德隆, 韩向北, 赵丽娟, 董妍
J4. 2010 (2):  345-348. 
摘要 ( 1274 )   [HTML]( )

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对体外培养人宫颈癌Siha细胞凋亡的作用,阐明其抗肿瘤作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Siha细胞,将其分为阴性对照组(乙醇)、阳性对照组(40 μg/L顺铂)及PPD 10、20和40 μmol/L组。分别用乙醇、顺铂和PPD处理细胞48 h后,利用光学显微镜观察细胞形态学改变,采用Annexin V-EGFP/PI双染色法、TUNUL染色法检测细胞凋亡情况,分别采用RT-PCR、Western blotting方法检测bax基因的转录及蛋白表达情况。结果:不同剂量的PPD处理后,Siha细胞变圆回缩并出现碎片,Annexin V-EGFP/PI染色呈现不同程度的绿染和红染,TUNUL染色可见绿色荧光,bax基因的转录与蛋白表达升高。结论:PPD可诱导人宫颈癌Siha细胞出现凋亡,其作用与bax基因表达上调有关。

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20(s)-原人参二醇对前列腺癌RM-1细胞的生长抑制作用及其机制
郭亚雄, 刘艳波, 李德龙, 韩向北, 许多, 程宏, 赵丽晶, 赵丽娟, 董妍
J4. 2010 (2):  349-353. 
摘要 ( 1231 )   [HTML]( )

目的:观察20(s)-原人参二醇(PPD)对前列腺癌RM-1细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法:建立前列腺癌RM-1细胞动物模型,将36只C57小鼠随机分为3组:模型组(橄榄油等体积灌胃每天1次、生理盐水等体积腹腔注射每周1次),紫杉醇(Taxol)组(20 mg/kg,腹腔注射每周1次),PPD组(20 mg/kg,灌胃每天1次),连续给药4周。每隔3 d测量肿瘤体积1次,给药第4周末处死动物。观察指标:动物一般状态、肿瘤体积、瘤重、抑瘤率、死亡率,采用RT-PCR和Western blotting法检测肿瘤组织Cyclin D1蛋白表达水平。结果:PPD组小鼠一般状态明显好于模型组,表现为活泼好动、毛色光亮;而模型组小鼠步履蹒跚、行动迟缓、精神萎靡;肿瘤组织出现破溃、糜烂、出血。给药13 d时,PPD组小鼠肿瘤体积明显减小(P<0.05);21 d时PPD组肿瘤体积明显小于Taxol组(P<0.05)。与模型组比较,PPD组小鼠瘤质量明显降低(P<0.05),死亡率为零;与Taxol组比较,PPD组小鼠抑瘤率增高(P<0.05),死亡率降低(P<0.05)。各给药组小鼠肿瘤组织Cyclin D1基因转录、蛋白表达水平均明显低于模型组(P<0.05),与Taxol组比较,PPD组Cyclin D1基因转录明显减弱(P<0.05),而蛋白表达水平差异无显著性(P>0.05)。结论:PPD有明显抑制前列腺癌RM-1细胞生长的作用,其作用机制可能与下调Cyclin D1蛋白表达有关。

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人子宫颈癌组织中MMP-26、MMP-9和TIMP-4的表达及其意义
李慧敏, 李一雷, 宋雪霏, 董欣洁, 刘志晶, 梁珊珊, 张丽红, 李伟
J4. 2010 (2):  354-358. 
摘要 ( 1397 )   [HTML]( )

目的:检测人子宫颈癌组织中基质金属蛋白酶-26 (MMP-26)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-4(TIMP-4)的表达,探讨其与临床病理特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测10例正常子宫颈组织、6例宫颈原位癌和79例宫颈浸润癌组织中MMP-26、MMP-9及TIMP-4的表达。结果:MMP-26在宫颈原位癌和浸润性癌中阳性表达率分别为83.33%和82.28%,较正常子宫颈组织中表达明显增强(P<0.05);MMP-26表达与子宫颈癌的肌层浸润深度和淋巴结转移有密切关联(P<0.05),随着子宫颈癌浸润深度的增加,MMP-26阳性表达增强;淋巴结转移组MMP-26蛋白阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。MMP-9在宫颈浸润癌组织中阳性率为68.35%,MMP-9表达与子宫颈癌病理分级有密切关联,其在Ⅲ级子宫颈癌组织中的表达明显高于Ⅰ和Ⅱ级(P<0.05)。TIMP-4在正常子宫颈、原位癌及浸润性癌组织中的表达呈下降趋势,但差异无显著性(P>0.05);TIMP-4的表达与子宫颈癌的临床分期有密切关联,其在早期癌中的表达高于晚期癌(P<0.05)。MMP-26与TIMP-4在子宫颈癌组织中的表达呈负相关关系(rs=-0.259,P<0.05);MMP-26与MMP-9蛋白在子宫颈癌组织中的表达无相关性(rs=0.140,P>0.05)。结论:MMP-26和MMP-9在宫颈癌组织中高表达,促进其侵袭和转移;TIMP-4在子宫颈癌组织中的表达下降,提示三者联合应用有望成为一项判断子宫颈癌预后的指标。

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TNXB基因多态性与精神分裂症发病的遗传学关联性分析
王姣艳, 张丽, 吴江, 刘扬, 王珍琦, 关松磊, 油洋, 张萱
J4. 2010 (2):  359-363. 
摘要 ( 960 )   [HTML]( )

目的:阐明TNXB基因多态性与中国北方汉族人群精神分裂症发病及其临床表型的关系。方法:收集779例中国北方汉族精神分裂症患者和983例健康人对照组全血样品,从中提取基因组DNA,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,检测TNXB基因rs204887位点基因型。应用拟合优度χ检验分析基因型频数分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,应用χ检验和数量性状分析分别进行等位基因、基因型以及各种临床表型的关联性分析。结果:TNXB基因rs204887位点的基因型频数分布在精神分裂症病例组和对照组均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。等位基因关联分析,C和T等位基因在病例组和对照组中的频数分布比较差异无显著性(P>0.05);基因型关联分析,C/C、C/T和T/T 3种基因型在病例组和对照组的频数分布比较差异无显著性(P>0.05);等位基因、基因型频数分布与精神分裂症各种临床表型均无关联(P>0.05)。结论: TNXB基因rs204887位点可能与中国北方汉族人群精神分裂症发病无关联。

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TGF-β和P53 蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义
苏振波, 梁作文, 赵丹, 王伟华
J4. 2010 (2):  364-367. 
摘要 ( 1074 )   [HTML]( )

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测36例前列腺癌标本组织中TGF-β和P53蛋白表达情况。结果:36例前列腺癌标本组织中高、中、低分化癌分别为10、16和10例。TGF-β在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为30%(3/10)、37.5%(6/16)和70.0%(7/10);P53蛋白在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为20%(2/10)、25.0%(4/16)和50%(5/10)。TGF-β和P53蛋白在高、中分化前列腺癌组织中的表达强度均低于在低分化前列腺癌组织(P<0.05)。结论:TGF-β和P53蛋白阳性表达率和表达强度与前列腺癌分化程度有相反的变化趋势,提示检测TGF-β与P53蛋白的表达可协助鉴定前列腺癌分化程度并评估预后。

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牙本质基质蛋白1在涎腺肿瘤组织中的表达
赵轩一, 姜秋, 张泽兵, 王渝, 孙宏晨, 白宇
J4. 2010 (2):  368-371. 
摘要 ( 903 )   [HTML]( )

目的:检测牙本质基质蛋白1(C-DMP1)在涎腺多形性腺瘤、黏液表皮样癌组织中的表达,探讨C-DMP1在涎腺肿瘤发生中的作用。方法:采用免疫组织化学方法,在显微镜下观察C-DMP1在30例涎腺良性肿瘤和30例恶性肿瘤组织中的分布及表达情况。结果:多形性腺瘤组织中,导管外层肌上皮细胞和黏液软骨样细胞大部分胞核显示为黄色,C-DMP1呈弱阳性表达,个别细胞胞核显示为棕褐色,呈强阳性表达,强阳性表达率为6.6%;C-DMP1在黏液表皮样癌组织中表皮样细胞胞核显示为棕褐色,呈强阳性表达,部分中间细胞胞核显示为黄色,呈弱阳性表达,而黏液细胞胞核呈阴性表达,强阳性表达率为73.3%。C-DMP1在涎腺良、恶性肿瘤组织中强阳性表达率比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:C-DMP1在涎腺良、恶性肿瘤组织中有着不同表达变化及其分布情况,提示C-DMP1可能参与涎腺肿瘤的发生。

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HBx和VEGF与乙肝相关性肝癌组织血管生成及转移的关系
刘凯歌, 高红艳, 赵慧, 牛春燕, 李莉
J4. 2010 (2):  372-376. 
摘要 ( 1330 )   [HTML]( )

目的:探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)在乙肝相关性肝癌组织血管生成及转移过程中的作用。方法:选择84例乙肝相关性肝癌组织和22例非乙肝相关性肝癌组织,免疫组织化学法检测HBx、VEGF及血管内皮细胞表面抗原(CD34)表达,光镜下微血管计数(MVD)。结果:84例乙肝相关性肝癌组织中HBx阳性表达率为73.81%(62/84),阴性率为26.19% (22/84);62例HBx阳性表达组中VEGF阳性率[74.19%(46/62)]明显高于22例HBx阴性组[36.36%(8/22)]和非乙肝相关性肝癌组[36.36%(8/22) (P<0.05)];HBx阴性表达的乙肝相关性肝癌组和非乙肝相关性肝癌组中VEGF阳性表达比较差异无显著性(P>0.05);84例乙肝相关性肝癌组织中HBx和VEGF的表达水平呈正相关关系(Rs= 0.552,P<0.01);二者在高分化肿瘤组织中的表达高于低分化组织(P<0.05),有转移组表达高于无转移组; HBx阳性表达组平均MVD值明显高于HBx阴性组和非乙肝相关性肝癌组(P<0.01),有转移组MVD高于无转移组(P<0.01);有门脉侵犯组高于非侵犯组(P<0.05)。结论:HBx和VEGF广泛表达于乙肝相关性肝癌组织中,二者表达水平呈正相关关系;HBx可能通过上调VEGF的表达在乙肝相关性肝癌组织血管生成及转移中起促进作用。

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苦碟子对经皮冠状动脉介入治疗术后基质金属蛋白酶水平和支架内血栓形成的影响
王智慧, 张晶, 邢玥
J4. 2010 (2):  377-380. 
摘要 ( 1146 )   [HTML]( )

目的:探讨苦碟子注射液对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内血栓形成、基质金属蛋白酶(MMPs)和血栓素B2(TXB2)水平的影响,阐明苦碟子注射液减少PCI术后支架内血栓发生的机制。方法:40例老年冠心病患者行PCI术后随机分为2组,实验组(n=20)给予苦碟子注射液,对照组(n=20)常规内科治疗,所有患者在术前、术后6个月测定MMPs及TXB2,术后检查冠状动脉造影及观察主要心血管事件发生情况(再狭窄、心源性死亡、心肌梗死、再次血运重建术)。结果:与术前比较,实验组、对照组PCI术后MMPs、TXB2水平均下降(P<0.05),术后实验组低于对照组(P<0.05)。术后实验组心血管事件发生率低于对照组 (P<0.05)。结论:苦碟子注射液可以降低PCI术后MMPs、TXB2水平及支架内血栓的发生率,提示苦碟子注射液发挥作用的靶点为MMPs和TXB2。

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脑舒康胶囊对大鼠血液流变学及血栓形成的影响
文继红, 吕文伟, 周福波, 郭云辉, 张庆勇, 付艳, 陈霞
J4. 2010 (2):  381-384. 
摘要 ( 1394 )   [HTML]( )

目的:探讨脑舒康胶囊(NSK)对血液流变学及血栓形成的影响,初步阐明NSK对脑缺血的治疗作用机制。方法:将40只Wistar大鼠随机分为5组(每组8只):空白对照组、NSK 2、8和16 g/kg组及步长脑心通(BCNXT)2 g/kg组,观察电刺激颈动脉血栓形成的时间。另取Wistar大鼠40只随机均分为血瘀模型组、NSK 2、8和16 g/kg组及BCNXT 2 g/kg组,建立血瘀模型后测量体外血栓的长度及干、湿质量,测定ADP诱导的血小板聚集率、凝血时间、全血及血浆黏度。结果:与空白对照组比较,NSK 8和16 g/kg组体内血栓形成时间显著延长(P<0.05或 P<0.01);与血瘀模型组比较,NSK 8及16 g/kg组体外血栓的长度变短,血栓的干、湿质量降低(P<0.05或P<0.01),血小板聚集率降低(P<0.05),凝血时间延长,全血及血浆黏度降低(P<0.05或P<0.01)。结论:NSK具有抗血栓形成及改善血液流变学特性的作用。

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MBD3基因多态性与精神分裂症的关联性分析
孟祥飞, 谢冰, 刘永哲, 寇长贵, 史杰萍, 许志国, 于雅琴
J4. 2010 (2):  389-393. 
摘要 ( 946 )   [HTML]( )

目的:探讨MBD3基因多态性与精神分裂症的关系,为精神分裂症的病因学研究奠定基础。方法:以中国北方汉族精神分裂症患者及其健康父母组成的50个核心家系(共计150例)为研究对象,对MBD3基因上的标签 SNP rs4807934和rs4807122位点采用多重聚合酶链式反应 (PCR) 和连接酶检测反应 (LDR) 方法进行基因型检测,采用拟合优度χ2检验分析基因型频数分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律,进行基于家系的单倍体相对风险分析(HRR)和传递不平衡检验(TDT)分析。结果:MBD3基因上rs4807934和rs4807122位点基因型在患者组和父母组中频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律;HRR分析,rs4807934和rs4807122位点等位基因在患者组和父母组的频数分布差异无显著性(均P>0.05);TDT分析,rs4807934和rs4807122位点杂合子父母双亲传递给患病子女的2个不同等位基因概率均未偏离50%(P>0.05)。结论:MBD3基因上rs4807934和rs4807122位点所代表的区域可能与精神分裂症的发病无关联。

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应用Finecross微导管经桡动脉开通冠状动脉慢性完全闭塞病变的效果评价
赵雷, 刘斌, 赵佳怡, 祝金明, 王智慧, 李淑梅
J4. 2010 (2):  398-400. 
摘要 ( 986 )   [HTML]( )

目的:对比分析应用Finecross微导管经桡动脉途径与传统方法经股动脉途径开通冠状动脉慢性完全闭塞(CTO)病变成功率的影响因素,探讨开通CTO病变新方法。方法:45例经冠脉造影证实存在单支CTO病变患者,按患者意愿及经济情况分为Finecross微导管经桡动脉途径开通CTO病变组(试验组)及传统方法经股动脉开通CTO病变组(对照组),比较两组手术成功率、手术时间及并发症等差异。结果:试验组经桡动脉途径开通CTO病变23例,成功率87%,平均手术时间(1.2±0.4)h,未出现并发症;对照组经股动脉开通CTO病变22例,成功率64%,平均手术时间(2.1±0.6)h,2例出现并发症,两组成功率和平均手术时间比较差异有显著性(P<0.05)。结论:应用Finecros微导管经桡动脉途径开通CTO病变成功率高、手术时间短、安全有效。

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高龄股骨粗隆间骨折患者股骨近端髓内钉内固定治疗与术后贫血的关系
王飞, 朱庆三, 苗旭漫
J4. 2010 (2):  401-404. 
摘要 ( 948 )   [HTML]( )

目的:探讨股骨近端髓内钉(PFN)内固定与高龄股骨粗隆间骨折患者术后贫血的关系,阐明PFN固定是否为高龄股骨粗隆间骨折术后贫血的主要危险因素。方法:选择股骨粗隆间骨折行PFN内固定治疗患者43例,男性23例,女性20例,年龄71~95岁,平均年龄(82±3)岁,按Evans分型:ⅢA 20例、ⅢB 17例、Ⅳ型 6例;受伤原因:滑倒摔伤25例,车祸摔伤15例,其他疾病晕倒摔伤3例。对照组19例,男性11例,女性8例,年龄70~85岁,平均年龄(80±5)岁,按Evans分型:ⅢA 9例、ⅢB 6例、Ⅳ型 4例;受伤原因:滑倒摔伤11例,车祸摔伤7例,其他疾病晕倒摔伤1例。对照组患者行患肢皮牵引固定保守治疗。比较PFN手术组手术前后的红细胞数(RBC)、血红蛋白(HB)和红细胞压积(HCT),并与对照组比较。结果:手术组患者术前RBC、HB和HCT与对照组比较差异均无显著性(P>0.05),手术组术后第2、3天患者RBC、HB和HCT较术前降低且低于对照组(P<0.05);对照组入院后1周3项指标较入院时有所降低,但差异无显著性(P>0.05)。结论:高龄股骨粗隆间骨折患者经PFN内固定治疗后容易出现术后贫血,隐性失血是术后贫血的主要原因。

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中国汉族人群脂蛋白脂酶Pvu Ⅱ基因多态性与冠心病关系的Meta-分析
周丽婷, 史杰萍, 叶琳, 崔建林, 王春华, 隋春生, 刘特, 梁楠
J4. 2010 (2):  405-407. 
摘要 ( 949 )   [HTML]( )

目的:评价中国汉族人群中脂蛋白脂酶(LPL)PvuⅡ基因多态性P-P-基因型与冠心病的关系,阐明LPL基因在冠心病发生发展中的作用。方法:按照系统评价的要求全面检索PubMed、Medline医学数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、维普信息数据库等数据库,共搜集中国汉族人群LPL PvuⅡ基因多态性与冠心病关系的8个病例-对照研究。评价纳入文献的质量,采用RevMan 5.0软件,对符合纳入标准的文献进行Meta-分析。结果:共纳入6篇文献,累计病例593例,对照572例。LPL PvuⅡP-P-基因型个体发生冠心病危险性的OR值为2.32,OR值95%可信区间为(1.64~3.28P<0.05)。合并结果漏斗图基本对称,纳入的文献不存在发表偏倚,具有较好的代表性。结论:中国汉族人群中LPL PvuⅡP-P-基因型携带者易于发生冠心病,提示LPL 基因可能为中国汉族人群冠心病的遗传易感基因。

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男性2型糖尿病患者骨质疏松症相关因素分析
刘锐, 何成彦, 徐冬岩, 刘波
J4. 2010 (2):  408-411. 
摘要 ( 790 )   [HTML]( )

目的:探讨男性2型糖尿病患者骨密度(BMD)及骨生化指标的变化情况,阐明骨质疏松症相关危险因素。方法:测定129例男性2型糖尿病患者和67例正常男性的BMD,并检测生化及骨代谢指标。结果:2型糖尿病患者组BMD降低的发生率明显高于对照组(P<0.01),血清钙、碱性磷酸酶(ALP)水平显著高于对照组(P<0.05),血清骨钙素(BGP)水平则显著低于对照组(P<0.01),两组血清磷无明显改变(P>0.05);相关性分析结果,BMD与年龄、病程、糖化血红蛋白(HbAlc)、空腹血糖(FBG )、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)呈负相关关系(P<0.05),相关系数(r)分别为-0.420,-0.341,-0.372,-0.298,-0.285, 与空腹胰岛素(FINS )呈正相关关系,r为0.320;2型糖尿病患者BMD与年龄、病程和血糖控制有关联(P<0.01)。结论:男性2型糖尿病患者较正常人群易发生骨质疏松症,BMD、血清钙、ALP、BGP水平是诊断糖尿病性骨质疏松症的重要指标,良好的血糖和血脂的调控及尽可能的保护胰岛β细胞可降低骨质疏松症的发生。

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24例甲型H1N1流感并发重症肺炎患者的临床分析
刘伟, 彭丽萍, 华树成
J4. 2010 (2):  412-414. 
摘要 ( 1121 )   [HTML]( )

目的:探讨新型病原体甲型H1N1流感病毒所致危重患者的临床特征,为判断病情和治疗提供参考。方法:对24例甲型H1N1流感并发重症肺炎患者的一般临床资料、症状、体征、辅助检查、诊断及治疗方法和结果进行分析。结果:24例患者平均年龄(28.73±9.24)岁,其中孕妇2例(8.3%),肥胖[体质指数(BMI)≥30]18例(75%),有慢性基础疾病者2例(8.3%),包括支气管哮喘1例,肾移植术后1例。患者以发热、咽痛、气短为主要症状。双肺多发实变20例(83.3%)。24例患者均给予抗病毒治疗(奥司他韦75 mg或150 mg每日2次口服),其中22例(91.6%)患者应用激素治疗,18例(75.0%)患者采用机械通气治疗,6例(25.0%)患者经气管插管行机械通气治疗,2例(8.3%)患者死亡。结论:甲型H1N1流感并发重症肺炎患者以青壮年为主,孕妇、肥胖、有慢性基础疾病者感染后易并发重症肺炎,应尽早应用抗病毒药物、合理应用糖皮质激素和人工通气辅助治疗,张力性气胸、多脏器功能不全等相关并发症是其主要死亡原因。

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氢质子磁共振波谱在颅内常见肿瘤诊断中的应用价值
周宏伟, 孔博玉, 兰文婧, 刘洋, 谷艳英
J4. 2010 (2):  415-419. 
摘要 ( 823 )   [HTML]( )

目的: 通过氢质子磁共振波谱(H-MRS)方法分析颅内常见肿瘤组织与正常脑组织及脑肿瘤间代谢物差别,探讨H-MRS对颅内常见肿瘤的诊断价值。方法:对经临床手术证实的27例Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤、22例Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤、24例脑转移瘤和21例脑膜瘤的H-MRS图像进行分析,得到N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌酸(Cr)、胆碱复合物(Cho)和乳酸(Lac)的峰值高度并计算NAA/Cr、Cho/Cr、NAA/Cho比值,比较各组数据。结果:颅内肿瘤常规MRI检查结果表现各异,难以鉴别;颅内肿瘤组织H-MRS与正常脑组织比较NAA降低(P<0.01),Cho升高(P<0.05),且胶质瘤实质强化区的NAA/Cr比值与脑膜瘤、转移瘤相比具有明显差异(P<0.05)。结论: H-MRS可以在分子水平上对颅内肿瘤进行鉴别诊断,可以在临床上弥补常规MRI影像的不足;H-MRS检查可为病理分级、制定合理的治疗方案提供有价值的影像信息。

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吉林省青少年超重及肥胖现状调查分析
杨颖, 刘彬, 李凡
J4. 2010 (2):  420-423. 
摘要 ( 955 )   [HTML]( )

目的:分析2008年吉林省青少年超重、肥胖现状和分布特点,为青少年肥胖的预防提供依据。方法:采取分层整群抽样方法抽取2008年吉林省6 505名9~18岁青少年作为调查对象,通过问卷、测量收集资料,计算体重指数(BMI),利用WGOC标准(中国肥胖问题工作组标准)和IOTF标准(欧洲肥胖问题工作组标准)对不同年龄段的BMI、超重率和肥胖率进行分析。结果:按WGOC标准分析,吉林省9~18岁青少年总体超重率为10.07%,肥胖率为6.90%,超重加肥胖率为18.51%;按IOTF标准分析,吉林省9~18岁青少年总体超重率为11.74%,肥胖率为4.30%,超重加肥胖率为16.05%。与2005年全国学生体质与健康调查结果(7~22岁男生超重率为8.20%,肥胖率5.07%;女生超重率4.61%,肥胖率2.6%)比较,吉林省青少年总体超重率和肥胖率明显增高。11~14岁是肥胖症的高发阶段,12岁是肥胖症发生最危险年龄。对于同年龄段,男生的肥胖率明显高于女生,按WGOC标准,9~18岁男生超重率为11.94%,肥胖率为10.05%;9~18岁女生超重率为8.50%,肥胖率为4.27%。在12岁时男生超重率为19.77%,肥胖率为20.53%;12岁女生超重率为12.84%,肥胖率为10.89%。结论:吉林省青少年肥胖状况呈上升趋势,男生肥胖状况明显重于女生,学校、家长等应该对此引起注意并采取有效防治措施。

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多囊卵巢综合征胰岛素抵抗研究进展
谢铁男, 岳瑛
J4. 2010 (2):  424-428. 
摘要 ( 742 )   [HTML]( )

多囊卵巢综合征(PCOS)是一种常见的异质性内分泌疾病,其病因尚不清楚,  多数学者认为遗传和环境因素在其发病中起一定作用。PCOS不仅是生殖疾病,而且是一种多系统综合征,流行病学调查显示:PCOS患者发生2型糖尿病、高血压、冠心病、子宫内膜癌等疾病的风险明显增加,胰岛素抵抗及其伴随的高胰岛素血症是PCOS患者重要的病理生理改变,可能在PCOS的发生发展中起关键的作用。

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